高原适应过程中大鼠脑内β－内啡肽含量变化的研究

选用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,由平原（海拔５ｍ,上海）直接运送到高原（２２６１ｍ,西宁和３４６０ｍ,天峻）。以放射免疫分折法研究了大鼠在高原２４ｈ．急性缺氧期和３０ｄ慢性缺氧期中枢脑内β－内啡肽样免疫活性物质（β－ＥＰ）的含量变化。结果表明：１．大鼠在两个不同海拔（２２６１ｍ,３４６０ｍ）环境２４ｈ急性缺氧期与平原对照组相比,脑垂体内β－ＥＰ含量降低非常显著（Ｐ＜０．０１）,纹状体、丘脑、下丘脑、桥－延脑、海马内β－ＥＰ含量均增加非常显著（Ｐ＜０．０１）。２．大鼠在３４６０ｍ高原３０ｄ慢性习服期,垂体及各脑区内β－ＥＰ的含量变化呈时相性：即１—３ｄ均呈进行性增加（Ｐ＜０．０１）：３－１５ｄ呈持续性减少,除中脑、纹状体、丘脑外,均为Ｐ＜０．０１。１５－３０ｄ垂体、丘脑、皮层、纹状体内β－ＥＰ含量仍持续减少（毒体、皮层Ｐ＜０．０１）,桥－延脑、下丘脑、海马趋于回升（Ｐ＜０．０１）,中脑亦趋于回升（Ｐ＞０．０５）。脑内β－ＥＰ的这种变化可能具有十分重要的生物学意义。     

大鼠实验性脾虚证胃粘膜内分泌细胞变化的免疫组织化学研究

用正常成年雄性Wistar大鼠53只,体重100～150g,分为正常对照组、实验性脾虚组、自然恢复组和四君子汤治疗组。取胃,固定于Bouin液。制成石蜡切片,进行(1)HE染色;(2)免疫组织化学染色,按Sternberger PAP法显示胃泌素细胞(G细胞)、生长抑素细胞(D细胞)和5-HT细胞。根据细胞的免疫反应程度,将细胞分为强阳性、中等阳性和弱阳性三级,每例动物计数三种细胞各1,000个,并计算各级细胞占的百分比;(3)从正常对照组,脾虚组随机选择各5例动物,对D细胞和G细胞进行显微分光光度计的定量测定;(4)由四组动物随机选择各5例,进行G细胞和D细胞密度及G/D细胞比值的测定。本文的观察表明:(1)脾虚组胃粘膜未见明显的组织学变化;(2)内分泌细胞:与对照组相比,脾虚组G细胞和5-HT细胞中,弱阳性细胞增多,表明分泌活动增强;D细胞弱阳性和中等阳性细胞减少,强阳性细胞增多,表明分泌释放减弱,合成增强。与自然恢复组比较,治疗组G细胞和D细胞的分泌活动接近于对照组;5-HT细胞无明显的恢复;(3)显微分光光度计的测定结果与光镜观察一致,脾虚组G细胞胃泌素反应物的含量低于对照组,D细胞内生长抑素反应物的含量高于对照组;(4)脾虚组G细胞密度低于对照组(P<0.01),D细胞密度略高于对照组,G/D细胞比值也低于对照组(P<0.01)。本文结果提示,脾虚证这些内分泌细胞的分泌活动出现异常,可能是导致消化功能紊乱的原因之一。经四君子汤治疗后,内分泌细胞的分泌活动接近于对照组,说明此药对脾虚证有一定的治疗作用。     

褪黑素减弱大鼠下丘脑弓状核β-内啡肽免疫反应的强度

为探讨褪黑素（ＭＥＬ）镇痛作用的机制,本文采用免疫组化方法结合计算机图像处理技术,观察了注射ＭＥＬ对大鼠下丘脑弓状核内神经细胞的β－内啡肽免疫反应的影响。实验大鼠分约药组及对照组,分别腹腔注射ＭＥＬ１１０ｍｇ／ｋｇ或配药液,１ｈ后灌注取脑、冰冻切片,进行免疫组化染色,计算机图像处理技术测定染色脑片积分光密度（ＩＯＤ）和平均光密度（ＯＤ）。结果显示,给药组大鼠弓状核内β－内啡肽免疫反应明显减弱,ＩＯ     

