鲤鱼粘液细胞类型的研究

以阿新蓝－过磺酸雪夫氏染色方法（ＡＢ－ＰＡＳ）观察了鲤鱼粘液细胞的形态和类型。根据ＡＢ－ＰＡＳ染色结果将鲤鱼粘液细胞分成四型：Ⅰ型为红色,ＡＢ阴性,ＰＡＳ阳性,含中性粘多糖;Ⅱ型为蓝色,ＡＢ阳性,ＰＡＳ阴性,含酸性粘多糖;Ⅲ型为紫红色,ＡＢ与ＰＡＳ均为阳性,同时含有中性粘多糖和酸性粘多糖,但以中性粘多糖为主;Ⅳ型为蓝紫色,ＡＢ与ＰＡＳ均为阳性,同时含中性粘多糖和酸性粘多糖,但以酸性粘多糖为主。     

应用超声波六胺银法的改良法显示组织胞浆菌

应用超声波六胺银法的改良法显示组织胞浆菌,效果好,图像清晰,细菌的菌壁被染成深黑色,菌体中央为空白区,背景为淡绿色。①该法需时少,六胺银液的浸染时间仅需２０分钟左右,而原法则需７０～９０分钟。②由于浸染时间短,减少了杂质的沉淀,增加了背景的清晰度。原法浸染时间长,常可产生背景的杂质沉淀,影响结果的评判。③该法利用超声波的高频振谐下所作的缩张运动,加速了溶液中分子的运动速度,从而促进了切片的氧化过程,使菌壁的醛基更加完全彻底的暴露出来,有利于还原溶液中的硝酸银成为金属银,将细菌给予更好地显示出来、从最后的结果证明：它优于原法或ＰＡＳ法。     

PAS反应在显示真菌中的应用和体会

ＰＡＳ反应 (Ｐｅｒｏｄｉｃ Ａｃｉｄ Ｓｃｈｉｆｆｒｅａｅｔｉｏｎ)属于糖类的组织化学反应 ,它不仅在对糖原、粘蛋白、粘多糖及含碳水化合物的物质有特异性 ,而且对真菌的显示亦十分理想。现将ＰＡＳ显示真菌的体会予以介绍 :1、材料和方法1.ｌ材料选取外检中食道、胃、鼻腔、上颌窦、肺、皮肤、指 (趾 )甲等组织ＨＥ染色切片中疑有真菌感染者5 0例。重新切片。1.2　改良Ｓｃｈｉｆｆ试剂的配制 ,碱性品红 0 5ｇ加1ｍｏｌ/Ｌ盐酸 15ｍｌ,振荡使之溶解 ,再加 0 6 %偏重亚硫酸钠 85ｍｌ。紧盖瓶塞 ,振荡后在室温下放置 2 4ｈ ,溶液呈草…     

南方鲇消化道杯状细胞分布及类型探讨

本研究应用阿利新蓝－过碘酸雪夫氏（ＡＢ－ＰＡＳ）染色方法对南方鲇（Ｓｉｌｕｒｕｓ　ｍｅｒｉｄｉｏｎａｌｉｓ）消化道杯状细胞的分布特点进行了分类研究,结果表明：南方鲇消化道杯状细胞的数量从肠前段、肠中段到肠后段,呈现递增趋势,有杯状、囊状和梨形三种不同的形态,ＡＢ反应阳性,ＰＡＳ反应阴性,分泌物主要含酸性粘多糖,属Ⅱ型粘液细胞。     

PSⅡ原初电子供体P680的光破坏现象研究：高效液相色谱对光抑制？…

采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）的分析方法,对菠菜（ＳｐｉｎａｃｉａｏｌｅｒａｃｅａＭｉｌｌ．）叶绿体ＰＳⅡ反应中心光破坏过程进行了研究,结果表明：（１）在本实验条件下,４５ｍｉｎ的光照处理,可以使ＰＳⅡ反应中心的光化学活性基本接近丢失。（２）从光照约２０ｍｉｎ开始至约４０ｍｉｎ,Ｃｈｌａ的含量逐渐减少到原有含量的２／３左右,然后浓度保持不变至约６０ｍｉｎ此后,Ｃｈｌａ的含量出现了第二次下降,到８０ｍ     

