三种鼠科动物血浆超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶以及血浆蛋白成分的比较分析

本文利用SOD和LDH在一块凝胶板上同时显色的优点,电泳分析黑线姬鼠(Apodemus agrarius)、褐家鼠(Rattus norvegicus),黄胸鼠(Rattus flavipectus)血浆SOD和LDH同工酶以及血浆蛋白成分。结果表明,LDH为有色区带,SOD为无色透明区带,而且SOD比LDH泳动快,两类区带互不重迭,以致3种鼠血浆中SOD和LDH的图谱清晰可辨。由于黑线姬鼠的SOD和LDH的泳动度不同于其余2种鼠,周此3种鼠的图谱各具特征。3种鼠血浆蛋白中的前清蛋白和铁传递蛋白区带数和泳动度亦具有明显差异,说明上述酶分子亚基和血浆蛋白分子的化学结构不同,成为种间差异在分子水平上典型的表现。     

六种鼠乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶位点变异的研究

用电泳比较分析了鼠科动物６个种的组织ＬＤＨ同工酶的Ａ、Ｂ、Ｃ亚基和ＳＯＤ同工酶位点的种属差异。结果表明,ＬＤＨ的Ａ和Ｂ亚基在进化上的可变性程度不同。在被分析的２个属共６种鼠中,首次发现Ｂ亚基的结构具有属的特征,同属的鼠种Ｂ亚基泳动度相同,在垂直凝胶电泳板上处于同一泳动线上。不同属的鼠其Ｂ亚基泳动度不同,家鼠属的鼠Ｂ亚基比姬鼠属的泳动快;Ａ亚基的结构既有属的特性,更具有种的特征,同属不同种的鼠Ａ亚基泳动速度不同,表现为ＬＤＨ同工酶带的间距不同。ＬＤＨ的Ｃ亚基结构因鼠种不同而异,由Ｃ亚基组成的ＬＤＨ－Ｘ带黄毛鼠位于自身的ＬＤＨ－３和ＬＤＨ－４之间,社鼠和褐家鼠此带位于自身的ＬＤＨ－４和ＬＤＨ－５之间,白腹巨鼠此带位于自身的ＬＤＨ－５以外的阴极端,与黑线姬鼠此带的位置特征相同。ＳＯＤ同工酶带只表现种的差异,其３条带泳动速度的改变具有协同而变的共同特点。被分析的鼠种经配对法比较生化特征的相同程度,初步表明黄毛鼠亲缘上与褐家鼠比较近,白腹巨鼠亲缘上又比其余３种鼠更近于姬鼠属。     

六种鼠苹果酸脱氢酶,血浆蛋白质和血红蛋白的变异分析

本文分析了家鼠属（Ｒａｔｔｕｓ）４种鼠和姬鼠属（Ａｐｏｄｅｍｕｓ）２种鼠的苹果酸脱氢酶、血浆中β１区和β２区蛋白质、血浆清蛋白、前清蛋白以及红细胞中血红蛋白的变异。结果表明,ＭＤＨ在进化上是比较保守的,其中ＭＤＨｍ和ＭＤＨｓ２带在各鼠间位于同一泳动线上,仅ＭＤＨｓ１带的泳动速度出现属间和种间的微小差异;血浆中β１区和β２区的蛋白质带、清蛋白带以及前清蛋白带各鼠间出现明显的变异,表现为黑线姬鼠和社鼠在β１区出现２种多态型区带,褐家鼠在β２区也有２种多态型带;各鼠间的血红蛋白变异比较明显,主要表现在区带数和主成分的泳动度显著不同,而且社鼠的Ｈｂ出现３种多态型,黄毛鼠出现２种多态型,其余各鼠的Ｈｂ皆为单态性。上述１６项生化特性按相似和相异进行配对比较,初步表明黄毛鼠与褐家鼠亲缘上比较相近,白腹巨鼠要比其他３种鼠亲缘上更接近于黑线姬鼠,而社鼠与白腹巨鼠之间进化分歧相对地较大。     