树脑β－内啡肽能神经元胞体和纤维分布的研究

本文用免疫组织化学方法和免疫电镜方法对１４只树脑β－内啡肽能神经元胞体和纤维的分布及其在细胞器的定位进行了研究。结果表明，本文首次报道在Ｂｒｏｃａ斜角带观察到β－内啡肽免疫反应阳性神经元胞体，电镜观察到β－内啡肽免疫反应物质定位于大颗粒囊泡内的小颗粒上和粗面内质网上。下丘脑弓状核及其附近区域观察到β－内啡肽免疫反应阳性神经元胞体。在室周区、室旁核、第３脑室室管膜下层及室管膜上皮细胞间、内侧基底下丘脑及其外侧区、正中隆起内带和外带部可见到β－内啡肽免疫反应阳性纤维和串珠状的膨体。对β－内啡肽的释放途径及其调节因素作了探讨。     

大鼠烫伤后延髓孤束核β－内啡肽含量的变化及其抗血清的作用

大鼠背部２０％体表面积接触沸水２０ｓ,形成Ⅲ度烫伤后,延髓孤束核推挽灌流液中β－内啡肽免疫活性物质的含量显著升高,在烫后１、４ｈ两次达到峰值。烫后立即向弧束核微量注射０．４μｌβ－内啡肽抗血清（滴度１：３００００）,可在一定程度上改善心功能指标,延缓血压和心率的下降,但未能延长动物的存活时间。提示孤束核的β－内啡肽在烫伤休克的病理过程中起作用,其含量的过量升高有抑制心血管功能的作用,从而不利于烫伤休克的恢复。     

β-EP和胃泌素在大鼠舌下腺的免疫组织化学定位

In order to study the distribution of β-EP and gastrin immunoreactive cells in the sublingual gland, we used the Advidin Biptin-Peroxidase Complex (ABC) immunohistochemical technique to detect the expression of β-EP and gastrin in rat sublingual glands. The results show that the epithelial cells of striated ducts and interlobular ducts appeared β-EP and gastrin positive in immunoreaction and the mucosus and serous acinar cells were immunoreactive negative. The poei-tive substances were distributed in the cytoplasm with negative nuclei. These results suggest that β-EP and gastrin are ex-pressed in the epithelial cells of ducts in the rat sublingual gland, which may play an important role in the secretion and functional regulation of the sublingual gland.     

大鼠实验性脾虚证胰腺组织化学研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只,分为（１）正常对照组,喂饲自来水。（２）脾虚组,用苦降破气中药和饮食失节法致成脾虚模型。（３）自然恢复组,动物致虚后,喂饲自来水。（４）中药治疗组。取四组动物胰腺进行ＲＮＡ,琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）,乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）,三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ）,葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）和硫胺素焦磷酸酶（ＴＰＰａｓｅ）组织化学反应和观察,并对ＳＤＨ,ＬＤＨ,ＲＮＡ进行了显微分光光度计定量测定。本研究结果表明,脾虚组胰腺泡细胞的ＲＮＡ,ＳＤＨ,ＡＴＰａｓｅ,Ｇ－６－Ｐａｓｅ,ＴＰＰａｓｅ含量和活性都低于对照组,而ＬＤＨ活性高于对照组。治疗组与自然恢复组相比,治疗组胰腺泡细胞以上指标接近对照组。定量测定与定性的结果一致。本研究表明,脾虚证时胰腺泡细胞上述几种酶活性和ＲＮＡ明显下降,可能在脾虚证发病中起主要作用,中药治疗有显著改善     

