峨眉山野生金蝉花孢梗束培养试验

为确定峨眉山金蝉花孢梗束培养的最佳工艺条件,对金蝉花孢梗束生长的常用培养基配方进行筛选试验,选用大米、小米、黄豆等原料进行配方试验,采用均匀设计试验法优化培养基配方。结果表明,金蝉花在以无机盐为主要营养成分的Richard琼脂培养基和Czapek琼脂培养基上均能产生孢梗束。在大米等的配方试验中,以大米为营养物质的金蝉花孢梗束生长最快,金蝉花氨基酸含量为23.4%,粗多糖含量为26.5%,蛋白质含量为29.3%,均高于野生金蝉花中该物质的含量。在均匀设计的配方试验中,10号培养基中的金蝉花孢梗束以珊瑚状为主,菌体形态最好,孢梗束产率可达57.4%。10号配方孢梗束中蛋白质的含量高达42.5%,氨基酸含量高达33.3%,均远高于野生金蝉花。     

水貂IGF-Ⅰ基因的克隆、序列分析及原核表达分析

获得水貂IGF-Ⅰ基因的cDNA序列,实现IGF-Ⅰ基因在大肠杆菌中的融合表达。利用RT-PCR技术从水貂肝脏组织扩增出水貂胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）的编码区序列。此序列编码153个氨基酸的前体蛋白质。同源性分析表明IGF-Ⅰ的核苷酸和氨基酸序列与已报道的金丝猴、小熊猫、大熊猫、东北虎、马等哺乳动物的序列高度同源（＞90%）。对位比较发现水貂的信号肽序列具有氨基酸特异性,这些氨基酸是否影响水貂IGF-Ⅰ分子的构型、进而影响功能则需要进一步的研究。将构建的重组表达载体pGEX-6P-1-IGF-Ⅰ转入大肠杆菌BL21进行原核表达,得到高效融合表达,融合蛋白分子量约为34 KD。Western-blotting杂交证实了表达蛋白的抗原活性。本研究成功克隆、表达了水貂IGF-Ⅰ基因,分析和预测了其结构和功能,为进一步的生物活性研究打下基础。     

分支氨基酸的代谢作用

氨基酸输液用的各种配方溶液中都含有亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。本文主要介绍这三种氨基酸在糖异生、蛋白质合成代谢和蛋白质分解代谢中的作用。同时介绍了这三种氨基酸之间以及与其它氨基酸的拮抗作用,为临床应用这几种氨基酸提供理论基础。     

三个茯苓材料氨基酸与蛋白质的含量比较

目的：3个茯苓品种的蛋白质与氨基酸含量比较。方法：凯氏定氮法和考马斯亮蓝测定蛋白质和氨基酸含量;结果：3个品种的茯苓所含蛋白质、氨基酸种类齐全,辐射一号中人体所需的8种必需氨基酸含量最具明显优势,其游离氨基酸和总蛋白含量高于湘靖28,蛋白质与游离氨基酸含量高低为野生型＞辐射一号＞湘靖28;结论：辐射一号是一个经济价值指标较优的品种,对茯苓新品种选育和茯苓蛋白类保健品开发具有指导意义。     

生长期中华鳖体内营养物质沉积率与饵料营养水平的关系研究

以150g左右、健壮的170只中华鳖为试验动物,随机分为17个组(其中1个组为“对照组)。以饵料能量、蛋白质为试验因素,采用2因子5水平回归正交旋转组合设计,得到9个试验饵料配方及其营养组合,进行60d饲养试验。试验表明,第9组鳖和第10～16组鳖平均体增重最高为2.22g/d,能量(GE)、蛋白质(CP)、脂肪(EE)和氨基酸(AA)沉积率分别达到36.27%、56.48%、55.06%和43.66%。试验条件下鳖体内营养物质沉积率与饵料配方营养水平及其组合有密切相关关系,9号饵料配方、营养水平及其组合比较适宜于生长期鳖的需要。       

氮、钾水平对小麦籽粒蛋白质合成关键酶活性的影响

在大田栽培条件下,以蛋白质含量差异的两个冬小麦(Triticum aestivum L.)品种宁麦9号(低蛋白)和扬麦10号(中蛋白)为材料,研究了不同氮、钾施肥水平对小麦旗叶与籽粒中游离氨基酸含量、蛋白质合成关键酶活性和籽粒蛋白质含量的影响及其与开花期旗叶氮、钾营养的关系.结果表明,氮、钾施肥显著提高了小麦花后旗叶与籽粒中游离氨基酸和籽粒蛋白质含量、旗叶谷氨酰胺合成酶(GS)及籽粒GS和谷丙转氨酶(GPT)活性,其中氮肥的作用大于钾肥、氮钾肥配合达到最大,对扬麦10号的效应大于宁麦9号.开花期旗叶氮/钾比随施氮水平的增加呈二次曲线变化,随施钾水平的增加呈下降趋势.旗叶GS活性和成熟期籽粒蛋白质含量与氮/钾比均呈显著或极显著的二次曲线关系.因此,旗叶和籽粒中蛋白质合成关键酶活性受开花期旗叶氮/钾比的显著影响,是氮、钾素影响小麦籽粒蛋白质形成的重要生理原因.     