力竭性游泳对大鼠胃组织丙二醛,游离巯基和ATP含量的影响

目的：探讨力竭性游泳造成胃肠功能紊乱的机理。方法：３２只ＳＤ雄性大鼠随机分为４组,即对照组（Ｃ）;运动后即刻组（ＥＸ１）;运动后３０ｍｉｎ组（ＥＸ２）;运动后６０ｍｉｎ组（ＥＸ３）,测定力竭性游泳后不同时相胃组织中ＭＤＡ,游离巯基和ＡＴＰ含量。结果：运动后即刻三项指标没有发生显著变化,但在运动３０ｍｉｎ和６０ｍｉｎ组中ＭＤＡ含量显著增加,而游离巯基和ＡＴＰ含量在这两个时相中显著下降,同时,解剖学观察也证实,力竭性游泳后３０ｍｉｎ和６０ｍｉｎ胃组织损伤严重。结论：运动源性自由基对胃组织有严重损伤,是造成运动性胃肠功能紊乱的重要因素。     

发菜类囊体膜色素蛋白复合物分离及其光谱性质的研究

采用改进的Ａｌｌｅｎ’ｓ的绿胶系统,首次对陆生蓝藻发菜（Ｎｏｓｔｏｃ ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｅ Ｂｏｒｎ．ｅｔ Ｆｌａｈ．）类囊体膜色素蛋白复合物进行了分离,共分离出了１１条绿色的色素蛋白复合物条带。两条浅黄色的条带。其中７条绿色条带属于ＰＳⅠ组分,４条绿色条带属于ＰＳⅡ组分,１条浅黄色条带经光谱分析初步认定为类胡萝卜素蛋白复合物,而另一条浅黄色条带为游离色素。     

hBMP－2cDNA在COS细胞和小鼠肌肉中的表达

研究了骨形态发生蛋白ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ在ＣＯＳ细胞和小鼠肌肉中的表达的情况,从ｐＳＰＳ６５ＢＭＰ－２质粒中回收ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ,删除５＇端的非翻译序列,插入ｐＳＶＬ载体中,构建了含有ＢＭＰ－２全长编码序列的重组表达质粒ｐＳＶＬＢＭＰ－２。将表达质粒导入ＣＯＳ－７细胞中,细胞ＲＮＡ点杂交结果表明,转染ＢＭＰ－２基因的细胞内ＢＭＰ－２的ｍＲＮＡ水平明显升高;细胞培养上清的ＥＬＩＳＡ显示,转染ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ后,细胞分泌产生的ＢＭＰ－２显著增加。小鼠实验发现,在肌肉内用注射法导入ＢＭＰ－２重组质粒后,局部组织内ＢＭＰ－２的ｍＲＮＡ转录水平也明显提高。     

应用真空负压LSAB法快速显示各种组织相关抗原的研究

应用真空负压ＬＳＡＢ法快速显示各种组织中的相关抗原,无论从时间上,还是从二抗三抗的稀释度,阳性物的显示强度和效果等,都比免疫组化中的其它方法好。冰冻切片和培养细胞片,整个过程需时５０ｍｉｎ左右,石蜡切片全过程需时６０ｍｉｎ左右,如果从抗体的孵育时间讲,则孵育时间仅为产品说明书注明的时间的１／５。稀释度产品说明书注明二抗三抗为１：４００,该法二抗三抗的稀释度为１：８００,如此可增加标记切片的张数,降低成本。根据实验对比,在组织切片含有大量的抗原或抗体时,它与真空负压ＡＢＣ法没有明显差别,在抗原抗体含量少的情况下,真空负压ＬＳＡＢ法就显示出优势,阳性反应物明显比其它方法都强。真空负压ＬＳＡＢ法之所以具有上述的优点,这主要是它不需要提前形成复合物,因此,它的分子量小行动敏捷灵活,对组织的渗透性强。它与生物素的结合点多,加上真空负压的特殊条件,这就使真空负压ＬＳＡＢ法成为需时少,效果好,敏感性高的一种新方法。     

离子交换高效液相层析法测定腺苷酸环化酶活性

用离子交换高效液相层析（ＨＰＬＣ）分离并同步测定脑组织腺苷酸环化酶（ＡＣ）反应生成的ｃＡＭＰ,从而直接测定ＡＣ活性。１００℃加热１ｍｉｎ终止ＡＣ反应后,混合物在０℃放置２ｈ。在此期间,反应体系中残留的ＡＴＰ水解酶将反应混合物中大部分剩余的ＡＴＰ水解除去。用二氯甲烷抽提除去罂粟碱等干扰物质,使混合物中的ｃＡＭＰ同蓁物质在Ｓｈｉｍ－Ｐａｋ ＷＡＸ－１阴离子交换ＨＰＬＣ术上基线分离,并可定量测定,用此方     

流行性出血热循环免疫复合物组分分析

应用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫转印技术对流行性出血热患才血清中免疫合物组分进行了分析。流行性出血热循环免疫复合物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离,考马斯亮兰染色,显色主要有７条带,分子量分别为２３ｋＤ,５０ｋＤ,５２ｋＤ,６５ｋＤ,７２ｋＤ,８０ｋＤ及１００ｋＤ。采用该病毒特异性抗血清、单克隆抗体以及人免疫球蛋白、补体成分抗血清识别,在其特环免疫复合物中可检出特异性病毒抗在及相应的免疫球状蛋白和补体成     

