五味子乙素对人肝细胞氧化损伤的保护作用

以过氧化氢(H2O2)处理人肝细胞(L02)后分组,分别以五味子乙素(Schizandrin B,Sch B)15、10和5μmol/L浓度保护细胞6 h后测定细胞存活率及培养基上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,来考察Sch B对被氧化损伤细胞的保护作用。在H2O2作用下,各组细胞存活率下降,LDH、MDA和AST含量均显著升高,SOD活性显著降低;Sch B处理后LDH、MDA和AST含量均有所降低,SOD活性有所恢复。随着Sch B剂量的增高,这种保护作用表现更加明显。因此,我们认为Sch B可减轻H2O2导致的细胞氧化损伤,能起到一定的保护作用,且该作用呈现一定的剂量依赖性。     

美洲大蠊油脂对过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用

采用人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞,建立过氧化氢(H2O2)诱导的氧化损伤模型,加入H2O2前用美洲大蠊油脂(100、200、400、800、1000μg/m L)预处理,通过MTS法检测细胞存活率,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,相关试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)系列抗氧化酶的活性,以及脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量的变化,从细胞水平研究美洲大蠊油脂对氧化损伤细胞的保护作用,并初步探讨其作用机制。实验结果显示,与对照组相比,模型组细胞存活率明显降低,LDH漏出率明显增加,胞内SOD、GSH-Px活性显著降低,MDA含量增多。与模型组相比,美洲大蠊油脂(800、1000μg/m L)能显著增强细胞SOD(P0.01)、GSH-Px(P0.05)活性,降低MDA含量(P0.05),使得细胞存活率显著提高(P0.01),LDH漏出率降低(P0.01)。其中油脂的浓度与细胞存活率、SOD活性之间为正相关,与MDA含量为负相关,均呈现浓度依赖性。结果提示美洲大蠊油脂对H2O2所致SH-SY5Y细胞氧化损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与提高细胞SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量从而增强细胞自身抗氧化能力有关。     

唐古特大黄多糖对过氧化氢所致肠上皮细胞损伤的保护作用

目的:观察唐古特大黄多糖(Rheumtanguticum polysaecharide,RTP)对过氧化氢所致正常人肠上皮细胞损伤的保护作用.方法:以过氧化氢(100μmol/L)诱导正常人肠上皮细胞损伤,损伤前用RTP(30,100,300 μg/ml)预处理细胞.采用MTT比色法测定细胞活力并进行形态学观察;吖啶橙染色法及流式细胞术观察细胞凋亡情况,采用分光光度法,用相应试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:加入过氧化氢后,细胞活力及SOD活性均降低,而MDA含量、LDH释放量及细胞凋亡数量均增高,与正常组比较具显著性差异(P＜0.05或0.01);以RTP预处理细胞后发现,细胞活力明显增高,且SOD活性增强,同时,MDA水平、LDH活性均降低并可使凋亡细胞数减少.结论:RTP对过氧化氢所致的肠上皮细胞损伤具保护作用,且能抑制细胞凋亡及坏死,表明其具有一定的抗氧化损伤作用.     

山楂叶金丝桃苷对高糖诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制

为研究金丝桃苷对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞氧化损伤的保护作用及机制,用含100mmo L/L葡萄糖和分别为20、50、100μmo L/L金丝桃苷的培养基共同孵育SH-SY5Y细胞36 h,检测细胞活力、细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性,细胞内活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及SIRT1和NF-кB基因的mRNA水平和蛋白含量。结果显示金丝桃苷可提高高糖诱导后SH-SY5Y细胞的存活率,抑制细胞LDH释放,清除ROS,降低MDA含量与caspase-3活性,增强SOD、CAT活性和GSH含量;同时,金丝桃苷还能提高SIRT1基因的mR-NA表达及蛋白含量,降低NF-кB基因的mRNA水平和蛋白含量。结果表明金丝桃苷能通过激活SIRT1基因,抑制NF-кB基因保护高糖所致SH-SY5Y细胞的氧化损伤。     

复方龙脉宁不同提取液对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用

采用不同浓度H_2O_2处理H9c2心肌细胞,MTT法检测复方龙脉宁(Compound Longmaining,CLMN)水提液和醇提液含药血清(5%、10%、20%组)对氧化损伤的H9c2心肌细胞活性的影响,研究CLMN提取液对H_2O_2导致H9c2心肌细胞氧化损伤的修复作用。结果显示,当H_2O_2浓度为100μM,作用时间24 h,可建立稳定的H9c2心肌细胞氧化损伤模型;与对照组相比,经H_2O_2处理后的细胞活性明显下降,SOD活性显著降低,而LDH活性、MDA含量则显著增加,而用CLMN水提液和醇提液含药血清(10%、20%组)处理氧化损伤的H9c2心肌细胞,可显著提高细胞存活率及SOD活性,降低LDH活性和MDA含量。说明CLMN水提液和醇提液均对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞氧化损伤具有很好的保护作用。     

