胚胎移植——畜牧业发展的助推器

胚胎移植———畜牧业发展的助推器王磊刘敏（山东省农科院,２５０１００）（济南市十一中,２５０００１）胚胎移植,在我国俗称借腹怀胎,它是将一头良种母畜配种后形成的早期胚胎取出,移植到另一头（或几头）同种的、生理状态相同的母畜生殖器官的相应部位,使之继续...     

激素诱发绵羊超数排卵及移植试验

胚胎移植,亦称受精卵移植,简单涵义就是:从一头优良母畜(简称供体)的输卵管内取出受精卵或早期胚胎,移植到另一头生产性能较差的同种或同品种母畜(简称受体)的相应部位,“借腹怀胎”,繁育后代。这项技术结合超数排卵,在畜牧业生产上应用后,可以充分发挥优良母畜的繁殖潜力,在短期内达到迅速扩大良种畜群的目的。随着受精卵保存技术的不断提高,如     

重组人促卵泡激素剂量对食蟹猴卵泡发育和排卵同期化的影响

目的优化食蟹猴胚胎移植同步受体的处理技术。方法选择5~9岁月经周期正常的成年雌性食蟹猴37只,于出现月经血的第2~3天,每日肌注重组人促卵泡激素(rh FSH),按超排剂量和方式分2个实验组,超排供体组、超排受体组,另有一组自然受体组(对照组)。结果和结论 2个实验组超排后卵巢反应全部良好,超排供体组和超排受体组超排后卵巢的获卵总数(15.18±6.51 VS.5.67±3.79)和平均排卵数(6.77±3.61 VS.1.00±0.00)差异具有统计学意义(P<0.05),但超排受体组和超排供体组的雌二醇(E2)水平浓度差异无统计学意义(P>0.05),变化模式一致,且超排受体组与超排供体组排卵同期化的准确率可达83.33%,而对照组仅为42.85%,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。     

不同纲动物间的细胞核移植——将小鼠细胞核移到泥鳅细胞质中

我们以前的细胞核移植工作^[1,2]表明：移核卵早期胚胎发育模式(主要指卵裂速度及卵裂模式)与受体卵相同,而与供体核种类无关;供体与受体之间亲缘关系的远近及染色体数目的差异程度,对移核卵囊胚以后的发育有重要影响,但对不同组合间细胞核移植所得囊胚比例影响较小。由此我们可以假定,移核卵最初发育的启动及囊胚以前的发育主要与受体卵有关,而和供体与受体之间亲缘关系的远近关系不大。为了进一步验证这一理论并寻找除染色体数目⑵以外其它影响移核卵囊胚以后发育的因素,在本实验中,我们选择了小鼠(图版Ⅰ—A)和泥鳅(Ⅰ—B)即不同纲间动物作为细胞核移植的材料。     

不同纲动物间的细胞核移植——将小鼠细胞核移到泥鳅细胞质中

我们以前的细胞核移植工作［１,２］表明：移核卵早期胚胎发育模式（主要指卵裂速度及卵裂模式）与受体卵相同,而与供体核种类无关;供体与受体之间亲缘关系的远近及染色体数目的差异程度,对移核卵囊胚以后的发育有重要影响,但对不同组合间细胞核移植所得囊胚比例影响...     

核酸诱导家鸡性状变异的初步研究

从供体红玉母鸡输卵管和卵巢提取DNA和mRNA,分别注入受体来杭幼鸡和受精多卵后,能获得具有供体性状的变异体。mRNA诱导的变异体性状能在当代和子一代表达,而在子二代则消失。     

哺乳动物胚胎的冷冻保存

哺乳动物精子冷冻保存试验于1950年获得成功,它标志着近代低温生物学的开端。冷冻精液结合人工授精,使得种公牛的配种潜力得到最大限度的发挥,良种公牛的精子可以普及到各处,甚至是偏僻的地方。良种后代的增加,不仅决定于公畜,也有赖于母畜。优良母畜繁殖潜力的提高,也是改良畜群的一方面。胚胎移植不仅可以充分利用优良母畜的繁殖潜力,同时把优良公畜和母畜都加以考虑。有些国家把胚胎移植作为完成育种计划的一种辅助方法,在牛的繁育上起了作用。精子能够低温     

克隆动物研究进展

本文介绍了世界上和中国采用细胞核移植技术克隆动物的研究历史。综述了细胞核移植的程序、方法和影响因素,包括受体卵母细胞的去核、供体细胞核的制备、核移植、激活、受体细胞与供体细胞的融合、重组胚的体内和体外培养以及胚胎移植产生克隆动物。对克隆动物研究和应用前景进行了讨论。近期的研究结果表明,多代克隆可产生大量遗传性相同的动物,不久的将来克隆技术在商业上的应用将成为现实。     

