重庆市1264株粪肠球菌和屎肠球菌耐药性监测

【摘 要】 目的 了解2011年中国重庆市主要7所教学医院临床分离粪肠球菌和屎肠球菌对各类抗菌药物的耐药性。方法 重庆市主要7所教学医院(6所综合性医院,1所儿童医院)按统一方案、采用统一的材料、方法和判断标准(CLSI 2011年版)进行粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性监测。数据用WHONET 5.5软件按照CLSI 2011年版折点进行分析。结果 共分离到非重复粪肠球菌589株、屎肠球菌675株,对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁仍极敏感,耐药率<2%,万古霉素耐药粪肠球菌和屎肠球菌检出率分别为0.3%、0.7%。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、呋喃妥因的耐药率较低,分别为14.8%、8.6%和5.1%,对高浓度庆大霉素的耐药率分别为46.9%;屎肠球菌耐药性明显高于粪肠球菌,对青霉素和氨苄西林耐药率接都在90％左右。儿童和成人耐药率存在一定差别。结论 本市医院肠球菌感染以屎肠球菌为主, 粪肠球菌次之,两者耐药性明显不同, 监测其耐药情况对指导临床用药具有重要意义。     

肠球菌感染性心内膜炎中粪肠球菌毒力因子的作用

肠球菌是革兰阳性球菌。1984年,肠球菌作为一个新的菌属从链球菌属中独立出来,即肠球菌属(enterococcus)。肠球菌营养要求较高,在含有血清的培养基上生长较好。接种血平板35℃孵育18 h后,可形成灰白色、不透明、表面光滑、直径为0.5-1 mm大小的圆形菌落,在血琼脂平板培养基上主     

牦牛肠道粪肠球菌的分离和鉴定

试验为获得1株与牦牛肠道共生的粪肠球菌,通过对健康牦牛粪样中的肠球菌进行分离培养、革兰染色、生化试验、16S rRNA基因测序比对等生物学鉴定,初步证实该分离菌株为粪肠球菌。此试验为进一步分析牦牛肠道菌群结构,探索牦牛耐饥、耐渴、耐粗饲、对高山草原极强适应性与其肠道菌群的关系,进一步研究与牦牛共生的粪肠球菌的生物学特性、生理特性、对宿主危害性等提供一些实验依据。     

血流感染粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及耐药研究

回顾性分析上海市某三甲医院血培养阳性标本中粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及对抗菌药物的耐药特征,为临床治疗其所致感染奠定基础。收集上海市某三甲医院2012年2月—2016年9月血流感染患者血液标本中的粪肠球菌和屎肠球菌,采用法国生物梅里埃公司的VITEK 2Compact全自动细菌鉴定和药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏测定,研究细菌临床分布特点及对常用抗菌药物的耐药特征。共分离获得30株粪肠球菌和17株屎肠球菌。粪肠球菌样本主要来自泌尿科、消化科和血液科,所占比例分别为13.33%、16.67%和10.00%。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素和红霉素的耐药率分别为13.33%、10.00%、36.67%、33.33%、66.67%和60.00%。屎肠球菌样本主要来自消化科(29.41%),其对以上抗菌药物的耐药率分别为88.24%、82.35%、88.24%、76.47%、23.53%和70.59%。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率显著高于粪肠球菌,而对四环素的耐药率显著低于粪肠球菌。两者均对替加环素、利奈唑胺和万古霉素敏感,但万古霉素对屎肠球菌的最低抑菌浓度显著低于粪肠球菌。结果提示,屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率高于屎肠球菌,对万古霉素敏感,且其万古霉素最低抑菌浓度低于粪肠球菌。本研究为治疗这两种细菌所致感染的经验性用药提供了数据支持。     

不同分离源粪肠球菌的毒力基因比较

【背景】粪肠球菌作为一种重要的乳酸菌在食品和医药领域应用广泛。由于很多粪肠球菌为条件致病菌,因此充分了解粪肠球菌基因组中毒力基因(Virulence genes)的携带情况对合理利用该菌种有重要的意义,但目前还没有研究专门报道不同分离源粪肠球菌基因组中毒力基因的携带情况。【目的】了解不同分离源粪肠球菌毒力基因的携带情况,评估分离自自然发酵乳制品中的粪肠球菌的安全性。【方法】利用比较基因组学方法确定107株分离自乳源、血液、尿液、粪便和水源中的粪肠球菌携带毒力基因情况,使用主成分分析比较不同分离源菌株毒力基因的差异,通过卡方检验筛查出环境特异性毒力基因。【结果】在107株粪肠球菌基因组共找到88种编码不同功能蛋白的毒力基因,其中与粘附相关的毒力基因最多。同时发现乳源分离株与其他环境分离株所携带的毒力基因没有显著差异。【结论】乳源分离株中携带的毒力基因与其他环境分离株无显著差异,表明分离自自然发酵乳制品中的粪肠球菌可能同样存在致病风险,因此在食品工业中使用粪肠球菌时一定要对菌株的安全性做全面的评估。     

