快速测定染色体损伤的微核测定法——Ⅱ.微核测定法评价胱胺对染色体辐射损伤防护效果的研究

微核测定法证明,胱胺对受照射大鼠的血液淋巴细胞和骨髓有核细胞染色体的辐射损伤有明显的保护作用,其剂量减低系数(DRF)分别为1.89和1.81。此法同传统方法所测得胱胺的防护效果相近似。     

快速测定染色体损伤的微核测定法 Ⅰ.电离辐射对哺乳动物血液中淋巴细胞微核率的影响

本文介绍了用明胶-离心法分离和浓缩血液中淋巴细胞而后制片观察分析其微核出现率,并以此来测定染色体损伤的新方法。应用这种方法测定了大鼠受Co~(60)-r射线照射的剂量-效应和时间-效应;还对受265拉特照射后活存狗的远期效应进行观察。结果表明,与骨髓有核细胞微核测定以及染色体畸变分析的结果是一致的。本文还对其应用价值作了初步的讨论。     

当归多糖对辐射损伤小鼠骨髓单个核细胞凋亡的影响

目的探讨当归多糖(Angelica polysaccharides,APS)对辐射损伤小鼠骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclear cell,BMNC)凋亡的影响,旨在阐明APS对辐射性造血损伤保护作用的分子机制。方法结果结论方法 C57BL/6小鼠随机分为10组,正常组不作任何处理,其余9组经X射线(4.0Gy)照射后分别给予不同剂量APS或生理盐水,并于照射后第1、3、7d处死小鼠,流式细胞术检测BMNC凋亡率、Bcl-2表达率,Western Blot法(WB)检测P53蛋白、Caspase-3蛋白的表达。结果与正常组相比,生理盐水组BMNC凋亡率、P53蛋白、Caspase-3激活片段(12+17KD)的表达升高,Bcl-2及Caspase-3全长片段(35KD)的表达降低。与生理盐水组相比,2mg/kg APS组和8mg/kg APS组均能降低凋亡率,P53蛋白及Caspase-3激活片段的表达,升高Bcl-2和Caspase-3全长片段的表达。结论 APS对辐射引起的细胞凋亡具有一定的保护作用。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究 Ⅲ.丝裂霉素c诱发人淋巴细胞染色体畸变与不同周期阶段的微核形成

为了研究染色体畸变与微核形成的关系,本实验用不同浓度的丝裂霉素C(MMC,0.025—0.4μg/ml),处理人外周血淋巴细胞,观察中期染色体畸变与不同细胞周期形成的微核间的关系。获得如下主要结果:(1)MMC诱发的染色体畸变细胞率(ACF),未经培养的G_0期淋巴细胞的微核细胞率(NC-MNCF)以及培养的淋巴细胞的微核细胞率(C-MNCF),在一定剂量范围内均呈剂量依赖性增加,并可用幂回归方程描述;(2)微核形成与染色体畸变全然无关的NC-MNCF,和C-MNCF一样,与ACF呈良好的正相关;(3)用胞质分裂阻滞(CB)法,检测MMC诱发的CB-MNCF,较C-MNCF无显著提高,MNCF/ACF的比值较小,并随着MMC剂量增加从0.15左右降到0.03。所有上述结果表明,不能简单理解微核形成与染色体畸变间的关系,在分裂的细胞群体中,中期染色体畸变可能仅是微核形成的一种来源。     

微波辐射对小白鼠的生物效应研究 Ⅲ.对角膜细胞染色体的影响

随着微波技术在工业、国防、医疗、通讯等部门的广泛应用和空间电磁强度的不断增加,微波辐射已成为危害人们身体健康的一种因素,联合国人类环境会议已把微波列入必须控制的造成公害的主要污染物之一。关于首先微波导致人眼损害的研究,最早是由Hirsch在1952年报道:一名雷达技术工人,在1500—3000MHz频段,功率密度100亳瓦/厘米~2下工作一年后,发现二侧性白内障。此后,不少研究者表明,大强度暴露导致人眼晶状体混浊,患白内障发生。1978年YaO,K.T.S曾报道微波辐射对中国田鼠角膜上皮细胞染色体的影响,而国内至今未见有这方面的报道。我们用微波照射小白鼠角膜细胞,并就微波辐射对其染色体的影响作初步探讨。     

