动物遗传工程

931461用生长滋紊甚因徽注射北方狗鱼的分子学分析及其生长估侧[英〕/Gross,M.L.…1 Aquaeulture一1992,103(3~4)一253~273[译自ANI,1992,4(10),5204〕 把小牛或Chin。。k蛀鱼生长激素cDNA注射到北方狗鱼新生受精卵里。筛选鱼鳍片组织表明,1398条推断的转基因鱼中有88条出现转基因的甚因组整合。通过血清的放射免疫检侧到1218条推断的转兹因鱼中有36条表达了受劳斯肉瘤病毒长末端重复序列转录调控的小牛生长激素转基因。用薄切片免疫组织化学检测亦发现在注射鱼鱼鳍的中胚层组织里含小牛生长激素。注射的40条鱼的6种组级进行Southern杂…     

科技期刊目录索引选

谷翻.生.李继耕:叶绿体分子遗传与遗传工程研究进展。生 物工程学报,3(l):1,一,。70刘涤:植物次生物质工业化生产研究的现况。生物工 程学报,3(一):,,一,570杨胜利:反义RNA。生物工程学报,3(l):16,t,8,。孟广展:DN^测序技术又一个新突破。生物工程学 报,3(1):20,1957。王永祥:生物传感的发展趋势。生物工程学报,3(l): 22,19870李育阳:外源荃因在醉母中表达产物的分泌。生物工 程学报,3(2):s一,l,57。注愚浩:橄生物的过沁培养及其利用.生物工程学 报,3(2):56,l,s,o李亦平等:人币干扰素结构基因的定向点突变。生 物工程学报,s(2):,o,i,。7。…     

两种不同终止子在转基因鲤鱼中的促生长效应

转基因构建体中启动子的选择会直接影响转植基因的活性, 近年来有研究表明转基因构建体中终止子的选择会一定程度地影响转植基因的活性。为了更好地筛选转基因构建体和培育快速生长的转“全鱼”生长激素(Growth hormone, GH)基因鱼, 文章用鲤鱼β-actin基因终止子和生长激素基因终止子分别构建了转基因构建体, 显微注射得到转“全鱼”GH基因鱼P0代养殖群体, 比较两种不同终止子构建体的活性。统计分析发现, 生长激素基因终止子构建体的养殖群体的体重频率呈正态分布且平均体重显著高于β-actin基因终止子构建体的养殖群体, β-actin基因终止子构建体的养殖群体的体重频率呈右倾趋势的非正态分布。值得一提的是在混合养殖组中得到一条生长最为快速的鲤鱼证实为转基因阳性且为生长激素基因终止子构建体的转基因鲤鱼。该结果表明转“全鱼”生长激素基因鲤鱼可快速生长, 并能将转植基因向下代遗传。实验结果提示生长激素基因终止子构建体比β-actin基因终止子构建体表现的促生长活性要强。     

植物遗传工程

920691外渊签因在植物中的表达方法:工程病弃的潜在利用〔英〕/Joshi,R.L.…1 FEBS Lett一1901,281(i~2)一i~s〔译自DBA,1091,10(12),91一06876〕 表达外源基因的植物病毒可能对植物生物技术相当重要。但确保防止工程病毒在环境中的扩散却是一个重要的安全向题。讨论了下列问题:1.高等植物的基因转移方法(土壤杆菌介导的基因转移以及直接基因转移);ii。应用土城杆菌介导的基因转移保护作物(除草剂抗性、病毒病抗性、抗虫性以及基因表达的修饰以改良作物),111.病毒墓因组介导的外源基因在植物中的表达(DNA病毒基因组衍生的表达载体和R…     

DNA分析与扩增

920836用盆组聚合酶链反应构建小砚全长血型.蛋白签因〔英〕/Gu,H.一厂B ioehe皿.Biophys.Res.Commun一1991,177(i)一202~208〔译自})BA,1991,10(15),91一08450〕 分别从贫血小鼠脾基因库(质粒pBR322)和小鼠基因库(质粒pUC18)中分出小鼠血型搪蛋自一A基因不完全cDNA克隆(质粒pGP315)和基因组克隆(质粒pGX7,含第一个外显子和转录起始位点附近的序列),并定序。由于缺乏构建小鼠全长血型糖蛋白一A基因的限制位点,用聚合酶链反应拼接这两部分序列克隆擂人的成分,获得全长的重组DNA片段(IO53bp,含小鼠血型糖蛋白A eDNA)。用5种DNA…     

