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相似文献
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1.
探讨人白血病细胞系U937白血病抑制因子(LIF)受体α亚基和另一亚基gp130细胞内区与促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的关系,旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体(190/130,130/190)并分别在U937表达,其与野生受体竞争性结合白血病抑制因子,用免疫组化和免疫印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体(190cyt-190cyt,13  相似文献   

2.
生物固氮作用机理   总被引:1,自引:0,他引:1  
生物固氮作用机理李佳格徐继(中国科学院植物研究所,北京100093)MECHANISMOFBIOLOGICALNITROGENFIXATIONLiJia-geXuJi(InstituteofBotany,ChineseAcademyofScience...  相似文献   

3.
本工作采用分离培养家兔肺内小动脉平滑肌细胞(PASMCs),观察了外源性血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)、BN52021(PAF受体拮抗剂)、吲哚美辛、维拉帕米对PASMCs产生血栓素A_2(TxA_2)、前列环素(PGI_2)及对细胞膜Ca~(2+)-ATPase活力的影响。结果表明:(1)基础状态下PASMCs存在花生四烯酸(AA)代谢。(2)外源性PAF通过受体后途径激活环加氧酶促进AA代谢致TXA_2及PGI-2增加,TXA_2/PGI_2比值无明显变化。(3)外源性PAF能直接抑制Ca~(2+)-ATPase活力。(4)维拉帕米可逆转PAF抑制PASMCs膜Ca~(2+)-ATPase活力的效应。  相似文献   

4.
天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用多聚酶链式反应(PCR)技术,对天然天花粉蛋白(nTCS)基因在Tyr14和Arg22两个保守残基处同时进行定点突变,即Tyr14变成Phe,Arg22变成Leu,然后克隆到pET-8c高效表达载体上,构建成重组质粒pETY14F/R22L.经序列分析,定点突变的结果与预先设计的完全一致,突变后的天花粉蛋白命名为Y14F/R22LTCS.将pETY14F/R22L转化到E.coliBL21(DE3,pLysS)中,进行表达.经CM-SepharoseCL-6B柱纯化,SDS-PAGE鉴定,纯度可达90%.RIP活性测定显示,Y14F/R22LTCS的活性比nTCS降低了7.5倍,活性变化不显著,因此,TCS的Try14和Arg22对维持其活性部位构象并不是必需的.但由于Y14F/R22LTCS在E.coli中的表达量与nTCS相比明显下降,因此,Tyr14和Arg22可能与TCS翻译后的折叠有关.  相似文献   

5.
IL—3、GM-CSF和IL—5是一类功能相似的造血因子,它们的受体至少包括配体特异性的α亚基和共用β亚基(βc)两部分。βc识别三因子的N端α-螺旋,而α亚基则识别三因子的C端α-螺旋,两者均为功能性的高亲和力受体所必需.由于βc胞内区较长,能结合Jab和Stat等信号分子,所以,三种因子受体受配体刺激后能诱导相似蛋白的酪氨酸磷酸化。另外,激酶的不同剪切型、转录因子的同分异构体、受体亚基的细胞型特异性以及信号传导通路的多重性等则为三因子作用特异性的基础。本文就对其主要内容作一综述。  相似文献   

6.
通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用3H-TdR参入、Northernblot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVECDNA合成的作用及对血小板源生长因子(PDGF)、PDGF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达和肾素-血管紧张系统(RAS)的影响,结果显示,HSPG明显抑制培养的hASMC基础的DNA合成(cpm值为:10385±3263vs,25541±6421,P<0.01)及外源性PDGF诱导的DNA合成(cpm值为:9878±1947vs.13481±44l0,P<0.05);抑制PDGFA链、TGF-Bp和ET-1mRNA表达,提高PDGFa和β受体mRNA的表达;显著降低hASMC培养液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度和血管紧张素转换酶(ACE)的活性,推测HSPG抑制PDGFA链、TGF-β及ET-1mRNA表达,降低ACE活性及AngⅡ浓度是其抑制hASMC增殖的重要机  相似文献   

7.
核受体辅助因子及其信号转导   总被引:2,自引:0,他引:2  
类固醇激素、核受体及其辅助因子在细胞增殖、分化中起重要的作用。核受体与相应的配体结合后同细胞内的辅助激活因子CBP/P300、PCAF、P/CIP和SRC家族等结合形成的复合物能使组蛋白乙酰化促进基因的转录,当缺乏配体时核受体同辅助抑制因子SMRI、mSin3A及HAD1具有很强的结合力使组蛋白去乙酰化抑制基因的转录活性。MAPK、PKA、AP-1、Sap-a、JAK/STAT、JAK信号传导中核受体辅助因子参与信号传导过程影响基础的转录。  相似文献   

