培养衣藻的几个关键因素

衣藻是中学生物学实验课必须用到的材料之一.为提高实验效果,需要培养出个体大、密度高的衣藻种群.经过多年的实验,发现影响衣藻生长、繁殖的主要有五个关键因素.     

植物学实验教学的探索(续)

藻类植物时间 3月中旬第一课时课题绿藻——衣藻实验内容从绿色池水中寻找衣藻和其他绿色单细胞藻类。目的要求认识衣藻的形态结构和生活习性。第二课时课题绿藻——水绵实验内容 1.制作水绵装片进行观察;2.制作水绵接合生殖的装片进行观察。目的要求在观察过程中要求学生比较水绵与衣藻的异同;从相同点提出绿藻的特征,从不同点说明水绵是多细胞丝状体。第三课时课题其它藻类植物     

衣藻和水绵制片方法的改进

衣藻和水绵制片方法的改进在初一植物学《实验七》中,教材要求将衣藻和水绵分开制片和观察,这样做有许多弊病。我们在教学中,将衣藻和水绵合制成一块装片,观察起来效果更佳。方法是：先用吸管吸取含有衣藻的水,滴１滴在洁净的载玻片中央,再用镊子（或解剖针）取３～...     

3月份生物各科实验准备

植物学衣藻和水绵的采集、培养和装片制作时值春末夏初时节,气温约10-20℃左右,在有机物丰富、无污染、水流平缓的水池或水沟中,采集发绿的水样,带回在显微镜下观察,水中常含有衣藻。如果水样中衣藻数量较多,可以直接用于实验观察。     

4种常用抗生素对莱茵衣藻生长及光化学活性的影响

采用4种不同浓度的抗生素对(氨苄青霉素(Amp)、卡那霉素(Kan)、氯霉素(Cmp)及四环素(Tet))莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)进行无菌化处理,研究抗生素种类及浓度对莱茵衣藻的细胞密度、叶绿素a含量及光化学活性的影响,以确定对莱茵衣藻细胞无害并能抑制伴杂菌生长的抗生素种类及使用浓度。结果表明:低于100μg/mL的氨苄青霉素(Amp)及20μg/mL的氯霉素(Cmp)处理,会使莱茵衣藻的细胞密度及叶绿素a的含量增加,卡那霉素(Kan)及四环素(Tet)各浓度的处理都会使细胞密度及叶绿素a的含量下降,并呈现抗生素的剂量依赖效应;50μg/mL的Amp及10μg/mL的Cmp在处理3 d后会增加莱茵衣藻的实际光合效率(YII)及相对电子传递效率(rETR),而后下降;Kan及Tet各浓度的处理都会使YII及rETR显著下降。结合4种抗生素对莱茵衣藻伴生菌的抑菌实验结果,表明在4种抗生素中,Cmp在抑菌范围内并不会明显地抑制莱茵衣藻细胞的生长与光化学活性,可用于莱茵衣藻细胞无菌化培养中。     

豆血红蛋白基因lba的克隆及其转化衣藻叶绿体

降低细胞内的氧气含量是提高莱茵衣藻产氢效率的重要手段之一。本研究首次尝试将豆血红蛋白基因lba转入衣藻叶绿体中表达,利用豆血红蛋白具有与氧可逆结合的特性,期望降低转基因衣藻细胞内的氧气含量,达到提高衣藻产氢效率的目的。实验结果证明,lba成功转入到衣藻叶绿体中,且对其生长没有产生显著影响,这为下一步调控Lba在衣藻叶绿体中表达活性和提高衣藻产氢效率奠定了实验基础。     

适用于本科实验教学的衣藻核遗传转化方法研究

对莱因衣藻衣藻核遗传转化关键技术中的衣藻对数生长期确定、玻璃珠性质及振荡操作环节进行了研究,建立了既简便、廉价,又稳定、有效的衣藻核遗传转化系统方法。该方法适用于高等院校本科生遗传学实验教学,其涉及的实验技术可成为培养学生综合实验技能的理想教学内容。     

