大熊猫的牙型及骨关节面的Moiré图示

应用Moiré等高线研究动物骨关节面是一项新的研究工作,本文介绍1980年实验完成的我国珍贵动物大熊猫[Ailuropoda melanoleuca(avid)]牙型及其骨关节面的Moiré等高线图示,并结合功能进行了初步探讨,为建立大熊猫的Moiré解剖图谱和对大熊猫的全面研究积累了资料。为以后探讨动物牙型及关节面间Moiré等高线的差异,建立力学模型和关节工程设计提供参考依据。     

哺乳类动物臼齿的Moire等高线研究

哺乳类动物的臼齿形态与食性的关系十分密切,而对于齿型的判别一直依赖于直观的经验观察,缺乏实验资料。本文根据对刺猬、犬蝠、松鼠、裼家鼠、黑熊、豹、熊猴、现代人、水鹿以及猪的下颌第2臼齿齿啮合面及其外侧面的Moire等高线特征,提出了对哺乳类动物齿型进行初步对比和分类的建议。     

骨关节结核患者TNF-α、TGF-β炎症因子表达分析

为了分析骨关节结核患者TNF-α、TGF-β炎症因子的表达及其临床应用价值,本研究以我院2015年1月~2016年9月期间收治的50例骨关节结核患者为研究对象,按骨关节结核病变分为增生性病变组和干酪性病变组,分析两组患者血清TNF-α、TGF-β炎症因子阳性表达差异;以30例健康人群为对照组,分析TNF-α、TGF-β对骨质骨量的影响。结果表明,TNF-α、TGF-β在不同病变骨关节结核组织中呈现高低不同的阳性表达,TNF-α、TGF-β在增生性病变结核组织中的表达水平显著高于干酪性病变结核组织中的表达水平(p0.05),TNF-α、TGF-β在增生性病变的坏死性结核组织中和非坏死性结核组织中的表达水平无明显差异性(p0.05),但TNF-α、TGF-β在干酪性病变的坏死性结核组织中的表达水平显著高于干酪性病变的非坏死性结核组织中的表达水平(p0.05)。增生性病变患者和干酪性病变患者的骨关节结核组织中的成骨细胞数均明显低于正常人(p0.05),而破骨细胞数则明显高于正常人(p0.05),增生性病变患者骨关节结核组织中的成骨细胞数明显低于干酪性病变患者(p0.05),而破骨细胞数则明显高于干酪性病变患者(p0.05)。由此可知,骨关节结核患者TNF-α、TGF-β炎症因子在不同病变骨关节结核组织中存在不同程度的表达,对患者病情发展及患者骨质骨量均有着重要的影响。     

可塑性跟骨钛板内固定治疗跟骨关节内骨折

目的探讨应用跟骨钢板治疗跟骨关节内骨折的疗效。方法对36例42足累及距下关节的跟骨骨折采用切开钢板内固定伴植骨治疗结果进行分析总结。结果术后36例0．5～3年随访,均骨性愈合。采用张铁良跟骨关节内骨折评分标准：优良率91．6％。结论跟骨钛板内固定结合植骨治疗跟骨骨折具有操作简单、有效恢复Bohler角和Gissane角、恢复关节面固定坚强、有利于早期踝关节功能锻炼的优点,是目前治疗跟骨关节内骨折较为理想的方法之一。     

转基因动物与基因表达调控的研究

十余年来,随着转基因技术的快速发展,基因表达调控的转基因研究已逐渐开展。本文在下列几方面介绍了转基因动物技术在基因表达调控中的应用。转基因动物可作为在体内研究外源基因表达调控的“反应器”,例如研究酶对底物作用的种属特异性。可以精确研究ＤＮＡ顺式作用序列,探讨包括改变基因表达在内的组织和阶段特异性表达,增强子、内含子和核基质附着区的调节作用以及各基因间相互作用。转基因动物可研究发育中的时、空调节（如     

异烟肼影响重组耻垢分支杆菌Rv1776c基因表达的实验研究

目的 研究经典抗结核药物异烟肼对重组耻垢分支杆菌生长增殖及其Rv1776c基因表达的影响。方法 将重组菌MS-Rv1776c接种于LB培养基培养作为对照组,实验组给予异烟肼药物处理,不同时间点取菌液测量A600值,根据所测A值绘制增殖曲线;提取菌液DNA以RT-PCR方法检测异烟肼对Rv1776c基因表达的影响;免疫印迹法SDS-PAGE及Western blot检测异烟肼对Rv1776c蛋白表达的影响。结果 异烟肼对两组重组耻垢分枝杆菌增殖无显著影响（P>0.05）;异烟肼可抑制Rv1776c基因的表达（P<0.05）;SDS-PAGE及Western blot检测发现异烟肼可显著降低ERv1776c蛋白的表达（P<0.05）。结论 异烟肼对重组耻垢分支杆菌的增殖无影响,但可抑制结核分枝杆菌Rv1776c基因及其表达的蛋白。该结果对研究结核菌从休眠菌到复苏初期及活跃期的药物预防提供了实验依据。     