核酸碱基组成分析方法的研究 Ⅲ.脱氧核糖核酸嘌呤和嘧啶衍生物直接分光光度测定法

利用核碱在一定pH条件下产生构并表現出不同的紫外綫吸收的特点,本文提出了一种測定提純DNA核碱組成的直接分光光度的方法,测定方法簡易,测定时間远較其他測定方法为短,A,G,C,T四种核碱的回收率为94—106%。     

以细胞遗传学方法评价辐射防护药的新程序 Ⅱ.评价辐射防护药对狗防护效果的新方法——照射狗骨髓有核红细胞微核测定

我们的工作表明,小鼠骨髓有核细胞微核测定对辐射防护药的筛选是一个灵敏、简便的新指标。在辐射防护药研制第二阶段——用大型实验动物验证效价时,微核测定方法是否仍然适用,这是一个需要进一步研究的问题。通常,我们是以致死剂量或亚致死剂量照射狗的30天活存率为主要指标,辅以某些血液学指标如白细胞总数测定和急性放射病临床症状观察等,然后对辐射防护药的效价加以综合的评价。但这些指标有的生理波动比较大,有的观察时间较长,有的有明显的个体差异。因此寻找灵敏、简便、生物学意义比较明确的新指标有其一定的意义。染色体畸变分析在一定程度上可以满足上述要求,但方法繁杂,不适合大规模动物实验的实际需要,而且常用的实验动物狗的核型特点是染色     

工业废水诱发的洋葱根尖细胞有丝分裂染色体畸变与微核的测定

用工业废水对洋葱根尖染毒,对其诱发的根尖细胞有丝分裂期染色体畸变、微术是定表明,处理样品有丝分裂过程中存在着大量的畸变类型,主要表现为多极分裂、染色体桥、染色体片段、滞后染色体以及微核的产生。     

以细胞遗传学方法评定辐射防护药的新程序——Ⅰ.小鼠骨髓有核细胞微核测定筛选辐射防护药的研究

长期以来,在辐射防护药的筛选实验中,一直沿用以全致死或50％致死剂量照射的小鼠作为筛选模型,以照后30天活存率为评定指标。虽然死亡率是较客观,也是较易观察的指标,但费时,需要的动物数量多,还易受一些外界因素诸如气候、季节、营养等等的影响。对于一些防护效价较低的化合物,往往不易得出确定的结论。因此寻找简易、快速、灵敏与死亡又有较好相关性的评定指标,就成为研究辐射防护药的一项重要课题。     

以细胞遗传学方法评价辐射防护药的新程序 Ⅲ.以整体给药、离体照射的人类淋巴细胞染色体畸变评价胱胺的辐射防护效果

在辐射防护药的临床过渡工作中,根据动物实验结果推算人体试用效价,由于临床上不可能找到合适的急性放射病人来进行验证,如何肯定其对人类的真正防护效果,仍是一个急待解决的问题。 在目前采用的两种评定模型中,即离体照射的外周淋巴细胞体系和放射治疗的肿瘤病人,常以淋巴细胞染色体畸变率作为指标来评定辐射防护药的人体防护效果。由于这     

黄精属细胞分类学研究——Ⅲ.国产6种黄精的染色体数目和核型

本文对国产6种黄精的染色体数目和核型进行了研究,结果为:康定玉竹2n=28=6m+8sm+14st;狭叶黄精2n=30=12m+12sm+6st;毛筒玉竹2n=22=6m+6sm+10st;大苞黄精2n=22=4m+12sm+6st;轮叶黄精有两种细胞型,分别为2n=54和2n=58;点花黄精2n=90;此外,在部分类群中还发现有明显的杂合现象。作者通过与现有资料进行对比,对各类群染色体数目和结构变异的特点和机制进行了初步分析。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅰ.人体全血辐射处理后不同放置和培养时间对微核率的影响