银杏叶制剂对致痛大鼠脑内β-内啡肽表达的影响

目的:研究β-内啡肽指标在脑内的表达变化,观察银杏叶制剂对致痛大鼠脑内β-内啡肽的影响。方法:取SD雌性大鼠50只,随机分为5组,模型组、药物对照组、给药组(高、中、低)三个剂量组。药物对照组给予生理盐水10天,给药组给与高中低三个剂量组的银杏叶的混悬液,每天给药两次,给药10天后,在大鼠的右脚掌给与5%的福尔马林150μl刺激,1小时后将大鼠处死,取海马和下丘脑做连续切片后,采用HE染色,在光镜下进行定位,用β-内啡肽做免疫组化染色,对照图谱在显微镜下观察β-内啡肽在海马区及下丘脑的阳性细胞数。结果:高、中剂量给药组中下丘脑室旁核、室周核、弓状核内β-内啡肽表达增加(P<0.05)。海马的CA1CA2、CA3区β-内啡肽的表达增加主要在高、中剂量组(P<0.05),低剂量组无差异。结论:大鼠给予银杏叶片制剂后,炎性致痛大鼠海马区及下丘脑区的β-内啡肽表达发生了变化,揭示银杏叶片在疼痛大鼠的中枢神经系统对β-内啡肽有一定的影响作用;提示银杏叶镇痛的有一定的中枢机制。     

实验性脾虚证大鼠结肠和盲肠组织化学、免疫组织化学研究

成年雄性Wistar大鼠60只,分正常对照组;脾虚组;自然恢复组和四君子汤治疗组。四组动物取结肠和盲肠分别进行H-E;酶组织化学和5-羟色胺细胞PAP免疫组织化学观察。结果表明,脾虚组结肠和盲肠粘膜上皮的杯状细胞较对照组明显增多,淋巴细胞及淋巴集结也增多。固有层毛细血管充血并有炎症细胞的增多。上皮细胞和腺细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)减弱,乳酸脱氢酶(LDH)增强;结肠上皮细胞和腺细胞碱性磷酸酶(AIP)和三磷酸腺苷酶(ATPase)增强,而盲肠上皮细胞和腺细胞AIP和ATPase减弱。结肠和盲肠5-HT细胞免疫组化反应减弱。这些结果表明肠上皮细胞酶的变化和5-HT细胞分泌活性的变化与脾虚证的发生密切相关,可能是导致脾虚证原因之一。经四君子汤治疗后以上各项指标均比自然恢复组更接近于正常对照组,说明此药对消化道粘膜上皮酶活性和5-HT细胞分泌活性恢复正常有明显效果,从而起治疗作用。     

β-内啡肽在齐口裂腹鱼消化道和脑中的定位分布

β-内啡肽属内源性阿片肽,广泛存在于胃肠道及脑组织中,发挥着多种生理功能。本文采用链霉亲和素-生物素复合物免疫组织化学技术研究β-内啡肽在齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)消化道和脑中的定位分布。食道、后肠呈β-内啡肽阴性反应,口咽腔、前肠及中肠呈β-内啡肽阳性反应,阳性细胞多分布于黏膜上皮之间,呈圆形、卵圆形、蝌蚪形、梭形、锥形等。β-内啡肽阳性细胞分布密度在前肠最高,中肠次之,口咽腔最低。β-内啡肽定位于间脑、中脑、小脑神经元及中脑神经纤维中,其阳性神经元密度在中隆起最高,下丘脑中叶前球核、下丘脑下叶次之,侧膝核、前圆核、下圆核、中纵束旁及小脑瓣浦肯野氏细胞层较低,下丘脑下叶乳头体、中脑基部上缘最低。β-内啡肽在消化道的分布与该鱼食性及消化道结构、功能密切相关;β-内啡肽在脑区的分布特性,推测与其参与调节不同脑区的神经内分泌活动有关。综上所述,β-内啡肽广泛分布于齐口裂腹鱼消化道及脑内,进一步证实它是一种双重分布的脑肠肽。本研究为β-内啡肽可能参与调节消化、神经内分泌活动提供了形态学证据。     

急性低氧下β-内啡肽参与对大鼠体液免疫的抑制性调节

正常大鼠脑室注射β－内啡肽（β－ＥＰ）（１ｎｇ／ｒａｔ）使溶血素生成和鸡卵白蛋白的ＩｇＧ抗体产生受到明显抑制,脾脏单个核细胞ＤＮＡ含量也下降,７ｋｍ４８ｈ低氧同样使溶血素的产生明显下降,大鼠脑室注射阿片受体阻断剂钠屈酮（ｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ）可使低氧造成的ＩｇＧ和溶血素生成抑制翻转,低氧抑制的脾脏单个核细胞ＤＮＡ合成得到部分阻断,脑室注射β－ＥＰ与７ｋｍ低氧１２ｈ一样使脾脏中儿茶酚胺含量增加,因而     