FGFR2Ⅲc重组慢病毒载体的构建及其在肌原细胞L6中的表达

目的:构建人FGFR2Ⅲc重组慢病毒表达系统,感染并筛选获得大鼠肌原细胞L6表达人FGFR2Ⅲc的重组细胞株,初步研究FGFR2Ⅲc对L6细胞的作用.方法:从人胎盘组织中获得FGFR2Ⅲc基因,并克隆到Gateway慢病毒系统的入门载体pENTR-11,采用LR重组酶将重组的pENTR-FGFR2Ⅲc和表达载体pLenti6/V5-DEST进行重组反应得到pLenti6/V5-DEST-FGFR2Ⅲc.将该重组表达载体和Viral Packaging Mix包装质粒通过阳离子脂质体共转染293FT细胞,待细胞完全裂解后收集重组慢病毒颗粒上清液;取适量上清液感染L6细胞,杀稻瘟毒素筛选2～4周,挑单克隆细胞进一步扩大培养并建立重组细胞株.RT-PCR、间接免疫荧光和Western blot鉴定重组细胞株中目的基因FGFR2Ⅲc的表达,bFGF和硫酸乙酰肝素共同诱导各重组L6细胞株后流式细胞术分析细胞周期,形态观察检测成肌分化水平,并通过相关信号通路抑制剂分析与各信号通路的关系.结果:构建了舍人FGFR2Ⅲc基因的重组慢病毒表达载体,获得的重组慢病毒颗粒能高效感染L6细胞,RT-PCR和间接免疫荧光实验说明正确表达目的基因;流式细胞术结果表明L6中高表达FGFR2Ⅲc的重组细胞株的G1/G0期的细胞增多;各重组细胞株分别加入Erk1/2和p38通路抑制剂抑制诱导2天,发现重组细胞株发生不同的形态变化.结论:通过慢病毒表达系统,成功构建高表达FGFR2Ⅲc的重组L6细胞株,FGFR2Ⅲc通过Erk1/2和p38通路影响了L6细胞的形态发生,该结果为下一步在大鼠L6细胞中研究FGFR2Ⅲc基因与成肌分化功能相关性奠定基础.     

强啡肽对纹状体内D_1多巴胺受体反应的调节

用6-羟多巴胺破坏黑质纹状体通路,使大鼠多巴胺耗竭后,应用原位杂交组织化学方法测量D1多巴胺受体对即早基因c－fos和zif268诱导反应,分析强啡肽对突触前、后调节作用。先用D1多巴胺受体激动剂SKF－38393反复处理动物,促进纹状体内强啡肽表达,在伏隔核强啡肽表达增加,同时伴随着即早基因c-fos和zif268的减少．在纹状体的背部和两侧,强啡肽表达虽大量增加,而D1多巴胺受体反应仍然维持原水平．在中央纹状体区,即早基因的表达处于中间水平。结果提示,纹状体内强啡肽起着调节多巴胺输入到纹状体黑质神经元的作用,包括突触前、后位置;并且调节作用在纹状体的腹、背侧区是不同的     

Micro-CT评价Runx2基因修饰的骨髓间充质干细胞静脉移植促进缺血性股骨头坏死兔坏死股骨头修复效果

目的:应用Micro-CT评价Runx2基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)静脉移植促进兔坏死股骨头修复效果。方法:24只大耳白兔经缺血性股骨头坏死造模4周后随机分为4组,A组静脉移植1×107个Runx2基因修饰的MSC,B组静脉移植1×107个Runx2 si RNA修饰的MSC,C组单纯植入1×107个MSC,D组静脉植入等量生理盐水,细胞移植后2、4、6、8周取出股骨头标本行Micro-CT检测,评价股骨头坏死修复情况。结果:2周后各组动物股骨头关节面模糊,骨密度降低,骨小梁数量及厚度均下降,骨小梁结构紊乱,但组间差异不明显;4、6周后,A、B、C组动物股骨头内骨密度和骨小梁结构未明显变化,但可见修复反应,而D组动物股骨头内骨小梁结构破坏进一步加剧;8周后,D组动物股骨头关节面塌陷,骨小梁严重缺失形成较大空洞,A、B、C组股骨头可见明显修复反应,关节面完整度、关节面下骨密度、骨小梁体积及数量、骨小梁连续性表现为ACBD组。结论:MSC静脉移植可有效治疗股骨头坏死,且过表达Runx2基因修饰后能有效提升MSC移植后的治疗效果。     

