IGF-2r的结构和功能及其在胚胎发育中的作用

胰岛素样生长因子-2受体（insulin-like growth factor-2 receptor,IGF-2r）和非阳离子依赖型甘露糖-6-磷酸受体（cation-independent mannose-6-phosphate receptor,CI-MPR）为同一分子,属多结构域跨膜糖蛋白。IGF．2r与阳离子依赖型M6P受体（cation-dependent mannose-6-phosphotase receptor,CD,MPR）共同介导溶酶体酶的分选和转运过程,对溶酶体的形成起重要作用。IGF-2／M6P受体除能与溶酶体酶、TGF-β前体等M6P配体结合外,还能与非糖基化的IGF-2、视黄酸等作用,调节蛋白质的转运和跨膜信号传导等活动。IGF-2r为父源性印迹（paternal imprinted）基因,基因的印迹、表达受基因印迹控制区（imprinting control region,ICR）的甲基化差异修饰所调控。IGF-2r基因表达缺失出现胎儿肥大、心脏和胎盘发育不全、围产期死亡等异常现象,证明IGF-2r在胚胎发育过程中起重要作用。     

内分泌细胞中溶酶体的功能

内分泌细胞是动物体中分泌激素的细胞,按所分泌激素不同可以分为分泌肽类激素的细胞和分泌类固醇激素的细胞两大类。这两大类细胞在激素合成的原料、酶系统、有关细胞器和激素释放方式上都明显不同,但是两大类细胞中都有相当数量的溶酶体。溶酶体是具有降解功能的细胞器,细胞内大部分与降解有关的功能活动都有溶酶体的参与。在内分泌细胞中,除了在一般的细胞生理活动中执行降解功能以外,溶酶体在有关激素分泌的各个方面都起着不可忽视的重要作用。根据溶酶体研究的历史以及一些新近资料和概念,内分泌细胞中溶酶     

溶酶体贮积症的研究进展

溶酶体贮积症是一种罕见的遗传缺陷疾病,溶酶体内未酶解的大分子累积,最终导致细胞功能障碍和临床异常情况。许多溶酶体底物在细胞结构和功能上都有关键的作用,因此溶酶体功能失常的影响非常广泛,如神经受累、间质受累、网状内皮组织受累及胎儿水肿。治疗方法主要有骨髓移植、酶替代疗法、底物减少治疗、基因治疗和分子伴侣治疗。利用转基因及其他一些前沿技术,将有可能彻底根除这些长期困扰人类的溶酶体贮积症。     

胶质细胞的细胞间通讯

星型胶质细胞虽然没有动作电位,但是可以表达多种受体和离子通道,并且以细胞内钙波传递的方式来响应各类刺激。星型胶质细胞同样可以释放多种信号分子来介导细胞间的通讯。尤为特别的是,星型胶质细胞的钙波传播和突触功能的反馈调节都需要其释放ATP才得以完成。然而,星型胶质细胞释放ATP的途径和机理还有待研究。尽管人们已经在星型胶质细胞中发现了小囊泡和大致密核心囊泡的标记物,可是用以胞吐的囊泡究竟是什么还并不清楚。作者等近期的研究成果表明,FM染料——一种被成功应用于研究神经元和其他分泌型细胞囊泡循环的染料,可以特异地标记星型胶质细胞的溶酶体,并依不同程度的刺激表现出两种不同模式的钙离子依赖性胞吐：在较低强度刺激下（ATP,谷氨酸）发生部分胞吐,而在高强度刺激下（氰化钾）则发生完全胞吐。进一步研究表明,溶酶体中含有大量ATP,并且在部分胞吐时少量释放ATP,完全胞吐时大量释放ATP,同时释放溶酶体酶。选择性地裂解星型胶质细胞的溶酶体,发现ATP释放和钙波传播都消失了。总之,星型胶质细胞的溶酶体可以通过调节性胞吐对生理和病理条件下的细胞间信号传递产生重要意义。     

大鼠分泌期成釉细胞线状溶酶体的研究

目的：研究分泌期成徽细胞中,线状溶酶体的分布,探讨其在牙釉质形成中的作用。方法：运用酶组织细胞化学光、电镜技术进行制定和观察,并利用图像分析软件进行定量分析。结果：在分泌期成釉细胞中有线状溶酶体(Nly)的分布。且分布的密度随日龄而不同。结论：分泌期成釉细胞中的线性溶酶与牙釉质的形成和矿化过程相关。     

