红海藻多糖的提取和结构研究

本文报道了从红海藻中分离提取出水溶中性多糖,经纯化和鉴定得单—木聚糖,其一级结构测定结果表明,此多糖为直链结构,以β(1—3)木糖残基连接.构象研究结果表明,该多糖具有三股螺旋结构.     

深层培养云芝菌丝体蛋白多糖的提取及性质

采用水、３％草酸和０．２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠为溶剂分别提取深层培养的云芝〔Ｐｏｌｙｓｔｉｃｔｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ（Ｌ．）Ｆｒ．〕菌丝体蛋白多糖,其得率分别为菌丝体干重的２０％、４９％和１９％。提取的粗多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析进一步分离、纯化,纯化的多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后呈现一个斑点,在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析中有一个对称峰,紫外及红外光谱分析和蛋白质含量测定表明该多糖为蛋白多糖,其蛋白质和多糖含量在水提多糖中分别为１３％和６２％、在酸提多糖中分别为５％和９１％。在碱提多糖中分别为３％和８１％。组成该多糖的主要单糖是葡萄糖和木糖。     

九里香多糖和蛋白多糖的分离、纯化和分析

九里香(Murraya Paniculata L.Jack)皮部经热水提取、乙醇沉淀、SephadexG—100柱层析分离、磷酸氢钙吸附、酸溶,再通过Sephadex G-200柱层析纯化,得到灰白色粉末状九里香蛋白多糖。总糖含量为52.1％(其中葡萄糖醛酸含量为10.9％),蛋白质含量为20.0％。九里香蛋白多糖去蛋白后,即得九里香多糖,总糖含量为88.2％(其中葡萄糖醛酸含量为20.0％),经纸层析和聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定为单一斑点和单一区带。平均分子量约为1.7×10~(-5)。组成单糖的摩尔比为葡萄糖:露甘糖:木糖:阿拉伯糖:岩藻糖:葡萄糖醛酸=1.0:0.40:0.16:0.17:0.20:0.48.     

小球藻糖蛋白的分离、纯化和结构分析

采用柱层析分离纯化小球藻糖蛋白,并对其进行结构分析。结果表明,小球藻糖蛋白为白色粉末,产率为鲜藻的0．28％,易溶于水,分子量约为65,000Da,属O-连接方式,蛋白质含量为12．01％,糖链部分含有岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。     

松杉灵芝发酵菌丝体中水溶多糖的分离纯化与结构的比较研究

松杉灵芝发酵菌丝体经热水提取,冻融分级及乙醇二次分级,分离纯化出GFb级份,电泳及凝胶柱层析示其为均一多糖,分子量为9.8万。小于子实体多糖相应级份。 GFb经红外光谱,气相色谱,气质联机,碳13核磁共振,高碘酸盐氧化,Smith降解,甲基化及部分酸水解分析,确定其基本结构中主链为1→6葡萄糖基和1→6半乳糖基构戍,二者之比为1∶1,分支点在0-3位上,分枝点率为50％,与子实体多糖GF_3相同,侧链由1→3葡萄糖基,1→4葡萄糖基,末端葡萄糖基及末端半乳糖基构成,分子中分枝率为55.6％,较子实体多糖GF_3分枝率略低,分枝链略短。     

鸡腿菇子实体多糖的分离纯化、理化性质及抗氧化活性

本研究对水溶醇沉法提取的鸡腿菇粗多糖脱蛋白方法进行了比较,最终确定Sevage法为最优的脱蛋白方法。经DEAE-纤维素52离子交换及Sephadex G-200分子层析柱分级、纯化,最终得到2个主要的多糖组分Ccp-I-A和Ccp-I-B。理化性质测定结果表明,二者均为白色絮状固体,能溶于水,不溶于无水乙醇、丙酮等有机溶剂;与斐林试剂,CTAB、硫酸-咔唑、碘-碘化钾及三氯化铁反应均为阴性。GC测定结果可知Ccp-I-A主要由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为2.03∶9.52∶1;Ccp-I-B主要由岩藻糖和半乳糖组成,其摩尔比为1∶5.21。另外,Ccp-I-A和Ccp-I-B对DPPH和·OH显示出良好的清除能力,而且,相比于Ccp-I-B,Ccp-I-A的清除能力更高,当浓度为300μg/mL,其对DPPH和·OH的清除能力可分别达到72.1%和55.3%。     