高原鼠兔和高原鼢鼠乳酸脱氢酶同工酶的初步研究

比较异种生物同工酶(Isoenzyme)能从分子水平阐明物种的多样性。近年来,不少学者对许多动物的同工酶进行广泛而深入的研究(Masters 1975,Markert,1975)。其中对乳酸脱氢酶(以下简称LDH)的研究最为详尽(Everse等,1973,Moss,1982)。乳酸脱氢酶同工酶是由H(或B),M(或A)2种亚基组成的一组四聚体分子。H,M亚基分别受不同基因位点控制,并按不同比例组成5种不同的同工酶。     

高原鼠兔组织中精子特异性乳酸脱氢酶的作用机理

高原鼠兔Ochotona curzoniae具有很强的高原低氧适应能力。前期研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)在高原鼠兔体细胞中表达。为阐明LDH-C4在高原鼠兔组织中的作用机理,应用RNA干扰技术沉默高原鼠兔心肌、肝脏和脑组织中的Ldh-c基因;应用荧光定量PCR和Western Blot方法,测定Ldh-c基因在心肌、肝脏和脑组织中的表达水平;应用生物化学方法测定沉默Ldh-c基因后,心肌、肝脏和脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP的含量。结果表明,腹腔注射腺病毒p MultiRNAi-Ldhc能极显著降低高原鼠兔组织中Ldh-c基因的表达水平,在mRNA和蛋白水平,心肌中Ldh-c基因的表达分别下降48.11%和19.27%;肝脏中Ldh-c基因的表达分别下降70.16%和25.82%;脑中Ldh-c基因的表达分别下降49.08%和25.36%。沉默Ldh-c基因表达后,高原鼠兔心肌、肝脏和脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP的含量也显著降低,分别下降25.58%、41.94%和21.23%,28.16%、15.90%和24.66%以及16.65%、12.78%和18.50%。这些结果说明,高原鼠兔在低氧环境中,其心肌、肝脏和脑组织通过LDH-C4催化无氧糖酵解获得部分ATP,增强对低氧环境的适应能力。     

高原鼠兔乳酸脱氢酶同工酶对低氧环境的应答

用聚丙酰胺凝胶薄层电泳和紫外光谱法,研究与分析高原鼠兔(Ochotona curzoniae)在天然及模拟低氧条件下,心脏、肝脏、肾脏及骨骼肌4种组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的酶谱和其酶活力的变化。     

高原鼢鼠、鼠兔及大鼠心肌和骨骼肌乳酸脱氢酶活力及同工酶谱

为了探讨高原鼢鼠和鼠兔的低氧适应机理,用紫外分光光度法测定了高原鼢鼠、鼠兔及大鼠心肌和骨骼肌乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)的活力,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离了LDH同工酶.结果显示:鼢鼠、鼠兔、大鼠心肌LDH活力分别为16.90±2.00 U/mg pro,20.55±2.46 U/mg pro,38.26±6.78 U/mg pm,鼢鼠和鼠兔差异不显著(P>0.05),大鼠与鼠兔差异显著(P<0.05),大鼠与鼢鼠差异极显著(P<0.01);骨骼肌LDH活力,鼢鼠、鼠兔、大鼠分别为39.34±3.74 U/mg pro,78.33±9.54 U/mg pro,67.80±10.89 u/mg pr0,大鼠和鼠兔差异不显著(P>0.05),二者均极显著高于鼢鼠(P<0.01).高原鼠兔与鼢鼠LDH同工酶M亚基的迁移率较为相近,而H亚基差别较大;鼢鼠和大鼠H亚基的迁移率较为相近,而M亚基差别较大.鼢鼠和鼠兔心肌LDH同工酶亚基组成以H亚基为主,M亚基含量较低,而骨骼肌LDH同工酶亚基组成以M业基为主,H业基含量较低.大鼠心肌和骨骼肌LDH同工酶H亚基和M亚基含量均很丰富.说明高原鼢鼠和鼠兔虽然生活在极其缺氧的环境中,但它们的组织并不缺氧;高原鼢鼠和鼠兔以不同的策略适应高原缺氧.     