克隆动物研究进展

本文介绍了上世界上中国条用细胞核移植技术克隆动物的研究历史。综述了细胞核移植的程序、方法和影响因素,包括受体卵母细胞的去核、供体细胞核的制备、核移植、激活、受体细胞与供体细胞的融合、重组胚的体内和体外培养以及胚胎移植产生克隆动物。对克隆动物研究和应用前景进行了讨论。近期的研究结果表明,多代克隆可产生在量遗传性相同的动物,不久的将来克隆技术在商业上的应用将成为现实。     

用来提高动物繁殖力的胚胎移植技术

胚胎移植是从供体雌畜收集胚胎并移给受体雌畜使之成为继续妊娠的代理母亲的技术。胚胎移植技术几乎已经用于每种家畜和多种野生动物,包括人类和灵长类。近十年来,胚胎移植程序日趋精密。包括在牛中完善使用非手术移植方法,长期胚胎培养和冷冻保存以及最近的显微操作和许多与遗传工程有关的技术。这是一门迅速发展并且大火缩短了发明和使用之间的时间隔的科学。随着新技术的发展,潜在用途继续增加。Walter Heape 1890年报告他得到一窝用胚胎移植方法出生的小兔。     

孕酮诱发蟾蜍卵母细胞成熟作用部位的探讨

冬眠蟾蜍长足卵母胞胞,经手工剥除其卵巢膜、滤泡膜、透明带和质膜,包埋在琼脂块里,孕酮作用3小时(18±1℃)后,该细胞质团块中出现促成熟活性物质(MPF);将含有此MPF的微量卵质(约50毫微升),注入未经激素处理的卵球,能诱发后者恢复减数分裂,胚泡破裂,排出第一极体,正常抵达第二次成熟分裂中期。如果在去除上述卵外和卵表膜层结构的同时,剔除其细胞核(胚泡),然后包裹在琼脂中,经孕酮处理3小时左右,照样能够诱发产生促成熟活性物质;微量细胞质的转移,照样能使未经激素处理的受体卵正常成熟。随着供体卵质块与孕酮接触时间的延长,其诱发受体卵成熟的百分率逐渐增高。孕酮处理后9小时的供体卵质块,几乎全部能使受体卵正常成熟。上述结果表明,在本实验处理的条件下,孕酮诱发中华大蟾蜍卵母细胞形成促成熟活性物质的过程,既不依赖于卵表透明带与质膜,也不依赖于细胞核,而是细胞质自身活动的结果;显然,孕酮诱发蟾蜍卵母细胞成熟的初始作用部位是在细胞质。     

受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑子午岭黑山羊技术体系的建立

受精卵注射CRISPR/Cas9系统是制备基因编辑动物的有效方法,其中受精卵收集效率、显微注射胚胎存活率及胚胎移植受体妊娠率是关键影响因素.以子午岭黑山羊为研究对象探讨了情期内不同时间点放置CIDR对超数排卵的影响;分析了胚胎供体和受体发情停止时间差异对胚胎移植妊娠率的影响;设计了3个打靶肌肉生长抑制素基因(MSTN)的小向导RNA(sgRNA),并优化了CRISPR/Cas9系统显微注射参数.结果表明,胚胎供体发情停止后第4天放置阴道栓可有效提高黄体数(15.25±3.69)和受精卵数量(13.875±4.015);利用微量注射泵将Cas9mRNA(60 ng/μL)和打靶MSTN基因的sgRNAs(60 ng/μL)混合液注射到受精卵胞质内,注射参数Pi,Ti和Pc分别为300,0.5和60,注射24 h后胚胎分裂率为76.79%.胚胎移植时受体发情结束时间晚于供体发情结束时间12~16 h妊娠率最高(38.46%).本研究共得到19个存活的个体,经TA克隆测序分析,所有个体MSTN打靶位点上均发现碱基的插入或缺失.综上,本研究以子午岭黑山羊为例,建立了受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑山羊的技术体系,为利用CRISPR/Cas9技术进行山羊的遗传改造奠定了技术基础.     