本报告应用γ-射线诱发微核、放射性自显影等技术分析细胞周期,研究淋巴细胞微核形成与细胞周期间的定量关系。主要结果如下:(1)经400rad照射的静脉血,在室温下放置1.5小时,或在37℃下放置5小时,此时淋巴细胞属G_0期。和照射前相比,两组微核率均显著增加(P<0.01)。(2)照射静脉血经pHA刺激培养23—24小时收获细胞,此时转化淋巴细胞应属G_1期,分别计数转化和未转化(G_0期)淋巴细胞微核,与照射前未培养淋巴细胞相比有显著增加(P<0.01)。(3)400rad照射静脉血培养72小时后,淋巴细胞微核较培养前增加14.5倍。根据放射性自显影等细胞周期分析结果表明,微核在细胞周期各阶段均可形成。     

离体培养癌细胞的微核研究——8MV X线诱发HeLa细胞微核-剂量效应

应用微核测定法研究了8MV X线诱发HeLa细胞微核-剂量效应。结果表明,无论是微核细胞率还是微核率,在0—7Gy范围内与照射剂量呈直线关系。以最小二乘法进行迥归运算,二者皆符合直线模式y=a+bD,回归系数分别为2.1969;3.4522和1.823;4.6598(r=0.9924,0.9934)。     

多色荧光原位杂交对昆明山海棠和丙烯酰胺诱发微核染色体组成的研究

采用着丝粒和端粒DNA探针多色荧光原位杂交,分析了昆明山海棠和丙烯酰胺诱导的 NIH3T3细胞微核的染色体组成。结果表明,昆明山海棠和丙烯酰胺诱导的由整条染色体组成的微核分别可达70.7％和65.9％,提示昆明山海棠和丙烯酰胺均有较强的非整倍体毒性。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅱ.微核形成的放射性自显影和显微形态学研究

本报告应用γ-射线处理、PHA刺激,放射性自显影等方法研究了微核在人淋巴细胞各周期阶段形成的形态学证据。结果表明,经体外照射的人体外周血,在其间期淋巴细胞各阶段:G_0、G_1、S和G_2期,均可有微核形成,并观察到微核形成的中间过程,核变形,核物质膨出并延伸,中间连丝断裂或在细胞质中消失,与主核完全脱离后微核形成。在有丝分裂中,后期细胞也观察到无着丝点染色体断片和落后染色体,它们有可能形成微核。这样看来,细胞周期各阶段均可能形成微核。作者还观察到胞外微核的形成,并认为它的增多可能是一种病理现象。     

正丁酸钠对人胃腺癌细胞染色体数目和DNA含量的影响

培养的人胃腺癌MGc 80-3细胞经过正丁酸钠处理7天后,生长抑制率达50.7%,约有90%的细胞形态发生分化,其超微结构亦有显著改变。而且,在染色体数目上,超二倍体细胞由对照组的78%增加到实验组的96%,超三倍体和超四倍体细胞则分别从6%和14%下降至2%。同时应用~3H-TdR放射自显影和福尔根细胞光度法测定未标记细胞(G_1期)DNA含量,结果显示实验组比对照组降低了。而且在实验组的同一制片中,未分化细胞DNA含量平均为超六倍体值(DI=3.67和3.56),其中90%的细胞超过6C;分化细胞DNA含量则平均为近四倍体值(DI=2.03和1.99),其中近60%的细胞少于4C。两者差异统计显著,表明形态分化的人胃腺癌细胞的遗传物质含量明显减少,但这些细胞并非就是正常二倍体细胞。