现有溶酶体分离纯化技术的对比、分析和应用

溶酶体作为真核细胞中重要的细胞器,不仅是降解内外源物质的场所,也是细胞能量感知和调节的中心,能够协调细胞物质的转运、代谢和分泌。溶酶体稳态失衡会导致许多疾病,如溶酶体贮积症、肿瘤、免疫缺陷和神经退行性疾病。获得完整、高纯度的溶酶体是研究其微观结构、稳态调控和相关分子功能的重要前提。目前常用的溶酶体分离纯化技术包括离心分离纯化、荧光辅助细胞器分选、亲和免疫分离纯化、磁性纳米颗粒分离纯化和Lyso-IP等。该文综述现有溶酶体分离纯化技术的原理、特点和应用,并对它们进行对比分析。     

溶酶体与细胞凋亡

在特定条件下,包括活性氧、鞘氨醇、细胞凋亡效应因子Bax等在内的多种刺激因子均可诱发溶酶体膜通透,之后溶酶体内含的蛋白酶（如组织蛋白酶等）及其他水解酶从溶酶体释放至胞浆中,通过剪切效应分子、激活包括凋亡酶在内的其他水解酶而启动细胞凋亡程序的执行。简要概括了引发溶酶体膜通透的可能机制及溶酶体参与细胞凋亡的主要途径。     

内分泌细胞中溶酶体对激素分泌调节的作用

本实验用外源性雄激素引起垂体促性腺激素细胞和睾丸间质细胞分泌抑制,对这两种细胞中的溶酶体及分泌吞噬和自体吞噬活动进行了超微结构形态观察和半定量分析。实验中应用了CMP酶细胞化学技术和免疫胶体金技术。研究结果显示,在分泌受抑制状态下,垂体促性腺激素细胞中溶酶体增多,分泌吞噬活动加强;与此同时,睾丸间质细胞也表现溶酶体增多、自体吞噬活动加强。这些结果不仅再次证明在分泌蛋白质激素细胞中溶酶体以分泌吞噬的方式参与了激素分泌调节,更重要的是初步证明在分泌类固醇激素细胞的分泌调节中,也有溶酶体的参与,其形式是自体吞噬作用。细胞通过自体吞噬作用得以在短时间内清除一部分合成激素的细胞器和其中的激素,这可能是分泌类固醇激素的细胞及时有效地调整激素分泌量的一项重要机制,与分泌蛋白质激素细胞的分泌吞噬有着相同的意义。     

分泌型溶酶体与疾病

传统意义的溶酶体被认为是细胞内消化途径的终点站,是含有多种水解酶和脂肪酶的细胞器,可以消化蛋白以及膜结构等.某些特殊类型的细胞中存在分泌型溶酶体,它既有胞内消化的功能,又有调节分泌功能.在调节溶酶体胞吐的蛋白质中,Rab27a蛋白起到了核心作用.相关基因特别是控制胞吐的基因突变,可造成各种免疫缺陷综合症.星型胶质细胞溶...     

内体—溶酶体运输及其细胞功能

哺乳动物细胞中,内吞作用通过质膜内陷形成囊泡来摄取外界物质,经早内体到达晚内体/溶酶体降解或经再生循环回到质膜。内体运输网络参与细胞一系列重要生命活动,如信号通路调节、细胞器发生以及胞吐作用等。近年来发现Aps、BLOCs、HOPS和ESCRTs等复合体共同参与货物由胞内体到溶酶体或溶酶体相关细胞器的运送。该文主要就这些内体—溶酶体运输系统中重要蛋白复合体的组成和功能进行综述。     

氧化应激对溶酶体储存与转运甲醛的影响

内源甲醛代谢失调被认为是导致阿尔茨海默病的危险因素之一,甲醛蓄积会引起神经细胞的死亡和认知功能的降低.研究表明,细胞内甲醛分布于溶酶体内,而溶酶体功能异常与神经退行性疾病密切相关.本文采用甲醛特异荧光探针,在氧化应激条件下,检测到小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3和小鼠神经瘤母细胞株N2a溶酶体内甲醛明显升高;在慢性脑低灌注大鼠动物模型中,其脑神经细胞的溶酶体内甲醛也升高(P0.01);LeuLeuOMe处理bEnd.3细胞,使其溶酶体膜通透性增加,导致细胞内甲醛蓄积,而胞外甲醛降低.以上结果证明,溶酶体具有储存和转运甲醛的功能,如果溶酶体出现结构与功能的异常,会导致甲醛代谢失调,造成认知损害.     

