荧光光度法测定萹蓄中总黄酮含量

目的:建立一种准确测定萹蓄中总黄酮含量的新方法.方法:以芦丁为标准样品,用荧光分光度法测得其荧光强度、绘制标准曲线.用60%乙醇加热回流提取萹蓄有效成分,在相同的条件下测定样品中总黄酮的荧光强度,根据回归方程求得其含量.结果:当芦丁的浓度范围在0μg/mL～22μg/mL时,荧光强度和芦丁浓度具有良好的线性关系,线性回归方程Y=-8.973X 22.581,相关系数r=0.9771.篇蓄中总黄酮的平均含量17.05μg/mL,所得率为6.82%.结论:用荧光分光度法测定萹蓄中总黄酮的含量,操作简便、快速、准确,建议推广应用.     

荧光分光光度法测定谷物蛋白质中的酪氨酸

本文探讨了谷物中酪氨酸的荧光测定法。将30毫克风干样置玻璃水解管中,以6Mol盐酸作水解剂,110℃真空水解22小时,水解产物减压脱酸,以去离子双蒸水溶解,在激发波长277nm,发射波长303nm处测其荧光强度。方法精确度良好,重复测定12次变异系数为0.98％。在5ng～2μg/ml标准酪氨酸范围内,回收率为96—105％。用此法测得谷物中酪氨酸与氨基酸分析仪测得值相符。     

荧光分光光度法测定油炸制品中铝含量

建立荧光分光光度法高效测定油炸制品中铝含量的方法。样品采用干灰化法进行前处理,在pH为8～9的缓冲体系中铝与8-羟基喹啉形成稳定荧光络合物,测定其荧光强度计算铝含量。铝离子在100～300μg/L浓度范围内浓度与荧光强度呈线性相关,相关系数R=0.9982。加标回收实验得到回收率为80.7%～84.5%,相对标准偏差(RSD,n=5)为5.2%。该方法操作简便快捷,测定结果准确,灵敏度高,适用于油条、麻花等油炸食品中铝元素的测定。     

火箭电泳法测血清中载脂蛋白B含量

本文用纯化人血清低密度脂蛋白免疫家兔制得效价为1:256的特异抗血清,并用火箭电泳法检测116例正常人血清ApoB水平为68.51±1.22mg/dl,110例高脂血症病人血清ApoB水平为108.51±1.78mg/dl。两组比较有高度显著性(p＜0.01)。本法为临床检验和基础研究提供了新的途径。     

简便、快速测定细胞裂解液中DNA含量的荧光分析

生物组织中DNA的定量测定方法,均需进行样品的处理,步骤烦琐,费时,又影响灵敏度和重现性。Ananda等利用荧光探针——菲啶溴红检测生物样品中核酸的含量,虽然简化了样品的处理过程但仍不能直接测定细胞匀浆中DNA的含量。Rassel和Williamson等报道了4,6-二脒基-2苯吲哚(DAPI)荧光试剂能与DNA特异性结合成荧光复合物。Labarca等利用反苯并咪唑荧光试剂直接检测生物组织粗匀浆液中DNA含量,我们实验室     

简便、快速测定细胞裂解液中DNA含量的荧光分析

生物组织中DNA的定量测定方法,均需进行样品的处理,步骤烦琐,费时,又影响灵敏度和重现性。Ananda等利用荧光探针——菲啶溴红检测生物样品中核酸的含量,虽然简化了样品的处理过程但仍不能直接测定细胞匀浆中DNA的含量。Rassel和Williamson等报道了4,6-二脒基-2苯吲哚(DAPI)荧光试剂能与DNA特异性结合成荧光复合物。Labarca等利用反苯并咪唑荧光试剂直接检测生物组织粗匀浆液中DNA含量,我们实验室在此基础上建立了直接测定细胞粗裂解液中DNA含量的方法、可检测10ng DNA。     

测定血清中白喉抗毒素含量的Vero细胞试验的改进

<正>Vero细胞试验已经被应用在测定人血清中白喉抗毒素的保护力或者通过测定免疫小鼠血清中抗毒素滴度评价白喉类毒素的效力。 白喉毒素能抑制培养物中Vero细胞的新陈代谢和存活,这种毒素效应可以被血清样品中的白喉抗毒素中和。在Vero细胞上,血清样品的滴度在有固定量的白喉毒素存在时被测出。Vero试验是根据在微     

