光强对砀山酥梨石细胞形成的影响及其与内源IAA、ZR和ABA含量的关系

研究光强对砀山酥梨果实发育过程中石细胞形成的影响,探讨了内源激素和梨石细胞形成的关系。结果表明:梨花后第1周~11周是石细胞形成期,石细胞含量为高光强<中光强<弱光强<极弱光强;内源IAA、ZR含量于花后第1周与第7周分别出现2次高峰;花后第1周内源ABA含量最高后迅速下降,IAA、ZR和ABA含量为高光强>中光强>弱光强>极弱光强。高光强促进砀山酥梨果实发育前期IAA、ZR和ABA合成,减少石细胞的积累。     

基于SRAP分析的梨授粉品种亲缘关系对砀山酥梨石细胞含量的影响

利用SRAP分子标记,从88对引物中筛选出34对引物组合,分析砀山酥梨母本与授粉品种之间的亲缘关系,探讨梨授粉品种亲缘关系对砀山酥梨石细胞含量的影响。结果表明:授粉品种紫酥、鸭梨和马蹄黄与砀山酥梨亲缘关系较远,授粉品种华山、幸水和圆黄与砀山酥梨亲缘关系较近;砀山酥梨自然授粉果实石细胞含量为0.61%;选用紫酥、鸭梨和马蹄黄作授粉树时,果实石细胞含量分别为0.34%、0.33%、0.36%,低于自然授粉的砀山酥梨;选用华山、幸水和圆黄作授粉树时,果实石细胞含量分别为0.84%、0.70%、0.66%,高于自然授粉的砀山酥梨。选用与砀山酥梨亲缘关系较远的梨品种作授粉树可减少砀山酥梨石细胞含量,改善口感     

砀山酥梨果实苯丙氨酸解氨酶基因cDNA克隆及序列分析

为了研究梨石细胞形成与木质素合成的关系,以砀山酥梨果实为材料,通过基于同源性的RT—PCR方法,克隆木质素合成途径中的关键酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因。同时利用基因数据库资料对克隆的PAL序列进行比较分析。结果表明,从砀山酥梨果实中克隆的PAL基因eDNA片段长度为585bp,推断其编码195个氨基酸序列。该序列包含与其它植物PAL相同的活性催化位点,经序列分析和同源性比对,该氨基酸序列与其它植物PAL氨基酸序列的同源性在90％以上。系统进化树分析表明,砀山酥梨PAL氨基酸序列与蔷薇科的甜樱桃PAL氨基酸序列聚类关系最近。     

‘砀山酥梨’及其褐皮芽变果皮中多胺类物质含量和相关基因表达分析

为研究多胺类物质在‘砀山酥梨’芽变品系‘锈酥’果皮褐色形成中的作用,以‘砀山酥梨’和‘锈酥’花后不同时期果皮为试材,采用HPLC方法测定果皮中多胺类物质的含量,利用RACE技术克隆多胺合成过程中的关键基因,通过Protparam网站与MEGA5.0软件分析相关基因蛋白的理化性质及其系统进化,用荧光定量qRT-PCR方法分析不同时期果皮中相关基因的相对表达量。结果表明:(1)除花后50和150d外,其它时期‘砀山酥梨’果皮中腐胺含量均显著高于‘锈酥’,花后50d、75d、150d时,‘锈酥’果皮中的亚精胺、精胺含量显著高于‘砀山酥梨’果皮。(2)克隆出多胺合成的基因ADC、SPDS和SPMS(GenBank登录号分别为KM923903、KM923905和KM923906),预测ADC和SPMS均为水溶性蛋白、SPDS为疏水性蛋白,它们与苹果的亲缘关系最近。(3)荧光定量PCR结果显示,花后50d,多胺合成中ADC、SPDS和SPMS在‘锈酥’果皮中表达量均显著高于‘砀山酥梨’。研究推测,‘锈酥’果皮中多胺代谢及相关基因的上调表达可能与‘锈酥’的果皮褐色形成有关。     

梨花序不同序位坐果对果实发育及品质的影响

以'黄花'、'砀山酥梨'和'丰水'梨为试材,在大蕾期选择不同花序疏花后进行人工授粉,研究梨花序不同序位坐果与果实发育及品质的关系.结果显示:(1)'黄花'、'砀山酥梨'和'丰水'果形指数、果实硬度均随坐果序位的升高而升高,石细胞含量随坐果序位的升高而减少,且3个品种均表现第1序位果石细胞含量最高,5～7序位果单果质量小.(2)'黄花'、 '砀山酥梨'、 '丰水'的可溶性糖含量最高分别为2～4、1～3、3～5序位果,Vc含量最高的分别是1～4、2～5、3～5序位果,(3)果柄粗度和果柄粗/长值随序位的升高而降低,果柄粗度与果实单果质量、果实纵横径及可溶性固形物含量呈正相关,与果实硬度呈负相关.研究表明,各品种最佳坐果部位为:'黄花'2～4序位,'砀山酥梨'2～3序位、'丰水'3～4序位,生产中多数梨品种疏果时建议以留第3序位果较为稳妥.     

