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球形芽孢杆菌能够合成具杀蚊活性的蛋白晶体,该晶体在蚊中肠碱性条件下降解产生毒性,尽管球形芽孢杆菌蛋白酶与杀蚊毒素的降解无关,但它在球形芽孢杆菌杀蚊制剂的产生中有重要意义。同时球形芽孢杆菌产生的碱性蛋白酶具有潜在的医疗价值。 我们以本实验室分离的高效杀蚊菌C_3—41菌株为材料,研究了球形芽孢杆菌蛋白酶的产生特性及其理化性质,在国内尚属首次报道。 相似文献
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球形芽孢杆菌能够合成具杀蚊活性的蛋白晶体,该晶体在蚊中肠碱性条件下降解产生毒性,尽管球形芽孢杆菌蛋白酶与杀蚊毒素的降解无关,但它在球形芽孢杆菌杀蚊制剂的产生中有重要意义。同时球形芽孢杆菌产生的碱性蛋白酶具有潜在的医疗价值。 我们以本实验室分离的高效杀蚊菌C_3—41菌株为材料,研究了球形芽孢杆菌蛋白酶的产生特性及其理化性质,在国内尚属首次报道。 相似文献
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球形芽孢杆菌C_3-41对致倦库蚊的毒效及在蚊体内的再循环 总被引:1,自引:0,他引:1
球形芽抱杆菌C3-41菌株(Bacillussphaericus C3-41)对致倦库蚊(Culexquinquefa-sciatus)幼虫有很高毒效,对2龄和3—4龄幼虫的半致死剂量(LD50)分别为63.1和89.7芽孢/蚊幼虫。处理浓度越高,取食时间越长,蚊幼虫取食到的杀蚊活性物质量越多,死亡率越高。当蚊幼虫取食互致死剂量杀蚊活性物质后,球形芽孢杆菌在感染的活幼虫体内不增殖;但当蚊幼虫取食致死剂量杀蚊活性物质后,蚊幼死亡,球形芽抱杆菌在死蚊幼虫体内增殖明显,6天内芽抱从感染初期的1.86×102/蚊幼虫增加到1.59×106/蚊幼虫。芽抱在死蚊幼虫体内能正常荫发、生长、产孢和形成毒素。增殖的芽抱同样对致倦库蚊幼虫有较高毒力。 相似文献
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球形芽孢杆菌C3-41对致倦库蚊的毒效及在蚊体内的再循环 总被引:1,自引:1,他引:0
球形芽孢杆菌Csub3-41菌株(Bacillus sphaericus C3-41)对致倦库蚊(Culex puinquefa-seiatus)幼虫有很高毒效,对2龄和3-4龄幼虫的半致死剂量(LD50)分别为63.1 和89.7芽孢/蚊幼虫。处理浓度越高,取食时间越长,蚊幼虫取食到的杀蚊活性物质量越多,死亡率越高。当蚊幼虫取食亚致死剂量杀蚊活性物质后,球形芽孢杆菌在感染的活幼虫体内不增殖;但当蚊幼虫取食致死剂量杀蚊活性物质后,蚊幼死亡,球形芽孢杆菌在死蚊幼虫体内增殖明显,6天内芽孢从感染初期的1.86X102蚊幼虫增加到1.59X106/蚊幼虫。芽孢在死蚊幼虫体内能正常萌发、生长、产孢和形成毒素。增殖的芽孢同样对致倦库蚊幼虫有较高毒力。 相似文献
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苏云金杆菌遗传工程杀虫剂 总被引:2,自引:0,他引:2
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称 Bt)是一种对昆虫有致病作用的细菌。其杀虫活性物质主要是杀虫晶体蛋白质(Insecticide crystal protein,ICP)。由于该杀虫剂对人、畜无害,无致癌和致畸作用,是一种有着广泛应用前景的微生物杀虫剂。 根据1998年最新的分类,把ICP基因分为25类cry基因和2类cyt基因,每类ICP基因产生针对不同昆虫的晶体蛋白质。例如,cry3A基因产生杀鞘翅目昆虫的晶体蛋白质,而cry1基因所产生的活性物质主要用于防治鳞… 相似文献
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对951个样品分离鉴定,有747个样品含芽孢杆菌,有菌率为78.55%.共分离得到芽孢杆菌1138株,其中苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,简称B.t)143株,占12.5%;球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus,简称B.s)11株,占0.97%;其他芽孢杆菌984株,占86.40%.从芽孢杆菌中选出产生晶体、苏云金素或磷酸酯酶C(PhosphalipaseC,简称PLC)的毒素菌株168株,其中B.t占143株,B.s有5株,其他芽孢杆菌10株.在产毒素菌株中,经测定有120株菌对供试昆虫毒性达标.占77.92%.不同菌株的杀虫毒素、杀虫范围和毒力各异,认为这种差异取决于毒素和虫种两方面的特异性. 相似文献
