人促红细胞生成素受体胞外区基因的克隆及其在大肠肝菌中的表达

以人胎肝为材料,通过ＰＴ－ＰＣＲ的方法扩增出人促红细胞生成素受体（ｈＰｅｏＲ）的胞外区基因。将获得的或熟体胞外区基因起始密码子改构后克隆原核表达载体ｐＢＶ２２０中,进行原核温控诱导表达。表达产物经蛋白Ｎ端测序及Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ实验证实表达产物是ｈＥｐｏＲ胞外区蛋白。利用上罐发酵培养获得的包涵体蛋白经复性纯化后,体外生物学活性检测表明表达产物可特 抑制ＴＦ－１细胞在Ｅｐｏ刺激下的生长,证实了     

促红细胞生成素对培养大鼠内分泌细胞分泌功能的影响

促红细胞生成素对培养大鼠内分泌细胞分泌功能的影响李芳芳李恩吕占军１（河北医科大学基础医学院生化教研室,１实验动物中心实验室;石家庄０５００１７）促红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,Ｅｐｏ）是主要由肾脏所分泌的激素,具有促进骨髓中红细胞系列...     

L－NNA和还原型Hb对SHRsp肠系膜动脉内皮依赖性舒张的影响

我们以往的工作证实成年自发高血压大鼠（ＳＨＲ与ＳＨＲｓｐ）肠系膜动脉由乙酰胆碱引起的内皮依赖性舒张（ＥＤＲ）减弱。为进一步探讨ＥＤＲ减弱的机制，本文观察了一氧化氮（ＮＯ）合成酶抑制剂左旋硝基精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）及ＥＤＲＦ灭活剂还原型血红蛋白（ＲＨｂ）对卒中易感型自发高血压大鼠（ＳＨＲｓｐ）与常压对照（ＷＫＹ）大鼠肠系膜动脉ＡＣｈ内皮依赖性舒张（ＥＤＲ）的影响。发现Ｌ－ＮＮＡ（１０（－３）ｍｏｌ／Ｌ）可使ＳＨＲｓｐ弱于ＷＫＹ的ＡＣｈＥＤＲ（１０（－８）－１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）的差异消失，ＲＨｂ（１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）则仅在１０（－７）－１０（－８）ｍｏｌ／ＬＡＣｈ时使ＳＨＲ（ｓｐ）肠系膜动脉ＥＤＲ弱于ＷＫＹ的差异消失。将ＷＫＹ在加入Ｌ－ＮＮＡ后的与加入ＲＨｂ后的ＡＣｈ（１０（－８）－１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）ＥＤＲ进行比较，无显著差异。而将ＳＨＲｓｐ在Ｌ－ＮＮＡ后的与ＲＨｂ后的ＡＣｈ（１０（－８）－１０（－６）ｍｏｌ／Ｌ）ＥＤＲ进行比较，则有显著差异。并且，ＳＨＲｓｐ的有内皮肠系膜动脉条对ＲＨｂ的敏感性与ＷＫＹ接近，对Ｌ－ＮＮＡ的敏感性则低于ＷＫＹ。表明高血压时肠系膜动脉内皮依赖性舒张减弱中，ＥＤＲＦ机制与     

孤生受体的相互作用对视黄酸应答元件的影响

孤生受体ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的功能及其作用机理仍未阐明．以ＤＮＡ瞬时转染和测定氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）活性,以及凝胶阻抑测定,分析ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的相互作用对视黄酸应答元件（ＲＡＲＥｓ）的影响．实验表明,ＣＯＵＰ－ＴＦ通过降低ＲＡＲＥｓ的基础活性,来增强ＲＡＲＥ对视黄酸（ＲＡ）的敏感性,而ｎｕｒ７７则拮抗ＣＯＵＰ－ＴＦ的作用．ｎｕｒ７７能够加强不同ＲＡＲＥｓ的转录活性,并且与ＲＡ的诱导无关．结果证实,ｎｕｒ７７通过与ＣＯＵＰ－ＴＦ的直接作用而对ＲＡＲＥｓ产生影响,从而抑制ＣＯＵＰ－ＴＦ与ＲＡＲＥｓ结合和ＣＯＵＰ－ＴＦ的转录活性     