不同基因型梨木质素代谢对石细胞含量和果实口感的影响

以五种基因型梨果实为材料,对石细胞团的大小、分布进行解剖学观察,并测定石细胞、木质素含量和木质素相关合成酶PAL、POD、PPO活性,探讨不同基因型梨果实木质素代谢对石细胞含量及口感的影响.结果表明,不同基因型梨木质素含量高时,石细胞含量也高,石细胞团相对较大,分布较密集,口感差.各基因型的梨木质素、石细胞含量和大小为...     

大果水晶梨与砀山酥梨采后生理及贮藏性比较

以大果水晶梨和砀山酥梨为试材,用保鲜纸包装,研究了(1±0.5)℃下大果水晶梨采后生理及贮藏特性。结果显示:与砀山酥梨相比,大果水晶梨在贮藏过程中果实呼吸强度和乙烯释放速率相对较高,贮藏结束时失重率比砀山酥梨高0.65%,硬度降幅达6.2%;大果水晶梨果实的可溶性固形物含量比砀山酥梨多损失9.71%,可滴定酸含量多损失15.69%,而Vc含量少损失3.53%;大果水晶梨果实的丙二醛含量和多酚氧化酶活性在整个贮藏期内明显高于砀山酥梨。实验表明,大果水晶梨贮藏期间的呼吸代谢比砀山酥梨旺盛,其消耗营养物质的速率也快于砀山酥梨,耐贮性明显不如砀山酥梨。     

砀山酥梨4CL基因家族的全基因组鉴定与分析

4-香豆酸：辅酶A连接酶(4CL)基因是植物调控木质素代谢、参与类黄酮和其他次生代谢产物合成的关键基因之一,而木质素的合成及聚合在细胞壁沉积导致部分薄壁细胞次生壁加厚形成石细胞。为更好了解砀山酥梨中4CL基因的种类和数量,本文利用砀山酥梨基因组的氨基酸和cDNA数据库对4CL基因家族进行筛选,分析了砀山酥梨基因组中4CL基因的种类、进化关系、物理定位、以及基因结构和保守基序。结果显示在砀山酥梨基因组中发现并初步确定了29个4CL基因,通过基因的定位分析发现除了4、8、11、12号染色体上没有4CL基因之外,其他染色体上都存在4CL基因;并且在9、17号染色体上还存在着基因簇。通过基因结构和进化树之间的比较,进一步确定了基因结构和进化之间的相互联系。研究结果为砀山酥梨4CL基因功能的深入分析奠定了基础。     

库尔勒香梨果实石细胞发育及其对果实肉质影响初探

采用植物解剖学方法对库尔勒香梨果实石细胞形成过程和分布状况进行观察研究,结果表明,库尔勒香梨果实中石细胞从化后15d开始形成,随着时间的推移石细胞的直径和密度逐渐增大,花后110d左右直径达到最大值,花后50d左右密度达到高峰．之后随着果实的增大与成熟度的提高,石细胞团的密度表现下降的趋势。石细胞的分布特点是石细胞团以近果心和近果皮处分布密度高,直径大,中层果肉中石细胞团密度低,直径小。与其它品种相比,成熟库尔勒香梨的行细胞团密度最低,含有较大石细胞的含量相对较少,肉质较细。     

‘砀山酥梨’及其褐色果皮芽变PbXET基因克隆与表达分析

为研究‘砀山酥梨’及其褐皮芽变木葡聚糖转葡糖苷酶基因(PbXET)表达水平差异,该实验利用RACE技术,克隆了梨PbXET基因;采用实时荧光定量PCR技术,分析了梨树叶片、果皮和果肉等不同组织及花后不同时期果皮中PbXET基因表达差异。结果表明:(1)梨PbXET3(KJ690921)和PbXET4(KJ690922)开放阅读框分别为903bp和891bp,分别编码300和296个氨基酸;氨基酸序列聚类分析显示,PbXET3与苹果MdXET-3以及PbXET4与苹果MdXET-5的亲缘关系最近。(2)半定量PCR分析显示,花后150d,PbXET3和PbXET4基因在‘砀山酥梨’和‘锈酥’不同组织中均有表达,且PbXET3在叶片中表达量很低,在果皮、果肉中表达相对较强,其中叶片中PbXET3表达量低于PbXET4,而果肉和果皮中PbXET3的表达均明显高于PbXET4。(3)荧光定量PCR分析发现,在‘砀山酥梨’和‘锈酥’果皮中,PbXET3和PbXET4基因不同时期的表达量变化趋势不同;与‘砀山酥梨’相比,果皮颜色发生变化(花后100d)之后,‘锈酥’果皮中PbXET3表达量骤减;而果皮颜色发生变化(花后100d)之前,PbXET4表达量均显著降低。由此推测,PbXET3和PbXET4基因参与了‘锈酥’果皮褐色形成的调节,其表达水平差异可能是改变‘锈酥’表皮细胞结构的重要原因之一。     

