电磁脉冲诱导大鼠心肌闰盘Cx43连接蛋白的上调

目的:探讨电磁脉冲(EMP)对SD大鼠心肌闰盘及主要连接蛋白Cx43的影响.方法:将雄性SD大鼠35只,随机分为对照组和EMP辐照组,EMP辐照组又分为照后即刻、1h、3h、6h、12h、24h组,每组5只大鼠.应用EMP模拟发生器对EMP辐照组大鼠进行辐照,场强为200 kV/m、前沿15 ns、脉宽7-8 ns、脉冲次数200次,脉冲间隔为7s,麻醉后取大鼠左心室,采用硝酸镧示踪法和透射电子显微镜观察大鼠心肌闰盘(ID)结构的变化,用Real-Time PCR方法和Western blot方法检测EMP辐照后,大鼠连接蛋白Cx43在转录水平和蛋白水平表达量的变化情况.结果:电镜下正常对照组大鼠心肌ID处未见硝酸镧颗粒沉积;EMP组大鼠ID处可见硝酸镧颗粒,且随时间的延长,硝酸镧颗粒沉积量逐渐增多,以照后6h组硝酸镧颗粒沉积量达最大,然后硝酸镧颗粒沉积量随时间延长逐渐减少,24h组恢复正常.心肌细胞Cx43的mRNA表达水平在EMP照后lh和6h明显增高,分别是对照组的1.95、3.10倍(P＜0.05);照后即刻、3h、12h、24h表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot结果为照后即刻、1h、3h和6h组大鼠心肌细胞Cx43蛋白表达量与对照组比较显著增加,12h、24h与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:EMP可使心肌闰盘结构发生改变,上调Cx43蛋白的mRNA水平和蛋白表达量.     

心肌闰盘横纹切片制作改良法

心肌闰盘(intercalated disk)为心肌组织内同步兴奋的特化结构.心肌细胞末端互相连接成网,闰盘分布在细胞间连接处,在HE染色标本中呈深红色,需仔细辨认才行.而心肌闰盘及横纹是心肌结构中必须要观察的一部份,常规方法显示其结构,如Retterr氏法、Hemalinin氏法以及碘酸钠-苏木精心肌闰盘整块染色法,但步骤繁琐,染色不够稳定,常消耗大量的药品和人力.经我们改进整块组织染色切片,比其单片染色的更加清晰可辨,且易于批量制作教学切片.简介如下.     

小脑浦肯野细胞动作电位传输保真度在大鼠出生后发育期间的变化

小脑浦肯野细胞的轴突是小脑皮层唯一的传出通路,研究其动作电位传输能力对于了解小脑的生理功能具有重要意义.大鼠在出生后第2周到第3周,小脑浦肯野细胞的形态及功能都有显著变化,产生动作电位的能力明显增强.而轴突上动作电位传输能力的变化还有待研究.运用胞体以及轴突的双电极膜片钳技术,研究了出生8天以及15天的Wistar大鼠小脑浦肯野细胞轴突上动作电位的传输.与8天组相比,15天组大鼠小脑浦肯野细胞轴突上动作电位的传输能力明显增强.后超极化可以增强8天组轴突上动作电位的传输能力.研究表明,随着发育的成熟,动作电位的产生能力以及轴突上动作电位的传输能力同步增强.     

出生后小鼠睾丸不同发育期TIMP-4的表达

金属蛋白酶组织抑制因子-4(TIMP-4)是TIMP家族的最新成员。已有研究表明,TIMP-4mRNA大量表达于成年小鼠的睾丸中。为了证实TIMP-4基因在出生后小鼠睾丸中的表达是否具有发育依赖性,本实验利用RT-PCR、Western blotting和间接免疫荧光染色三种方法,分别检测了TIMP-4mRNA和蛋白在出生后小鼠睾丸不同发育期中的时空表达方式。RT-PCR和Western blotting结果分别显示,TIMP-4mRNA和蛋白均只在成年小鼠睾丸中表达,而在出生后的其它各阶段都不表达;间接免疫荧光染色进一步证实TIMP-4蛋白只定位在成年小鼠睾丸的Leydig细胞中。结果提示,TIMP-4在出生后小鼠睾丸中的表达具有显著的发育依赖性.     

