丙型肝炎病毒

<正>1989年,美国Chiron公司在世界上率先克隆了引起非甲非乙型肝炎的丙型肝炎病毒(HCV)的基因片段,并由此开发了C100-3抗体检测系统。1990年,冈本等人发现HCV结构基因中含有5＇非编码区(5＇noncoding region),从而使HCV的基因组成、分子生物学活性及免疫化学方面的抗原决定基等研究迅速进展,从临床及基础研究两方面逐渐搞清楚了其全貌。本文仅简述用PCR法诊断HCV基因组的过程。     

细胞内丙型肝炎病毒抗原,基因组及病毒颗粒的检测及分析

本文简单介绍了细胞内丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原、基因组及病毒颗粒的检测情况,并对体内肝细胞及体外培养的淋巴细胞中ＨＣＶ颗粒的检测进行了分析。     

丙型肝炎病毒的感染特点

１９８８年非甲非乙型肝炎病毒被命名为丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）,随后建立了血清学诊断方法和更特异的免疫杂交和多聚酶链反应（ＰＣＲ）法。感染ＨＣＶ后病人多呈慢性过程,可导致肝硬化及肝癌。ＨＣＶ主要经胃肠道外传播,静脉药瘾者为高危人群,性传播、家庭内密切接触和母婴传播不占重要地位。治疗可用ＩＦＮ－α,但易复发。ＨＣＶ感染后免疫保护作用差,尚无疫苗可用。     

PCR与ELISA检测丙型肝炎病毒的比较

ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ检测丙型肝炎病毒的比较李京培王明丽史百芬陆应玉（安徽医科大学２３００３２）丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染后,患者血清中可以检测其特异的核酸序列ＨＣＶ－ＲＮＡ和抗－ＨＣＶ等。目前国内临床大多数ＨＣＶ的实验室诊断主要依靠抗ＨＣＶ－ＩｇＧ检查,但急性期抗体检出率仅能达到６０％（３７．６～８２．８％）,部分病例可呈阴性反应［１］。说明用ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＶ有相当部分漏检,不能发现早期患...     

NASBA荧光分子信标技术定量检测丙型肝炎病毒

建立NASBA荧光分子信标探针检测技术,并对国家HCV标准品、人工构建HCVRNA野生株及HCV抗体阳性不同人群进行检测。实验结果:该方法检测HCV的灵敏度为103拷贝ml血清,阴性参比品的符合率为100%;检测的线性范围为103拷贝～109拷贝ml血清;精密性(CV值)小于6%,在HCV抗体阳性人群中HCVRNA的检出率在45%～65%之间。结论:该方法在HCVRNA临床定量检测中具有良好的灵敏度、特异性、重复性与实用性。     

丙型肝炎病毒感染标志检测临床意义的研究现状

随着丙型肝炎病毒分子生物学研究的深入，相继建立了多种ＨＣＶ感染标志的检测方法。本文就ＩｇＧ抗－ＨＣＶ，ＨＣＶＲＮＡ和ＩｇＭ抗－ＨＣＶ检测在丙型肝炎诊断，预后估计及抗病毒药物疗效评价方面的意义作简要综述。     

丙肝病毒IgM抗体检测方法的初步研究

选择东燃公司的重组结构区和非结构区抗原建立的抗ＨＣＶ－ＩｇＭ检测方法,简便、快速、特异性强、重复性好、敏感性高。只在丙肝病人组检出而健康献血员均为阴性,与抗ＨＡＶ、ＨＢＶ的ＩｇＭ抗体无交叉反应,且排除了ＲＦ干扰和ＩｇＧ占位引起的假阳性和假阴性,适用于抗ＨＣＶ－ＩｇＭ的临床检测。对２４例丙肝病人的抗ＨＣＶ－ＩｇＭ检测结果显示,急性丙肝病人血清抗ＨＣＶ－ＩｇＭ检出率较高（７５％,６／８）,且随ＡＬＴ正常而消失或滴度下降。慢性病人抗ＨＣＶ－ＩｇＭ检出率为５６．３％（９／１６）,其中７例ＩｇＭ持续阳性者为慢性活动性丙肝,说明慢性病人抗ＨＣＶ－ＩｇＭ与疾病的活动性密切相关。结果提示抗ＨＣＶ－ＩｇＭ的检测在急性肝炎的诊断及慢性丙肝的预后和转归上具有临床意义。     

用RFLP和PCR—RFLP技术研究东北虎和华南虎线粒体DNA多态性

采用ｍｔＤＮＡＲＦＬＰ和ＰＣＲＲＦＬＰ技术研究了东北虎和华南虎的ｍｔＤＮＡ的多态性。在ｍｔＤＮＡＲＦＬＰ研究中,分离纯化了东北虎和华南虎肝、肾和心脏组织的ｍｔＤＮＡ,用２０种识别６碱基对的限制性内切酶消化,结果只有１种限制性内切酶（ＸｂａⅠ）检测到多态性片段,其余１９种限制性内切酶消化产生的限制性格局在东北虎和华南虎完全一致。在ＰＣＲＲＦＬＰ研究中,用ＰＣＲ技术分别扩增了东北虎和华南虎ｍｔＤＮＡ的控制区（ｃｏｎｔｒｏｌｒｅｇｉｏｎ）,用８种识别４碱基对的限制性内切酶分别对扩增产物进行消化,结果只有１种限制性内切酶（ＲｓａⅠ）检测到多态性片段。ｍｔＤＮＡＲＦＬＰ及ＰＣＲＲＦＬＰ的结果均提示东北虎和华南虎之间的遗传距离极小。这可能与下列因素有关：两者分布区间无天然隔离屏障;具有强扩散能力;近几百年才被相互隔离。     

PCR－ELISA在检测血清中丙型肝炎病毒上的应用

建立了一个替代目前使用的套式ＰＣＲ的血清中丙型肝炎病毒ＲＮＡ检测的新方法。该方法只需经过一次ＰＣＲ扩增,即可通过对掺入标记物的ＰＣＲ产物的ＥＬＩＳＡ检测得到与套式ＰＣＲ相同的结果。与套式ＰＣＲ相比,该方法具有耗时少、易操作、较少产生假阳性等特点。     

Hepatitis C virus biology

Hepatitis C virus infection represents a major problem of public health with around 350 millions of chronically infected individuals worldwide. The frequent evolution towards severe liver disease and cancer are the main features of HCV chronic infection. Antiviral therapies, mainly based on the combination of IFN and ribavirin can only assure a long term eradication of the virus in less than half of treated patients. The mechanisms underlying HCV pathogenesis and persistence in the host are still largely unknown and the efforts made by researchers in the understanding the viral biology have been hampered by the absence of a reliable in vitro and in vivo system reproducing HCV infection. The present review will mainly focus on viral pathogenetic mechanisms based on the interaction of HCV proteins (especially core, NS3 and NS5A) with host cellular signaling transduction pathways regulating cell growth and viability and on the strategies developed by the virus to persist in the host and escape to antiviral therapy. Past and recent data obtained in this field with different experimental approaches will be discussed.