植物组织中冠瘦碱合成酶活性检测的一种简便有效方法

由根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) 感染引起的植物冠4瘤(crown gall)细胞除 具激素自养性生长特性外,还具有一类特殊的 基因产物,即冠瘦碱(opines)"'。常见的冠瘦碱 主要有章鱼碱(octopine）和胭脂碱(nopaline) 等。催化章鱼碱合成的酶为章鱼碱合成酶( octopine sy nthase),或叫Lysopine脱氢酶[D- （＋）一lysopine dehydrogenase, 简称LpDH] o 催化胭脂碱合成的酶为胭脂碱合成酶(nopaline sy nthase),或称胭脂碱脱氢酶(nopaline dehydrogenase, 简称NpDH)。即在NADH存在条 件下,LpDH催化丙酮酸与精氨酸的缩合反应, 形成章鱼碱;NpDH催化。一酮戊二酸和精氨酸 的缩合反应,形成胭脂碱。     

一种简便快速的聚合酶活性实时检测新方法

基于双链DNA结合染料能特异嵌入双链DNA发出荧光的原理,发展了一种实时检测DNA聚合酶活性的简便方法.在检测过程中,聚合酶的聚合反应进程被实时转换为荧光信号,通过监测荧光强度的变化实时检测聚合酶的活性及药物对聚合酶活性的影响.该方法不需要对DNA进行放射性同位素标记和荧光标记,也不需要聚丙烯酰胺凝胶电泳和聚合酶链式反应,是一种简便、快速的聚合酶活性实时检测新方法,为研究抗肿瘤药物对聚合酶活性的影响提供了一种简捷方法,也将为相关疾病诊治和药物筛选提供一种新的思路.     

介绍一种观察植物胚胎发育的简便方法

观察植物的胚胎发育,一般都采用石蜡切片方法,这对普通中学来说,目前尚难具备这个条件;本文介绍一种极简便的方法,也许可以满足一般中学,在教学上或课外生物兴趣小组对这方面的需要,现简述如下: 材料通常以十字花科植物为主,如油菜、白菜、甘蓝萝卜等;野生植物常采用荠菜。由于荠菜的胚珠较小,初学者最好选用油菜或白菜     

两种简便又较为准确检测SOD酶活性的方法

由于SOD的作用底物极不稳定,至今还未建立统一的检测SOD酶活性的方法,该文介绍了两种既简便又较为准确检测样品SOD酶活性的方法,采用这两种方法可较为准确地测定出不同样品的SOD含量及酶活性。     

一种简便快速检测质粒DNA的方法

简便、快速检测质粒DNA的方法,无论是 在筛选、鉴定新质粒或重组质粒的研究中都具有重要的意义。我们在将质粒pBR 322 DNA与 A DNA进行体外重组、筛选和鉴定重组子过程 中,摸索了一种简便快速检测质粒及重组质粒 DNA的方法。此法对菌体和溶菌产物不需任 何处理,比较简便易行     

一种鉴定植物组织中蛋白质的好方法

研究植物组织时,常常需要对蛋白质等物质的存在状况及变化等进行组织化学反应;在诸多鉴定蛋白质的方法中,笔者经过试验比较后,认为下述方法省时简便,效果较好,现介绍于后。     

一种简便的从石蜡包埋组织中提取RNA的方法

目的:建立一种从石蜡包埋组织提取高质量RNA的简便、经济的方法。方法:运用TRIzol法和改进的AGPC(酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿)法等2种提取方法,从50例石蜡包埋组织中提取RNA,用紫外分光光度仪测定RNA的产率和纯度;用管家基因β-肌动蛋白做RT-PCR,检测RNA的质量。结果:TRIzol法提取RNA的成功率为96%(48/50),AGPC法为94%(47/50),2种方法所得RNA的吸光度值及得率在统计学上均无明显差异。结论:AGPC法和TRIzol法的提取效率相似,且提取费用只有TRIzol法的一半左右,是一种简便、经济、适合大量提取石蜡包埋组织中的RNA的方法,可用于临床。     

一种简便的贴片方法

过去制作生物石蜡切片时,是使用粘贴剂贴片。粘贴剂过多、蜡片不易干燥、染色效果不佳、透明度差;粘贴剂用量太少,又怕材料脱落。为了克服上述困难,我们采用简便贴片方法,制作几批洋葱根尖、蚕豆根尖     