松杉灵芝发酵菌丝体中水溶多糖的分离纯化与结构的比较研究

松杉灵芝发酵菌丝体经热水提取，冻融分级及乙醇二次分级，分离纯化出ＧＦｂ级份，电泳及凝胶柱层析示其为均一多糖，分子量为９．８万。小于子实体多糖相应级份。ＧＦｂ经红外光谱，气相色谱，气质联机，碳１３核磁共振，高碘酸盐氧化，Ｓｍｉｔｈ降解，甲基化及部分酸水解分析。确定其基本结构中主链为１→６葡萄糖基和１→６半乳糖基构成，二者之比为１：１，分支点在０－３位上，分枝点率为５０％，与子实体多糖ＧＦ３相同，侧链     

赤灵芝GL-2发酵液中多糖组分及活性研究

对赤灵芝ＧＬ－２菌株发酵液中胞外多糖的提取进行了研究,通过乙醇分级沉淀对发酵液中多糖进行了分离,并采用凝胶柱层析法检测了各级份中多糖的分子量分布范围,动物实验证明,分级沉淀各级份均能促进小鼠体重增长,增强小鼠白细胞吞噬细胞的能力,提高红细胞中ＳＯＤ酶的活力。其中６０％级份的效果最为明显。     

哈拉海多糖的提取及含量测定

提取是多糖分离纯化的关键工序,提取方法及过程、提取工艺及参数以及多糖纯度等对多糖的后续结构分析及生物活性都有着较大的影响。多糖的提取方法有水提法、碱提法、酸提法及酶法等。本实验以哈拉海为原料,经水提醇沉及常规干燥后得到哈拉海多糖,并采用苯酚-硫酸比色法对多糖含量进行测定。     

黄绿蜜环菌菌丝体多糖分离纯化与含量测定

分离纯化黄绿蜜环菌菌丝体粗多糖,提高多糖含量,以进一步应用于工业化生产。采用DEAE-52纤维素层析柱分离纯化黄绿蜜环菌菌丝体多糖,依次用水、0.1 mol/L Na Cl、0.2 mol/L Na Cl、0.4 mol/L Na Cl、0.8 mol/L Na Cl进行洗脱;苯酚-硫酸法测定纯化后多糖含量,测定波长490nm,葡萄糖浓度与吸光度的回归方程为A=6.3137X+0.2156R2=0.9909。黄绿蜜环菌菌丝体水体粗多糖经DEAE-52纤维素层析柱分离纯化后,多糖含量达到99%以上。经过中试试验验证提取及分离纯化工艺适用于工业化生产。     

皱皮木瓜多糖的分离、纯化及抗氧化活性研究

为了研究木瓜多糖的提取、分离、纯化与抗氧化活性,采用水提醇沉法提取皱皮木瓜中的多糖,得多糖Ⅰ;利用Sevag法除去多糖中的蛋白质后得多糖Ⅱ;以30%H_2O_2脱除色素后再次醇沉得到精制多糖Ⅲ;透析除去小分子后利用AB-8大孔树脂进行分离以水、30%、50%、70%和95%乙醇洗脱,其中水洗脱部分多糖为Ⅳ。用苯酚-硫酸法测定多糖含量。多糖Ⅰ得率为9.83%,多糖含量(纯度,下同)为64.45%;脱蛋白后多糖Ⅱ中多糖含量为78.23%;经脱色后多糖Ⅲ含量达88.39%;大孔树脂水洗脱部分多糖Ⅳ含量为89.74%。以DPPH(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率和Fe~(3+)还原力方法测定木瓜多糖的抗氧化活性,木瓜多糖均体现出一定的抗氧化作用,呈浓度依赖性增强,其中多糖Ⅰ、Ⅱ表现出更好的作用。     

火棘多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

对火棘多糖的提取工艺、分离纯化以及抗氧化活性作了研究.结果表明:火棘多糖的最佳提取工艺为90℃、9h,料液比为1∶10,提取率3.5%;火棘多糖具有明显的体外清除含氧自由基的作用,DPPH·分光光度法测得SC50为1.87mg/mL;通过分级沉淀、DE-52柱层析分离得到PP-A2、PP-A3、PP-A4和PP-B1、PP-B2、PP-B36种级分;经SephadexG-200柱层析鉴定,PP-A2、PP-A3、PP-B2为均一多糖.     