不同海拔牦牛骨骼肌中乳酸脱氢酶三种亚基基因表达的比较

为了阐明高原低氧对牦牛（Bos mutus）骨骼肌中乳酸脱氢酶（LDH）三种亚基基因（LDHA、LDHB和LDHC）表达的影响,本实验分别选取高海拔（4 200 m）、中海拔（3 200 m）和低海拔（1 900 m）三个海拔位置养殖的临床健康成年雄性牦牛各5头,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测牦牛骨骼肌中LDH三种亚基基因的m RNA表达和蛋白表达水平。结果表明,随海拔的升高,牦牛骨骼肌中LDHA m RNA的表达逐渐下降;LDHB m RNA先降低后升高,在高海拔组牦牛中表达最高,相对表达量为2.82±0.12,与低海拔组（1.01±0.07）、中海拔组（0.73±0.06）牦牛LDHB mRNA表达量差异显著（P <0.05）;LDHC mRNA的表达量随海拔的升高呈下降趋势,且低海拔组（1.10±0.16）、中海拔组（0.86±0.16）、高海拔组（0.69±0.12）组间两两相比均差异显著（P <0.05）。LDHA和LDHC蛋白表达量随海拔的升高呈下降趋势,且LDHA蛋白表达量在低海拔组（1.00±0.00）、中海拔组（0.88±0.0...     

高原鼠兔脑组织中精子特异性乳酸脱氢酶的作用

高原鼠兔对高原低氧环境有很强的适应性。研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)基因在高原鼠兔脑组织中表达,为阐明LDH-C4在高原鼠兔脑组织中的作用,应用荧光定量PCR和Western blot方法,测定了Ldh-c基因在高原鼠兔脑组织中的表达水平;应用对精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)特异性的抑制剂(N-isopropyl oxamate),通过肌肉注射后,研究抑制剂对高原鼠兔脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP含量的影响。结果表明,在mRNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔脑组织中均有表达,相对表达水平分别为0.38±0.05和0.74±0.13;当肌肉注射1 m L 1 mol/L的抑制剂30 min后,血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L;与对照组相比,抑制剂组脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP含量显著下降,抑制剂对LDH、乳酸和ATP的抑制率分别为30.78%、46.47%和21.04%。结果表明,精子特异性乳酸脱氢酶基因在高原鼠兔脑组织中表达。LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为其脑组织生命活动提供至少20%的ATP,可能使高原鼠兔减小在低氧环境中对氧气的依赖,增强对低氧环境的适应能力。     

三种胡子鲶及其杂种F1的乳酸脱氢酶同功酶的比较研究

垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱揭示所有实验鱼的LDH-A_4均表现相同的迁移率,革胡子鲶的LDH-B_4比另两种的迁移较缓慢。胡子鲶和斑点胡子鲶具有五条由A、B座位编码的LDH谱带,且其迁移位置对应相同;革胡子鲶则只有三条LDH酶带。全部实验鱼的肝组织、斑点胡子鲶和革胡子鲶的脑组织存在靠近阴极的酶带,杂种斑点胡子鲶×胡子鲶的LDH与双亲的相问,而杂种胡子鲶×革胡子鲶、斑点胡子鲶×革胡子鲶则显示一些由来自双亲的基因编码的杂合带。利用LDH的表型差异对三种鱼的进化关系、遗传特性和杂交育种问题进行讨论。     

超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶在凝胶板上同时显色的方法

本文报道一种能使乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶在同一块电泳凝胶板上经同一种染色液一次处理达到同时显色的方法。显色结果,LDH为有色区带,SOD为无色透明区带,两者一目了然。而且前者泳动慢,后者泳动快,两种区带互不重迭,不发生干扰,结果可靠。此法不需光照,显色效率高,有利于同一样品同时进行此两种同工酶的电泳分析,达到一举两得的效果。     