人ApoE转基因小鼠与TGE_（7－2） TGE_（7－3）转基因鼠系的建立

用含小鼠金属硫蛋白（ＭＴ－１）基因启动子与突变的人ＡｐｏＥ７基因的６．０ＫｂＤＮＡ片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入４４１枚受精卵,移植于２０只假孕鼠,其中１５只受孕,共产仔鼠８０只,经ａ－３２Ｐ斑点杂交与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法鉴定出两只整合有人ＡｐｏＥ基因的转基因雌鼠,其拷贝数分别为２和５。将两只首建鼠（雌性Ｆｏ代）与正常雄鼠交配,建立Ｆ１代转基因鼠系ＴＧＥ７－２和ＴＧＥ７－３,为进一步从整体上研究ＡｐｏＥ在脂质代谢中的作用以及ＡｐｏＥ与动脉粥样硬化和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病的关系创造条件。     

红细胞生成素3‘端增强子在肺动脉平滑肌细胞代氧性增殖调控中的作用

用噻唑蓝比色法（ＭＴＴ法）、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（Ｈ＾３－ＴｄＲ）掺入法和流式细胞术,观察红细胞生成素（ＥＰＯ）３’端增强子片段对培养的猪肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）的内皮依赖性和非内皮依赖性低氧性增殖的影响。结果为：（１）低氧２４ｈ后ＰＡＳＭＣｓ明显增殖,转入野生型ＥＰＯ３’端增强子片段可被抑制,而转入突变型片段无此作用;（２）肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣｓ）低氧２４ｈ,其条件培养液有明显的促Ｐ     

第二信使介导模拟低氧下丘脑CRF分泌

用模拟高原低氧的方法研究急性低氧条件下促肾上腺皮质激素释放因子（ｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＲＦ）分泌的变化及第二信使参与ＣＲＦ分泌的作用。低氧（海拔７ｋｍ）１ｈ后,正中隆起（ｍｅｄｉａｎｅｍｉｎｅｎｃｅ,ＭＥ）处ＣＲＦ含量明显下降（Ｐ＜０．０５）,下丘脑（ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ,Ｈｙ）ＣＲＦ（不含ＭＥ）含量无明显变化,而Ｈｙ内ｃＡＭＰ含量明显增加（Ｐ＜０．０１）。脑室注射Ｆｏｒｓｋｌｉｎ、ＴＰＡ后低氧暴露（海拔５ｋｍ）１ｈ,ＭＥＣＲＦ含量下降（Ｐ＜０．０５;Ｐ＜０．０５）,ＨｙＣＲＦ无明显变化。脑室注射Ｆｏｒｓｋｌｉｎ后ＨｙｃＡＭＰ含量升高（Ｐ＜０．０５）。脑室注射Ｈ７和ＰＫＡ抑制剂,ＭＥＣＲＦ升高（Ｐ＜０．０５;Ｐ＜０．０１）,ＨｙＣＲＦ和ＨｙｃＡＭＰ均无显著变化。上述结果表明急性低氧应激中ＣＲＦ分泌显著增加,第二信使通路ＰＫＡ和ＰＫＣ通路均参与ＣＲＦ分泌     

红细胞生成素

红细胞生成素是一种调节红系祖细胞生长的细胞因子，近年来，尤其是大量重组Ｅｐｏ的生产，使Ｅｐｏ的基础及应用研究进入崭新时代，本文详述了Ｅｐｏ基因结构、蛋白质结构及生化特性，产生Ｅｐｏ的器官及其细胞定位的研究进展，体内Ｅｐｏ含量的细胞及分子水平调控的可能机制，Ｅｐｏ受体的种类，分子结构和蛋白质结构以及Ｅｐｏ与受体结合后信号传递的可能途径。     

败血症大鼠心肌肌浆网phospholamban蛋白磷酸酶活性的变化

用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ层析法部分纯化了大鼠心肌肌浆网ｐｈｏｓｐｈｏｌａｍｂａｎ（ＰＬＢ）蛋白磷酸酶（ＰＰａｓｅ）,并证明其是ＰＰａｓｅ－１。在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳放射自显影上证明,ＥＳ大鼠心肌ＳＲ部分纯化的ＰＬＢＰＰａｓｅ对底物＾３２Ｐ－磷酸化酶ａ和＾３２Ｐ－ＳＲ）的去磷酸化作用明显减弱;ＬＳ大鼠该部分纯化的ＰＰａｓｅ对底物的去磷酸化作用和健康大鼠相比未见明显变化。测定败血症大鼠心肌ＳＲ及其     