8.
利用微丝(microfilament,MF)解聚药物细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)处理G_0期小鼠C_3H_(10)T_(1/2)成纤维细胞,对G_0至S期DNA合成,胸腺嘧啶核苷激酶(thymidinekinase,TK)活性、TK基因表达、钙调素(calmodulin,CaM)水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察,G_0期细胞经3mg/LCB处理2h,促MF解聚增强了血清对S期细胞TK活性、TK基因表达和DNA合成的刺激作用,并促进细胞提前进入S期.血清刺激G_0期细胞进入晚G_1期和S期时,CaM水平明显升高,而CB预处理则使CaM含量进一步增加,特别是CB处理促使S期CaM增加向核内转移.CB处理明显增强血清对c-jun、c-fos和c-myc基因表达的刺激作用,而PKC抑制剂H_7则抑制CB处理对这些基因转录的刺激作用,说明CB使G_0期细胞MF解聚刺激c-jun、c-fos和c-myc的转录活性与PKC的作用有关.结果表明G_0至S期早期MF的重组可促进细胞进入S期,增强DNA合成.  相似文献   

9.
中国紫堇属新分类群*苏志云(中国科学院昆明植物研究所,昆明650204)NEWTAXAOFCORYDALISFROMCHINASuZhiyun(KunmingInstituteofBotany,ChineseAcademyofScience,Kunm...  相似文献   

10.
Bcl——2基因表达对TNF及OA诱发的细胞编程死亡的不同效应   总被引:1,自引:0,他引:1  
陈亚兵  蔡毓 《生命科学》1996,8(2):17-18
用TNF和OA(Okadaicacid)诱发人神经母细胞瘤SK细胞死亡,并证明细胞死亡为编程死亡(ProgrmmedCellDeath,简称PCD)。将编码Bcl-2全长蛋白的cDNA植入PJX41neo载体中,使其表达由HCMV病毒起动子控制。形成的顺义(pBcl-2-S)及反义(pBcl-2-AS)表达质粒经转染导入SK细胞中获得稳定转染子。Western印迹表明顺义转染子表达大量的26kdBcl-2蛋白,而反义转染子则不表达。增强表达的Bcl-2蛋白能抑制由TNF引发的PCD,但不影响OA引发的PCD,从而证明了Bcl-2基因产物抗细胞死亡效应的特异性。  相似文献   

11.
应用生态学报第5卷(1994)关键词索引CHINESEJOURNALOFAPPLIEDECOLOGYVol.5(1994)KEYWORDINDEXAAcanthopanaxsenlicosusigloo5(3):237Agroecosystem¥k4...  相似文献   

12.
GP130与IL—6信号途径   总被引:4,自引:0,他引:4  
IL-6受体两个亚基IL-6Rα和gp130组成。IL-6与之形成三元复合体,然后激后与gp130相偶联的Jak家族的酪氨酸激酶,诱发系列的磷酸化事件,激活Ras途径及新发现的不依赖Ras的途径,即直接激活STAT家族成员APRF等,然后,诱导靶基因表达。  相似文献   

13.
噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选   总被引:7,自引:0,他引:7  
构建人源噬菌体抗体文库如下:HIV感染者脾细胞中提取mRNA,经反转录再以人IgG重链Fd两端及轻链“通用”引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌粒载体pComb3中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,经辅助噬菌体救助,重组噬菌体得以溶源裂解,Fab表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的N端.此噬菌体抗体库的容量为5×105.筛选抗HIV-1同时又具有能被抗独特型抗体“IF7”所识别的独特型的阳性抗体:以重组包膜糖蛋白gp160及gp41多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选,使抗gp160的特异性抗体得到100倍的富集.然后通过直接ELISA和竞争性ELISA实验筛选出两株结合性较好的特异性抗gp160抗体-3B株与1D株.直接ELISA实验表明这两株克隆均能被“1F7”所识别,为抗独特型多肽的筛选奠定了基础.  相似文献   

14.
为了研究 C B P在胰岛 H I T 细胞中调节基因转录的机制,将不同的 C B P片段瞬时转染到细胞中,观察其转录活性.实验表明,在胰岛 H I T 细胞中,膜去极化及 c A M P 均可诱导 C B P30( C R E B结合功能区)转录活性增强,并有协同效应. P K C对 C B P30 的转录活性无影响;与 C R E B有更强结合力的 C B P K I X S/ B(氨基酸序列短于 C B P30 的 C R E B结合功能区)其基本转录活性及膜去极化、c A M P诱导下的转录活性均比 C B P30 更强.反义 C R E B 的过度表达可降低 c A M P诱导的 C B P的转录活性.提示在胰岛 H I T 细胞中,膜去极化及 c A M P对共转录因子 C B P转录活性的调节作用通过 C R E B介导.  相似文献   