同源重组技术研究进展

同源重组是近年来迅速发展起来的对细胞染色体基因组中某一特殊基因进行定向操作,以便借助转基因动物手段来精确研究基因结构与功能及表达调控的技术。本文对同源重组发生的分子机理、实验设计策略、打靶细胞的筛选和富集方法,近年来在这一领域中所取得的主要成就及应用前景进行了较全面的评述。     

过渡分析在先秦时期人骨年龄估计中的应用

成人骨骼年龄的估计向来是存在许多困难和争议的。通过对其发展历程的回顾可知,尽管早已研发出了相对较可靠的用耻骨联合、髂骨耳状关节面等特征部位的形态估计年龄的方法,但鉴于“年龄模拟效应”的存在,这些方法都不可避免地会使估计的结果出现偏差。建立在贝叶斯方法和最大似然估计的基础上,Jesper Boldsen等研发出的“过渡分析”能够有效地消除上述不良影响。借助ADBOU软件,通过对山西先秦时期人骨样本进行过渡分析的实践,发现传统的形态观察法和过渡分析法会造成估计得到的死亡年龄结构出现差异。由于年龄估计结果的差异会对古人口学研究造成显著影响,因此建议在借鉴过渡分析的基础上,加强对年龄估计方法的改进。     

转基因动物与基因表达调控的研究

十余年来,随着转基因技术的快速发展,基因表达调控的转基因研究已逐渐开展。本文在下列几方面介绍了转基因动物技术在基因表达调控中的应用。转基因动物可作为在体内研究外源基因表达调控的“反应器”,例如研究酶对底物作用的种属特异性。可以精确研究ＤＮＡ顺式作用序列,探讨包括改变基因表达在内的组织和阶段特异性表达,增强子、内含子和核基质附着区的调节作用以及各基因间相互作用。转基因动物可研究发育中的时、空调节（如β－珠蛋白基因和同源异形盒基因）以及基因多级调节系统。通过同源重组得到基因缺陷动物（基因敲除动物）可探讨目的基因突变所致的异常表型以研究基因功能与调控。     

同源重组技术研究进展

同源重组是近年来迅速发展起来的细胞染色体基因组中某一特殊基因进行定向操作,以便借助转基因动物手段来精确研究基因结构与功能及表达调控的技术。本文对同源重组发生的分子机理,实验设计策略,打靶细胞的筛选和富集方法,近年来在这一领域中所取得的主要成就及应用前景进行了较全面的评述。     

北京猿人头盖骨最大宽位置与高度测量的比较研究

本文应用颅骨冠状面投影轮廓图,进行颅顶点高、颅最大宽、颅宽位置高度、耳门上点间距、颅侧壁高等测量;并计算颅宽位置指数、颅侧壁高与颅顶点高的比值、颅侧壁高与颅最大宽的比值等以阐明在人类起源与发展过程中,颅最大宽位置与高度测量的变化规律。
同时,也运用Moire法,系统地观察颅侧点(euryon)位置在人类进化过程中的变化顺序。     

腰椎间关节的形态曲率及其力学分析

在56套(男30,女26)青岛和长春地区出土的成人腰骶椎骨骼上观测了腰骶椎上关节突关节面的形态和曲率。关节面的形态可分为隧道型、椭圆型和不规则型。根据其曲率不同可分为圆弧型、平面型和混合型。自上而下,隧道-圆弧型关节面依次增多,关节面的曲率半径逐渐增大,从而使腰骶部脊柱的运动范围自上而下也依次增大。     

快速成型技术在手术治疗跟骨关节内骨折中的应用

目的:跟骨解剖形态复杂、结构不规则,骨折多累及关节面,且致伤后关节面压缩、塌陷、粉碎严重,传统手术术区显露较局限,骨折复位较困难,关节面复位精度不高,手术时间较长,致残率高。探讨快速成型技术治疗跟骨关节内骨折的应用价值。方法:将2012年1月~2013年1月期间收治的30例SandersⅢ-Ⅳ跟骨骨折患者根据入院顺序随机均分为试验组和对照组两组,对试验组患者采用计算机辅助技术行跟骨骨折的三维重建解剖学模型,快速成型制作出与实体1:1大小的跟骨模型。依此对跟骨骨折做出明确的诊断、分型,制定手术方案,术前模拟手术,指导手术治疗,将术中指标与未模拟手术的对照组指标进行比较。结果:试验组和对照组的手术时间分别为(53.3±5.0)min和(71.4±4.9)min,两组间差异有统计学意义(P0.05)。试验组和对照组术中出血量分别为(47.3±6.8)mL和(51.3±8.4)mL,两组间差异无统计学意义(P0.05)。试验组术后功能评分:优良率88.2%,而对照组为88.9%,两组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:快速成型技术能够向术者直观、立体的展示骨折的形态,使术者准确评估骨折情况,弥补术区切口显露局限的不足,提高复位精度,缩短手术时间,减少术中创伤,降低致残率,对跟骨骨折的治疗有很强的指导意义、应用前景广阔。     

