"叶绿体中色素的提取和分离"一节探究式实验的尝试

目前高中生物教材中的实验往往只注重实验结论和机械的操作训练。为了充分发挥高中生的思维能力和创造力 ,改验证式实验为探究式实验是有必要的。我对“叶绿体中色素的提取和分离”这一实验进行了教改尝试 ,教学中采取了理论讲述与实验同步进行的方法 ,提高了学生的学习兴趣 ,初步培养了学生科学探索的欲望和能力。1　实验时间的安排按照过去常规教学 ,该实验往往是在全书内容讲完以后才做。为了充分显示探究性实验的意义 ,真正引发学生探索的欲望和达到探究的目的 ,我认为该实验穿插在“光合作用的场所”一节理论教学之中最好。当教师讲授…     

改良尿素-氯化锂方法提取成熟小麦种子总RNA

为了分离提取成熟小麦种子总RNA,去除多糖等杂质的严重干扰,本实验对尿素氯化锂分离RNA的方法做了三个方面的改进:一、去除成熟种子的胚(含大量麦胚凝集素等糖蛋白),发现裂解物的黏稠度明显下降;二、在裂解粗提物中加入CTAB至终浓度为02%,可去除大部分多糖;三、异丙醇沉淀RNA之后,充分溶解,离心去除残留的不溶性多糖等杂质。结果表明:所提取的成熟小麦种子RNA的纯度和产率都有明显提高 。     

"DNA的粗提取与鉴定"实验的优化方案

“DNA的粗提取与鉴定”是现行高中生物学课程的一项引导式学生探究实验,但在开展该项实验教学过程中遇到许多问题,其中较为突出的有：实验材料和试剂不易获得,许多学校因此而不做这个实验;实验成本昂贵,郊区和农村学校难以承受;实验方法步骤繁琐,对学生的实验技能要求较高,1课时难以完成全部实验。     

一种经济高效的用Silica提取纯化质粒DNA的方法

目的：为了达到批量提取质粒DNA的目的,在多次实验的基础上,建立一种经济、高效的质粒提取方法。方法：以pUC18、pET28b、pCAMBIA1304等3种质粒为材料,分别采用silica法和碱裂解法提取质粒DNA,通过质粒DNA浓度的紫外分光光度法定量测定、电泳分析和HindⅢ酶切鉴定,对两种质粒提取方法的效果进行了比较与评价;对silica法进行了改进和优化,进行大批量重组子的提取和验证。结果：silica法和碱裂解法提取质粒DNA效果相当,都可进行后续实验,但silica法具有经济、高效、无毒的优势。结论：silica法是一种简单、经济、高效的质粒提取方法,可用于批量质粒DNA提取。     

两个植物生理实验的改进

农业学校《植物及植物生理学》教材中的两个实验：“植物组织水势的测定（小液流法）”及“叶绿体色素的提取、分离和光学性质”是教学大纲规定的必做实验。从多年的实验情况看,这两个实验的成功率都不算太高。总结其原因,除学生主观上操作有些问题外,我们认为主要是实验方法本身存在不妥之处。为此我们对实验方法做了些改进,从而提高了实验的成功率。一、植物组织水势的测定（小液流法）本实验有以下三点不当之处：（１）加到１ｍｌ糖液的各指形管中的小圆片的水势存在差异。原因是教材没有对选取的叶片进行特别要求,而叶片的部位、厚…     

聚丙烯酰胺凝胶电泳中LPS样品制备方法的改进

为了对革兰阴性细菌的LPS进行快速分析,观察LPS的产量、分子量分布,进行菌种筛选和抗原传代稳定性研究,实验中对热酚法、酶水解法、冷酚法三种制备LPS的方法进行了比较。结果证明,改进的水饱和冷酚LPS提取方法,需要时间短、经济、方便,只须几个细菌菌落就可以提取LPS进行SDS-PAGE电泳分析,说明该方法有很好的实用性。     

对叶绿体中色素的提取和分离实验的改进

对叶绿体中色素的提取和分离实验的改进任金龙（山东省阳信县第一中学,２５１８００）根据高中生物实验四的目的要求可知,该实验是验证叶绿体中的色素的种类和颜色。而做实验时,首先要对色素进行提取,然后再用纸层析法进行分离。按实验步骤,进行色素的提取要用的材料...     