缺氧诱导因子1和红细胞生成素3‘—增强子调节内皮细胞？…

目的和方法：将红细胞生成素（ＥＰＯ）３＇－增强子野生片断及点突变片断借脂质体主人脐静脉内皮细胞株ＥＣＶ－３０４,用半定量ＲＴ－ＰＣＲ测定正常秘缺氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１）诱导剂氧化钴（ＣｏＣｌ２）作用下培养６ｈ的细胞环氧合酶２（ＣＯＸ－２）和血栓素合酶（ＴＸＳ）的ｍＲＮＡ。结果：ＨＩＦ－１诱导剂ＣｏＣｌ２可放ＣＯＸ－２和ＴＸＳ基因转明显增强２,向细胞导入野生ＥＰＯ３＇增强子片断可阻断ＣｏＣｌ２诱     

有氧运动对高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性调节…

本文研究了实验性在醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体（ＬＤＬ－Ｒ）活性变化及有氧运动时ＬＤＬ－Ｒ活性调节的影响,发现,高脂（ＨＣ）组肝组织匀浆ＬＤＬ－ＲＩ自古以来生较正常对照（ＮＣ）组降低３７％（Ｐ〈０．０５）,同时血清大醇（ＴＣ）、低密度脂收白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）及血清栽脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）均显著高于ＮＣ组（Ｐ〈０．０１）;高脂＋运动（ＨＥ）组ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ及ＡｐｏＢ均明显低于ＨＣ组,而ＬＤＬ－Ｒ     

人促红细胞生成素基因组基因和cDNA的克隆及其在COS－7细胞中的表达

利用ＰＣＲ技术,从正常人胎肝染色体ＤＮＡ中克隆到长度为１５７２ｂｐ的人促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因片段,它包含除第一个外显子和第一个内含子外所有外显子及内含子。再人工合成１３ｂｐ外显子１的编码区,并与１５７２ｂｐ片段拼接,从而得到除第一个内含子的人促红细胞生成素基因组基因。将克隆得到的ＥＰＯ基因插入载体ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ得到ｐＳＶ２－ＥＰＯ表达载体,转染ＣＯＳ－７细胞后获得高效表达。利用自行研制的小鼠抗人ＥＰＯ单抗及兔抗人ＥＰＯ多抗,对表达产物进行ＥＬＩＳＡ定量测定,细胞分泌ＥＰＯ量高达２５１±７Ｕ／ｍｌ．Ｋｒｙｓｔａｌ法测得体外生物活性２４１．５±６．５Ｕ／ｍｌ．用ＥＰＯ单抗免疫沉淀结合ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对转染细胞的表达产物做了进一步鉴定,清晰地看到了ＥＰＯ条带。从高效表达ＥＰＯ的转染细胞中分离纯化ｍＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并克隆到ＥＰＯ的ｃＤＮＡ,这为ＥＰＯ在其它系统中的表达及ＥＰＯ的功能与结构的研究打下了基础。     

低氧反应通路

氧对生命活动的重要性被发现以来,人们对低氧作用的研究,先后经历了由经典低氧反应效应到红细胞生成素（ＥＰＯ）,由ＥＰＯ到低氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１）,由ＨＩＦ－１到一系列低氧反应基因,再 到氧感受,历时２００余年。直到２０世纪９０年代,人们才初步勾划出一条由氧感受器一信号转导一效应基因的低氧反应通路的现代轮廓,为进一步研究既提供了重要基础,也提出了诸多关键课题,随着这一通路研究的深入,人们可望在２１世纪到新的理论概括和实际应用。     

鸡减蛋综合征病毒（EDSV—76）基因组E1区结构特点分析

ＥＤＳＶ－７６病毒中国株ＡＡ－２经常规方法提取其病毒ＤＮＡ后,建立了限制性内切酶ＰｓｔＩ水解片段的全基因文库。对其中ＰｓｔＩ－Ｇ片段和ＰｓｔＩ－Ａ片段的正反链进行序列测定,获得ＥＤＳＶ Ｅ１区（０－８．８ｍ．ｕ）的核苷酸序列。经分析,ＥＤＳＶ Ｅ１区具有与其他腺病毒Ｅ１区类似的结构。以大于６０个氨基酸残基为标准,ＥＤＳＶ Ｅ１区共有７个开放读码框架（ＯＲＦ）,其中Ｒ１、Ｒ２、ＥｌｂｓＴ和Ｅ１ｂ１Ｔ     

云南蕨类植物区系新记录（Ⅰ）

云南蕨类植物区系新记录（Ⅰ）陆树刚,张光飞（云南大学生态学与地植物学研究所,昆明６５００９１）ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＳＴＯＴＨＥＰＴＥＲＩＤＯＦＬＯＲＡＯＦＹＵＮＮＡＮ（Ⅰ）￥ＬＵＳｈｕ－Ｇａｎｇ;ＺＨＡＮＧＧｕａｎｇ－Ｆｅｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｃ...     