粪肠球菌和屎肠球菌耐药性分析

目的 监测我院肠球菌中粪肠球菌株和屎肠球菌株的耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法 采用法国生物梅里埃公司的GPI板进行细菌鉴定及药敏试验,应用whonet5软件统计粪肠球菌和屎肠球菌的耐药率。结果 粪肠球菌和屎肠球菌对氯霉素、呋喃妥因、万古霉素有较好体外抗菌活性,耐药率都在50%以下,对万古霉素的耐药率在1%以下。粪肠球菌对青霉素、高水平庆大霉素、环丙沙星、利福平、红霉素等大部分抗菌素的耐药率有逐年下降趋势,而屎肠球菌对环丙沙星、利福平、呋喃妥因等抗菌素的耐药率则有上升趋势,屎肠球菌对大多数抗菌素耐药率都高于粪肠球菌。结论 粪肠球菌和屎肠球菌呈多重耐药,临床用药应结合药敏试验结果合理选择抗菌药物。     

粪肠、屎肠球菌及相近种部分持家基因的系统发育分析

【目的】利用16S rRNA、clpX和recA基因分子标记研究Enterococcus faecalis、Enterococcus faecium及相近种间的种系发育关系,并比较这些基因序列对E.faecalis、E.faecium及相近种的区分能力。【方法】以分离自传统乳制品中的9株E.faecium和1株E.durans分离株为研究对象,以clpX和recA基因片段为标记,通过PCR扩增、测序,结合已公布的近缘种相应序列构建系统发育树并与16S rRNA基因进行比较。【结果】在基于clpX和recA基因的进化树中,10株试验菌株与E.faecalis始终处于同一分支。与该物种这两个基因的平均相似性为99.6%和98.6%,与另一分支的Faecium-group(E.durans和E.faecium)的平均相似性仅为61.5%和33.5%。相近种E.durans和E.hirae间这两个基因的差异性为20.3%和39.0%;在基于16S rRNA基因的进化树中,试验菌株与Faecium-group(E.lactis、E.faecium、E.durans、E.hirae)处于同一分支。与这些成员间该基因的相似性大于99.6%,与E.faecalis基因的平均相似性可达98.4%。相近种间该基因相似性无明显差异。【结论】按照10株试验菌株clpX和recA基因的分析结果可将由传统生理生化和16S rRNA基因序列鉴定的9株E.faecium和1株E.durans归类为E.faecalis,clpX和recA基因可用于部分相近种的分类鉴定。     

苏木对饥饿期粪肠球菌生物膜作用的体外研究

目的 验证中药苏木对饥饿期粪肠球菌生物膜的抑制作用.方法 建立饥饿期粪肠球菌生物膜体外模型,MTT法计算中药苏木对饥饿期粪肠球菌生物膜的抑菌率.并利用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察药物对生物膜中粪肠球菌的影响.结果 中药苏木对饥饿期粪肠球菌生物膜的抑制作用随药物浓度增加而增加.CLSM观察见中药苏木可使饥饿期粪肠球菌生物膜内活菌比例明显下降.结论 中药苏木对饥饿期粪肠球菌生物膜具有一定抑制作用.     

水溶性蜂胶对感染根管内粪肠球菌的体外抑菌试验

目的 研究水溶性蜂胶对感染根管内常见菌粪肠球菌的体外抑菌活性.方法 采用液体稀释法测定水溶性蜂胶对粪肠球菌的最低杀菌浓度(Minimal bactericidal concentrations,MBC).结果 蜂胶对粪肠球菌的MBC为0.156%.结论 蜂胶对感染根管内粪肠球菌具有良好的抑菌活性,将其用于感染根管消毒具...     

粪肠球菌Fsr群体感应系统的感染调控

群体感应(quorum sensing,QS)是细菌间的一种通讯方式,是控制微生物信号传递的重要机制,它使细菌能够感知周围环境中其他细菌的存在,并对其密度的变化做出快速反应,在调控基因表达和生物膜形成过程中起着重要作用。作为粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E. faecalis)特有的Fsr QS系统,通过调控E. faecalis毒力因子及生物膜等的表达,从而引起机体的各种感染。本综述通过阐述E. faecalis Fsr QS系统在介导毒力因子的表达及生物膜的形成中的作用,为E. faecalis所引起的感染提供理论基础。     

肠球菌E4及其抑菌产物特性的研究

目的获得抑制微生物生长的菌株。方法根据形态学和生理生化学特性进行菌种鉴定;采用牛津杯法测定抑菌谱和抑菌物质的理化特性。结果排除了过氧化氢和有机酸的作用,该菌发酵上清液对苏云金杆菌、枯草杆菌、大肠埃希菌、鸡白痢沙门菌等有抑制作用。根据菌株的生理生化特征,该菌株初步定为肠球菌属,定名为E4（Enterococcus sp．）。所产抑菌物质具有较好的热稳定性,在酸性条件下稳定且活性高。结论分离筛选了1株可产抑菌物质的肠球菌,其产生的抑菌物质具有良好的生物化学特性和广谱的抑菌能力。     

Identification of new sex pheromone plasmids in Enterococcus faecalis.

