内窥式共焦显微术

内窥式共焦显微术是将共焦显微术和光纤技术结合起来的新技术,既具有共焦显微术的独特优点:高分辨率和三维成像;又能对体内器官组织进行在体成像.分析共焦成像的原理,阐述了内窥式共焦成像系统,详细讨论其研究进展以及我们的研究结果,并分析了其优点及在生物医学领域的应用.     

激光共焦显微成像的最新进展及其在生命科学研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜近年来得到了迅速发展,是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。通过它可以对观察样品进行无创断层扫描和成像,在生物学和医学研究诊断的各个方面都得到了广泛的应用。本文主要介绍了激光扫描共焦显微镜的基本原理和发展状况,并着重介绍了在共焦荧光显微镜中采用薄荧光层和切片成像特性图来表征成像状态的功能。这种方法一般用于表征共聚焦和多光子显微镜的成像特性,是比较显微镜切片成像条件、成像质量等相关性能的重要依据。     

用于动物分类学研究领域的显微成像新技术

UV-C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图像分析技术，特别适用于采集非平面样品（高度变化范围超过了显微镜影深范围）的图像，它彻底解决了传统光学显微镜成像时尚倍数与大景深不能共存的问题。     

用于动物分类学研究领域的显微成像新技术

UV-C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图象分析技术，特别适用于采集非平面样品（高度变化范围超过了显微镜景深范围）的图象，它彻底解决了传统光学显微镜成像时高倍数与大景深不能共存的问题，使样品的不同高低部位都能清晰成像，     

用于动物分类学研究领域的显微成像新技术

UV—C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图像分析技术，特别适用于采集非平面样品（高度变化范围超过了显微镜景深范围）的图像，它彻底解决了传统光学显微镜成像时高倍数与大景深不能共存的问题，使样品的不同高低部位都能清晰成像，可以获得像电镜图像一样的巨大景深和精致的细节，更能得到电镜图像所没有的真实色彩。UV—C以清晰直观的样品图片带给读者手绘图所不能达到的视觉效果，是动物分类学家研究和描述物种的好助手。     

用于动物分类学研究领域的显微成像新技术

UV-C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图像分析技术，特别适用于采集非平面样品（高度变化范围超过了显微镜景深范围）的图像，它彻底解决了传统光学显微镜成像时高倍数与大景深不能共存的问题，使样品的不同高低部位都能清晰成像，可以获得像电镜图像一样的巨大景深和精致的细节，     

用于动物分类学研究领域的显微成像新技术

UV—C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图像分析技术，特别适用于采集非平面样品（高度变化范围超过了显微镜景深范围）的图像，它彻底解决了传统光学显微镜成像时高倍数与大景深不能共存的问题，使样品的不同高低部位都能清晰成像，可以获得像电镜图像一样的巨大景深和精致的细节，更能得到电镜图像所没有的真实色彩。UV—C以清晰直观的样品图片带给读者手绘图所不能达到的视觉效果，是动物分类学家研究和描述物种的好助手。     

用于动物分类学研究领域的显微成像新技术

UV—C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图象分析技术,特别适用于采集非平面样品（高度变化范围超过了显微镜景深范围）的图象,它彻底解决了传统光学显微镜成像时高倍数与大景深不能共存的问题,使样品的不同高低部位都能清晰成像,可以获得像电镜图像一样的巨大景深和精致的细节,更能得到电镜图像所没有的真实色彩。UV—C以清晰直观的样品图片带给读者手绘图所不能达到的视觉效果,是动物分类学家研究和描述物种的好助手。     

二组分荧光寿命成像显微术的研究

用ＭｏｎｔｅＣａｒｌｏ方法研究了激发光的调制频率、ＣＣＤ所记录到的光强度、荧光寿命的大小以及权值对二组分荧光寿命成像显微术的频域外差法测量及数据处理精度的影响,提出了改进测量精度的方法,如选择合适的调制频率和染料,使调制频率ω和荧光寿命τ满足（１４）和（１５）式;增大ＣＣＤ的积分时间等。     

皮肤组织显微共聚焦拉曼光谱成像研究

显微共聚焦拉曼光谱成像技术(Confocal Raman Microspectroscopy Imaging,CRMI)能够对样品微区进行精确无损的拉曼光谱分析和光谱图像扫描,提供生物样品的无损高分辨光学信息。本项研究工作,利用CRMI技术实验获取了正常人体离体皮肤组织的拉曼光谱特征,并结合典型特征峰的扫描图像,探讨了脂类、蛋白质等成分在皮肤真皮层的分布特点。实验发现皮肤组织真皮层内胶原蛋白的拉曼特征峰1 248 cm-1强度及其空间分布尤为突出,这一实验结果与组织学中胶原纤维占真皮结缔组织95%的事实相符。实验结果显示,CRMI技术能够全面诠释生物组织内部生化组成与分布信息,在实验描述皮肤组织病理变化的分子生物学机制方面具有广阔的应用前景。     

基于旋转偏振角的线偏振扫描成像方法研究

提出一种基于旋转偏振角的新的偏振光成像方法:改变入射线偏振光偏振角和检偏角,采集样品图像系列,总结出背向散射光2个正交偏振分量的光强差关于入射线偏振光偏振角和检偏角的函数关系式.通过对模拟散射介质,猪肉脂肪,猪肉骨骼肌和牛肉骨骼肌等样品进行实验,论证了偏振差函数式中各个参数与样品光学特性之间的联系,并从中提取出2个相互独立的参数,分别表征样品的纤维方向角和光学各向异性度,从而实现对样品浅表层光学特性进行定量测量.和普通光强图像相比,用这些独立的光学信息生成不同基色的图像,能更直观明了地区分组织结构差异,具有潜在的临床医学应用价值,如成为一种皮肤疾病、皮肤损伤的检测方法.     