陈旧标本DNA提取方法

对于自然环境中的或长期保存的动物标本,由于保存环境不良或保存时间过长,DNA提取的难度较大。受标本保存时间和损害程度等因素影响,导致实验结果的不稳定性加强,对于同一标本需要反复实验。为了提高DNA提取效率,节省实验成本,现对陈旧损坏标本的DNA提取方法进行综述。     

蓟马基因组DNA提取方法的改进

在昆虫分子生物学的研究中,从昆虫样品中有效地获得总DNA是分子实验成功的前提。但是,常规提取方法由于不能保留昆虫所有的形态特征,这对于体形较小的珍稀标本是不适用的。文中通过对改进的盐析法和STE法与KAc法的对比,发现盐析法和STE法提取的DNA质量明显优于KAc法,并且能够通过针刺从单头蓟马中成功提取DNA而不影响形态鉴定。2种提取方法的优点是单头蓟马在提取过DNA以后,虫体仍然可用以做成永久玻片进行形态鉴定。提取的DNA经实验证明,可以顺利的进行mtDNA-COI和rDNA-ITS2基因序列引物的扩增。     

指导学生做叶绿体中色素提取和分离的实验

指导学生做叶绿体中色素提取和分离的实验冯敏（广东省深圳外语学校５１８０２９）在高中《生物》课本的４个必做实验中,“叶绿体中色素的提取和分离”实验是难度最大、操作最复杂的一个实验,在实验中只要把握以下几个重要环节,即能取得良好的实验效果。（１）制备滤液...     

一种高效提取杨树发病树皮总RNA的方法及应用

对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法（RNA试剂盒改良法）在内的6种方法提取的总RNA的质量和浓度。结果显示,通过RNA试剂盒改良法提取的总RNA 28S rRNA条带亮度约为18S rRNA条带亮度的2倍且浓度高,表明该方法更适合感染欧美杨细菌性溃疡病的‘中林46’杨发病树皮总RNA的提取。为了验证RNA试剂盒改良法对健康杨树树皮及不同胁迫处理、组织RNA提取的适用性,进一步用该方法提取了‘中林46’杨、‘107’杨、‘北京’杨健康树皮,低氮、低磷处理的毛白杨组培苗以及白玉兰花的总RNA。结果表明,用RNA试剂盒改良法均能获取高质量的总RNA。所提取的总RNA已成功用于感染欧美杨细菌性溃疡病的杨树树皮转录组测序,以及低氮处理的毛白杨组培苗RT-PCR和荧光定量PCR实验,表明用RNA试剂盒改良法提取的总RNA可以用于后续分子实验。     

火龙果茎基因组DNA提取方法改良

火龙果(Hylocereus undulatus)是近年发展起来的一种新兴热带水果, 其茎富含多糖、多酚及其它次生代谢物, 黏性极大, 很难从中提取高质量的DNA。特别是一年生以上的老茎, 目前尚未有较好的DNA提取方法。为了解决这一难题, 该研究对CTAB+Tris-HCl洗涤法进行了3种方式的改良。结果表明, “改进三”方法可不受取样时期和取样部位的限制, 从一年生以上火龙果茎中提取的DNA质量最好且不含黏性物质, 可用于酶切与分子标记等生化和分子生物学实验。该研究探索了一条较为理想的火龙果茎DNA提取方法, 值得推广应用。     

火龙果茎基因组DNA提取方法改良

火龙果(Hylocereus undulatus)是近年发展起来的一种新兴热带水果, 其茎富含多糖、多酚及其它次生代谢物, 黏性极大, 很难从中提取高质量的DNA。特别是一年生以上的老茎, 目前尚未有较好的DNA提取方法。为了解决这一难题, 该研究对CTAB+Tris-HCl洗涤法进行了3种方式的改良。结果表明, “改进三”方法可不受取样时期和取样部位的限制, 从一年生以上火龙果茎中提取的DNA质量最好且不含黏性物质, 可用于酶切与分子标记等生化和分子生物学实验。该研究探索了一条较为理想的火龙果茎DNA提取方法, 值得推广应用。     

响应面分析法优化超声波辅助酶法提取南五味子多糖工艺的研究

为了建立超声波辅助酶法提取南五味子多糖的方法,并研究其提取工艺。按照Box-Benhnken中心组合试验设计原理,以多糖得率为响应值,以单因素实验数据为基础,进行响应面分析实验,考察提取pH、提取温度和提取时间对多糖得率的影响。结果显示：最佳提取工艺条件为：提取pH为4.8、提取温度57℃、提取时间66 min、复合酶用量为3.0%,最佳工艺条件下南五味子多糖得率为8.73%±0.25%。研究结果表明,该提取方法可减少多糖提取时间和提取溶剂用量,降低温度,有效提高了多糖的提取得率,可应用于南五味子多糖的制备。研究结果为南五味子多糖的开发应用提供了较好的依据。     

