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1.
皮质酮快速抑制PC12细胞乙酰胆碱诱发电流影响及机制探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
目的和方法:本研究采用全细胞膜片箝技术,观察皮质酮(B)对PC12细胞上乙酰胆碱诱发电流(IACh)的快速作用并初步探讨其可能机制。结果:PC12细胞上IACh是通过烟碱受体(nAChR)引起的。箝制电压为-80mV时,ACh(30μmol/L)诱发一内向电流;细胞外灌流同时给予ACh和B(10-5mol/L)时,B对IACh的抑制作用较弱;用B(10-5mol/L)对细胞进行预处理,可提高B对IACh峰值的抑制率,作用呈可逆性、浓度依赖性和非电压依赖性;细胞外用RNA合成抑制剂放线菌素D(4×10-5~4×10-3mol/L)或蛋白合成抑制剂放线菌酮(10-4~10-3mol/L)孵育细胞1~2h阻断基因机制,但均不影响B对IACh的快速抑制作用。结论:B对PC12细胞上IACh有快速抑制作用,此作用可能是由非基因组机制介导的。 相似文献
2.
在哺乳动物细胞中,程序性细胞死亡(PCD)的功能元件包括死亡受体、适配体蛋白、效应元件及调节元件。凋亡信号由适配体蛋白传导至效应元件-Asp特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase),活化的Caspase水解一系列关键底物,最终导致细胞解体。Bcl-2家族、IAPs家族、ARC和FLIPs等蛋白因子通过与适配体蛋白及Caspase的相互作用来调控PCD进程。 相似文献
3.
用佛波酯(佛波醇-12-豆蔻酸-13-乙酸酯,PMA)作用大鼠咒9细胞,发现PMA能促进CRHB7919细胞中磷脂酰胆碱(PC)水解,此效应出现在PMA作用细胞15分钟后,且具有PMA浓度依赖性。分析PC水解产物,发现PC主要水生成胆碱而不是磷酸胆是一步测定膜结合磷脂酰胆碱专一性的磷脂酶D(PC-PLD)活性,结果显示100nmol/LPMA作用细胞10分钟即激活PC-PLD,至30分钟PC-PL 相似文献
4.
球形幽门螺杆菌分子生物学研究 总被引:5,自引:1,他引:4
为研究幽门螺杆菌(HP)球形变异本质,作者通过延期培养和采用亚抑菌浓度抗生素,使3株HP发生球形变异,对弯曲形和球形HP作了SDS-PAGE、免疫印迹及4个毒力基因片段PCR和PCR-SSCP分析。SDS-PAGE图谱显示球形HP分子量在74×104以上的蛋白含量减少,免疫印迹显示球形HP125×104蛋白条带反应减弱,而抗生素诱变的球形HP分子量为11×104和63×104的蛋白条带反应增强。PCR及PCR-SSCP结果表明球形HP的hpaA,VacA,CagA和UreA4个毒力基因片段未发生缺失,但在hpaA或VacA基因中存在点突变 相似文献
5.
以遗传性脊髓小脑共济失调Ⅱ型基因(spinocerebellar ataxia typeⅡgeneSCA2)编码区内的CAG三核苷酸重复为研究对象(G+C含量为69.2%),比较了热启动PCR、碱基替代PCR、添加增效剂(1%-12.5%二甲亚砜、1%-25%甘油、1%-12.5%甲酰胺)与常规PCR的扩增效率,发现热启动PCR、碱基替代PCR及添加增效剂(1%-10%二甲亚砜、5%-20%甘油、 相似文献
6.
硫酸化对金顶侧耳多糖构象及生物活性的影响 总被引:18,自引:0,他引:18
从金顶侧耳子实体中分离纯化一半乳甘露聚糖PC-3。该多糖在水中为无规线团构象,与Con A可相互结合并产生沉淀,对柯萨奇病毒CB5有一定的抑制作用,PC-3经硫酸化修饰后,由于同性电荷的排斥作用,使糖链的无规线团扩展呈伸展状态,局部可能形成螺旋。硫酸化的PC-3与Con A不能结合成多糖-蛋白复合物,但显著地提高了抗病毒CB5的活性。 相似文献
7.
白细胞介素12抗肿瘤作用前景看好白细胞介素12(IL-12)是一种具有多种生物学作用的细胞因子,其抗肿瘤作用引人注目。先前已发现,IL-12可通过活化T细胞发挥抗肿瘤作用。最近美国波士顿儿童医院Folkman等的研究则表明,IL-12可抑制或阻止新血... 相似文献
8.