下丘脑神经元电压依赖性钾电流活动在大鼠出生后发育过程中的变化

采用膜片钳细胞贴附式技术,比较研究SD大鼠下丘脑神经元电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channel,Kv)单通道电流活动的动力学特性,在出生后发育过程中的变化。出生不同天数的大鼠,其下丘脑神经元上Kv通道的电流强度和电导无显著差别(P>0.05),通道电导接近120 pS;单位时间内封接膜片上N个通道的开放概率的总和升高,由第1天的0.19±0.08(n=10)上升到第9天的0.30±0.09(n=10,P<0.05),单通道活动密度增加,由0.14 channel/μm2升高至0.26 channel/μm2。上述结果提示大鼠下丘脑神经元在出生发育过程中,Kv单通道活动的动力学发生显著变化。     

大鼠生后发育期间胰腺IAPP免疫组织化学定位研究

本文应用免疫组织化学ＰＡＰ法对正常雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠生后发育期间胰腺ＩＡＰＰ－ＩＲ阳性细胞进行了定位研究。结果表明;生后１天的大鼠胰岛内即已存在ＩＡＰＰ－ＩＲ阳性细胞,双染法证实ＩＡＰＰ与胰岛素共存于胰岛Ｂ细胞的胞质内。ＩＡＰＰ细胞免疫反应强度随生后发育而变化,２８天以后趋于稳定。胰腺外分泌部也有散在的ＩＡＰＰ－ＩＲ细胞。本文初步探讨了上述结果的生物学意义。     

大鼠心肌重塑过程中Axin蛋白质的表达变化

为观察大鼠心肌重塑过程中Axin蛋白质表达水平的变化,实验用颈静脉输注去甲肾上腺素(NE)和动静脉造瘘(AVF)方法复制大鼠心肌重塑病理模型,采用超声心动术检测心脏结构和收缩功能。取病理模型大鼠左心室以及分离培养的成年大鼠心肌成纤维细胞,采用Wester blot技术检测Axin蛋白质的表达水平。结果观察到,在颈静脉输注NE 3d后,大鼠心脏发生向心性心肌肥厚和心肌纤维化,其左心室的Axin蛋白表达水平较对照组显著升高。A-V造瘘术一周后引起大鼠离心性心肌肥厚,心肌无明显纤维化,心肌Axin表达量与对照相比无显著变化。在分离培养的成年大鼠心肌成纤维细胞,NE处理24h能明显升高Axin蛋白的表达水平。上述结果表明,大鼠心脏有Axin蛋白质表达,NE致大鼠心肌重塑过程中Axin蛋白表达显著增加,可能与该过程的心肌纤维化有关。     

大鼠出生后脑内钙调神经磷酸酶的研究

本文用BA-ELISA.immunoblotting及酶活力测定等方法,研究了大鼠脑中钙调神经磷酸酶在大鼠出生后的变化情况。结果表明,钙调神经磷酸酶的含量在大鼠出生后第二周和第三周显著增加,其活力也在出生后第二周达到顶峰。钙调神经磷酸酶这种有规律的变化与脑中突触形成在时间上是一致的,暗示钙调神经磷酸酶可能参与突触功能的调节。     

大鼠心肌线粒体内、外膜磷脂动态结构的研究

我们以DPH为荧光探针.用毫微秒荧光分光光度计测定了大鼠心肌线粒体及线粒体内、外膜的动态微细结构;用HPLC分析了磷脂组成.实验结果提示.完整线粒体膜流动性主要反映了线粒体外膜的运动状态.线粒体内膜微粘度及磷脂分子摇动角大于外膜,扩散速率小于外膜.除去了蛋白质的线粒体内、外膜磷脂脂质体膜流动性无明显差异.提示线粒体内膜的高微粘度与膜中所含有的多量蛋白有关.     