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苏云金芽孢杆菌Cyt蛋白研究进展 总被引:5,自引:1,他引:4
苏云金芽孢杆菌 (Bacillusthuringiensis,简称Bt)是目前世界上应用最广泛、最成功的微生物杀虫剂 ,也是公认的无公害生物农药。苏云金芽孢杆菌最主要的杀虫活性物质是杀虫晶体蛋白 (InsecticidalCrys talProteins,ICPs) ,包括晶体蛋白 (Cry)和Cyt蛋白 (Cyt)两大类。这两类蛋白在氨基酸序列及其基因同源性上相距甚远 ,但它们均能在靶标害虫中肠内被激活成毒素 ,并在昆虫中肠细胞膜上形成孔道 ,进而引起中肠细胞胶样渗透裂解 (colloid osmoticlysis) ,最… 相似文献
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[目的]球形芽孢杆菌缺乏EMP、HMP、ED途径的关键酶,如磷酸果糖激酶等被认为是其不能以糖类物质进行生长的主要原因.杀蚊球形芽孢杆菌C3-41全基因组序列分析表明,在染色体DNA上存在的磷酸果糖激酶基因pfk,为了进一步分析球形芽孢杆菌糖酵解途径,进一步确定磷酸果糖激酶在糖酵解途径中的功能.[方法]通过pfk基因在球形芽孢杆菌菌株中的Southern-blot拷贝数鉴定,在C3-41pfk基因克隆的基础上进行pfk基因在大肠杆菌中的融合表达、序列分析和序列比对等方法进行研究.[结果]证明了球形芽孢杆菌pfk基因由960 bp核苷酸组成,表达42 kDa的PFK融合蛋白,有保守的底物结合域和ATP结合域,同时pfk基因重组表达质粒可以回复大肠杆菌pfk缺陷型菌株DFl020代谢糖的能力.[结论]杀蚊球形芽孢杆菌C3-41的pfk表达产物具有磷酸果糖激酶活性,为今后深入研究球形芽孢杆菌产能代谢机理奠定了基础. 相似文献
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球形芽孢杆菌C3-41二元毒素基因在苏云金芽孢杆菌以色列亚种中的克隆和表达 总被引:1,自引:0,他引:1
球形芽孢杆菌C3-41是我国分离的一株对蚊幼虫有毒杀作用的高毒力菌株,对库蚊、按蚊幼虫的毒性高于2362菌株,Southern杂交证明C\-3\|41总DNA中35Kb HindIII片段上带有419和514kD二元毒素基因,该片段由3479个核苷酸组成,核苷酸序列同2362菌株的二元毒素基因序列完全相同。含二元毒素基因的重组质粒pCW\|1和pCW\|2能在大肠杆菌中表达产生二元毒蛋白,但表达量低,重组子杀蚊毒性低。无晶体型苏云金芽孢杆菌以色列亚种重组子在其芽孢形成中能产生以晶体形式存在的二元毒素蛋白,其全发酵液和纯化晶体蛋白的杀蚊活性与C\-3\|41相近。 相似文献
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昆虫对苏云金杆菌的抗性及防治策略 总被引:6,自引:0,他引:6
苏云金杆菌Bacillusthuringiensis(B.t.)因其毒力高,致病快,且对非靶标昆虫及人类无毒,对环境安全等优点,成为世界上应用最广泛的一类微生物杀虫剂。使用对年来,一直没有害虫对其产生抗性的报道。然而,肥年代以来,人们在不同的实验室分别发现,经人工选择多代以后,昆虫对B.t.产生了抗性,有的抗性水平还很高[1]。更为严重的是,80年代后期,在美国的夏威夷及菲律宾等长期使用B.t.制剂的地区,发现一种世界性蔬菜害虫小菜蛾PtoteyatwteHa(LinnaeuJ对B.t.产生了抗性[4,5]。这些事实说明,昆虫对微生物杀虫剂同样有可能… 相似文献
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球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)LP1-G菌株在MBS培养基上能正常生长、发育,产生位于芽孢孢外膜外的伴孢晶体。其产生的41.9和51.2kD二元毒素蛋白合成于芽孢形成期,另一分子量约为49kD蛋白和二元毒素同期合成,并随着芽孢的释放而被降解。生物测定结果表明该菌株在营养体生长阶段对致倦库蚊幼虫无毒,孢子囊初期毒力较高,并在整个芽孢形成期都维持较高的毒力水平。其全发酵液对敏感和抗性库蚊幼虫都具有中等的毒杀作用,对3~4龄幼虫48h的LC_50。值分别为0.113和0.1 相似文献
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球形芽孢杆菌Mtx1杀蚊毒素在苏云金芽孢杆菌以色列亚种中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