中药金银花药用成分的提取及抑菌实验的研究

为了研究金银花中抗菌消炎成分总黄酮、绿原酸的提取方法及其抑菌效果,本实验中用金银花的提取物对11种菌种进行筛选,并对其中有抑制作用的菌种进行了最小抑菌浓度的实验。结果表明金银花的提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有较强的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的MIC为6．25mg／ml,对大肠杆菌的MIC为12．5mg／ml。     

农杆菌质粒DNA提取方法的优化

目的：为了减化操作过程,减少药品对操作人员有直接或间接危害,提高农杆菌质粒DNA的产率和实验结果的稳定性。方法：对常规碱裂解法进行了改动,改进的方法通过加大菌液的收集量,利用LiCl沉淀RNA,简化操作流程和严格反映环境条件,并且在操作过程中去除了酚、氯仿等对人体有害的试剂。结果：提取时间缩短,结果稳定,产率在1．5μg／μL以下。结论：用这种方法提取的质粒可以满足大多数分子生物学常规实验如DNA的酶切、PCR鉴定的要求。     

从科学、安全、节省角度设计"DNA的粗提取与鉴定"实验

“DNA的粗提取与鉴定”实验是高二（实验修订本·必修）第2册实验9的内容。它是我们感到在新教材中最难做的一个大型必做实验。我们发现做该实验存在以下问题：①实验室空气中酒精浓度高、实验桌上仪器摆放太拥挤易引起严重的安全隐患；②因需要发的临时材料太多而费时太多，以至于不能保证连续2个班的实验；③提取的DNA量太少，鉴定显蓝色太浅，或提取不到失败，[第一段]     

基于灰度共生矩阵的人体皮肤纹理分析

对纹理图像的分析及特征提取是近年来图像处理领域的研究热点,在现实中有广泛的应用价值。灰度共生矩阵已被理论证明是图像纹理分析的一个很好的方法。为了使灰度共生矩阵所提取的特征值能够更好地描述皮肤老化的灰度分布信息,以不同年龄层的女性的不同部位的皮肤纹理图像作为研究对象,对采集到的图像进行预处理,采用灰度共生矩阵法提取纹理的特征值,通过统计分析得出了特征值的变化规律。实验结果对皮肤老化研究及其纹理分析有参考意义。     

“DNA的粗提取与鉴定”实验的改进

"DNA的粗提取与鉴定"实验是人教版高中生物学中的一个重要实验,但教材中给出的实验方案存在一些不足。通过多次实验,从提取DNA的实验材料、提取方法、鉴定方法等方面进行了改进,取得了较好的实验效果。     

转化医学真菌学实例——直接提取DNA鉴定菌种及体外药敏试验指导诊治面部难辨认癣

目的报道1例由万博节皮菌(趾间毛癣菌有性期)所致面部难辨认癣,取皮损鳞屑直接提取真菌DNA做菌种鉴定,并与真菌培养鉴定结果比较,对培养的菌落直接用抗真菌乳膏做药敏实验指导治疗。方法病变部鳞屑经KOH涂片真菌镜检阳性后,取鳞屑直接提取DNA,以真菌通用引物ITS1/4做PCR扩增后测序;同时从培养生长的菌提取DNA做分子生物学鉴定;并将抗真菌乳膏加入含菌平板孔中观察抑菌圈大小。结果鳞屑直接提取的DNA与培养获得菌落提取的DNA经PCR-测序均鉴定为万博节皮菌,诊断万博节皮菌感染所致面部难辨认癣。镜检阳性后即给予特比萘芬口服(250mg/d)及1%萘替芬-0.25%酮康唑乳膏外用,每周复诊并取鳞屑镜检和培养,基于药物抑菌实验结果指导治疗5周,至临床治愈和真菌培养转阴。结论鳞屑直接提取DNA做PCR-测序能及早明确菌种,待培养菌落长出后做PCR-测序验证,直接用成品抗真菌乳膏做体外药敏实验指导临床选药,动态培养鳞屑以确定疗程。此个体化诊治方案为从临床到实验室、从实验室到临床转化医学真菌学的成功实例。