生物防治

940725启动子改良对杀蚊crylvB基因在聚球藻品种PCC7942中表达的影响〔英〕/Soltes一Rak,E.…厂Appl.Environ.Mierobiol一1993,59(s)一2404~2410〔译自DBA,1993,12(19),93-11028〕 使。ryIVB晶体蛋白基因王在聚球藻属品种PCC7942中表达最佳。制备了三种质粒,其中苏云金芽抱杆菌     

疫苗

890948培养条件对铜绿假单胞杆菌产生外毒素A的影响〔会,英〕/Blumentals,1.1.…厂1\ 110.N.丫’.八ead.Sei一1987,506一663一668〔译自DBA,1988,7(26),88一07947二 测定了影响铜绿假单胞杆菌(尸:eudo-,:o:。:。e::夕i。05。)(PA一103)产生外毒素入(一利‘可能的类毒素疫苗)1’肉因子。将细胞培养于含lmM人侄g十一升和1.l‘Mf,’。的限定培养基中直至达静止期为止。收集和水洗细JJIs后重忿于含o.11llMMg一丫肉些助倪培养甚中,]]l一l入jlnMMn;十和C。一J青外毒素产量比不加金属的降低50%。加25即MC扩语’使外毒素产量降低66%。s00lt…     

植物遗传工程

923053用土壤杆菌突变体菌株感染桃胚细胞获得再生植株〔英〕/S二igoeki,A.C.…了J.Am.Soe.Horti己.Sci一1991,116(6)一1092~1097〔译自DBA,1902,11(3),。z一01475〕 利用携带功能细胞分裂素基因和突变的植物生长素基因的章鱼碱型Ti质粒的根癌土壤杆菌(Ag-,oba时。r乞。饥tu仍efae艺e:s)突变体菌株tm”325::Tns感染桃(p,。。似s夕e:s艺ea)‘Redha-ven’未成熟胚。在无植物生长激素的MS培养基上从胚衍生愈伤再生出苗。此苗分枝率提高,但比未感染株更难生根。通过对总植物RNA进行Nor-thern分析测定了tms328::Tns细胞分裂素基因的转录…     

抗生素

890959真菌生产环抱素(eyelosPorin)[会,英]/Agathos,S.N.…厂Allll.N.\一\e、:d .sci一1587,506一657一662仁i圣I二l工)U一,1 988,7(16),88一07922〕 为J’‘I几厂!;环抱索A,将了’oly少aelad‘。。, ‘。jl。加,l;入‘fCC34g21的亲株和它的突变体M6培养于半合成的生产培养墓(55-M)_L。有利于亲株生产环抱素A的优良碳源包括山梨糖、葡萄糖、麦芽糖、果糖和纤组:__几糖。于不瓶培养时,含5%麦芽糖或葡萄掀的55M培养旅,培养到第10天时的产量为每升SOmg环抱素,且在生一民和生产时期之间.l2明显的拖后现象。在带通气搅拌的反应器内,}.艾…     

植物遗传工程

921日00植物甚因标签技术的进展〔英〕/Yoder,J.1.一1 Genet.Eng.(N.Y.)一1991,13一265~275[译自DBA,1991,10(17),91一oosse〕 讨论了以下内容:(A)染色体外重组;(B)基因标签,(C)人为构建位点专一性重组系统, (D)植物中同源重组的生物化学。提高植物中有效同源重组率的2条常规途径是:提高同源插入数、降低非同源擂入数。因多数串联擂人片段可被重复筛选,因此可用正一负交替筛选选择重组体。灵敏的物理检测法,如聚合酶链反应,可提高鉴别特殊擂人片段的有效性。(朱遐)921901限制性片段长度多态性在植物改良中的应用〔会,英〕/K ing,G.…2…     

