洞庭青鲫与其他六个鲫鱼品系线粒体DNA控制区的比较分析

运用PCR扩增、克隆、测序等技术,在获得洞庭青鲫和彭泽鲫线粒体DNA控制区全序列的基础上,对洞庭青鲫、彭泽鲫、普通鲫、红鲫、白鲫、A系和D系银鲫等7个鲫鱼品系线粒体DNA控制区的碱基组成、变异情况、序列结构和系统进化进行了比较分析。结果表明,7个鲫鱼品系线粒体DNA控制区碱基的平均组成为A:(32.7±0.16)%,C:(20.4±0.37)%,G:(14.1±0.08)%,T:(32.8±0.36)%,序列分歧率为0—5.7%,其中红鲫和白鲫的分歧率最大(5.7%),彭泽鲫、A系和D系银鲫之间最小(0)。洞庭青鲫与白鲫的分歧率为5.6%,与彭泽鲫、A系和D系银鲫为2.2%,与红鲫和普通鲫分别为0.8%和0.7%。对比哺乳动物线粒体DNA控制区结构,并参照其他鱼类序列,将7个鲫鱼品系的控制区分为终止序列区、中央保守区和保守序列区三个区域。同时识别了7个鲫鱼品系中一系列保守序列,并给出了它们的一般形式。序列差异和系统进化分析表明,在7个鲫鱼品系中,洞庭青鲫与普通鲫和红鲫的亲缘关系最近,与彭泽鲫、A系和D系银鲫亲缘关系次之,与白鲫的亲缘关系最远,而彭泽鲫、A系和D系银鲫三者在线粒体DNA控制区的相似性和分歧率上则表现为是同一个鲫鱼品系。       

17种金线Ba核DNA含量及倍性的研究

采用血涂自、Feulgen染色和显微分光光度技术,测定了金线Ba属（Sinocyclocheilus）17个种的核DNA含量。结果显示,除侧条金线Ba(S.lateristritus）中采自云南沾益炎方山那边的样本之2C值为7.79 pg外,其余的核DNA 2C值都集中分布在4.19-4.86pg范围,大体与其近缘四倍体种2C值相同或相近,是其近缘二倍体种2C值的大约2倍 此我们推断,这17种金线Ba很有都是四倍体,个别种还含有八倍体的类型,金线Ba属可能是整属的四倍体起源。     

应用流式细胞术测定17种中国野生蔷薇核DNA含量

以17种中国野生蔷薇为试材,采用改良的LB 01裂解液,以4种不同的标准植物——大豆（Glycine max Merr.‘Polanka’）、绿豆（Vigna radiata（L.） Wilczek）、番茄（Lycopersicon esculentum Miller）和玉米（Zea mays L.）为外标,以二倍体材料丽江蔷薇（Rosa×lichiangensis Yü et Ku）为内部参照,利用流式细胞术对其核DNA含量及染色体倍性进行检测,并采用常规染色体压片法验证倍性准确性。本研究首次检测了3个二倍体种——商城蔷薇（Rosa shangchengensis T.C.Ku）、广东蔷薇（Rosa kwangtungensis Yü et Tsai）和无刺刺梨（Rosa roxburghii f.inermis S.D.Shi）,1个三倍体种——伞房蔷薇（Rosa corymbulosa Rolfe）和1个四倍体种——弯刺蔷薇（Rosa beggeriana Schrenk）的核DNA含量及基因组大小。结果表明,流式细胞术检测结果与常规染色体压片法结果一致,可对中国野生蔷薇的倍性研究进行补充。本研究结果可丰富中国蔷薇属植物的细胞遗传学背景资料并为繁育新品种提供理论依据。     

几种念珠菌DNA总含量的流式细胞分析

应用流式细胞术(FCM)对处于稳定生长阶段的念珠菌属(Candida)的7种8株念珠菌进行了DNA总含量的流式细胞(FCM)分析。这8株念珠菌是:白念珠菌(C.albicans)2株,热带念珠菌(C.tropicalis),克柔念珠菌(C.krusei),近平滑念珠菌(C.parapsiolosis),乳酒念珠菌(C.kefyr),白念珠菌星形变种(C.stellatoidea),即血清B型白念珠菌,季也蒙念珠菌(C.guilliermondii)各一株。应用EB一步插入法染色,用鸡红细胞(CRBC)作为内参标准进行DNA总含量测定。分析结果表明:稳定生长阶段的组方图上,大多数念珠菌细胞处于DNA合成周期的G_0/G_1期;DNA总含量有明显的种间和种内差异。     