15.
用浸泡法得到了(E160A)天花粉蛋白(trichosanthin, TCS),(E160D)TCS与Ade 和(E160A)TCS与FMP复合物的晶体.在Mar Research 面探测器系统上分别收集了0.20 nm ,0.19nm 和0.205 nm 分辨率的X 射线衍射数据,数据处理用Mar Scale 程序系统完成.用同晶差值Fourier法解析了(E160A)TCS-Ade,(E160D)TCS-Ade 和(E160A)TCS-FMP的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序,修正结果,晶体学R因子分别为0.166,0.176,0.179.键长和键角的RMS偏差分别为0.0010 nm 和2.503°,0.0013 nm 和2.665°,0.0012 nm 和2.676°.在这三个结构中均未见到Glu189侧链方向的改变.Ade 或FMP仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行.这一结果表明:TCS中的Glu160分别突变成Ala 和Asp,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应,但是活性降低了一些.可见Glu160对TCS与AMP的作用是重要的,但不是必要的.  相似文献   

16.
植物细胞质膜氧化还原系统   总被引:2,自引:0,他引:2  
植物细胞质膜氧化还原系统陈珈(北京农业大学生物学院。北京100094)REDOXSYSTEMINTHEPLASMAMEMBRANEOFPLANTCELL¥ChenJia(CollegeofBiologica!Sciences,BeijingAgric...  相似文献   

17.
No .1TheMethodsforQuantifyingCapacityofBacteriainDissolvingPCompornds  …………………………………………… ZHAOXiao Rong ,LINQi Mei,SUNYan Xin,YAOJun ,ZHANGYou Zhan ( 1 )……………………………………TheScreenandCharacterizationofAFlocculant ProducingBacteriumLIUZi Juan,LIUZhi Pei,YANGHui Fang ( 5 …  相似文献   

18.
瓦草中三个新环肽   总被引:10,自引:3,他引:7  
从云南民间中草药瓦草(Sileneszechuensis)的根中分离鉴定了3个新的环肽,分别命名为瓦草环肽A,B,C(sileninsA,B,C)用光谱和化学方法确定它们均为环八肽,其结构分别为:sileniaA-cyclo-(Pro-Leu-Ser-Phe-Pro-Tyr-Leu-Val),sileninB--cyclo-(Phe-Leu-Ala-Pro-Leu-Pro-Phe-Pro),sil  相似文献   

19.
本文首次提出用ABC(AvidinBiotinComplex)法标记细胞膜受体,通过FRAP(FluorescenceRecoveryAfterPhotobleaching)技术,测量细胞内吞过程中受体流动性变化的方法。实验选择巨噬细胞ConA受体,比较了用ConA-Biotin+Avidin-FITC(ABC法)和ConA-FITC(直接法)标记的膜表面ConA受体荧光强度和内吞过程中受体的流动性测量结果。结果显示ConA-Biotin+Avidin-FITC标记的巨噬细胞膜受体的平均荧光强度比用ConA-FITC标记的平均荧光强度高大约3倍;ABC法标记的受体,测量结果误差小、灵敏度高;ConA刺激15min后,巨噬细胞膜表面ConA受体的扩散系数和荧光恢复率较静息状态时明显下降。讨论了两种标记方法对测量结果的影响  相似文献   

20.
里骆林区常绿阔叶林和人工杉木林气候水文效应   总被引:11,自引:2,他引:11  
里骆林区常绿阔叶林和人工杉木林气候水文效应黄承标,文受春(广西农学院林学分院南宁530001)(广西龙胜县林业局541700)ClimaticandHydrologicalEffectsofEvergreenBroad-leavedandArtificialChineseFirForestsinLiluoForestedRegion¥HuangChengbiao(ForestryCollege,CuangxiAgriculturalUniversity,Nanning530001),WenShouchun(ForestryBureau,LongshengCounty,Guangxi541700);ChineseJournalofEcol-ogy,1993,12(3):1-7.Siteinvestigationsandresearchesin1980-1990showthatevergreenbroad-leavedandartificialChinesefirfOrestsinLiluoforestedregioncanreducethevariationrangeofatmosphericandsoilt  相似文献   

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