快速生长转基因鲤鱼可望在中国实现商品化

由中国科学院院士、中国科学院水生生物所朱作言研究员主持的“快速生长转基因鲤鱼的中试研究”已通过成果鉴定。中国科学院李振声院士、中国工程院刘筠院士和林浩然院士等专家鉴定认为,该项研究建立了快速生长转基因鲤鱼的高效、安全养殖模式;对转“全鱼”生长激素基因鱼食品消费安全进行了严密的科学实验,证实了转“全鱼”生长激素基因鱼的食品消费安全性,为转“全鱼”生长激素基因鲤鱼的大规模商品化生产提供了科学依据,研究成果居国际领先水平。 朱作言院士主持的该项研究,筛选获得了快速生长的转“全鱼”生长激素基因黄河鲤鱼核心群200尾,其生长速度比对照鱼快140％以上。试验证明：转基因鱼怀卵量略低于普通黄河鲤鱼,受精率和孵化率与对照鱼无显著差异,转“全鱼”生长激素基因黄河鲤鱼具备大规模苗种繁育生产能力;转“全鱼”生长激素基因鲤鱼F1代的大规模养殖不仅增产,而且可降低养殖成本,并为转基因鱼的进一步选育提供材料;转“全鱼”生长激素基因三倍体鱼平均体重增长速度比对照鱼提高15％,铒料利用效率提高11．1％,由此建立了转“全鱼”生长激素基因高效、安全的养殖模式。试验还证明：摄食转“全鱼”生长激素基因鱼对小鼠的生长、脏器发育、血液生理生化指标、繁殖能力及其后代的生长发育均无影响。为此,专家建议,尽快推广养殖转基因三倍体鲤鱼,在我国建立世界首例转基因动物品种商品化生产的范例。杨淑培     

农业其它

852421一个编码核酮糖一1,5一二磷酸狡化酶小亚基的豌豆核基因组织特异性和光调节表达〔英〕/Coruzzi,G.…了EMBOJ一1984,3(8)一1671一1679〔译自DBA,1984,3(20),84一09731〕 研究了在豌豆不同组织中编码核酮糖-1,5一二磷酸梭化酶小亚基(rbcs)的多基因族的一个成员表达。豌豆(品种Progressg号)基因组DNA用Bglll消化并连接到IO59DNA上。用““P标记cDNA克隆P5515的插人筛选了重组噬菌体,分离出6个编码的rbcs。将克隆的汇PS一3D的一个EcoRI片段继续克隆到pPR::6上,称为pPS一4.0;把这个含有rb。S基因的E。oRI一Clal片段再克隆…     

HPV16 l1基因的克隆及其在真核细胞中的表达

克隆并表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期基因l1,以期为研制防治宫颈癌的DNA疫苗奠定基础.本实验采用PCR方法从质粒p16L1BN1中获得HPV16l1基因片段,利用基因重组技术,将其克隆至含巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达载体中,核酸序列鉴定HPV16l1基因真核表达质粒构建成功,再用脂质体介导基因转染7721人肝癌细胞.转化阳性细胞经SDS-PAGE显示在分子量大约为55kDa的位置出现一条特异性条带,与HPV16L1分子量大小相符.表达产物经Western blotting分析能与HPV16L1单克隆抗体特异结合.真核表达质粒pcDNA3-HPV16L1构建成功并能在真核细胞7721中有效表达,为下一步进行动物DNA免疫实验奠定了基础.     

生长激素及其基因转移对鱼类生长和

生长激素及其基因转移对鱼类生长和渗透压的调节起着重要作用.转生长激素基因鱼表现出明显的快速生长效应.生长激素促进了鲑科鱼类对海水的适应能力.本文对此进行了综述,并讨论了生长激素及其基因转移对鱼类生长和渗透压调节作用的生理机制、生长激素与胰岛素样生长因子以及甲状腺激素的关系.     

外源生长激素基因在蓝太阳鱼中的整合、表达和遗传

通过基因重组, 将石斑鱼生长激素基因编码序列克隆到鲤鱼βactin基因启动子下游, 构建了“全鱼”生长激素基因表达载体pCAecGHc。采用显微注射法, 研制出转“全鱼”生长激素基因蓝太阳鱼。经过PCR、PCR Southern杂交、RT PCR等技术对转植基因在转基因蓝太阳鱼中的整合和表达情况进行了检测。结果表明:转植基因在两批次P0 转基因蓝太阳鱼中的整合率为5 .60%和12. 26%, 并在转基因鱼中得到了正确表达, 表现为嵌合性表达。对转基因蓝太阳实验鱼进行了对照养殖实验, 初步显示转基因蓝太阳鱼具有较快的生长表型效应, 比对照组生长速度快20%-40%左右。应用近交策略培育出了两个转基因蓝太阳鱼F1 品系, 检测表明, 转植基因在两个品系的整合率分别为22 .03%和40 .8%。结果表明: 转植基因通过性腺传递给了子代, 同时也证实转基因P0 代的生殖腺为转植基因的嵌合体。     