拟衣藻系统分类新证据

拟衣藻 (Chloromonas)与衣藻属 (Chlamydomonas)的亲缘关系及分类学位置在藻类学界一直没有定论。其重要原因是单细胞鞭毛类是否具有蛋白核这一特征在系统分类学上具有重要意义 ,而光镜形态与色素体上具 1到多个蛋白核的衣藻极其相似的拟衣藻 ,其不具蛋白核这一特征的稳定性受到许多学者的怀疑。本文观察并报道了中华拟衣藻 (ChloromonasSinica)的超微结构 ,通过对拟衣藻与衣藻超微结构的探究和比对 ,发现除了从孢子时期开始的整个生活史中 ,中华拟衣藻都不具蛋白核外 ,无论显微还是超微结构 ,拟衣藻与衣藻都显示出高度的相似性。从而提出在尚未获得更多资料之前 ,将拟衣藻从衣藻属分离出来成为独立的属较为合适     

莱茵衣藻在本科实验教学中的应用

以莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhard6i）为实验对象,研究醋酸钠和硝酸钠胁迫对其生命活动的影响。实验结果表明醋酸钠可能会抑制衣藻的生长,而硝酸钠则无明显的促进作用。醋酸钠和硝酸钠对衣藻的胁迫效应差异很大,醋酸钠胁迫可以明显提高SOD和CAT的酶活性,硝酸钠则无明显作用,甚至有一些抑制作用。通过该研究,探索了衣藻在本科教学实践中的应用．对丰富本科实验具有重要意义。     

培养温度和保存时间对草履虫密度的影响

草履虫是原生动物门纤毛纲的代表动物。在培养与保存草履虫的过程中,培养液中草履虫密度高低,直接影响学生的实验效果。实验证明,草履虫的生长、繁殖受温度影响比较大。草履虫培养液在不同温度条件下、保存时间长短不同,草履虫的密度不同。围绕着这一问题,进行了温度和时间对草履虫密度影响的研究。     

转基因衣藻lba及对照藻产氢培养条件的优化

通过对莱茵衣藻849及其转基因衣藻lba进行光照强度、细胞浓度和培养基中硫酸盐含量三因素三水平的正交实验,确定了两个藻种的最佳产氢条件,同时对转基因藻和849产氢培养条件下的光合放氧速率和pH进行了检测。实验结果表明,在25 ℃下,莱茵衣藻849和转基因衣藻lba的最佳产氢条件都为光照强度 60μmol/(m²·s),细胞浓度为叶绿素含量12.5μg/ml,培养基中硫酸盐含量0μmol/L。莱茵衣藻849和转基因衣藻lba的最高氢气产量分别达到了349μl/mg chlorophyll 和634μl/mg chlorophyll。在产氢条件下,转基因藻lba的净光合放氧速率比849低。结果为利用豆血红蛋白特性通过基因工程手段提高莱茵衣藻产氢量提供基础实验数据。     

转衣藻染色质烟草细胞核的变化及衣藻核基因的表达

应用反复冻融法以衣藻原生质体为材料制备衣藻染色质,应用显微操作技术准确将衣藻染色质转移到烟草叶片外植体中,进行连续培养并镜检观察。结果表明,经染色质转移处理的烟草叶片外植体、衣藻细胞核与烟草细胞核均发生形态上的变化。同时烟草叶片外植体正常发芽并获得再生苗,经RT-PCR检测发现,有衣藻核基因(rbcs2)的表达。     

衣藻鞭毛永久装片的简便方法

鞭毛是衣藻在水中的运动器官.衣藻的鞭毛很纤细,不经染色,难以在普通显微镜下观察.观察衣藻的鞭毛,通常用鲁哥氏液染色,虽然这种方法很简便,但用此法染色后,经过脱水,鞭毛的颜色就会复失.为了制成永久装片长期观察,我们认为用以下方法制作手续比较简单,鞭毛的染色效果也较好.具体做法是:     

绿眼虫染色的好方法

绿眼虫染色的好方法在进行绿眼虫观察实验时，染色往往造成绿眼虫身体变圆而影响观察。通过多次实验，我们找到了一个好方法，而且当绿眼虫密度不太大时仍可进行。取少许绿眼虫培养液，滴一滴于载玻片上，加盖玻片，置显微镜下，可观察到多数绿眼虫分散在向光侧。染色时先...     