超滤法提取分离甘蔗叶多糖的研究

目的：应用超滤技术对甘蔗叶多糖进行提取分离。方法：采用切割分子量为50000、30000、10000和5000的滤膜对甘蔗提取液进行提取分离,葸酮-硫酸法测定多糖的含量。结果：甘蔗叶多糖的超滤法最佳分离纯化参数为温度30℃-40℃,压力差0．15MPa。膜面流速20m/s,相对分子质量为50000以上的多糖约占总糖的17．2％,而相对分子质量5000以下的寡糖和单糖约占35．5％。     

刺参糖胺聚糖的亚分级和各级分的理化特征与抗凝性质

刺参糖胺聚糖及其解聚物在水溶液中可通过逐步提高所加入的醋酸钾浓度引起的沉淀作用进行亚分级。本文对有关级分的理化特征、抗凝活性及诱导血小板聚集的副作用进行了比较。原聚糖平均分子量为50000,所得各级分的分子量分别为55000,48000,41000,23000和9000,它们在不连续琼脂糖凝胶电泳中显示不同特点。化学分析表明,除两个分子量较低级分中葡糖醛酸和岩藻糖含量略低外,各級分组成糖基和硫酸酯基的分子比值与原聚糖相近似。其红外、核磁谱与原聚糖一致。各级分体外抗凝活性随分子量变小而程度不同地减弱,其中分子量对聚糖延长凝血酶时间的影响较其对部分凝血活酶时间的影响为著。分子量最小的级分无明显诱导人血小板聚集副作用。     

宁夏不同地区灵武长枣果实多糖的单糖成分分析

以宁夏4个不同地区(灵武、中宁、青铜峡、银川)成熟期的灵武长枣果实为研究对象,经水提醇沉法提取,采用DEAE-cellulose52和HW-55S分离纯化,并利用GC-MS法进行多糖的单糖组成分析。结果表明:多糖提取率最高的是灵武地区,达到1.795%;分离纯化后,4个地区的长枣多糖各得到1个中性(Ju-0)和3个酸性组分(Ju-1、Ju-2、Ju-3),其中Ju-2含量最高;GC-MS分析可知灵武长枣多糖含有阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸10种单糖,不含果糖,以阿拉伯糖、核糖、半乳糖和2种糖醛酸为主,木糖含量最低。各地区多糖的单糖组成、含量各不相同,从各组分来看,四个地区多糖的Ju-0和Ju-1组分组成均以阿拉伯糖、核糖、半乳糖为主,四个地区多糖的组成差异主要在于Ju-2和Ju-3组分。从各地区单糖总量来看,灵武地区是阿拉伯糖含量最高,中宁、青铜峡、银川地区以葡萄糖醛酸含量为最高。     

丹皮多糖PSM2b的纯化及其理化性质研究

从中药丹皮(MoutanCortex)蒸馏水浸提液得到粗多糖,经DEAE Cellulose 52柱层析分离得到降血糖组分PSM2b,Surperdex200柱层析进一步纯化得到PSM2b A和PSM2b B两个组分,快速层析纯化系统(FPLC)和电泳鉴定为均一的多糖蛋白复合物。FPLC法测定A和B两组分的分子量分别为1.16×105、1.30×104,苯酚 硫酸法测得其总糖含量分别为76.91%、32.00%,Folin 酚法测得其蛋白含量分别为9.90%、42.60%。气相色谱分析PSM2b A的单糖组成为:L 鼠李糖、L 岩藻糖、L 阿拉伯糖、D 木糖、D 甘露糖、D 葡萄糖、D 半乳糖,摩尔比依次为1.00∶0.18∶4.30∶0.50∶1.30∶2.41∶6.97,PSM2b B的单糖组成为:L 鼠李糖、L 岩藻糖、L 阿拉伯糖、D 葡萄糖、D 半乳糖,摩尔比依次为1.00∶1.17∶0.183∶2.34∶4.18。两者的红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β消去反应初步证明所提取的两种糖蛋白不存在O 型糖肽键。     