激光扫描共聚焦显微镜活细胞成像方法优化

激光扫描共聚焦显微镜可用于固定样品和活细胞样品的成像,近年来得到了广泛的应用。本文介绍了激光扫描共聚焦显微镜的基本原理及其在活细胞成像中的应用,并以FV10-ASW Viewer4.2软件为例,从扫描速度、分辨率、降噪、光电倍增调节、多参数协同优化、成像质量评估、图像后期处理等多个角度总结了激光扫描共聚焦活细胞成像系统的方法优化和推荐参数设置。本文的工作可以为活细胞实验提供一定参考。     

Quantification and its Applications in Fluorescent Microscopy Imaging

Fluorescent microscope imaging technologies have developed at a rapid pace in recent years. High-throughput 2D fluorescent imaging platforms are now in wide use and are being applied on a proteome wide scale. Multiple fluorophore 3D imaging of live cells is being used to give detailed localization and subcellular structure information. Further, 2D and 3D video microscopy are giving important insights into the dynamics of protein localization and transport. In parallel with these developments, significant research has gone into developing new methodologies for quantifying and extracting meaning from the imaging data. Here we outline and give entry points to the literature on approaches to quantification such as segmentation, tracking, automated classification and data visualization. Particular attention is paid to the distinction between and application of concrete quantification measures such as number of objects in a cell, and abstract measures such as texture.     

Feulgen Staining of Intact Plant Tissues for Confocal Microscopy

A method was developed to prepare plant structures for confocal laser scanning microscopy by combining Feulgen staining with pararosaniline and embedding in LR White_TM. This procedure preserves intact, delicate structures for three-dimensional imaging without loss from sectioning or squashing, and the slides can be viewed several times without serious photobleaching.     

用激光共聚焦显微术在小鼠卵母细胞中检测蛋白激酶C

用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术结合的方法研究了小鼠卵母细胞中蛋白激酶C(PKC)α和βⅠ的表达和定位,以及蛋白激酶C(PKC)和皮质颗粒的双标记,探讨了以哺乳动物卵母细胞为实验对象进行免疫荧光共聚焦显微研究的简便方法.结果发现,PKC α和βⅠ在小鼠生发泡期和MⅡ期卵母细胞中都有表达,但表达部位存在差异.说明采用改进的激光共聚焦显微术,可以方便、灵敏地检测特异蛋白质在卵母细胞中的表达部位,从而为生殖、发育研究提供有效手段.     

Live Cell Imaging of Primary Rat Neonatal Cardiomyocytes Following Adenoviral and Lentiviral Transduction Using Confocal Spinning Disk Microscopy

Primary rat neonatal cardiomyocytes are useful in basic in vitro cardiovascular research because they can be easily isolated in large numbers in a single procedure. Due to advances in microscope technology it is relatively easy to capture live cell images for the purpose of investigating cellular events in real time with minimal concern regarding phototoxicity to the cells. This protocol describes how to take live cell timelapse images of primary rat neonatal cardiomyocytes using a confocal spinning disk microscope following lentiviral and adenoviral transduction to modulate properties of the cell. The application of two different types of viruses makes it easier to achieve an appropriate transduction rate and expression levels for two different genes. Well focused live cell images can be obtained using the microscope’s autofocus system, which maintains stable focus for long time periods. Applying this method, the functions of exogenously engineered proteins expressed in cultured primary cells can be analyzed. Additionally, this system can be used to examine the functions of genes through the use of siRNAs as well as of chemical modulators.     

Feulgen Staining of Intact Plant Tissues for Confocal Microscopy

A method was developed to prepare plant structures for confocal laser scanning microscopy by combining Feulgen staining with pararosaniline and embedding in LR White_TM. This procedure preserves intact, delicate structures for three-dimensional imaging without loss from sectioning or squashing, and the slides can be viewed several times without serious photobleaching.     

用激光共聚焦显微术检测哺乳动物卵母细胞中纺锤体相关蛋白的方法(英)

哺乳动物卵母细胞是发育生物学和细胞生物学的重要研究对象.激光共聚焦显微术是检测卵母细胞中纺锤体相关蛋白的有用技术,但是针对哺乳动物卵母细胞的特点需要做许多调整以得到理想结果.其中,卵母细胞的准备、固定、透膜、脂类抽提、抗体孵育步骤十分关键.另外,不同物种的卵母细胞也有差异,在进行激光共聚焦研究时需要做出相应的调整.     

共聚焦激光扫描显微镜在发育生物学中的应用

共聚焦激光扫描显微镜以高空间分辨率、非介入无损伤性连续光学切片、实时动态观察等优越性,应用于生物医学众多领域中。本文主要论述共聚焦激光扫描显微镜在发育生物学中的应用。     

活细胞钙动态的共聚焦扫描显微镜检测技术

共聚焦激光扫描显微镜（Confocal Laser Scarming Microscope,CLSM）广泛应用于活细胞内钙敏感探针标记的钙水平的动态测量。较之传统的显微镜CLSM在钙成像分析上有着不可比拟的优越性,但也存在一些缺陷,近些年陆续出现了一些针对这些缺陷的改善措施,如比率法、葡聚糖探针及其他一些新技术与共聚焦显微镜的联合应用等,并且出现了诸如双光子显微镜等新型激光共聚焦显微镜。随着共聚焦钙成像技术的不断发展进步,其今后的应用前景将会越越广阔。