应用B.t.和SBTi基因提高水稻抗虫性的研究

用基因枪法将单个B.t.基因或与SBTi基因一起导入到两个华南地区优良籼稻品种中,获得21个转B.t.单基因的植株系,4个转B.t.和SBTi双基因的植株系。对R1代植株的分子杂交和遗传分析表明,3个转双基因系中多个拷贝的B.t.和SBTi基因均是整合在植株基因组同一染色体上相同或相近位点。Northern blot证明在R2代转基因植株中B.t.基因稳定表达。对稻纵卷叶螟的抗性实验表明,转B.t.单基因或B.t.和SBTi双基因的转基因植株均较原种对照有更强的抗性,而转双基因植株较转单基因植株又有更强的抗性。     

华北汉族Kell、Kidd、Diego、Duffy、Lutheran和Xg血型系统的分布

用抗-K、-Di~a、-Jk~a、-Lu~a、-Fy~a、-Fy~b和-Xg~a等8种血清在北京检查了原籍华北的汉族,所得结果如下:Kell系统:在290人中仅发现1人对抗-K血清呈阳性反应,K基因频率为0.0017。Dtego系统:在290人中对抗-Di~a血清呈阳性反应者有32人,Di~a基因频率为0.0567。Kidd系统:在290人中对抗-Jk~a血清呈阳性反应者167人,Jk~a基因频率为0.3487。Lutheran系统:同时用抗-Lu~a及抗-Lu~b血清检查,发现290人中2人是Lu(a b ),288人是Lu(a-b ),基因频率Lu~a=0.0035,Lu~b=0.9965。Duffy系统:同时用抗-Fy~a和抗-Fy~b血清检查了2夕‘人,其中厂,,(a 石一)206人,如(a一石 )xZ人,如(a b )56人,Fy扣一 b一)2人,基因频率Fy口~。.,748,斤”一。.1斗。3,场(未用抗一脚今血清检查,不知是约还是 Fy~4和抗0.0849。X忍系统:分别检查了男性l乃人、女性115人。对抗一X犷血清呈阳性反应者 男65人,女54人,基因频率无Xga=0.3273。     

激素和活性多肽

动物细胞,另二则为分泌人生长激素人原生质周围空间中的大肠杆菌系统。本文讨论了后一种系统,提出证实生物合成和天然22k人生长激素的证据。(戴顺志)8803了3使用生吻电化学系统生物合成幽类化合物〔俄〕z‘Yaroploov,A.I.…了Biokhi-miya(Moseow)一1586,51(9)一1442一1445〔译自CBA,198了,(4),1722〕 在有外源性电子受体甲硫酸吩嗓存在时,使用冻干的球型节细菌(Arfhrobacter夕Iobijorm‘s)(3一幽酮类1一脱氢酶)细胞,使氢化一可的松氧化为强的松龙。此固定化冻干细胞保留着20%的原活性。在固定化和非固定化细胞的稳定性上实际上并无差别…     

生物防治

921826用细菌。pd蕃因转化生防真菌绿枯.母〔会,英万/Supak,J.…了Abstr.Gen.Meet.A皿.Soe。Mierobiol一i。。i,91 Meet。一201〔译自DBA,1991,10(21),91一12211〕 向生防因子绿粘帚菌(GI￡oelad￡。二v￡,e:s)Gul中导入对硫磷水解酶。pd基因。质粒pWM513在1.3kb Pstl片段上含opd基因。将此擂入物克隆到含8碱基单链受体AGCTTGCA的质粒pHIS的Hind皿位点上。产生4种质粒,即以每种取向擂人1或2个基因拷贝。借助PEG法用这些质粒转化绿粘帚霉原生质体。利用新的质粒微制备法分析了134个推测的转化体。用SOuthern印迹杂交证实载体序…     

激素和活性多肽

构建了一种表达/分泌载体,它产生了一107一周质磷酸盆结合蛋白与人生长激素释放因子仆GRF)的杂'种蛋自。用携带PhoS一mhGRF杂交基囚的质粒pAA踌专化大肠杆菌ANCC75株,将细胞转人磷酸盐含量有限的培养基中以诱导