颈卵器植物MADS-box基因的研究进展

作者通过对颈卵器植物MADS_box基因最新研究结果的概述 ,介绍了MADS_box基因与颈卵器植物生殖器官决定、发育和进化的关系以及被子植物花器官发育的ABCD模型在三类颈卵器植物中的表现形式和进化关系。这些结果表明MADS_box基因的结构、功能和表达模式的变化是植物生殖器官决定、发育和进化的主要原因。     

颈卵器植物MADS_box基因的研究进展

作者通过对颈卵器植物MADS_box基因最新研究结果的概述,介绍了MADS_box基因与颈卵器植物生殖器官决定、发育和进化的关系以及被子植物花器官发育的ABCD模型在三类颈卵器植物中的表现形式和进化关系。这些结果表明MADS_box基因的结构、功能和表达模式的变化是植物生殖器官决定、发育和进化的主要原因。     

牛超数排卵技术研究进展

超数排卵是获得牛胚胎移植研究与应用所需可移植胚胎的重要途径。由于影响供体牛超数排卵的因素众多、复杂,几十年来供体牛每次超数排卵所获得的平均可移植胚胎数几乎没有增加,因此,如何提高超排效果成为研究热点。综述了近年来牛超排的最新研究进展,以期为牛超排效果的改善和胚胎移植效率的提高提供参考。     

亲虾的“多次产卵”在对虾育苗中的利用

低等动物的产卵有两大类型,即一次性产卵类型和多次性产卵类型。一次性产卵类型,是指在一个性周期中只产卵一次或一批,其卵巢发育特点是成熟卵的发育是同步性的;多次性(或分批性、延长性)产卵类型,在一个性周期中卵细胞分批成熟,产卵多次,其卵巢发育特点是成熟卵的发育是不同步的。根据以往的记载,东方对虾(Penaeus orientalis)为一次性产卵类型,体质不好的亲虾是一次成熟、分批产出。     

鱼类体细胞移核胚胎发育影响因素的探讨

将脱膜后的泥鳅 (Misgurnusanguillicaudatus)受精卵置于不同孵化液中孵化 ,结果表明 ,孵化液 1×Holtfreter中正常鱼苗和总鱼苗的孵化率最高 ,分别为 5 4 8%和 5 9 2 %。 1/ 2×Holtfreter、 1/ 10×Holtfreter、曝气冷开水和改变孵化液处理 ,正常鱼苗的孵化率差别不大 ,分别为 48 0 %、 49 6 %、 5 0 0 %和 48 8%。曝气冷开水畸形率最高 ,为 8 8%。PBS不适合用作孵化液。机械损伤对胚胎的孵化率无明显影响 (73 39%vs 75 70 % ) ,但对胚胎发育有明显的致畸作用 (8 0 6 %vs 0 )。以雌核发育鳙 (Aristichthysnobilis)尾鳍培养细胞作供体 ,泥鳅未受精卵作受体 ,微卫星标记分析表明 ,移核胚胎的核来源于供体核 ,受体卵中未除去的核被排斥。供体细胞培养代数严重影响移核胚胎的发育率。随着培养代数的增加 ,移核胚胎的发育率逐渐降低。继代核移植可提高移核胚胎的发育率 ,尤其是第 1次体细胞继代核移植 ,晚期囊胚的发育率急剧上升 (4 3 84%vs 7 6 9% ) ,说明继代核移植可促进受体卵对供体核的再程序化。泥鳅和大鳞副泥鳅 (Paramisgurnusdabryanus)未受精卵作受体 ,其移核胚胎发育率无明显区别 (7 6 9%vs 7 0 2 % )。     

小鼠早期胚胎移植技术的研究

哺乳动物胚胎移植技术是实验胚胎学、遗 传学、发育生物学研究中的一项重要技术。在 卵母细胞的体外培养、卵的体外受精及对早期 胚胎进行显微手术等研究中,往往是通过观察 卵在体外培养中的卵裂情况来鉴定实验效果。 但是更理想的方法就是将有发育能力的胚胎移 入受体子宫或输卵管内,以观察胚胎能否继续 发育直至胎儿出生。为此,我们对小鼠早期胚 胎进行了外科、非外科手术移植的研究。     

人类的体外受精和胚胎移植

人类的体外受精和胚胎移植是一个复杂的过程，关键的步骤是人工诱发超排卵、采集孵细胞、体外受精与体外培养以及胚胎移植。人类的体外受精和胚胎移植技术在研究人类生殖生理，治疗不孕症，计划生育和优生等方面具有很高的价值。     

非人灵长类的体外受精和胚胎移植

非人灵长类的体外受精和胚胎移植是了解人类生殖机制,如卵的成熟调控,受精卵的成熟与分化,胚胎着床,控制某些遗传疾病以及保护珍稀灵长类和提高实验灵长类质量的有效途径。本文从非人灵长类卵的获取(包括超数排卵,非激素刺激动物取卵),精子处理(精液采集,冻存和精子获能),体外受精和胚胎移植、胚胎的冻存等方面介绍了有关研究概况和发展动态。