流式细胞仪检测高等植物细胞核DNA含量的方法

相对于动物和微生物而言,流式细胞术在植物科学上的应用会因植物组织与细胞(如细胞壁、中央液泡、特殊细胞器等)的特殊结构以及次生代谢产物等特殊成分,造成样品在前期处理、染色及测试等方面的困难,甚至导致检测失败或结果不准确。笔者在长期运用流式细胞仪测试工作中,积累了大量的植物样本检测经验,并参考国内外相关文献,总结出从植物取材、样品制备到植物细胞核DNA流式检测的方法和技巧,可为植物科学研究者及从事流式细胞检测的技术人员提供实验参考。     

三个三倍体鲫鱼品系及野鲫mtDNA的比较研究

用16种限制性内切酶研究了银鲫(3N=156～162)、彭泽鲫(3N=162)和缩骨鲫(3N=150)3个三倍体鲫鱼品系及野鲫(2N=100)的线粒体DNA。有6种酶在种系间和种系内产生限制性片段长度多态性(RFLPs),银鲫共存在4种单倍型,彭泽鲫2种,野鲫3种,缩骨鲫1种。彭泽鲫和银鲫拥有相同的常见单倍型,缩骨鲫的单倍型属于野鲫的常见型。根据限制性位点的变异数据,计算了单倍型间的相似性、核苷酸多样性、品系内核苷酸多样性和品系间的遗传距离,确定彭泽鲫属于银鲫的一个地方品系,缩骨鲫属于野鲫的一个地方品系。根据核苷酸的差异,推算出银鲫和野鲫两个亚种的分化大约在11万年前完成。     

流式细胞术检测胃癌前病变DNA及p21，p53含量

应用流式细胞术和免疫荧光技术,对80例胃癌前病变细胞中DNA含量,rasp21和p53蛋白进行定量检测,探讨其在胃癌前病变中,作为癌变早期标志物的临床意义.检测结果发现,胃癌前病变的DNA异倍体率随不典型增生病变的分级增高而增加, rasp21和p53蛋白的表达量亦随胃癌前病变不典型增生程度的加重而增高.DNA异倍体和rasp21表达阳性的胃癌前病变出现的癌变率显著增高,提示可能是癌变早期的分子标志物.     

17种金线鲃核DNA含量及倍性的研究

采用血涂片、Feulgen染色和显微分光光度技术 ,测定了金线属 (Sinocyclocheilus) 17个种的核DNA含量。结果显示 ,除侧条金线 (S .lateristritus)中采自云南沾益炎方山那边的样本之 2C值为 7 79pg外 ,其余的核DNA 2C值都集中分布在 4 19～ 4 86pg范围 ,大体与其近缘四倍体种 2C值相同或相近 ,是其近缘二倍体种 2C值的大约 2倍。据此我们推断 ,这 17种金线很可能都是四倍体 ,个别种还含有八倍体的类型 ,金线属可能是整属的四倍体起源。     

几种念珠菌DNA总含量的流式细胞分析

应用流式细胞术（ＦＣＭ）对处于稳定生长阶段的念珠菌属的７种８株念珠菌进行了ＤＮＡ总含量的流式细胞（ＦＣＭ）分析。这８株珠菌是：白念珠菌２株，热带念珠菌，克柔念珠菌，近平滑念珠菌，乳酒念珠菌，白念珠菌星形变种，即血清Ｂ型白念珠菌，季也蒙念珠菌各一株。应用ＥＢ一步插入法染色，用鸡红细胞（ＣＲＢＣ）作为内参标准进行ＤＮＡ总含量测定。分析结果表明：稳定生长阶段的组方图上，大多数念珠菌细胞处于ＤＮＡ合成周期     

三种鲫鱼品系同工酶比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,对彭泽鲫、银鲫D系以及野鲫三种鲫鱼品系的心、肝和肾脏组织的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶表型进行了比较研究.结果表明彭泽鲫乳酸脱氢酶同工酶比银鲫D系在肝组织多出二条酶带(LDH7'和LDH8');超氧化物歧化酶在心和肾组织中分别多出一条酶带(SOD12'),表明彭泽鲫和银鲫已在生化水平产生明显的分化,推测它们可能起源于不同的地区,由不同的祖先,独立演化而形成.此外,彭泽鲫和银鲫D系的同工酶电泳图谱都包含野鲫的基本酶带,而彭泽鲫和野鲫的酯酶同工酶电泳图谱尤为相似,推测彭泽鲫和银鲫可能起源于野鲫,而彭泽鲫和野鲫的关系较近,银鲫和野鲫的关系较远.     

