用硅胶管在制备PAG板状胶时封漏

在制备聚丙烯酰胺凝胶的板状胶时,封漏的方法很多,但根据我们的体会,用硅胶管封漏具有方便、可靠、清洁等优点。此法不似琼脂封漏那样麻烦,也没有使用凡士林封漏后玻板清洗费事的烦恼。用宽1cm的玻璃条两条(厚度根据自己需要,例如1mm、2mm或     

一种改进的蛋白质超薄凝胶电泳方法

介绍了一种将聚丙烯酰胺凝胶固定在电泳夹板上的蛋白质电泳方法.通过此方法蛋白质电泳可以在0.4 mm厚的聚丙烯酰胺凝胶上进行.实验证明,经此方法处理的玻板结合凝胶非常牢固,在电泳后的所有处理步骤中都不会发生凝胶脱落现象.     

一种操作简便的组合式板状电泳槽

为了简化常规电泳操作,我在实际工作中研制了一种组合式无胶封板状电泳槽,可显著地简化操作,节省时间。现介绍如下。 一、电泳槽结构特点 采用组合方式 由三块部件构成完整电泳槽。上板与下板合拢后构成凝胶模板,倒入胶液后利用凝胶本身的封固作用使上下板顶端构成上电极槽。     

回收凝胶中蛋白样品的电泳方法

近年来聚丙烯酰胺凝胶电泳和薄电点聚焦电泳已成为分析和纯化蛋白质的主要手段之一.从凝胶中回收蛋白样品的方法很多,我们参考了其中Otto和Strabfors等人的方法并加以改进,经过了一些摸索,建立了一种从凝胶中回收蛋白样品的电泳方法.此法稳定可靠,简易快速,回收率高,值得推广. 材料与方法 1.圆盘电泳玻管(10cm×0.5cm),胶浓     

一个多用途的垂直升降电泳装置

本电泳装置经过多次实验,表明仪器性能良好,可满足各种电泳的要求。它具有活动的上槽,能调节上下的距离直至250毫米,槽的两侧至少可同时做二块凝胶板,便于比较实验。凝胶板的大小和厚薄可用不同长度的玻板和不同规格的衬条(宽窄、长短、厚薄)来调节凝胶模框。本电泳槽不仅能做单向或双向电泳,还可作盘状电泳。因此是一种多用途的电泳装置。     

一种垂直板凝胶电泳装置的简便胶封技术

垂直板凝胶电泳技术,在生物学和医学研究中使用日益普遍。然而,与水平电泳相比,由装置的垂直状态产生的液面高差,在制板电泳过程中易出现胶液或电极液渗漏,导致电泳失败。因此,发展一项简便可靠的防漏技术实有必要。本文介绍一种以聚丙烯酰胺凝胶(PAG)作为防漏介质的垂直板电泳装置和胶封技术,使用效果满意。一、电泳装置由上、下电泳槽(图1)和凝胶板模(图2)二部分组成。电泳槽用有机玻璃制作。下槽是一只上口敞开的     

回收凝胶中蛋白样品的电泳方法

近年来聚丙烯酰胺凝胶电泳和薄电点聚焦电泳已成为分析和纯化蛋白质的主要手段之一。从凝胶中回收蛋白样品的方法很多,我们参考了其中Otto和Strabfors等人的方法并加以改进,经过了一些摸索,建立了一种从凝胶中回收蛋白样品的电泳方法。此法稳定可靠,简易快速,回收率高,值得推广。材料与方法 1、圆盘电泳玻管(10cm×0.5cm),胶浓度6.2％,电极缓冲液(Tris-Gly,pH8.8),样品     

微量DNA的聚丙烯酰胺凝胶薄板电泳分析

聚丙烯酰胺凝胶薄板电泳,是进行微量DNA分析的一种有效方法。它能快速鉴定DNA的迁移位置,并将分子量大小不同的DNA片段进行分离。通常DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳均采用2—3毫米厚的平板胶,由于板胶厚度大,因     

聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离血红蛋白的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,借助圆盘电泳仪的简易装置,对正常血红蛋白及异常血红蛋白(Hb)等进行了分析,获得满意效果。一、方法 1.凝胶制备 40％聚丙烯酰胺液(丙烯酰胺38.4克及甲叉双丙烯酰胺1.6克溶于蒸馏水至100毫升)1份,20％两性载体(Ampholine,国产、pH4—10)0.5份,蒸馏水3份,0.25％过硫酸铵液(临用前配制)2份,混匀,立即分装于内径4毫米,长9厘米的玻管中,胶长6厘米,日光灯下聚胶(约2小时),待胶聚合后,加样     

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测胰蛋白酶抑制剂的方法

ＳＤＳ—ＰＡＧＥ－　明胶电泳是检测蛋白酶抑制剂的常用方法,基本原理为：聚丙烯酰胺凝胶中加入ＳＤＳ和明胶,　　ＳＤＳ使蛋白酶抑制剂发生可逆变性。电泳完毕,用　Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－　１００恢复凝胶板中蛋白酶抑制剂的活性,凝胶板置于蛋白酶溶液里保温,含蛋白酶抑制剂部位的明胶不被蛋白酶水解而呈现蛋白染色带。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ一明胶电泳检测蛋白酶抑制剂时,在同一块凝胶板上可同时检测酸性、碱性及中性的蛋白酶抑制剂,但电泳后处理（包括复性,酶解,漂洗和染色）时间长（约２０ｈ）,而且对于同一样品中分子量相近的蛋白酶…     

不经染色直接从SDS-PAGE制备凝胶中准确切下所需蛋白条带的方法

蛋白样品的垂直板SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)不但是一种最常用的蛋白分析方法,也经常用于蛋白质的制备。从电泳凝胶上纯化蛋白,一般都要先用考马斯亮蓝染色,然后切下所需的蛋白条带。这里介绍一种可以不染色,直接从SDS-PAGE制备凝胶上准确切割所需蛋白条带的方法。与染色后切胶的方法相比,这种方法简单、省时,分离到的蛋白容易从胶中洗脱回收,并可明显提高回收率,而且省去了令人烦怖的从回收的蛋白中脱去染色时结合的染料的问题。作者曾用此方法分离过多种蛋白,屡试不爽。这种方法与一般的SDS-PAGE制备电泳的差别主要在电泳结束后对凝胶的处理上。     

双梯度超薄胶PAGE分离DNA及其银染与回收

双浓度梯度超薄胶PAGE分离DDRT-PCR扩增产物表明,在30cm长的凝胶板上能清晰分辨长度仅差1bp的DNA,清楚的显示出100多条分离谱带,并可直接从银染PAGE胶中回收DNA谱带。     

绿豆淀粉胶电泳在同功酶研究中的应用——关于淀粉胶电泳方法的改进

淀粉胶电泳是一种以淀粉凝胶作为介质的电泳方法。这种方法自1955年由Smithies首创以来,已普遍用于蛋白质化学的研究,特别是在同功酶的研究中使用较多。淀粉胶电泳的主要优点在于它的系统简便和无毒性。淀粉凝胶中葡萄糖残基所构成的三维网状结构虽不如聚丙烯酰胺凝胶那样均匀一     

薄层凝胶等电聚焦电泳的快速简便制胶方法

在薄层凝胶等电聚焦电泳技术中,制胶可谓是关键的一步。如果制胶失败,将造成时间上的浪费和经济上的损失(凝胶中所用的两性电解质载体——安福林的价格较昂贵)。如果制成的凝胶薄厚不匀或无支撑物,将会直接影响实验结果或给实验操作带来麻烦。我们针对这种情况,结合实验教学,摸索出一种快速、简便而效果较好的制胶方法。现简要介绍如下     

聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质区带的快速负染技术

聚丙烯酰胺凝胶电泳中的快速负染为新近发展起来的方法,其原理为用还原型谷胱甘肽还原四唑鎓硝基蓝(nitroblue tetrazolium)使凝胶背景染色,而蛋白区带不被染色,成为白亮区带,故名为负染。此方法简单、经济,可在20分钟内完成,其灵敏度不亚于考马氏亮蓝染色。具体做法简介如下:凝胶电泳结束后,用无离子水洗涤凝胶板,将其置于含有8 mM 谷胱甘肽的1 M Tris-HCl,pH9.6溶液中作用15分钟,用无离子水洗涤胶板一次,而后再将胶置于含1 mM 四唑鎓硝基蓝的1 M Tris-HCl,pH9.6溶液中显色,约2分钟出现胶背景染色,而蛋白区带不     