任力强 《国外医学:分子生物学分册》1994,16(5):222-225
mdm2(murine double minute2)基因定位于人染色体12q13-14,转录产物为-5.5kbmR-NA,在人体正常组织中有广泛表达,其编码区为1476bp,MDM2蛋白定位在细胞核中,半寿期很短,利用单抗或多抗发现和有5种与mdm2相关,但分子量不同的蛋白,MDM2蛋白在体内外都能与突变型或野生型P53蛋白结合,抑制P53蛋白介导的反式活化作用。mdm2可作为一种癌基因使P53 相似文献
9.
细胞程序死亡与bcl-2基因 总被引:3,自引:0,他引:3
细胞程序死亡,是有别于细胞坏死的另一种重要的衰老,死亡形式,它在胚胎发育,肿瘤发生,免疫系统的克隆选择中起重要作用,bcl-2是调控PCD的基因,但不能抑帛有类型的PCD,最近发现,bcl-X基因编码大小不同的两种蛋白,分别具有刺激和抑的PDCCD的功能,bcl-2通过抑制PCD可导致细胞癌变,因而bcl-2被看作第三类癌基因。 相似文献
10.
R-藻蓝蛋白的分离及其结构表征 总被引:15,自引:0,他引:15
本文对传统藻胆蛋白的分离方法进行改进,利用柱层析法直接从新鲜多管藻提取分离出纯的R-藻蓝蛋白。分别用凝胶柱层析法和电泳法测定了其分子量。结果表明:通常实验条件下:R-藻蓝蛋白的最稳定聚集态是三聚体,其分子量为122.8KD,它由分子量分别为18.1KD(α)和20.5KD(β)两个亚基组成,其分子组成为(αβ)3。利用吸收和荧光光谱研究了R-藻蓝蛋白的光谱性质。R-PC的三聚体在可见光范围有两个明显的吸收峰,分别为546nm和614nm,与同系的C-PC和PEC明显不同,表明各类色团光谱特性在三聚体状态基本不变,说明三聚体内色团间无强相互作用。R-PC荧光发射峰位于640nm,与同系的C-PC和PEC基本一致,说明三聚体保证了高效的能量传递。单体的荧光发射呈现双峰(566nm,643nm),说明单体内能量传递效率不高。从光谱性质可知,在PC家族中,R-PC具有最高的光能捕获效率 相似文献
11.
信号传导途径新热点:直接效应物模式跨膜信号传导途径的通常模式,是生长因子与受体作用后,使其受体的酪氨酸蛋白激酶活化。活化后的酪氨酸蛋白激酶使磷脂酶CY活化;或是酪氨酸蛋白激酶使某些蛋白质因子磷酸化,转而引起原癌基因产物c-Ras蛋白活化。蛋白激酶C与... 相似文献
12.
采用IFA、RT-PCR法观察了柯萨奇B组病毒(CBV)5型在Hep-2细胞内的增殖动态。CBV感染细胞后4h可检出病毒RNA,8h可检出病毒抗原,12h可观察到细胞病变,20h可检出病毒颗粒。结果为CBV增殖特性的研究提供了新的资料,并指出PCR是监测CBV增殖的敏感方法。 相似文献
13.
缩短的人巨噬细胞集落刺激因子(M—CSF)在大肠杆菌中… 总被引:1,自引:1,他引:0
本文用聚合酶链反应(PCR)获得了一个缩短的人巨噬细胞集落刺激因子cDNA基因,并克隆在质粒pAET3d中,在T7启动子指导下,在大肠杆菌BL2LysE中获得了和一个6组氨酸短肽标签的融合表达。重组的融合M-CSF表达量占菌体总蛋白的12%,表达产物一部分以不溶性包涵体形式存在,另一部分则以可溶性蛋白存在。经过金属螯合新和层析一步纯化,所得的融合(His)6-M-CSF在还原型SDS-PAGE上基 相似文献
14.
显示基因表达差异的PAGE—银染技术 总被引:6,自引:0,他引:6
ddRT-PCR(differentialdisplay reversetran-scription-polymerasechainreaction)技术是Liang和Pandee~([1])于1992年首先建立的一种在RNA水平上显示基因表达差异,进而分离目的基因的有效方法。与其它分离基因的方法相比,ddRT-PCR方法具有许多优点~([2]),目前已经成为筛选未知差异表达基因的最为有效的方法之一。ddRT-PCR是3种技术的有机结合:(1)通过错定引物T12MN(M=A、T、C、G,N=A、C… 相似文献
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蛋白激酶C的激活转位和它介导的信号通路 总被引:4,自引:0,他引:4
蛋白激酶C是一系列丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,已发现了至少十二种同功酶。在静止细胞中,它主要以非活化形式存在于胞浆中,由受体-G蛋白耦联的PLCβ激活便裂细胞膜上的磷脂而释放DAG;与PKC的结合引起了PKC的别构激活;而通过其它信号途径激活的PLD水解胞膜的磷脂酰胆碱(PC)产生的磷脂酸经磷脂酸酯酶产生的DAG可能是PKC持续激活的必要条件。在体外实验中,PKC的持续激活是一些细胞分化所必须的。蛋白激酶C的激活首先引起了它转位到膜,有时转位到核,并在转位后继续保持磷酸化活性,同时对它的下游底物进行磷酸化导致它们的活化。PKC可活化RafSer/Thr蛋白激酶及NF-kB,介导细胞对外界的反应,包括对核基因表达的调节,引起细胞生长或分化等。由于Raf可与活化的Ras—GTP结合从而定位到胞膜,说明蛋白激酶C与Ras介导的Raf-1/MEK/MAPK信号通路间存在着“对话”。 相似文献
16.