苏芸金杆菌85-10-6(S)发酵培养基的筛选

采用正交设计及方差分析法,筛选到Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号高浓度培养基配方。通过以85-10-6(s)为供试菌株、Ⅰ号配方在7吨发酵罐进行发酵试验,证实生产性能良好,发酵液平均含菌量71亿/ml,检查菌形、同步率、产晶率均属正常。     

定向进化提高微小蛋白质内含子Ter DnaE-3 剪接活性的研究

目前,蛋白质内含子在蛋白质工程领域中得到越来越广泛的应用。为提高微小蛋白质内含子Ter DnaE-3(Trichodesmium erythraeum)在异源宿主中的剪接活性,采用易错PCR技术,通过改变反应体系中dNTP、Mg2+、Mn2+的浓度等手段,借助依赖卡那霉素的蛋白质内含子筛选系统进行筛选。Western印迹结果表明:通过定向进化,其中5号突变体的剪接活性从原始的约20%提高至约85%;9号突变体能够避免发生剪接副反应,即N端断裂反应。氨基酸突变位点与剪接活性变化的相关性分析表明:参与α-helix形成的氨基酸的突变极有可能影响蛋白质内含子的断裂反应,参与β-sheet形成的氨基酸的突变则有可能影响蛋白质内含子结构的紧凑性。通过定向进化提高微小蛋白质内含子Ter DnaE-3在异源宿主中的剪接活性,进一步验证依赖卡那霉素抗性的筛选系统的可行性,为扩大蛋白质内含子的应用范围奠定基础。     

不同饲料配方对树Qu饲养与繁殖的效果观察

于１９８４年３－７月,１９８５年和１９８７年以不同批号共２９７号树Ｑｕ,先后对三个饲料配方做了喂养试验。结果表明：含蛋白质１０．５％和配方不能用于树Ｑｕ的饲养与繁殖;含蛋白质１５．１５％的配方可作为常规饲料,用于短期饲养,其繁殖效果较差,含蛋白质２４％的配方对树Ｑｕ的配方对树Ｑｕ的饲养与繁殖均较适合,是较好的树Ｑｕ饲料配方之一,有一定推广价值。     

氨基酸肥猪粉催肥试验

<正> 前言随着世界人口的增长和生活改善,需要不断增加含有丰富蛋白质的畜产品(猪、牛、羊、鸡、鸭等)的产量。为此目的,近二十年来,在进行畜禽育种,饲养管理及其一系列技术改进中,配合饲料成为引入注目的重要课题。人们从家畜营养生理的研究得知:要保障家畜迅速生长发育,其饲养配合比中,氨基酸的组分应与家畜蛋白质饲料中氨基酸组分相近。一九六五年以前大都是采用禾谷、油粕、鱼粕为配合饲料,据测定,其必须氨基酸含量特别是促     

施氮水平对小麦籽粒发育过程中氨基酸含量的影响

施氮能提高小麦籽粒蛋白质氨基酸的含量,并与施氮水平呈正相关;但对普通小麦必需氨基酸与蛋白质氨基酸的比值没有影响,而硬粒小麦4286随施氮水平的提高,该比值下降。在开花后32d以前,籽粒发育过程中游离氨基酸与施氮水平呈正相关,以后,籽粒中游离氨基酸趋于相近,表明施氮增加了游离氨基酸的库源,不同基因型小麦对施氮水平的反应不同,在同等施氮水平和栽培条件下,籽粒中蛋白质氨基酸和游离氨基酸含量为硬粒小麦4286＞小偃6号＞小偃107,不同施氮水平下,籽粒中氨基酸含量为高氮＞中氮＞低氮。     

一株水貂阿留申病毒VP2基因的高变区测序分析

为分析我国水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)跨宿主传播的分子机制,扩增获得一株吉林地区水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)VP2基因高变区片段。序列分析表明,第235位存在与参考毒株不同的氨基酸位点,进化树分析结果表明,该毒株与丹麦高致病毒株ADV-K亲缘关系较近。ADV第235位氨基酸位点可能与病毒的感染能力相关。     

用日立835型氨基酸自动分析仪测定精氨酸的短程序

<正> 精氨酸是动物体所必须的十种氨基酸之一。它常出现在氨基酸输液的配方之中。近年来,精氨酸促进机体特异性免疫作用的发现和研究更令人瞩目。用日立835型氨基酸分析仪,按标准程序测定蛋白质水解液耗时70分钟,作者在大量测定精氨酸的过程中,利用仪器内原有的缓     

用日立835-50型氨基酸自动分析仪测定赖氨酸、蛋氨酸的短程序

<正> 动物体所需的十种必需氨基酸中,赖氨酸和蛋氨酸是重要的限制性氨基酸。在配合饲料,谷物良种选育及蛋白质饲料的开发利用工作中,都将高赖氨酸或高蛋氨酸做为重要指标。日立835—50型氨基酸自动分析仪测定蛋白质水解液氨基酸成份的标准程序需要72分钟,这对大量只需测定赖氨酸和蛋氨酸或两者之一的样品很不经济,既费时间,也费试剂。     