鲫鱼(Carassius auratus)外周血细胞显微和亚显微结构的观察

本文记载了用光镜和电镜观察鲫鱼外周血细胞所得的结果。 用光镜观察以Wright氏染液染色的血涂片,可区分出下列各种类型的血细胞:红血细胞,淋巴细胞,血栓细胞,单核细胞,中性、嗜酸和嗜碱粒细胞。此外,在外周血液中还可以看到少量未成熟的红血细胞。 在外周血液中,嗜酸和嗜碱粒细胞的数量极少。但在头肾和脾等造血组织中这类细胞的数量较多。 鲫鱼外周血液中各种血细胞的超微结构,基本上和人类以及其他鱼类相应血细胞的超微结构相似。     

鲫不同种系线粒体DNA物理图谱的构建

用１３种限制性内切酶对鲫鱼三个亚种共七个品系的线粒体ＤＮＡ进行分析,其中有９种酶在种系间或种系内产生限制性片断长度多态性,发现了１６个线粒体ＤＮＡ组合单倍型,通过双酶切分析,构建了１６个线粒体ＤＮＡ组合单倍型的１３种限制性内切酶的发点的物理图谱。     

雌核发育银鲫的受精生物学研究——天然雌核发育银鲫繁殖方式的讨论

本文研究了同源雌核发育银鲫精子在4种类型的雌核发育银鲫卵中的发育特征。初步揭示了天然雌核发育银鲫根据精子的来源不同而分别具有二种不同的繁殖方式,对其在维持雌核发育银鲫种群生存,促使克隆分化等方面的独特的生物学意义进行了讨论。     

方正银鲫与扎龙湖鲫体细胞、精子的DNA含量及倍性的比较研究

经淋巴细胞培养方法制备染色体表明黑龙江银鲫[Carassius auratus gibelio(Bloch)]的染色体数为150±条,鲫[c.auratus auratus(Linnaeus)]的染色体数为100条。一些研究者将前者称为三倍体,后者称为二倍体。通过显微分光光度法测量了这两鲫鱼雄性个体的红血球和精子的DNA含量。前者分别为112.81和57.57单位,其比值为1.96∶1,后者分别为77.22和37.57单位其比值为2.06∶1。由此证明银鲫雄性的精子发生与鲫一样能正常完成减数分裂。因此,我们认为黑龙江银鲫不是三倍体而是一个二倍体种群(2n=150±,n=75±),鲫为2n=100,n=50。     

鲫鱼后鳃体结构与功能的研究

本文对鲫鱼后鳃体的形态结构及其功能进行了初步研究。结果表明,鲫鱼后鳃体是一种内分泌腺体。腺体由滤泡组成,滤泡上皮包括二种颗粒细胞(亮细胞和暗细胞)和一种支持细胞。对不同性腺期的鲫鱼后鳃体的观察表明,后鳃体滤泡细胞随性腺发育增加高度,滤泡增生,腺体体积增大。而性腺成熟后期,后鳃体滤泡上皮有崩溃现象。揭示后鳃体可能与性腺发育有关。用免疫组织化学的非标记过氧化物酶技术对鲫鱼后鳃体进行激素降钙素的定性定位研究,观察到滤泡上皮的颗粒细胞发生阳性反应,由此证明颗粒细胞可分泌降钙素。     

野生鲫和五个金鱼品种的判别分析和聚类分析

对野生鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ）和五个金鱼品种（Ｃａｒａｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ ｖａｒ．）的亲缘关系进行了比较研究。（１）两组判别分析表明,以１７个形态变异性状的指标衡量野生鲫鱼和金鱼以及金鱼各品种之间的差异,说明金鱼的种下分化是明显的（Ｆ〉〉Ｆ０．０１）。（２）对６个品种（包括鲫鱼）各２０尾鱼（计１２０个个体）进行１７个指标的聚类分析,结果大部分个体（占各品种的５０￣１００％）     

鲫鱼尾部神经分泌系统显微和亚显微结构的季节性变化

鲫鱼尾部神经分泌系统的神经分泌细胞和它的轴突中可观察到各种不同电子密度的颗粒。在性腺各个不同的发育阶段,该系统的分泌物具有累积、充满、释放和恢复这样一种周期性变化,由此说明鲫鱼的尾部神经分泌系统和它的生殖有关。     

两性型天然雌核发育彭泽鲫染色体组型的研究

彭泽鲫是一种两性型天然雌核发育群体。染色体组型分析结果表明：雌、雄鱼的染色体数目均为１６６。它们的核型组成是：３２条中部着丝点染色体、４０条亚中部着丝点染色体、１８条亚端部着丝点染色体和７６条端部着丝点染色体。臂数（ＮＦ）为２３８。本研究结果与其它雌核发育类型的鲫鱼有明显的差别。     

团头鲂和日本白鲫血液的比较研究

在８２尾团头鲂和４８尾日本白卿材料鱼上测定了血液中红细胞数、白细胞数、血红蛋白值，经细胞脆性值，比积及比重，血细胞沉降率、白细胞分类计数及各型血细胞大小赞美 下述常数值的雌雄差异，周年变化及鱼种间的差异，为鱼类血液学提供了较为系统的资料。