血液稀释对大鼠脑卒中后心肌酶活性的影响

血液稀释对大鼠脑卒中后心肌酶活性的影响马宁张北奇周锡英张硕立于占久１朱方（河北省医学科学院石家庄０５００２１;１河北医科大学中医学院石家庄０５００９１）以往实验证实,闭塞单侧大脑中动脉对心肌细胞有明显的损伤作用。我们用实验性脑卒中２４ｈ后的模型大鼠,...     

大鼠和家兔心肌穿刺后再生现象的观察

本文观察了大鼠和家兔心肌穿刺后7、14、21天的心肌组织结构,发现穿刺点周围的心肌纤维胞体膨大,有核的分裂相和双核,在此基础上有肌微丝及肌原纤维的再生,并有闰盘的形成,在这个部位和刺破的心肌表面还有巯松结缔组织的增生。     

Palmdelphin在出生后发育的大鼠小脑中的表达模式研究

Palmdelphin是参与质膜的动态变化与细胞形态的调控的paralemmin家族新成员,与神经发育的相关性尚不明确.前期工作提示,它与调控小脑发育的一种肌动蛋白结合蛋白Mtss1(metastasis suppressor1)具有一定相关性.为了探索该基因与小脑出生后发育的相关性,利用原位杂交技术研究Palmdelphin在小脑中的时空表达,结果表明,Palmdelphin在出生后第7d大鼠小脑中有明显的表达,且分布主要集中在浦肯野神经元.半定量RT-PCR的结果进一步表明Palmdelphin的转录水平在小脑发育过程中受到调控,在出生后7d有表达高峰.这些结果显示Palmdelphin与小脑出生后神经元发育存在一定相关性.     

力竭性运动后大鼠血清CK、CK-MB活性和心肌组织形态学的动态改变

目的：探讨一次和反复力竭性运动后不同时相大鼠血清肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）与心肌损伤的变化规律。方法：通过力竭性游泳制备运动性心肌损伤模型,分别于运动后即刻和3 h6、h、12 h2、4 h4、8 h、96 h检测血清CK、CK-MB活性,并观察心肌组织形态学的动态变化。结果：大鼠一次力竭运动后0~12 h,CK和CK-MB活性明显增加,6 h达高峰;心肌炎细胞浸润灶逐渐增多,胞质嗜酸性增强,损伤高峰在12 h左右。反复力竭运动后0~12 h和48 h9、6 h CK和CK-MB活性皆明显增加,分别于运动后即刻和96 h达高峰;心肌细胞均有不同程度的损伤,48 h最严重。结论：过度运动和/或力竭性运动皆引起运动性心肌损伤,同时存在延迟性心肌损伤。     

大鼠发育期睡眠/觉醒周期的神经调节

幼年期大鼠的睡眠/觉醒周期和成年期的有显著差异,最为显著的特点是快眼动(REM) 睡眠在24 小时内的百分比远多于其他任何年龄阶段,随着脑发育成熟而逐渐减少.与此同时,非快眼动(NREM) 睡眠和觉醒的百分比逐渐增加.后者与参与NREM睡眠和觉醒调节的神经元在发育早期的成熟程度较为一致.鉴于大鼠发育早期REM睡眠每日的百分比由最高开始逐渐降低,而触发和促进REM睡眠的胆碱能神经元各生化成分的活性则是由最低开始逐渐升高,此期的REM睡眠应该还有胆碱能以外的动力驱动.新近的资料表明,促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)可能是幼年期REM睡眠的另一主要驱动力量.     