狐、貉和水貂犬瘟热病毒受体SLAM 的基因克隆及其真核表达

信号淋巴激活分子(SLAM)为犬瘟热病毒(CDV) 感染其宿主动物识别的细胞受体。本试验应用RT -PCR 从狐狸、貉和水貂的外周血淋巴细胞中克隆到其相应SLAM 基因。基因测序比较发现,狐狸、貉与同科的犬SLAM 基因编码区长度均为1 029 bp,核苷酸同源性高于98.6% ;而水貂SLAM 基因编码区长度为1 020 bp,与以上三种动物遗传关系较远(核苷酸同源性< 83.7%),但与海豹SLAM 基因遗传关系较近(核苷酸同源性为91.4% )。基于不同动物SLAM 基因序列的系统进化树分析显示,犬、狐狸、貉、水貂和海豹在进化树上构成了以CDV 为感染宿主的遗传分支。氨基酸序列比较显示,该5 种动物SLAM 分子上均存在一个长度为26 个氨基酸的信号肽序列,且在空间结构上影响宿主--病毒特异性的8 个关键氨基酸均完全保守。通过构建表达该狐狸、貉、水貂SLAM 基因的三种真核表达质粒,分别转染CRFK 细胞后,应用CDV 强毒感染试验证实,CDV 均能在三种转染细胞上产生明显的细胞病变效应(CPE),而未转染CRFK 细胞对照无CPE 产生,由此证实作为CDV细胞受体的狐、貉和水貂的SLAM,体外表达后能明显增强犬瘟热强毒株对非敏感细胞的感染能力。     

植物氨基酸生物合成及其调节研究的进展

蛋白质的与非蛋白质的氨基酸从植物分离出的氨基酸在一百种以上。醇不溶的残渣水解后释放的氨基酸,通常在蛋白质水解物内发现,叫蛋白质氨基酸。在蛋白质水解物以外遇到的氨基酸叫非蛋白质氨基酸。一般认为: (1)非蛋白质氨基酸是次生产物,在植物     

木薯亲本正反交亲和力与授粉柱头的蛋白质组学分析

为研究木薯不同亲本杂交亲和力的差异,分别以华南5号、华南6号、华南7号为亲本进行正反交,统计不同组合间稔实率的差异。同时对受精柱头蛋白质进行分析,研究柱头对杂交亲和力影响的蛋白质调控水平。结果表明:SC5(♀)×SC7(♂)平均稔实率最高为26.22%,SC7(♀)×SC5(♂)平均稔实率最低为11.13%。通过双向电泳和质谱法分析母本SC5和SC7授粉柱头的蛋白质变化,得到27个差异蛋白质点,其中19个蛋白质出现上调表达,这些差异表达蛋白质分别参与碳代谢及能量代谢、分子伴侣和氨基酸代谢;而8个蛋白质下调表达,它们分别参与蛋白质合成及氢氰酸代谢;表明这些代谢途径对木薯亲和力高低有一定的影响。     

黄皮种子蛋白质营养价值的评价研究

在对黄皮种子氨基酸的组成及蛋白质的含量进行分析的基础上,应用模糊识别法和氨基酸比值系数法,对其营养价值进行了全面评价,并与8种植物种子蛋白质进行对照比较。结果表明:黄皮种子(干品)蛋白质含量为8.625%,含有17种氨基酸,种类齐全,其含量为762.2 mg.g-1蛋白质,必需氨基酸(EAA)占总氨基酸量的35.5%,第一限制性氨基酸为含硫氨基酸(M et+Cys),贴近度为0.8536,营养价值与高粱米、西瓜子等接近。     

柞蚕抗菌肽CA1的分离

应用FPLC、HPLC系统配合MALDI TOF MS等技术 ,分离得到一个以灭活的Escherichiacoli诱导产生的具有明显杀菌活性的柞蚕抗菌肽CA₁。自动蛋白质序列分析仪测定其一级结构为WNPFKELERAGSRVRDAIISAGVAVATVAQATAILK ,含有 36个氨基酸残基 ,经联机检索 ,与cecropinD有 88%的同源性 ,仅有 4个氨基酸残基的差异 ,其中铰链区第 2 1～ 2 3位氨基酸为AGV ,与已知柞蚕抗菌肽A、D铰链区AGP有所不同 ,提示抗菌肽存在多态性。     

蛋白质分泌信息与基因工程

蛋白质分泌信息存在于自身氨基酸排列顺序内,上溯到DNA分子中。信号顺序引发蛋白质分泌的早期过程,成熟蛋白顺序决定最终分泌结果。它们相互作用并离不开细胞输出环境的配合。信号顺序启发人们对分泌性载体的构建,对蛋白质分泌信息的全面了解,肯定了基因工程中全方位研究的必要。