Summary We describe the identification of the following new sex pheromone plasmids inEnterococcus faecalis: a haemolysin-bacteriocin plasmid, pIP964; three R plasmids, pIP1017, pIP1438 and pIP1440; and two cryptic conjugative plasmids, pIP1141 and pMV120. The identification was based on the formation of cell aggregates on filter membranes during conjugation, on efficient transfer in broth matings, and on a positive clumping reaction of cells carrying these plasmids. In addition these plasmids hybridized with DNA probes specific for sex pheromone-induced structural genes encoding surface proteins required for conjugative transfer of the plasmids.     

Partial purification and characterization of bacteriocin produced by Enterococcus faecalis DU10 and its probiotic attributes

A novel bacteriocin produced by avian duck isolated lactic acid bacterium Enterococcus faecalis DU10 was isolated. This bacteriocin showed a broad spectrum of antibacterial activity against important food-borne pathogens and was purified by size exclusion chromatography followed by reverse-phase high-performance liquid chromatography in a C-18 column. Tricine–SDS PAGE revealed the presence of a band with an estimated molecular mass of 6.3?kDa. The zymogram clearly linked the antimicrobial activity with this band. This result was further confirmed by mass-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, since a sharp peak corresponding to 6.313?kDa was detected and the functional groups were revealed by Fourier transform infrared spectroscopy. Bacteriocin DU10 activity was found sensitive to proteinase-K and pepsin and partially affected by trypsin and α-chymotrypsin. The activity of bacteriocin DU10 was partially resistant to heat treatments ranging from 30 to 90°C for 30?min. It also withstood a treatment at 121°C for 10?min. Cytotoxicity of bacteriocin DU10 by methyl-thiazolyl-diphenyl-tetrazolium bromide assay showed that the viability of HT-29 and HeLa cells decreased 60?±?0.7% and 43?±?4.8%, respectively, in the presence of 3,200?AU/mL of bacteriocin. The strain withstood 0.3% w/v of bile oxgall and pH 2 affected the bacterial growth between 2 and 4?hr of incubation. Adhesion properties examined with HT-29 cell line showed 69.85% initial population of strain E. faecalis DU10, which was found to be strongly adhered to this cell line. These results conclude bacteriocin DU10 may be used as a potential biopreservative and E. faecalis DU10 may be used as a potential probiont to control Salmonella infections.     

Sex pheromone plasmid pAD1-encoded surface exclusion protein of Enterococcus faecalis.

Summary During conjugative transfer of sex pheromone plasmids ofEnterococcus faecalis a so-called surface exclusion protein reduces the frequency with which these plasmids are transferred to cells already possessing the same plasmid. We report here the DNA sequence of a 3 .8 kb fragment of the sex pheromone plasmid pAD1 containing the structural genesea1 for surface exclusion protein and a small open reading frame (ORF) upstream ofsea1. Surface exclusion protein Seal was found to be highly homologous to the surface exclusion protein Sec10 encoded by the sex pheromone plasmid pCF10. Hybridization studies with DNA probes derived from the structural gene seal demonstrated that, with the exception of pAM373, all known sex pheromone plasmids carry a homologous gene. These studies also indicated that the genetic organization is similar in these plasmids, with the structural gene for surface exclusion protein being located 5 to that for aggregation substance.     

重组大肠杆菌的高密度发酵和甘油生产条件的初步研究

在摇瓶中进行重组大肠杆菌菌株BL21高密度发酵条件的研究,考察了葡萄糖浓度、盐离子浓度、温度、接种量、发酵时间等对该菌株生产甘油的影响。初步确定底物浓度为2.5%,盐离子浓度0.2%,温度为37℃,接种量为2%,经24h的摇瓶发酵,甘油产量最高达6.8g/L。在30L发酵罐实验中、按初步确定的优化条件发酵26h,甘油产量可达46.67g/L,是LB/葡萄糖培养基中甘油产量的2.06倍。     

大肠埃希菌TA系统mazEF的研究进展

大部分细菌的遗传物质中含有毒素-抗毒素系统(TA)的遗传基因.mazEF是大肠埃希菌染色体上的一对毒素抗毒素基因,由毒素基因mazF和抗毒素基因mazE组成.其在细菌的生长调控和细胞程序性死亡中发挥了重要的作用.环境压力激活mazEF后,MazF可以通过对mRNA的剪切作用造成翻译停止.mazEF的存在可以增加细菌对环境压力的耐受性、保持细菌遗传物质的稳定、参与抗生素引起的细胞死亡、也在细菌的耐药性中发挥重要作用.