溶酶体膜H^＋—ATP酶的细胞化学观察

本实验在以p-NPP为底物、氯化铈为捕捉剂、Tricine-KOH为缓冲液的中性最适环境中温育大鼠肝组织,进行肝细胞、血窦内皮细胞和枯否氏细胞内溶酶体膜上H~+-ATP酶定位的细胞化学研究。温育反应形成的磷酸铈反应产物电子密度高、颗粒细、分布均匀、非特异性反应产物少、重复性好。对照实验证实,溶酶体膜上的H~+-ATP酶是对哇巴因耐受的,对NEM敏感的囊泡膜H~+-ATP酶。     

神经干细胞定向分化过程中溶酶体表达变化的研究

目的对神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体的表达变化进行观察研究。方法采用细胞培养技术、荧光免疫细胞化学技术以及光电镜酶细胞化学技术对神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体的表达变化进行观察。结果在神经干细胞向神经元定向分化的过程中,随着细胞分化的不断成熟,溶酶体的表达亦发生着变化。分化初期主要以核周附近表达明显,至神经元分化成熟则散在分布于胞质中及突起内,且表现有圆形、线状两种形态。结论在神经干细胞向神经元定向分化过程中溶酶体发生表达分布的变化,说明其参与了细胞的代谢和细胞内物质的运输。     

溶酶体在垂体—肾上腺皮质激素分泌调节中的作用

本实验用地塞米松造成大鼠垂体促皮质激素细胞及其靶腺肾上腺皮质束状带细胞分泌抑制,对这两种细胞中的溶酶体及分泌自噬和自体吞噬活动进行了超微结构观察、CMP 酶细胞化学定性和形态计量。实验结果显示,在分泌受抑制状态下,垂体促皮质激素细胞中分泌自噬和自体吞噬作用加强,与此同时,肾上腺皮质细胞中自体吞噬作用也业著加强。这些结果表明,在分泌类固醇激素的细胞中,溶酶体以自体吞噬的方式清除一部分生产激素的细胞器,可能是一种普遍存在的分泌调节机制,正如在分泌蛋白质和肽类激素的细胞中普遍存在着分泌自噬这一调节机制一样。     

玉米叶片依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶两种分子型动力学特性的研究

从玉米叶片中部分纯化了依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PPi-PFK),对果糖2,6-二磷酸具有很高的敏感性(K_a≈15nmol/L)。纯化过程中酶的生糖方向活性对酵解方向活性的比值逐渐增加。F2,6-P_2的参与使这一比值下降,并且解除高浓度PPi对酶FBP形成活性的抑制。 用胰蛋白酶限制酶解,90min使80％酶的酵解方向活性丧失而仍然保持几乎全部的酶的生糖方向活性。胰蛋白酶修饰的酶的动力学结果表明F6P饱和曲线呈明显S型而且V_(max)大大下降。在F2,6-P_2存在下修饰酶的K_m(F6P)值比天然酶约大4倍。 酶的生糖方向活性动力学特性的比较说明天然酶和胰蛋白酶修饰酶几乎具有相同的催化能力和底物(F6P)亲合力。 实验支持植物PPi-PFK存在两种可以相互转化的酶分子型的调节酶的活性和作用方向的模型。     