CD11c在新生儿及成人指皮组织表达的免疫组织化学研究

目的:研究新生儿及成人指皮组织CD11c阳性细胞的数量、形态和分布情况。方法:取7例尸检新生儿及5例成人无名指指皮组织样本,CD11c标记,行免疫组织化学染色,光镜观察阳性细胞的表达、分布情况并进行统计学分析。结果:人指皮组织中,CD11c阳性细胞和阳性突起呈棕褐色,胞体大小不等、形态多样;胞核呈圆形或椭圆形,突起长短粗细不等,可相互连接。阳性细胞呈散在或灶带状分布,灶带状分布常见于表皮乳头周围、血管神经分叉周围,血管外膜、环层小体被囊结缔组织内可见散在的CD11c阳性细胞。新生儿组CD11c阳性细胞的表达率为(31.0±9.4)%,高于成人组(6.0±2.7)%(P0.01)。结论:CD11c分子可能也是人指皮组织细胞分化过程中的阶段性标志物,其表达量的降低与年龄的增长有关。     

短期高浓度氟对小鼠磨牙成釉细胞形态及BMP-4表达的影响

目的:研究短期高浓度氟对小鼠磨牙成釉细胞形态及骨形成蛋白-4(BMP-4)表达的影响,探讨氟对牙本质发育的相关机制。方法:选择40只4日龄的ICR小鼠为研究对象,随机分2组各20只,每组对照鼠与实验鼠各半,对实验动物进行单次腹腔注射,剂量分别为10mg/kg和20mg/kg的Na F,对照组动物则进行单次腹腔注射等剂量的Na Cl,24小时后处死动物。采用免疫组化染色观察高浓度氟对小鼠磨牙不同分化阶段成釉细胞形态及BMP-4表达的影响。结果:成釉细胞在分泌过渡期及早、晚期对短期暴露高浓度F-敏感,与对照组小鼠相比,实验组小鼠成熟期成釉细胞无明显变化,过渡期与分泌晚期成釉细胞中BMP-4的表达显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:短期高浓度氟对分泌过渡期及晚期成釉细胞中BMP-4的表达有抑制作用。     

针对猪瘟病毒E2蛋白的嵌合猪源化单克隆抗体的表达及抗病毒活性鉴定

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是严重危害养猪业的一种烈性传染病,常造成巨大的经济损失,是世界动物卫生组织要求必须申报的动物疫病之一。猪瘟的病原是猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),CSFV的结构蛋白由衣壳蛋白(C)和囊膜糖蛋白(E~(rns)、E1、E2)构成。E2蛋白是CSFV主要的保护性抗原,可以诱导机体产生中和抗体,从而抵抗CSFV的感染。此前,本团队制备了一株针对CSFV E2蛋白的鼠源单克隆抗体HQ06。文中将HQ06抗体重链和轻链可变区基因与猪源恒定区基因嵌合后克隆至真核表达载体,利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞制备一株针对CSFV E2蛋白的嵌合猪源化单克隆抗体c HQ06。应用ELISA、Western blotting试验证实了c HQ06与CSFV E2蛋白具有良好的反应性;中和试验结果表明c HQ06可以中和CSFV。综上所述,本研究应用CHO细胞稳定表达了具有良好反应性和中和活性的针对CSFV E2蛋白的嵌合猪源化单克隆抗体c HQ06,为研究CSFV E2蛋白结构、功能以及开发新型的CSFV诊断和治疗制剂奠定基础。     

牛科(哺乳纲:偶蹄目)动物与生境利用有关的适应形态模式

对广义牛科动物颅后骨骼的多元变量分析揭示了牛科生境利用和体型之间的骨学特征。利用逐步分辨分析方法和一个基于机器学习的决策树方法鉴别了每种生境中牛科动物颅后解剖结构的形态特征。从110个广义牛科动物测量了43个指标进行了这项分析。利用所有主要肢骨测量值和以单根肢骨测量为主的测量值获得的分辨函数和决策树可以完美地区分适应开阔生境、森林和山地的牛科动物(在所有分析中得到了100 %正确的再分类)。由于调整的函数仅涉及到很小的颅后骨骼测量集,这些函数可以应用于研究考古学和古生物学发掘物中保存的不完整标本。这些表征生境利用的生态适应函数与那些用颅齿部性状建立、用于推测牛科动物食物选择的函数结合,具有刻画已灭绝的分类类群的古个体生态学和重建古环境的潜力。我们还分析了多元回归是否较单一因子回归表现出较高的预测能力,并提出了从每一种单根主要肢骨测量的颅后形态变量得到的最好代数函数