衣藻(Chlamydomonas sp)中间纤维及核纤层存在的证实(简报)

衣藻(Chlamydomonas sp)是属于绿藻门的最低等单细胞植物,为典型的真核生物。迄今以衣藻为材料所作的有关细胞骨架方面的研究多集中在微管蛋白(tubulin)。C.J.Miller等曾以衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)全蛋白与几种中间纤维抗体进行免疫印迹实验有阳性反应,但是衣藻中是否存在中间纤维与核纤层是不清楚的问题。衣藻中间纤维与核纤层的形态研究更未见报道。目前认为中间纤维-核纤     

饵料对河蟹溞状幼体变态发育的影响

报道饵料对河蟹状幼体 ( Z1～ Z3)变态的影响。结果表明 :梅尼小环藻是 Z1的适口饵料 ,适量投喂浓度为 80万个 /ml至 1 0 0万个 /ml;投喂衣藻或小环藻与衣藻的等浓度混合饵料都不能使 Z1顺利变态为 Z2 。2 0个 /ml褶皱臂尾轮虫密度是适于 Z2 的饵料密度 ,轮虫密度低于 5个 /ml或高于 40个 /ml都对 Z2 的变态有不良影响。另外 ,投喂 60万个 /ml小环藻加 2 0个 /ml轮虫混合饵料对 Z2 变态发育更为有利 ;而用 2 0万个 /ml衣藻加 2 0个 /ml轮虫投喂 Z2 ,却使 Z2 的变态率明显降低。 30个 /ml轮虫密度是适于 Z3的饵料密度 ,轮虫密度低于 2 0个 /ml或高于 40个 /ml都会对 Z3变态产生不良影响。     

茉莉酸对莱茵衣藻代谢降解杀菌剂三氯生的影响机制

三氯生是一种广谱抗菌剂,广泛应用于日用化学品之中。长期以来,三氯生随生活污水排放至水环境中,对动植物产生毒性作用,进一步通过食物链对人类健康产生威胁。开发高效绿色的三氯生降解方法具有重要的现实意义。微藻作为重要的水环境分解者,参与水体中外源化学物的代谢降解。茉莉酸是一种常见的植物激素,能诱导高等植物对环境胁迫的抗逆性,但其对微藻类低等植物防御体系的影响还未见报道。因此,本文中,笔者考察了不同浓度茉莉酸处理对莱茵衣藻应答三氯生胁迫作用及对三氯生代谢的影响。结果发现,0. 05、0. 15和0. 45μmol/L茉莉酸处理不同程度缓解了三氯生对莱茵衣藻的氧化胁迫,但高浓度茉莉酸(0. 45μmol/L)会抑制莱茵衣藻的生长。与三氯生单独处理的莱茵衣藻样本相比,0. 15μmol/L茉莉酸处理显著提高了谷胱甘肽S-转移酶和多酚氧化酶活力,降低了体内过氧化物酶活力。此外,茉莉酸处理莱茵衣藻体内三氯生积累量显著小于未处理组,而培养液中三氯生残留量无显著差异,说明茉莉酸促进了衣藻对三氯生的代谢降解。进一步通过高分辨质谱鉴定了6种三氯生在莱茵衣藻体内的代谢产物,其中有4种只在茉莉酸处理组中检出,说明在茉莉酸处理下莱茵衣藻代谢三氯生的方式更加多样化,降解效率更高。     

怎样观察衣藻生活细胞的结构?

衣藻细胞小,能游动,加碘液杀死细胞并染色,藻体颜色失真。而且只要碘液稍浓,或染色时间稍长,整个细胞变成蓝黑色,基本结构无法看清。用生活细胞观察结构效果较好,方法是;用吸管吸取培养液一滴于载玻片中央,加盖片。于盖片的某一侧加一滴透明胶水(商品),再用解剖针微微掀动同一侧盖片的边缘一次,透明胶水即向盖片下扩散,并形成浓度梯度。在各梯度中都有衣藻分布。盖片下无胶水的地方藻细胞游动迅速,胶水浓度稀的地方细胞游动减慢。随着胶水浓度的增高,细胞游动速度递减,最后被迫停止运动。在这个区域选择几个个体大,结构清楚的生活细胞,观察其基本结构,效果较好。     

衣藻感光作用的实验

衣藻可依靠眼点的感光作用到光照适宜的地方,进行光合作用,维持自己的生活。但因衣藻个体很小,学生不易看到眼点,平时又没有这方面的感性认识,所以对衣藻能感光这一点感到比较抽象。为了使学生更好地理解这部分内容,设计以下实验,提供给学生一个自己动手动脑的机会...     

中国衣藻属研究（I）

报道了衣藻属（Chlamydomonas）的9个新种：近条纹衣藻、具孔衣藻、顶角衣藻、近环形衣藻、具粒衣藻、近具喙衣藻、不整衣藻、疣突衣藻、倒卵形衣藻,以及4个新变种：阿美衣藻大型变种、似博泡衣藻大型变种、侏儒衣藻陈氏变种和锥形衣藻胶被变种。