中枢应用β-内啡肽对大鼠血浆唾液酸水平的影响以及与免疫功能的关系

实验选择体重２００－２５０ｇ健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠６４只,采用麻醉大鼠中枢微量注射,分光光测定法及免疫组织化学法,研究侧脑室,弓状核（ＡＲＣ）区注射β－内啡肽（β－ＥＰ）对大鼠血浆唾液酸（ＳＡ）水平的影响及与免疫功能的关系,结果表明：（１）侧脑室注射β－ＥＰ可明显降低血浆ＳＡ水平;（２）血浆ＳＡ水平在ＡＲＣ区注射β－ＥＰ后明显降低,此效应可被Ｍ胆碱受体阻断剂阿托品或切断双侧颈迷走神经所阻断;（３）Ａ     

小鼠早期胚胎发育期间TGF—β免疫组织化学定位

The distribution of transforming growth factor beta-1 (TGF-beta-1) in the early developing mouse embryos between day 1 and day 12 of gestation was examined by immunohistochemical techniques. Polyclonal rabbit antiserum raised against a synthetic oligopeptide identical to the N-terminal residues 1-29 of TGF-beta-1 from human platelets was used. The following results were obtained: 1. Embryonic cells of early cleavage stages (2, 4 and 8 cells) and late morulae showed positive immunofluorescent reaction without any difference in staining intensity (Plate I, Figs. 1-4). 2. Marked staining of blastocysts in toto or sections with anti-TGF-beta-1 antibodies by either immunofluorescence or immunoperoxidase reaction was also observed. Inner cell mass (ICM) cells and trophoectoderm cells were both reacted, but more intense staining was found in primary endoderm cells differentiated from ICM cells adjacent to blastocoele (Plate II, Fig. 5). 3. Scattered granules stained strongly with immunoperoxidase reaction were present in embryonic ectoderm and visceral endoderm surrounding the forming mesoderm which was only slightly stained (Plate II, Fig. 6). 4. Intense immunoperoxidase staining was also present in mesoderm of visceral yolk sac of day 8 and day 10 embryos (Plate II, Fig. 7). 5. During the formation of somites, neural tube and limb bud, remarkable staining was found in mesenchyme, individual cells of somites, mucous layer of gut tubes, heart and limb buds (Plate III, Figs. 8-10). No significant staining was seen in neural cells per se except the inner surface of neural tube. The results of present studies indicate that abundant TGF-beta-1 is present in preimplantation mouse embryos including cleavage, morulae and blastocyst stages. In postimplantation embryos, TGF-beta-1 appears to play an important role in the differentiation of endoderm and mesoderm, particularly in the development of extraembryonic tissues, and in later morphogenetic and histogenetic events involving mainly mesoderm or mesenchyme cells.     

大鼠心脏的雌激素受体免疫组织化学研究

观察雌激素受体在雌性与雄性大鼠心脏中的表达.取大鼠心房与心室组织制作冰冻切片,应用抗雌激素受体单抗进行免疫组织化学(SP法)染色并进行图像分析.结果显示,雌性与雄性大鼠心脏都存在雌激素受体,且受体的表达无性别差异(P＞0.05);心房与心室都存在雌激素受体阳性表达,其表达也无明显差异(P＞0.05);阳性反应见于心肌细胞和成纤维细胞.结果表明,大鼠心脏存在雌激素受体,心房与心室都可能是雌激素的靶组织;心血管疾病的性别差异与雌性、雄性的受体含量无关,可能与生理条件下受体的活性及功能状态有关.     