人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究

凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即ＵＥＡ－Ｉ、ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＰＳＡ、ＰＮＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＷＧＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,ＰＮＡ和ＰＳＡ在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ受体在正常和癌组织中有着特征性变化,ＢＳＬ和ＤＢＡ在食管中无反应,ＬＣＡ、ＳＢＡ和ＲＣＡ－１正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ＣｏｎＡ和ＷＧＡ则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管ＵＥＡ－Ｉ在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ（ＤＢＡ和ＳＢＡ）、β－Ｄ－Ｇａｌ／β－Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ（ＲＣＡ－Ｉ）、α－Ｄ－Ｇｌｃ／α－Ｄ－Ｍａｎ（ＬＣＡ和ＣｏｎＡ）、［β－（１－４）－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ］２／ＮｅｕＮＡｃ（ＷＧＡ）和α－Ｄ－Ｇａｌ（ＢＳＬ）等的糖复合物的改变有较为密切的关系。     

应用荧光原位杂交和RFLP标记检测多小穗小麦新种质10—A中的黑麦染 …

利用ＡＰＡＧＥ,荧光原位杂交技术和ＲＦＬＰ标记,对导入黑麦（ＳｅｃａｌｅｃｅｒｅａｌｅＬ．）多小穗等性状创制的小麦新种质１０－Ａ进行了分子标记检测,ＡＰＡＧＥ分析发现,１０－Ａ与其他１ＲＳ／１ＢＬ易位系一样,含有１ＲＳ的醇溶蛋白标记位点Ｇｌｄ１Ｂ３。以黑麦基因组总ＤＮＡ作探针,用中国春（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｕｍｃｖ．ＣｈｉｎｅｓｅＳｐｒｉｎｇ）基因组ＤＮＡ作封阻,与１０－Ａ根尖细胞有丝分裂染     

精氨酸加压素对大鼠抗体产生和淋巴细胞增殖的上调作用

大鼠侧脑室注射１００ｎｇ精氨酸加压素（ＡＶＰ）,用ＥＬＩＳＡ法检测血中对鸡卵白 白抗原产生的ＩｇＧ抗体水平。结果显示,ＩｇＧ水平高于对照,而ＡＶＰ的Ｖ１受体阻断剂ＤＰＡＶＰ则可阻断此作用;ｉｃｖ８００ｎｇＡＶＰ,大鼠的ＳＲＢＣ溶血素 水平高于对照;ｉｃｖ１００ｎｇ、８００ｎｇＡＶＰ２ｈ后,脾淋巴细胞对ＭＴＴ产生的颜色反应均比对照增加,而ＤＰＡＶＰ可阻断之;ｉｃｖ８００ＡＶＰ２ｈ后,脾淋巴细胞对ＭＴ     

牙龈紫质单胞菌内毒素对成纤维细胞和牙龈组织的侵入及损害

应用免疫组化方法证实５６０％的成年人牙周炎（ＡＰ）患者的牙龈组织的成纤维细胞中存在牙龈紫质单胞菌内毒素（Ｐｇ－ＬＰＳ）,正常的牙龈组织样本无一例阳性。以免疫胶金技术发现Ｐｇ－ＬＰＳ在５ｍｉｎ内即能侵入体外培养的小鼠成纤维细胞,至６０ｍｉｎ时可在细胞核内检出Ｐｇ－ＬＰＳ。Ｐｇ－ＬＰＳ检测阳性的小鼠成纤维细胞和ＡＰ患者牙龈组织的成纤维细胞的可出现相似的内质网扩张、膜旁核糖体颗粒脱落、线粒体的外膜或嵴消失等超微结构病变。实验结果表明,Ｐｇ－ＬＰＳ是ＡＰ的主要致病因子之一。     

苹果果实组织脱落酸结合位点的亚细胞定位

在苹果（ＭａｌｕｓｐｕｍｉｌａＭｉｌ）果实细胞的可溶性组分中存在ＡＢＡ特异结合位点,这些位点能与ＡＢＡ形成稳定的３ＨＡＢＡ蛋白结合复合物,而微粒体部分未表现出３ＨＡＢＡ结合活性。可溶性组分对３ＨＡＢＡ的结合效率与结合稳定性需要活体组织完整细胞的存在。ＡＢＡ共价交联物ＡＢＡＬＹＣＨ,具有与ＡＢＡ相同的抑制红苋菜（ＡｍａｒａｎｔｈｕｓｔｒｉｃｏｌｏｒＬ．）种子萌发的生物活性,能有效地竞争抑制果实组织圆片对３ＨＡＢＡ的结合。通过ＡＢＡＬＹＣＨ对苹果果实组织圆片及果实组织游离细胞的荧光染色表明,未成熟果实的细胞外周被特异性地染色。在ＢＳＡ存在的情况下,ＡＢＡＬＹＣＨ复合物被转运进细胞,形成密集的强烈荧光团。结果表明,ＡＢＡＬＹＣＨ与３ＨＡＢＡ的竞争性结合发生在细胞质膜水平。     