溶酶体跨膜蛋白175钾通道蛋白质与帕金森病

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种复杂的神经退行性疾病,以运动障碍和非运动症状为特征。虽然以多巴胺为基础的疗法在疾病的早期阶段能有效地对抗症状,但缺乏神经保护药物意味着疾病仍在继续发展。PD病人迫切需要新的疾病修饰疗法和新的治疗策略。遗传学研究表明,罕见和常见的基因变异都会导致PD的发生和发展。跨膜蛋白175(transmembrane protein 175,TMEM175)是来自溶酶体的PD风险基因之一,编码一种具有新型结构的溶酶体钾通道蛋白质,参与维持溶酶体膜电位和pH的稳定性。随着对TMEM175的了解,多项研究证实TMEM175的缺陷能够导致溶酶体功能障碍,诱导神经元α-突触核蛋白(α-synuclein)的病理性聚集,促进帕金森病发生。鉴于溶酶体TMEM175通道蛋白的重要功能,TMEM175基因可能是帕金森病及其他神经退行性疾病治疗的潜在靶点。本文综述了溶酶体TMEM175基因的结构及功能,重点阐述了其作为溶酶体内稳态调节因子通过影响溶酶体的功能参与PD发生发展的过程,并对其研究进行了展望。以TMEM175为靶标,筛选具有保持TMEM175的活性状态或增强其表达的药物可能具有改善PD病人病情的效果,但TMEM175如何通过保持其通道的开放和闭合状态之间的平衡来调节溶酶体的离子稳态,具体机制尚需要进一步研究探讨。未来对该离子通道蛋白质的进一步研究将为 靶向PD治疗带来新的策略和思路,为在PD的诊断与治疗中奠定TMEM175的靶标分子地位提供支持。     

棉铃虫中肠几种酶的组织化学研究

采用酶组织化学方法研究了棉铃虫中肠三磷酸腺苷酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的分布和活性。结果显示三种酶在棉铃虫中肠均有分布,但分布部位各不相同,其中,三磷酸腺苷酶在肠壁分泌细胞、肠壁细胞、环肌和纵肌均有分布,以肠壁分泌细胞活性较高;碱性磷酸酶主要分布于肠壁分泌细胞,在肠壁分泌细胞做绒毛处活性最高;酸性磷酸酶分布于肠壁细胞、环肌和纵肌,在肠壁细胞底膜处活性最高。这些酶可以作为棉铃虫中肠不同条件下的生理指标。     

Vps4：一个有效抑制HBV感染的宿主因子

Vps4属ATP酶AAA家庭成员,其细胞功能包括溶酶体膜转运、蛋白降解和伴侣蛋白样活性等。病毒体出芽和释放必须利用某些宿主细胞成分,Vps4是参与细胞空泡蛋白分选的宿主因子,在此过程中起着重要作用。Vps4显性负相突变体在体外可显著抑制HBV复制和分泌,这可为抗HBV治疗提供新的策略。     

人溶酶体α-甘露糖苷酶cDNA的克隆与表达

溶酶体α-甘露糖苷酶是糖蛋白降解途径的主要外糖苷酶,该酶缺陷引起溶酶体α-甘露糖苷贮积症.用RT-PCR法从HeLa细胞中克隆的人溶酶体α-甘露糖苷酶cDNA含有1个由2964bp组成的阅读框,编码由988个氨基酸组成的多肽,前26个氨基酸为潜在的前导序列,成熟多肽的预测分子量为111kD,具有11个潜在的N-交联糖基化部位.用逆转录病毒介导法导入患者细胞后,该cDNA表达高活性α-甘露糖苷酶.序列分析表明,此cDNA与已发表的拟似人溶酶体α-甘露糖苷酶cDNA有不同程度的差异,尤其是第2315位碱基的T-C转换可能与控制酶活性有关     

溶酶体检测在海洋污染监测中的应用研究进展

溶酶体(lysosome)是真核细胞内重要的细胞器.近年来随着对溶酶体结构和功能研究的深入,溶酶体被认为是亚细胞水平上的有毒物质的靶点,在国外已广泛应用于海洋污染监测.本文概述了溶酶体标志酶、溶酶体 自噬系统和溶酶体膜的生物学特性,在此基础上介绍了利用溶酶体检测技术进行海洋污染监测的原理和方法.双壳贝类消化腺和鱼类肝脏最适于作为溶酶体检测的敏感器官;采用溶酶体膜稳定性测定(LMS)、溶酶体中性红保留时间测定(NRRT)、溶酶体形态测量(MM)、溶酶体标志酶免疫组化测定(Ih)和电镜(EM)观察等技术,能够指示海洋污染状况,因此溶酶体可作为生物标志物监测海洋环境污染.文中还分析了溶酶体检测的优缺点以及应注意问题,对其应用前景进行了展望.