中华鳖多糖制备纯化及一般理化性质研究

利用双酶酶解工艺制备了中华鳖体内的多糖物质,以乙醇沉淀纯化了鳖多糖。鳖多糖为灰白色粉未状,易溶于水,不溶于丙酮等有机试剂,其中多糖质量分数为82.12%,它的蛋白、硫酸根及已糖醛酸质量分数分别是3.20%、2.16%、10.36%。     

蛹虫草子实体多糖的分离纯化

目的:研究人工培养蛹虫草子实体多糖的分离纯化方法.方法:多糖经脱色、醇析、除蛋白及乙醇分级沉淀,采用Seph-adex G100柱层析纯化.结果:60℃脱色9h脱色率达70.72％.醇析最优条件为:无水乙醇,24h,4倍乙醇.Sevag法抽提30min重复6次除蛋白率达84.09％;抽提lh重复3次、6次除蛋白率分别为81.14％、84.47％,多糖损失率分别为27.03％、43.16％.木瓜蛋白酶除蛋白最优条件为70℃,1:10,2h,除蛋白率为25.67％.粗多糖经乙醇分级沉淀得2种粗多糖成分,分别经Sephadex G100柱层析可进一步纯化为3种较纯多糖成分.结论:采用乙醇分级沉淀及Sephadex G100柱层析纯化粗多糖可得到3种较纯多糖成分,纯化效果较好.     

枸杞多糖的分离鉴定与体外肠道代谢初步分析

对枸杞多糖的分离纯化工艺和结构鉴定、质量分析方法进行研究,并对其体外肠道代谢过程进行模拟分析,为其开发利用提供参考。枸杞子经乙醇提取除杂、水提、超滤浓缩、冷冻干燥获得枸杞多糖(LBP);LBP采用中压制备色谱系统在线检测,先经DEAE-650M阴离子交换色谱柱分离获得4个主要组分,再分别经超滤浓缩、Sephadex G25色谱纯化、冷冻干燥,获得纯化的4种主要枸杞多糖LBP-1～4。经HPSEC色谱分析,组分LBP-1～4相对分子量依次为65.58、63.83、62.67、65.58 kD;采用HPAEC-PAD检测,表明LBP-1～4主要由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖等6种单糖组成,其中阿拉伯糖与半乳糖含量较高;采用紫外-可见分光光度法分析,测定LBP-1～4的中性糖、糖醛酸和总蛋白质含量分别为64.08%～73.05%、8.5%～18.0%、7.27%～18.67%;体外模拟肠道代谢分析结果表明,LBP在人工胃液中稳定,在人工肠液、大鼠肠道菌群液中会发生降解代谢。上述研究结果可为枸杞多糖的制备与质量控制、产品应用开发提供参考。     

海枣曲霉β-D-岩藻糖苷酶的研究

虽然芦β-D-岩藻糖苷酶(EC3．2．1,38)已从多种动植物中分离纯化,但因它们的专一性均不高而难以确证。我们从海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)培养物中提取,经过PEG6000-磷酸缓冲液双水相分离,相继用DEAE—sepbadev A-50、羟基磷灰石、Sephadex G-100等柱层析分离,获得了凝腔电泳均一的β-D-岩藻糖苷酶,比话力提高500倍。酶反应的最适条件为40℃和pH 6.0,在35℃以下和pH5．5—6.5稳定。凝胶过滤法测分子量为50000—60000,用SDS—PAGE测出分子量为57000。酶的Km值为2.4mmol／L,Vmax为12．8μmol·min-1·mg-1。金属离子Ag+．Hg2+对酶有强抑制作用,巯基乙醇和牛血清清蛋白以及甘油 和多种糖能提高酶活力。化学修饰结果表明,-SH、-COOH基团和组氨酸,色氨酸残基为酶活力所必需。该酶只能水解pNPβ-D-岩藻糖苷,有严格的底物专一性,并能专一地受D-岩藻培和D-岩藻糖酸-r-内酯所抑制,为迄今为止最专一的β-D-岩藻钠苷酶,堪称该酶的典型代表。