抗真菌多肽APS-1的分离纯化与特性

蜡状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）Ｓ１菌株对多种作物真菌性病害有良好的防效。本文报道了Ｓ１菌株产生的抗真菌物质的纯化及其部分特性。该菌株的发酵液经过酸沉淀和有机溶剂抽提、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００与ＤＥＡＥ５２柱层析等步骤后,抗真菌物质得到纯化,硅胶薄层层析显色为单点。该物质在２７５ｎｍ处有吸收峰,对蛋白酶有一定耐受性,茚三酮反应呈阴性,但酸水解后,茚三酮反应呈阳性,双缩脲反应也呈阳性。氨基酸组分分析结果表明,该物质由谷氨酸、天门冬氨酸、酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和一种异常氨基酸组成。推测该物质为一种环状多肽,命名为ＡＰＳ１。紫外光照射和高压灭菌处理后,ＡＰＳ１的抗真菌活性损失不大。平板抑菌试验结果表明,ＡＰＳ１对９种供试真菌的孢子萌发有抑制作用,其完全抑制浓度因真菌种类不同而有差异     

碱性磷酸酶标A蛋白加强的PAP技术

本文介绍一种碱性磷酸酶标Ａ蛋白加强的ＰＡＰ技术。采用ＰＡＰ技术、碱性磷酸酶标Ａ蛋白（ＰＡＡＰ）技术ＰＡＡＰ和加强的ＰＡＰ（ＰＡＰ－ＰＡＡＰ）技术显示下丘脑室旁核催产素（ＯＴ）能神经元。结果发现,其中使用ＰＡＰ－ＰＡＡＰ技术免疫反应产物的显色最深。此技术的原理可能是,由于Ａ蛋白分子至少有四个位点能与ＩｇＧ分子的Ｆｃ段高亲合性地结合,故在该技术中,先经过ＰＡＰ程序的三步免疫反应并显色后,每个与一抗结合的二抗分子上和每个与二抗结合的ＰＡＰ复合物分子上各暴露一个能与Ａ蛋白分子结合的Ｆｃ段,在随后经过ＰＡＡＰ技术处理时,部分ＰＡＡＰ复合物分子就结合在这些Ｆｃ段上,经显色后,ＰＡＡＰ技术显示的浅紫兰色与ＰＡＰ技术显示的浅棕褐色重叠,变成更深的反差明显的深棕褐色。     

抗真菌多肽APS—1的分离纯化与特性

蜡状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）Ｓ１菌株对多种作物真菌性病害有良好的防效。本文报道了Ｓ１菌株产生的抗真菌物质的纯化及其部分特性。该菌株的发酵液经过酸沉淀和有机溶剂抽提、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００与ＤＥＡＥ５２柱层析等步骤后,抗真菌物质得到纯化,硅胶薄层层析显色为单点。该物质在２７５ｎｍ处有吸收峰,对蛋白酶有一定耐受性,茚三酮反应呈阴性,但酸水解后,茚三酮反应呈阳性,双缩脲反应也呈阳性。氨基酸组分分析结果表明,该物质由谷氨酸、天门冬氨酸、酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和一种异常氨基酸组成。推测该物质为一种环状多肽,命名为ＡＰＳ１。紫外光照射和高压灭菌处理后,ＡＰＳ１的抗真菌活性损失不大。平板抑菌试验结果表明,ＡＰＳ１对９种供试真菌的孢子萌发有抑制作用,其完全抑制浓度因真菌种类不同而有差异     

纯化光系统Ⅱ（PSⅡ）核心天线复合物CP43和CP47的共振拉曼光谱

采用ＤＥＡＥ－ＦｒａｃｔｏｇｅｌＴＳＫ６５０Ｓ阴离子交换树脂柱层 从菠菜中分离纯化了ＰＳⅡ核心天线复合物ＣＰ４３和ＣＰ４７。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ）检测结果表明,纯化的ＣＰ４３和ＣＰ４７均只含１条蛋白带,证明样品纯度的可靠性。其常温（４６０－５００ｎｍ）较ＣＰ４３具有明显的精细结构。同时测定了它们的常温共振拉曼光谱,可以看出;类似于全反式构型的β－ｃａｒｏｔｅｎｅ分子,ＣＰ４３和ＣＰ