野皂荚多糖胶与黄原胶复配增效作用研究

野皂荚多糖胶是一种从豆科皂荚属的灌木或小乔木野皂荚豆分离得到的半乳甘露聚糖胶,按照不同配比、浓度、温度、电解质种类配制野皂荚多糖胶与黄原胶的复配胶液,通过凝胶强度测定仪比较其复配胶液凝胶强度的变化情况。结果表明,野皂荚多糖胶和黄原胶通过分子间缠绕或者分子间次级键的相互作用使其形成凝胶,协同增效凝胶的最优工艺条件为:野皂荚多糖胶与黄原胶复配质量比为6∶4,总胶浓度2%,60℃水浴中加热30min,凝胶强度达到100.5 g/cm~2。加入氯化钾、氯化钠、磷酸二氢钾、氢氧化钾能显著提高复配胶液的凝胶强度。     

快速简易凝胶板干燥方法

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳广泛应用于生物化学及免疫化学等研究方面。人们希望能将电泳凝胶板制成干片,以便进行放射自显影或使电泳结果可以长期保存。国内外已有凝胶真空干燥器生产,可以使凝胶板在加热和真空情况下迅速干燥。但价格昂贵,而且每次只能干燥1—2片,不能适应大量干燥凝胶板的需要。虽然Ginlian和王育东在室温下用简易方法干燥凝胶板,但凝胶板需先用甘油预处理     

结冷胶固定化保加利亚乳杆菌及在玉米秸秆连续发酵d-乳酸中的应用

秸秆生物炼制化学品是解决秸秆资源利用附加值低、减轻秸秆焚烧带来的环境污染的主要方法之一。本研究制备了结冷胶固定化保加利亚乳酸杆菌(Lactobacillus bulgaricus)T15凝胶珠(结冷胶-T15凝胶珠),并对其性质进行表征,建立了结冷胶-T15凝胶珠固定化细胞循环连续发酵产D-乳酸发酵工艺。结冷胶-T15凝胶珠的断裂应力为(91.68±0.11) kPa,较海藻酸钙固定化T15凝胶珠(海藻酸钙-T15凝胶珠)提高了125.12%,表明结冷胶-T15凝胶珠的强度更强。以结冷胶-T15凝胶珠为出发菌株,葡萄糖为发酵基质,10批次循环(720h)发酵,其D-乳酸最高批次产量为(72.90±2.79)g/L,较海藻酸钙-T15凝胶珠提高了33.85%,较游离T15提高了37.70%。将葡萄糖更换为玉米秸秆酶解液,使用结冷胶-T15凝胶珠进行10批次循环(240 h)发酵,D-乳酸生产强度可达(1.74±0.79)g/(L·h),远高于游离菌。10批次循环发酵后结冷胶-T15凝胶珠磨损率小于5%,表明结冷胶是一种细胞固定化的良好载体,可广泛应用于细胞固定化工业发酵领域。本研究为细胞...     

用不同格数的玻板测定灭鼠效果的研究

以往报道说明,在格粉板法中,用400格玻板比用100格玻板测定灭家鼠效果更准确(赵承善等,1983)。之后,又报道用12格框架计数粉区上鼠迹所占格数,计算灭鼠率(李镜辉等,1983)。为简便400格粉板法,并对不同格数玻板的准确性进行探讨,进行了本项工作。现报道如下。     

pH控制对热凝胶发酵的影响

热凝胶 (Ｃｕｒｄｌａｎ)是一种直链结构的 β 1,3 葡聚糖 ,由Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｆａｅｃａｌｉｓｖａｒ.ｍｙｘｏｇｅｎｅｓ发酵生产而来 ,是一种新型的微生物胞外多糖[1 ] ,其分子量在 5 0万左右。热凝胶在中性条件下不溶于水 ,但能溶于碱溶液中。加热含有热凝胶的水浊液可形成两种类型的凝胶 ,一种是弹性较低的类似琼脂的可逆胶 ;另外一种是凝胶强度大、弹性好的热不可逆胶。由于热凝胶具有独特的热成胶性能 ,在食品工业 ,特别是高温制作的食品领域具有广阔的应用前景。热凝胶的胶体可以包容和控制药物的扩散 ,所以可以用来作为药物…