丹参酮ⅡA对正常和氧化损伤内皮细胞的保护作用研究

采用过氧化氢诱导建立的内皮细胞氧化损伤模型,探讨了丹参酮ⅡA对氧化损伤的HUVECs的保护作用.通过内皮细胞LDH、SOD、NOS、GSH-Px的活性和MDA、NO含量的变化趋势,MTT和流式细胞术反映的细胞存活率的变化,研究了丹参酮ⅡA对正常和氧化损伤HUVECs的作用.结果表明丹参酮ⅡA在10～100μmol/L浓度之间时,无明显细胞毒性.浓度在20 μmol/L以上时,丹参酮ⅡA能显著增强HUVECs抵御氧化损伤的能力;同时降低了LDH的泄漏,阻止了MDA等过氧化物的生成,提高了NOS、NO、SOD和GSH-PX分泌量,显著减少了细胞早期凋亡率和坏死率.表明丹参酮ⅡA可以保护HUVECs免受氧化损伤,防止动脉粥样硬化斑块的形成.     

大豆对菲胁迫的生理响应及耐菲机理研究

为了探讨菲胁迫下植物的生理反应及耐受机制,以大豆为供试材料,采用叶片喷施试验,分别从表型、生物量、氧化损伤以及抗氧化酶活性等方面研究不同浓度菲处理对大豆幼苗生长的影响。结果表明:低浓度菲(≤50 μmol/L)能够增加叶片生物量,提高叶绿素及类胡萝卜素含量。同时,幼苗叶片中的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、脯氨酸含量,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性以及过氧化物酶(Peroxidase,POD)的活性明显高于对照组。在高浓度菲(75-100 μmol/L)处理下,MDA含量继续增大,大豆幼苗的生物量、叶绿素含量、渗透胁迫物质含量及SOD活性都受到抑制,而叶片中的类胡萝卜素含量及POD活性较高。以上结果表明,植物通过提高SOD和POD活性,以及类胡萝卜素和渗透胁迫物质含量来减轻叶片施用菲对植物生物量、叶绿素含量及氧化胁迫的影响。此外,POD和类胡萝卜素在高浓度菲胁迫下仍保持较高水平,说明它们在菲胁迫中起到较为稳定的作用。     

金属硫蛋白拮抗同型半胱氨酸对血管内皮细胞的脂质过氧化作用

目的:观察金属硫蛋白(metallothionein,MT)对同型半胱氨酸(homocysteine Hcy)损伤血管内皮细胞的拮抗作用及机制.方法:培养液中分别加入Hcy及Hcy MT孵育血管内皮细胞,自动生化分析仪测培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法测细胞丙二醛(MDA)含量.结果:同型半胱氨酸增加内皮细胞LDH及蛋白漏出,并使细胞MDA含量明显升高.MT呈浓度依赖性地抑制Hcy所致的血管内皮细胞损伤及MDA增高.结论:MT拮抗Hcy对血管内皮细胞的脂质过氧化损伤.     

余甘粗多糖对HepG-2细胞氧化应激反应的影响

为了研究余甘粗多糖对人肝癌细胞Hep G-2增殖能力及氧化应激反应的影响,将不同浓度余甘粗多糖(CEPS)作用于Hep G-2肝癌细胞,分别培养24、48、72 h后,利用倒置生物显微镜观察其细胞形态,采用MTT法检测细胞增殖抑制率并通过测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,乳酸脱氢酶(LDH)活力,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量来探讨余甘粗多糖对Hep G-2细胞氧化应激反应的影响。研究表明随着余甘粗多糖浓度的增加,细胞存活率降低,贴壁生长异常,悬浮死亡细胞数量增加,且MDA含量增加,SOD、LDH、GSH-Px活力均呈现出增强趋势,初步判断余甘粗多糖引起Hep G-2肝癌细胞受损,导致过氧化物MDA含量增加,相应的抗氧化物酶为了自我保护而增强活力,说明余甘粗多糖对Hep G-2肝癌细胞氧化应激反应产生影响,从而诱导Hep G-2细胞损伤,增殖活力下降。     

间歇性低压低氧对过氧化氢心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察慢性间歇性低压低氧对过氧化氢所致心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法:雄性豚鼠20只,随机分为两组(n=10):对照组(non-IHH)、低氧组(IHH)。低氧组豚鼠于低压氧舱接受28 d(海拔5 000 m、每天6 h)的低压低氧处理。胶原酶方法急性分离心肌细胞。细胞动缘探测系统测定过氧化氢对各组细胞收缩力的变化。生化方法测定各组丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的变化。结果:①过氧化氢可使心肌细胞出现收缩、舒张紊乱,但IHH处理使其出现的潜伏期明显延长。②给予过氧化氢(300μmol/L,10 min)使来自于non-IHH或IHH的心肌细胞LDH、MDA含量均明显增加,但IHH心肌细胞LDH、MDA含量明显低于non-IHH心肌细胞的LDH、MDA含量。③经IHH处理组的心肌细胞SOD,CAT活性均明显高于non-IHH组。给予过氧化氢使来自于non-IHH或IHH的心肌细胞SOD,CAT活性均明显降低,但IHH心肌细胞SOD,CAT活性明显高于non-IHH心肌细胞的SOD,CAT活性。结论:IHH具有对抗过氧化氢心肌细胞损伤的作用,可能与其增强抗氧化酶活性有关。