大鼠胰腺γ-氨基丁酸免疫组织化学定位

本文用ABC—GDN免疫组织化学方法,研究了γ-氨基丁酸(Gamma—Aminobutyric Acid,GABA)在大鼠胰腺的定位和分布,并用相邻切片法,观察它与胰岛素的共存关系。结果发现GABA免疫反应阳性细胞主要分布于胰腺内分泌部(胰岛)。在外分泌部亦有少许分布。大部分胰岛细胞呈GABA免疫反应阳性,集中位于胰岛的中央部。相邻连续切片免疫染色证实GABA与胰岛素共存于胰岛B细胞中。外分泌部胰腺GABA免疫反应阳性细胞,呈零散分布于腺泡和导管上皮间。本文为进一步探讨GABA在胰腺的生理作用提供了形态学依据。     

大鼠降主动脉雌激素受体的免疫组织化学研究

冰冻切片微波修复后,用ER单克隆抗体免疫组织化学SP法及图像分析方法,观察雌激素受体（ER）在雌性与雄性大鼠降主动脉壁的分布,结果显示,ER阳性反应存在于血管壁的内皮细胞与平滑肌细胞中,阳性反应强度无性别差异。无段间差异（降主动脉胸段与腹段）,血管周围的脂肪组织也可见大量呈阳性反应的细胞,结果表明,降主动脉壁的内皮细胞,血管平滑肌细胞中存在ER。降主动脉可能是雌激素的靶器官。     

肺炎支原体感染大鼠肺组织中PDGF-BB变化的免疫组织化学研究

为探讨血小板源性生长因子 - BB(PDGF- BB)在肺炎支原体反复肺感染导致肺间质纤维化的发病机制中的作用 ,作者于 2 4周内给大鼠反复 9次吸入肺炎支原体复制慢性肺感染模型。随后用 PDGF- BB单克隆抗体按 SABC法行免疫组织化学染色和定量图像分析 ,以观察肺组织 PDGF- BB蛋白质水平表达的变化。结果显示 :(1)感染组动物 (n=4)支气管肺泡灌洗液肺炎支原体 - PCR检测均为阳性 ,而对照组 (n=4)和感染加红霉素治疗组动物 (n=4)均为阴性 (P<0 .0 5 ) ;三组动物的支气管和肺组织常规细菌培养结果均为阴性 ;感染组动物透射电镜检查见肺泡间隔增宽 ,其中有较多胶原纤维堆积 ,其余两组则未见明显异常。 (2 )感染组动物肺间质结缔组织内、支气管壁和小血管壁内可见较强的 PDGF- BB阳性染色 ,其积分光密度为 37.90± 10 .14(n=4) ,显著高于对照组者 (7.5 4± 1.98,n=4,P<0 .0 5 )和感染加红霉素治疗组者 (10 .90± 3.30 ,n=4,P<0 .0 5 )。提示肺炎支原体反复肺感染的 PDGF- BB蛋白质水平表达增加 ,可能参与肺间质纤维化的发病过程     

β—内啡肽的免疫调节作用

越来越多的证据表明,神经系统与免疫系统间存在着双向作用,而内源性阿片肽在这一双向关系中起重要的介质作用,本文就β－内啡肽（β－ＥＰ）在免疫系统中的作用作一综述。     

训练与β－内啡肽对急性运动反应关系的研究

用放射免疫法测定训练和非训练大鼠运动前、运动到５０％耐力时间（Ｔ１／２）和衰竭时丘脑下部和血浆β－内啡肽（β－ＥＰ）的含量,探索了训练与β－ＥＰ对急性运动反应的关系。结果表明：训练组大鼠丘脑下部β－ＥＰ含量在运动到Ｔ１／２和衰竭时分别较安静时提高了４％和１５％;对照组大鼠在Ｔ１／２时,β－ＥＰ的变化趋势同训练组,以后随运动生理负荷的增强而迅速降低,衰竭时较Ｔ１／２时降低了２６％,较训练组降低了３２％（Ｐ＜０．０５）。训练组大鼠血浆β－ＥＰ含量随运动开始迅速上升,Ｔ１／２时较运动前增加了５．７倍（Ｐ＜０．０１）,以后上升的幅度减小;非训练组大鼠血浆β－ＥＰ也随运动开始迅速提高（Ｐ＜０．０１）,Ｔ１／２后趋于稳定,在Ｔ１／２和衰竭时分别比训练组低２２％和２６％。表明非训练组大鼠丘脑下部β－Ｅｐ对急性运动呈明显的双相变化,训练提高了大鼠丘脑下部和血浆β－ＥＰ对衰竭运动的反应。