亚硝胺诱发大鼠膀胱癌动态过程的超微结构观察

本文以亚硝胺为致癌剂诱发大鼠膀胱癌。用电镜方法对灌药后不同周次的大鼠膀胱粘膜癌变的动态过程进行超微结构研究。观察表明：移行上皮非对称性单位膜的改变和多形性微绒毛形成、梭形小泡消失、微丝和连接复合体减少所致的壳层丧失、胞浆内溶酶体增多及戒指样细胞形成、核周纤维层不规则或消失等是膀胱粘膜上皮早期癌变的重要形态学指标。     

高血压大鼠心肌肥大及逆转过程中相关因素的探讨

目的：探讨在心肌肥大及逆转过程中收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、神经肽Y(NPY)等与左心室肥大的关系。方法：血压和心率用生物信号分析系统记录;NPY用放射免疫法测定,用SPSS软件求出了相关系数和回归方程。结果：SBP、DBP、MAP、心肌匀浆中NPY与心系数(LVW／BW)呈正相关,血液中NPY和心率(HR)与心系数不相关。结论：血压升高是导致左室肥大的因素之一,收缩压的影响大于舒张压;SBP、DBP、MAP、心肌匀浆中NPY与心系数(LVW/BW)有相关的趋势。     

变温过程中大鼠心肌等长收缩发展张力呈双相变化

本实验旨在探明变温过程对心肌的影响,以及可能的内在机理。采用阶梯方式降、复温,测定３０℃、２５℃、２０℃、１５℃与１０℃条件下,大鼠乳头肌等长收缩的各参数值的变化。结果表明：在降温过程中,心肌发展张力（ＤＴ）呈双相变化,即从３０℃降温到２５℃,ＤＴ增大,而后ＤＴ逐渐下降;温度降到２０℃时,静息张力（ＲＴ）保持不变,而降至１５℃以后ＲＴ明显上升。乳头肌等长收缩的时间参数如ＴＰＰ、ＴＰＮ、ＴＰＴ、Ｔ１／２Ｒ均随温度的降低而逐渐延长。在复温过程中,与降温过程中相同温度点相比,２０℃、２５℃、３０℃点发展张力明显降低,而１５℃、２０℃、２５℃点静息张力显著增高。这提示在降温过程中,心肌细胞肌钙蛋白Ｃ对Ｃａ２＋敏感性可能呈现双相变化,且低温造成的心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度增高,可能引起心肌细胞损伤。因而,心冷停搏液保护心肌功能的关键环节,应是如何防止在降温过程中心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度一过性增高。     

大鼠心肌发育相关基因在心肌梗死后的表达变化

探讨大鼠急性心肌梗死后与心肌发育相关基因的表达变化 .通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型 ,利用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)和Northern印迹技术分别检测GATA4、Nkx2 5BMP2和Wnt11基因在心肌梗死后不同时间的表达变化趋势 .结果显示 ,在正常心肌中 ,与心肌发育相关的基因GATA4、Nkx2 5和BMP2有较强的表达 ,而Wnt11基础表达较低 .心肌梗死后 ,GATA4、Nkx2 5和BMP2表达下降 ,7d后有所恢复 ;Wnt11的表达在心肌梗死后呈上升趋势 ,至梗死 7d达到高峰 .结果提示 ,心肌发育相关基因的表达在心肌梗死后有明显改变 ,并发现启动心肌发育的关键信号分子———Wnt11基因表达上调 ,为心肌损伤后细胞分化机制的研究提供线索     

大鼠生后不同时期心肌NGF mRNA水平的变化

神经生长因子 (ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ)是最早发现的神经营养因子 ,对于神经元的发育、分化、维持正常功能具有极重要的作用。研究表明 ,ＮＧＦ也参与免疫、造血、生殖、心血管等功能的调节。以往的研究证实 ,心肌细胞可以分泌ＮＧＦ。多年来 ,人们对ＮＧＦ在心脏方面的作用进行了较为深入的研究 ,但迄今为止 ,尚未见有关生后发育过程中正常心肌ＮＧＦｍＲＮＡ表达方面的报道。本研究采用ＲＴ ＰＣＲ(ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ)方法 ,半定量分析大鼠生…