1901～2001年诺贝尔化学奖部分与生命科学有关的获奖项目

１９０２ ＨＥＲＭＡＮＮ ＥＭＩＬ ＦＩＳＣＨＥＲ（１８５２－１９１９，德国柏林大学）他在糖和嘌呤衍生物合成上的特殊贡献得到认可。 １９０７ ＥＤＵＡＲＤ ＢＵＣＨＮＥＲ（１８６０－１９１７，德国柏林农业大学）因为他的生物化学研究和发现无细胞发酵现象。 １９１５ ＲＩＣＨＡＲＤ ＭＡＲＴＩＮ ＷＩＬＬＳＴＡＴＴＥＲ（１８７２－１９４２，德国慕尼黑大学）因为他在植物色素，特别是叶绿素方面的研究。 １９１８ ＦＲＩＴＺ ＨＡＢＥＲ（１８６８－１９３４，德国 Ｋａｉｓｅｒ－Ｗｉｌｈｅｌｍ研究所）因为他发明了工业合成…     

头序Song木化学成分研究

自头序Ｓｏｎｇ木７０％ＥｔＯＨ提取物分得６个化合物,应用光谱技术（ＩＲ,ＭＳ,ＨＮＭＲ,＾１３ＣＮＭＲ,ＤＥＰＴ,２ＤＮＭＲ）及化学方法,确定了他们的结构,分别为β－谷甾醇（Ⅰ）,胡萝卜甙（Ⅱ）,齐墩果酸（Ⅲ）,竹节参皂甙１（Ⅳ）,竹节参皂甙Ⅳａ（ＣｈｉｋｕｓｅｔｓｕｓａｐｏｍｉｎⅣａ）（Ⅴ）,常春藤皂甙元－２８－Ｏ－β－吡喃葡萄糖醛酸（１→４）－β－Ｄ－吡喃葡萄糖甙（Ⅵ）,以上化合物均为首次从该     

沈阳市东陵区景观生态潜力研究

沈阳市东陵区景观生态潜力研究赵羿,吴彦明（中国科学院沈阳应用生态研究所,１１００１５）邓百祥（辽宁省水利水电勘测设计研究院,沈阳１１０００６）ＥｃｏｌｏｇｉｃａｌＰｏｔｅｎｔｉａｌｏｆＬａｕｄｓｃａｐｅｉｎＤｏｎｇｌｉｎｇＤｉｓｔｒｉｃｔｏｆＳｈｅｎｙａｎｇ￥ＺｈａｏＹｉ;ＷｕＹａｎｍｉｎｇ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｐｐｌｉｅｄＥｃｏｌｏｇｙ,ＡｃａｄｅｍｉａＳｉｎｉｃａ,Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１５）,ＤｅｎｇＢａｉｘｉａｎｇ（ＬｉａｏｎｉｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＷａｔｅｒＣｏｎ－ｓｅｒｖａｎｃｙａｎｄＷａｔｅｒＰｏｗｅｒＳｕｒｅｅｙｉｎｇａｎｄＤｅｓｉｇｎｉｎｇ,Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１０００６）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（５）：１－８。Ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｌａｕｄｓｃａｐｅｃｏｎｓｉｓｔｓｏｆｉｔｓｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ,ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｄｐｒｉｃｅｌｅｓｓｐｏ－ｔｅｎｔｉａｌ．Ｔｈｒｏｕｇｈｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ（ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｏｔ     

重组质粒pPIC9K-oLHαhCGβCTP的构建及在毕赤酵母中的表达

将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合,通过设计两对引物,用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐＰＩＣ９Ｋ质粒中,用电打孔方法转入巴氏毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）,并获高效表达．表达蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明分子量约为２８ｋＤ．２．５Ｌ发酵罐大量培养,产量可达２．０ｇ／Ｌ．     

TWO NEW SPECIES FROM TRICHOSANTHES（CUCURBITACEAE）

ＴＷＯＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＦＲＯＭＴＲＩＣＨＯＳＡＮＴＨＥＳ（ＣＵＣＵＲＢＩＴＡＣＥＡＥ）ＹｕｅｈＣｈｕｎ－ｈｓｉＨｕａｎｇＬｕ－ｑｉＣｈｅｎｇＣｈｉｎｇ－ｙｕｎｇ〔ＡＢＴＲＡＣＴ〕ＴｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓｒｅｆｅｒａｃｔａＹｕｅｈｅｔＬ．Ｑ．Ｈ...