凝胶上测定糖蛋白的荧光标记法

凝胶上测定糖蛋白及含糖酶是研究它们的性质和纯度的一种有效的方法。文献中报告的方法,有的不够灵敏,有的则非常麻烦。我们约在20年以前合成了一种荧光酰肼:dansyl glycyl hydrazide(DNS-Gly-NHNH_2),用以     

工业合成甘氨酸其含量的测定——甲醛法

<正> 甘氨酸是医药、有机合成和生物化学研究中常用的氨基酸之一。工业上,甘氨酸可由一氯醋酸和氢氧化铵作用而成。而工业合成甘氨酸其含量的测定目前尚无国家标准。上海市卫生局药品检验标准中,甘氨酸的含量测定,采用高氯酸—冰乙酸非水滴定法。其它氨基酸的含量测定在工业上和医药上亦主要采用非水滴定和克氏定氮法,但是工业合成甘氨酸,由于其样品中有氯化铵的存在,用以上两法测定其准确性均受干扰。本文介绍用过量的氧化镁去除NH_3,在     

猪毛中氨基酸含量测定

<正> 毛发角蛋白中氨基酸含量分析早已有报导,方法是脱脂毛发用6NHCl,在110℃下,按照各个氨基酸最佳水解时间,水解24—72小时。在酸水解时遭到部分破坏的氨基酸,如胱氨酸、酪氨酸、苏氨酸、丝氨酸等,则采用外推法分别计算出时间为零时的各个氨基酸含量。但是目前工业生产胱氨酸,所用原料猪毛中含有10—15%猪皮杂质,其水解条件是依     

UHPLC法同时测定金银花中6种有效成分的含量

本实验建立了UHPLC同时测定不同产地金银花中绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量的分析方法。采用Agilent 1290超高效液相色谱系统,Agilent ZORBAX RH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水,以0.2 m L/min的流速进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长350nm。结果表明在该色谱条件下,金银花的6种有效成分在8 min内可达到基线分离。方法的加样回收率为96.88%~99.16%,相对标准偏差为0.23%~1.06%。UHPLC法分析速度快,重复性好,结果准确,可用于金银花中绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C的含量测定。     

HPLC法对舒新片中丹皮酚的含量测定

目的:建立舒新片中丹皮酚的含量测定方法.方法:用高效液相色谱法对舒新片中丹皮酚进行定量分析,色谱柱为Kromsal C18柱(250 mm× 4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(60∶40);流速:1.0mL/min;检测波长274nm.结果:丹皮酚在0.021～0.105mg/ml范围内线性关系良好,r=0.9997;平均加样回收率为99.07％,RSD为0.36％.结论:该方法简单、准确、专属性强、重复性好,可有效控制舒新片中丹皮酚的含量.     

HPLC法同时测定柠檬中6种水溶性维生素含量

本研究以7个不同品种柠檬为材料,采用高效液相色谱(HPLC)法对不同品种柠檬中6种水溶性维生素(VB1、VB3、VB6、VB9、VB12和VC)含量进行同时测定。样品前处理后,经Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.9 m L/min;柱温为30℃,在波长267 nm处检测。结果表明,6种水溶性维生素在17 min内完全分离,在0.06~49.60μg/m L(R~2=0.9999~1.0000)呈良好的线性关系,检出限为0.03~0.27μg/m L,定量限为0.08~0.82μg/m L,平均回收率为99.06%~101.72%,RSD为0.49%~0.98%。进一步用该方法对7个不同品种柠檬样本进行检测,结果显示柠檬样本中VC含量远高于B族维生素含量,S_NM中VC含量最高(57.96±0.56 mg/100 g),EUR_D中VC含量最低(27.37±0.27 mg/100 g)。主成分分析揭示了不同柠檬果汁中水溶性维生素的相似性和差异性。S_NM的综合评价指数高于其他6个样品且EUR_D的综合评价指数远低于EUR_C和EUR_Y。该方法操作简单,精密度、重复性、稳定性好及回收率高,可有效检测柠檬中多种水溶性维生素的含量;7个品种柠檬果汁中维生素含量差异显著;主成分值可为柠檬中维生素指标提供理论依据。     