光照对砀山酥梨果实发育过程中POD、PAL、PPO酶活性的影响研究

以40年生砀山酥梨为材料,用ZD-IA型照度计测定光照强度,用分光光度法测定POD、PAL、PPO等3种酶的活性;研究了光照强度对果实发育过程中POD、PAL、PPO等3种酶活性的影响。结果表明:(1)光照强度对POD、PAL、PPO等3种酶活性有显著的影响;(2)在光照充足的部位,POD、PAL酶活性较高,具体表现为高光强>中光强>弱光强>极弱光强,彼此间活性差异极显著(P<0.01);(3)PPO在光照充分的情况下,活性偏低,表现为高光强<中光强<弱光强<极弱光强,差异显著。     

鸭梨PPO与GFP融合基因的烟草转化及亚细胞定位观察

将鸭梨PPO基因与绿色萤光蛋白GFP基因相融合共同进行遗传转化的方式,对鸭梨多酚氧化酶开展细胞定位研究。通过克隆该酶基因除终止密码子TAA外长度为1 779bp的CDS序列,与绿色荧光蛋白基因重组构建了荧光表达载体pBI121-PPO-GFP,借助农杆菌转化烟草,转基因烟草叶片细胞经激光扫描共聚焦显微镜观察,绿色荧光蛋白荧光与叶绿体自发荧光相重合。结果表明鸭梨多酚氧化酶为叶绿体蛋白质。     

基于苹果基因组开发梨的多态性SSR引物

从NCBI网站获取‘金冠’苹果基因组数据,在每条染色体上随机设计4对共68对引物。利用梨品种‘黄冠’和‘莱阳茌梨’及其F1代杂交群体(共94个单株)对这些引物的应用性进行验证,同时分析了该群体遗传多样性。(1)引物扩增结果显示,有40对引物可以扩增出预期目的条带,占设计引物数量的58.82%,其中16对引物能够扩增出多态性条带。(2)群体遗传多样性分析结果显示,有16对多态性引物扩增产物的等位基因数平均为2.312 5,有效等位基因数平均为2.001 4,平均杂合度观测值、期望杂合度和香农指数分别为0.548 3、0.490 5和0.746 2,表明可以在梨上运用。研究证明,SSR位点在苹果与梨之间可以转移应用。     

Effects of Flower-Nipping on Morphology and Yield and the Formation of Wound Periderm of Tse-Pear

Variations of the external form of Tse-pear (Pyrus bretschneideri cv. Tse-li) occurred after flowernipping. It became conical in shape in comparing with the natural rounded spindle-shaped pear without flower-nipping. The wound periderm formed rather rapidly on the floral tube after flower-nipping. Four days after flower-nipping, the initiation of phellogen became visible. Seven days later, the cell division of phellogen increased and the cork layer formed near the surface. After 15 days, the closed-layer on the surface and the hypertrophic cell layers mostly collapsed, cork cells increased and they subsequently formed the protective layer. The effects of flower-nipping on the yield of pear depended upon the degrees of treatment. In heavy treatment, the yield decreased about 15% from the harvest.     

Metabolism of diphenyloxazole (PPO) by mouse liver microsomes.

2, 5-Diphenyloxazole (PPO) is an inducer and inhibitor of aryl hydrocarbon hydroxylase. We report that PPO is itself metabolized to an alkali-extractable metabolite with intense fluorescence. The fluorescence spectra of excitation and emission indicate peaks at 345 nm and 510 nm, respectively. The reaction is linear with respect to time and enzyme concentration. NADPH is required for activity and the reaction is inhibited by carbon monoxide and 7, 8-benzoflavone but not by SKF-525A or hexobarbital. The intensity of fluorescence produced is similar to that of benzo (a) pyrene. PPO may be a useful model compound in studies of drug metabolism by the mixed function oxidase.     

Abscisic acid is involved in the water stress-induced betaine accumulation in pear leaves

ABA exogenously applied to the leaves of the whole plants of pear (Pyrus bretschneideri Redh. cv. Suly grafted on Pyrus betulaefolia Rehd.) significantly increased the betaine concentrations in the leaves when the plants were well watered. The plants subjected to 'drought plus ABA' treatment had significantly higher betaine concentrations in their leaves than those given drought treatment alone. The 'drought plus ABA' treatment increased the amount of betaine aldehyde dehydrogenase (BADH, EC 1.2.1.8) and its activity in the leaves more than did the drought treatment alone. The experiments with detached leaves showed that ABA treatment significantly increased the concentration of betaine, activity of BADH and apparent amount of BADH in non-dehydrated leaves, and enhanced the accumulation of betaine, activity of BADH and apparent amount of BADH in dehydrated leaves. These effects of ABA were both time- and dose-dependent. Two ABA isomers, (-)-cis, trans-ABA and 2-trans, 4-trans-ABA, had no effect on the betaine accumulation in the leaves, showing that the ABA-induced effects are specific. These data demonstrate that ABA is involved in the drought-induced betaine accumulation in the pear leaves.