高原鼢鼠和高原鼠兔骨骼肌糖酵解和肝脏乳酸代谢的差异(英文)北大核心CSCD

高原鼠兔(Ochotona curzoniac)和高原鼢鼠(Myospalax baileyi)是青藏高原地区特有的土著动物。本文旨在探讨高原鼠兔和高原鼢鼠骨骼肌糖酵解和肝脏乳酸代谢的不同生理机制。我们克隆出两种动物肝脏中的丙酮酸羧化酶(pytuvate carboxy-lase,PC)基因的部分序列;应用real-timePCR法测定两种动物肝脏和骨骼肌中PC、LDH-A和LDH-BmRNA的表达水平;使用苹果酸偶联法测定肝脏中PC酶活力,并测定两种动物骨骼肌和肝脏中乳酸含量、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力;用聚丙烯酰胺凝胶电泳观察肝脏和骨骼肌LDH同工酶谱。结果显示:(1)高原鼢鼠骨骼肌LDH-BmRNA的表达量极显著高于高原鼠兔(P<0.01),而LDH-AmRNA的表达量没有差异(P>0.05);(2)高原鼠兔肝脏中PC、LDH-A和LDH-BmRNA的表达量都极显著高于高原鼢鼠(P<0.01);(3)高原鼠兔肝脏和骨骼肌中LDH和乳酸含量以及肝脏中PC活力均极显著高于高原鼢鼠(P<0.01);(4)LDH同工酶谱显示,高原鼠兔骨骼肌以LDH-A4、LDH-A3B、LDH-A2B2为主,而高原鼢鼠骨骼肌以LDH-AB3、LDH-B4为主;在高原鼠兔肝脏中LDH以LDH-A3B,LDH-A2B2,LDH-AB3和LDH-B4为主,而高原鼢鼠肝脏只有LDH-A4。以上结果表明,高原鼠兔通过提高骨骼肌无氧糖酵解的水平为其快速奔跑提供能量,通过提高肝脏中糖异生水平快速将骨骼肌运动所产生的乳酸转化为葡萄糖和糖原,所以减少了在低氧环境中对氧的依赖,而高原鼢鼠尽管生活在低氧的地下洞道,它通过提高骨骼肌有氧糖酵解的水平,为其持续的挖掘活动提供能量。     

七种鼠科啮齿动物消化道长度和重量的比较

测定浙江省金华地区7种鼠科啮齿动物的总消化道及各消化器官的长度和重量,与其食性和生境作比较,旨在检测近缘种之间消化道长度和重量的差异,家栖种类与野栖种类消化道形态的差异,野外捕获动物带回实验室处死,解剖分离消化道为胃,小肠,盲肠和大肠,精密直尺测定各器官的平展长度,纵剖肠道,生理盐水冲净内容物,65℃恒温干燥后称得干重,研究结果表明,消化道长度的种间差异明显大于消化道重量的种间差异;盲肠和大肠长度的种间差异明显大于小肠长度的种间差异,植食性野栖种类的胃,盲肠和大肠大于杂食性家栖种类,而两类动物小肠长度的差异不明显。     

饥饿对小鼠脑组织中转氨酶、肌酸激酶、乳酸脱氢酶和热休克蛋白70的影响

饥饿处理小鼠1～3天,分别检测脑组织中转氨酶、肌酸激酶、乳酸脱氧酶和HSPT0的变化.结果表明,谷丙转氨酶在饥饿1～3天有逐渐增高的趋势;谷草转氨酶在饥饿1～2天明显升高,但饥饿3天后迅速下降;在正常脑组织中,肌酸激酶的活性较强,饥饿1天后迅速下降,2～3天维持在较低水平;乳酸脱氢酶和HSP70受饥饿影响明显升高.