一种简便有效的菌落原位杂交法

本方法采用国产定量滤纸代替硝酸纤维素膜进行菌落杂交筛选。省去了真空烤膜和预杂交操作。末端标记的寡核苷酸探针杂交所得结果具有较好的特异性和较强的放射活性。     

一种简单有效的植物RNA提取方法

在提取缓冲液中加入皂土有效地去除了蛋白质并抑制RNAse,建立了一种高效的植物RNA提取方法。以麻疯树幼叶为材料,分别用TRIZOL,异硫氰酸胍法,SDS-KAc法和新创皂土法提取总RNA进行比较和验证,琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析结果表明,只有皂土法能提出质量高,完整性好的RNA。进一步以皂土法提取的18S rRNA为模板的RT－PCR结果分析表明, 用该法提取的RNA 能用于分子克隆与基因表达分析等后继分子生物学实验。该方法简便,快速,不失为一种经济高效的RNA提取方法。     

简便的植物组织解离法

为建立蜀国立下汗马功劳的诸葛亮,在病危时给后主刘禅的遗书上写道:“臣家有桑八百株,子孙衣食,自可足用。”他把自己栽种八百株桑树作为子女生活费的来源,为子女生活作长久安排。一代名相,两袖清风,死后留给子孙唯有自己栽种的桑树,令人不胜感慨。古代传奇小说《开河记》记述,隋炀帝登基后,下令开凿通济渠,虞世基建议在堤岸种柳,隋炀帝认为这个建议不错,就下令在新开的大运河两岸种柳,并亲自栽植,御书赐柳树姓杨,享受与帝王同姓之殊荣,从此柳树便有了“杨柳”之美称。唐代文成公主远嫁西藏松赞干布,从长安带去柳树种苗,植于拉萨大朝寺周围,…     

简便的植物组织解离法

在分析植物组织细胞类型和组成时,常要用组织解离的方法。组织解离是借助化学试剂的作用,将植物组织浸软,使其各组成细胞之间的结合物质溶解,从而达到细胞各自分离的一种非切片方法。以往常用的解离液多为强酸,如Jeffery氏法,就是用铬酸、硝酸作为解离液来分离木质化的组织。段续川法则采用浓硝酸、浓硫作为分解草本植物叶肉、皮层或髓中的薄壁组织细胞。采用上述方法进行解离植物组织时,不仅所需的时间较长,而且所用试剂对人体也有较大的危害。过去德国学者富兰克林,曾提出用醋酸和过氧化氢作为解离液的方法,对番茄茎次生木质部进行组织解…     

植物组织DNA提取的一种快速方法

本文所介绍的方法最初是由Bendick提出 的,我们原则上将此方法用于自己的实验室。 在我们现有的实验条件下,对玉米、高粱、大豆、 豌豆、大米草、水稻等多种植物幼苗DNA作了 反复提取,都取得了较好的结果。其方法主要操 作如下：     

从凝胶中回收DNA的一种简便方法

从凝胶中回收DNA的方法已见多种报道,其中的电洗脱法较实用,已有几种装置作为商品出售。Wu等的方法无须任何专门设备,而是在DNA电泳区带前方挖槽,槽内嵌半透膜,使样品自凝胶泳入槽内的缓冲液中。该方法说来简单,实际操作却很费劲,尤其在样品数量大或重复操作时,更觉不便。我们按照Wu等的工作原理,制成一种电洗脱器,可使DNA的回收操作变得简单而高效。     

定量测定生物材料中少量蛋白质的一种简便方法

Lowry 等人通常使用定量测定蛋白质的方法需要操作40分钟左右,并且需要三种试剂。经 Miller 改进的这种技术,测定时间缩短约20分钟。通过以下方法可以缩短测定时间:用升高温度(50℃)以缩短显色时间和改用两种试剂,即用较小体积、较浓的碱性铜试剂和较多量、较稀的酚试剂。     

一种培养变形虫的简便方法

变形虫在科学研究和教学等工作上是很好的实验材料。为对培养和应用变形虫的工作提供方便,我们介绍一种培养变形虫的简单方法。 制备玻璃微吸管 用外径0.5—0.7厘米的玻璃管(硬质玻璃管为佳),截成约10厘米长的一段(图1),按制作普通吸管的方法,在煤气灯或酒精喷灯上烧中间部分(烧时不断旋转),待烧软后立即离火迅速往两头拉(图2,3),然后在拉细部分约5厘米处截断,用镊子夹住断头处,靠近镊子部分放在酒精灯上烧软,立即离火斜向拉直,随后在弯角约长0.5厘米处截断(图4,5),用胶皮管套住没有拉细的一端,在胶皮管的另一端套一根经火烧光滑断口的约长5厘米的玻璃管(图6)。使用时,把光滑一头玻璃管口衔在口中,可任意吸取虫体。在管口塞上     

一种培养曲霉的简便方法

一种培养曲霉的简便方法取晒干贮藏的大豆５００ｇ左右，放于锅中煮烂，然后将约２５０ｇ的小麦面粉拌入其中，作成若干大豆面粉团。将这些大豆面粉团于通风处吹凉后，在蔑席上平铺成一薄层，上面用向日葵叶子盖上。把蔑席移搁在支架上，置于２８℃左右的室内，过８～９天...