将来源于球形芽孢杆菌SSII-1的mtx1毒素基因克隆至穿梭载体pBU4上,得到mtx1插入方向相反的重组质粒pMT9和pMT4.含有pMT9和pMT4的大肠杆菌转化子能表达产生Mtx1毒素,发酵液对敏感和抗性致倦库蚊幼虫具有中度毒杀作用;含有pMT9和pMT4的苏云金芽孢杆菌转化子B-pMT9和B-pMT4在营养体生长阶段对敏感蚊幼和抗性幼虫也具有毒性,毒力与野生型SSII-1相当,而不同转化子在芽孢形成期的毒力因插入的mtx1基因转录方向不同而表现出差异,其中B-pMT4对目标蚊幼毒力极低(LC50>100mg/mL),而B-pMT9对蚊幼虫具有毒性(LC50=2.49mg/mL). 相似文献
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球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)LP1-G菌株在MBS培养基上能正常生长、发育,产生位于芽孢孢外膜外的伴孢晶体。其产生的41.9和51.2kD二元毒素蛋白合成于芽孢形成期,另一分子量约为49kD蛋白和二元毒素同期合成,并随着芽孢的释放而被降解。生物测定结果表明该菌株在营养体生长阶段对致倦库蚊幼虫无毒,孢子囊初期毒力较高,并在整个芽孢形成期都维持较高的毒力水平。其全发酵液对敏感和抗性库蚊幼虫都具有中等的毒杀作用,对3~4龄幼虫48h的LC_50。值分别为0.113和0.137mg/mL。该菌株对敏感和抗性致倦库蚊幼虫的毒杀作用可能同其产生49kD蛋白相关。 相似文献
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苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白与DNA分子的相互作用 总被引:2,自引:0,他引:2
苏云金芽孢杆菌 (Bacillusthuringiensis,简称Bt)在形成芽孢的同时能够产生伴孢晶体 ,其中含有一种或几种杀虫晶体蛋白 (ICPs,InsecticidalCrystalProteins) ,即δ 内毒素[1] 。伴孢晶体进入敏感昆虫的消化道后发生溶解并释放出 2 7~ 1 40kD的原毒素。在中肠蛋白酶的作用下 ,原毒素被激活为 2 3~ 70kD的毒性多肽[2~ 4 ] 。随后毒素与中肠刷状缘膜泡 (BBMV ,BrushBorderMembraneVesicle)上的特异受体发生结合并且在细胞膜上形成孔道 ,破坏细胞… 相似文献
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1 引言苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis简称Bt)是目前世界上产量最大、应用最为成功的微生物杀虫剂 ,除了已筛选出多种Bt菌株直接发酵培养外 ,还培育出转基因工程菌及转基因植物 ,使Bt的使用范围大为扩大。Bt在形成芽孢时产生的伴孢晶体是Bt杀虫活性的主要来源 ,它可能由几种晶体蛋白即δ -内毒素组成 ,包括Cry和Cyt两大类。一般认为 ,δ -内毒素的作用过程要经溶解、酶解活化、与受体结合、插入和孔洞或离子通道形成等五个环节[1] ,涉及到多种毒素和作用位点 ,单一因素的改变对其敏感性影响不大 … 相似文献
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采用常规的生物测定方法确定了纯化的球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)的缺失信号肽的97kDa营养期杀蚊毒素(Mosquitocidal toxin 1,Mtx1)蛋白和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)27.3kDa的Cyt1Aa晶体蛋白对致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)幼虫的杀虫活性。结果表明Mtx1和Cyt1Aa不同比例的混合物对致倦库蚊的毒力比单独毒素蛋白高,经统计分析表明两毒素蛋白对目标蚊幼虫具有明显的协同作用。在LC98处理浓度下,Mtx1和Cyt1Aa按3∶1混合的混合物LT50值比单独Mtx1的提前了6.36h。表明Cyt1Aa和Mtx1对致倦库蚊具有协同毒杀作用,提高对目标蚊虫的毒力、缩短半致死时间。该结果为深入研究Mtx1和Cyt1Aa的杀蚊作用方式奠定了基础,同时为其在蚊虫防治中的应用提供了新的思路和方法。 相似文献