糖皮质激素快速抑制高钾离子诱导嗜铬细胞瘤细胞内游离钙浓度升高 … 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究应用钙离子特异光指示剂Fura-2/AM,使用Miracal影像系统检测了糖皮质激素对高钾离子升高嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)内游离钙浓度([Ca^+]i)作用的影响。结果表明:(1)皮质酮抑制高钾离子诱导PC12细胞[Ca^2+]i升高与其预处理细胞时间的长短有关,预处理3min时,皮质酮开始产生抑制作用;预处理5min时,其呈现的抑制作用最;预处理25min时,抑制作用基本消失。(2) 相似文献
17.
研究了优雅粘囊藻藻胆体的特性。从聚丙烯酰胺凝胶电泳、吸收光谱和二阶导数图谱可证明,它的PBS含有一种红色藻胆蛋,两种C-藻蓝蛋白和三种别藻蓝蛋白。但是,用PAGE和羟基磷灰石柱层析分离和纯化所得藻胆蛋白,一般仅得到一种C-PC和一种亚基组成特殊的别藻蓝蛋白APC。这种APC吸收光谱和荧光发射相同于已报告的APC660nm。但是它的亚基组成是(αα'ββ')2而不是(α'α2β2β')Lc^10或α 相似文献
18.
在大肠杆菌中,80%的3-脱氧-D-阿拉伯-庚酮-7-磷酸(3-deoxy-D-arabino-heptulosoate 7-phosphate,DAHP)合酶由aro基因编码。分别以大肠杆菌K12及其抗苯丙氨酸类似物的突变体总DNA为模板,以PCR方法扩增得到aroG基因及其突变。基因测序结果表明抗苯丙氨酸灯似物的突变体,其aroG基因核苷酸625位发生了T→C的点突变,从而使AroG蛋白的20 相似文献
19.
为探讨HCV/HBV 复合疫苗的可行性,将合成的丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位抗原基因PCX与HBsAg 基因连接成PCXS基因,与β-半乳糖苷酶(GZ)基因融合后在大肠杆菌及减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得表达.目的蛋白GZ-PCXS可被抗-HBs 及抗-HCV 抗体所特异识别.GZ-PCXS抗原皮下注射免疫ICR小鼠后,诱发了较高水平的抗-GZ-PCXSIgG反应.构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261(pWR/PCXS)口服免疫小鼠后,诱发了高水平的CD8+ T细胞增殖反应及抗GZ-PCXSIgG反应.所有免疫小鼠均未见明显的毒副作用.该研究揭示,HCV/HBV 复合抗原可诱发特异性体液免疫及细胞免疫应答,而活菌苗口服可能是理想的免疫途径,为HCV/HBV 双价疫苗研究提供了一定的理论及实验依据. 相似文献
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本文采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对212例住院及门诊病人其中肝病患者98例(慢性肝炎43例、肝炎后肝硬化47例、原发性肝细胞癌8例)进行HCV-RNA检测。结果98例慢性肝病患者血清中HCV-RNA-PCR阳性27例(27.6%),114例非肝病患者血清中HCV-RNA-PCR阳性9例(7.9%),两组间差异非常显著(P(0.01),各种肝病患者的HCV-RNA-PCR阳性率均高于非肝病组。68例患者同时进行了HCV-RNA-PCR检测和抗-HCV检测,25例抗-HCV阳性的患者中HCV-RNA-PCR,21例阳性(84%),43例抗-HCV阴性的患者中HCV-RNA-PCR,9例阳性(20.1%)、有输血及血制品史者48例,其中HCV-RNA-PCR阳性16例(33.3%),164倒无输血史者中HCV-RNA-PCR阳性20例(12.2%),两组间差异非常显著(P(0.01)。结果表明:1.HCV感染与慢性肝病有密切联系,说明HCV感染是慢性肝炎、肝硬化、肝癌的致病因素;2.HCV-PCR法具有特异性好、灵敏度高、简便快速等特点,弥补了抗-HCV检测的不足之处,是目前确定HCV感染的主要手段;3.HCV感染与输血关系密切,因此对献血员进行常规HCV检测对预防由输血所致HCV感染有着极其重要的临床意义。 相似文献