使用BODIPY荧光染料快速测定微藻油脂含量方法

使用BODIPY505/515荧光染料,通过荧光分光光度法测定藻细胞中的油脂含量。结果表明：BODIPY505/515的最佳染色条件为二甲基亚砜（DMSO）体积分数2%,BODIPY505/515最终质量浓度0.25μg/mL,染色时间30min,染色温度35℃。在最佳染色条件下,微藻油脂含量与荧光强度呈线性相关（R2=0.976 4）。通过测定BODIPY505/515染色的不同种属微藻的荧光强度,应用该关系计算其油脂含量,与质量法测定的结果相比没有显著差异。该方法较为普适,比传统方法相比具有简便快捷,试样用量少的特点,与尼罗红荧光染料相比具有较窄的发射波谱范围,不会与微藻的自身荧光相互干扰,更适于过程监控及高含油藻株的筛选。     

ELISA方法测定血清中Hib多糖抗体含量的条件比较研究

分别以牛血清白蛋白和人血清白蛋白作为封闭液的主要成分测定7份血清中抗b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的抗体含量,结果显示,两组数据之间没有显著性差异(P>0.05)。分别用HRP标记的羊抗人IgG和HRP标记的鼠抗人IgG测定该7份血清,结果显示两组结果无显著性差异(P>0.05)。同时,将血清反应的温度和时间由37℃1.5h改为4℃16h(过夜),结果显示两者无显著性差异(P>0.05)。从而优化了该方法。     

圈养大熊猫血清微量元素含量的测定与分析

正微量元素包括Fe、Cu、Cr、Mn和Zn等,虽含量极微,但具有极重要的生理功能,涉及机体的生长发育、免疫代谢等生命活动过程(Shenkin,2008; Subrahmanyam et al.,2015),也是反映机体新陈代谢及生理功能状况的重要指标(Carpene et al.,2017)。例如Fe元素参与机体氧的运输和贮存(Abbaspour et al.,2014),血清铁被认为是动物营养评估的生化指标(Ganapathy et al.,2011); Cu元素是多种氧化酶的重要组分,参与动物新陈代谢、生长发育等(Desai et al.,2014)。     

基因编码3-氯酪氨酸改造荧光蛋白

蛋白质翻译后修饰产生的3-氯酪氨酸 (3-Cl-Tyr)与多种疾病相关,包括帕金森病、哮喘、动脉粥样硬化等． 在动脉粥样硬化患者中发现AopA1 192位酪氨酸有高水平的氯化, 显示此种修饰可能会促进病变．为了研究酪氨酸氯代对蛋白质功能的调控作用,我们发展了将3-Cl-Tyr定点特异插入到蛋白质中的方法． 因为3-Cl-Tyr酚羟基上的质子比酪氨酸(Tyr)更容易解离,具有更低的pKa,在绿色荧光蛋白GFP及其突变体,以及光转化荧光蛋白mEOS2荧光活性中心中分别用3-Cl-Tyr取代Tyr,使得GFP发色基团的pKa降低到4.7,并且具有与EGFP相似的量子产率,使mEOS2 发色基团的pKa降低到4.2.这样使得荧光蛋白的发色基团在酸性条件下仍然能以去质子化形式存在,在500 nm以上仍然具有较强吸收,避免了用400 nm左右激光激发及其对细胞及细胞器造成的光损伤．这种新型的荧光蛋白突变体将适用于溶酶体、吞噬酶体等酸性细胞器．     

HPLC法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法：色谱柱为DiamonsilTM C18（250×4.6 mm,5滋m）,流动相为甲醇-0.05mol.L-1磷酸溶液（93∶7）为流动相,检测波长210 nm,进样量10滋L。结果：熊果酸在21.28滋g.mL-1～212.8滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为97.79%（RSD=1.30%）;齐墩果酸在24.02滋g.mL-1～240.2滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为98.36%（RSD=1.11%）。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于鸡矢藤药材的质量评价。