抗草鱼出血病病毒转基因稀有鮈鲫的初步研究

研究采用草鱼H1基因启动子,以草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)外衣壳蛋白VP7基因为靶基因,以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,构建了3个小发卡RNA(shRNA)表达载体pH1siGCRV(x)-CMVeGFP。CIK细胞感染实验表明,pH1siGCRV2-CMVeGFP具有较高的病毒抑制作用。通过显微注射将pH1siGCRV2-CMVeGFP导入稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)受精卵,获得转基因稀有鮈鲫P0代群体。转基因稀有鮈鲫攻毒实验显示,转基因稀有鮈鲫死亡率为30%,抗草鱼出血病能力显著提高。进一步的实时荧光定量PCR检测证实,转基因稀有鮈鲫脾脏、后肠和肝脏中GCRV的含量显著低于对照鱼,并随着时间的延续逐渐减少,转基因稀有鮈鲫体内GCRV的复制受到有效抑制。研究为抗草鱼出血病转基因鱼育种奠定重要基础。       

稀有鮈鲫HAN近交系的免疫与生化标记分析

目的 筛选稀有鮈鲫HAN近交系遗传质量检测标记.方法 采用鳞片活体移植和同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳法对稀有鮈鲫HAN近交系的遗传纯度进行检测.结果 在免疫标记分析中,鳞片同体移植存活率为96.7％以上,野生群体移植存活率为7.4％,而HAN系F22鳞片异体移植的成功率为80％,显著高于野生群体.在生化标记分析中,在HAN系F22中无多态性位点,不同个体的同工酶谱呈现高度一致,在野生群体中有2个多态位点即est2和est3,多态位点的比例为15.56％.结论 经过多代近亲交配,稀有鮈鲫HAN近交系生化标记基因已经纯合,鳞片异体移植存活率达到80％,表明HAN系具有较高的遗传均一性.选用鳞片的异体移植及酯酶和肌蛋白分别作为免疫和生化标记对稀有鮈鲫HAN近交系进行遗传质量检测是可行的.     

人工养殖稀有鮈鲫消化道组织学观察

采用活体解剖和显微技术对人工养殖的稀有鮈鲫消化道组织结构进行了详细观察,并描述了其形态结构。结果表明:稀有鮈鲫为杂食性无胃鱼,肠道系数0.64±0.06。消化道包括口咽腔、食道、肠和肛门。口咽腔和食道粘膜层为复层扁平上皮,内含较多杯状细胞、粘液细胞和少量味蕾;食道粗短,肌肉层发达。肠由前肠、中肠和后肠三部分组成。肠道由前到后,粘液细胞数量逐渐增多,粘膜皱褶数量逐渐减少,粘膜皱褶高度逐渐降低。     

稀有鮈鲫的摄食率、排泄率和排粪率

稀有鮈鲫是我国近年来开始使用的一种实验鱼,由于它具有易于饲养、周年繁殖、性成熟快、连续产卵类型等一系列特性,已作为实验材料成功地应用于鱼病学、环境科学等方面的研究工作中。关于稀有鮈鲫繁殖、发育等生物学方面的研究已有较多的文献报道1,但尚未见鱼类能量学方面的研究资料发表。       

EE2对稀有鮈鲫和斑马鱼幼鱼体内卵黄蛋白原诱导的比较

利用卵黄蛋白原(Vtg)作为类雌激素污染的生物标志物,比较研究了不同浓度的17α-乙炔基雌二醇(EE2)对斑 马鱼(Brachydanio rerio)和稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)幼鱼体内Vtg的诱导。研究结果表明:5ng/L,20ng/L和100ng/L EE2分别暴露5d后,稀有鮈鲫幼鱼体内的Vtg即可显著诱导,并且其含量随暴露时间的增加而增加,在暴露15d时 达到最大值;而斑马鱼幼鱼虽然100ng/LEE2暴露5d时可显著诱导体内Vtg的生成,但20ng/L EE2在暴露10d后, 5ng/L EE2在暴露15d后,才可显著诱导斑马鱼体内Vtg的生成。这一结果说明EE2暴露下对稀有鮈鲫体内Vtg的 诱导要比斑马鱼敏感。     

稀有鮈鲫临界温度的研究

稀有鮈鲫临界温度的研究王剑伟中国科学院水生生物研究所武汉４３００７２稀有钢鲫（ｆｆｏｂｍｐｎｉｒａｎＹｅｅｔＦｕ）是一种小型鲤科鱼类,在作为一种新的实验鱼。灭蚊鱼等方面具有广阔的应用前景［’,’）。从１９９０年开始,我们就积累了有关稀有铜鲫越冬、度夏...     

稀有鮈鲫性别决定类型初探

稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)是中国特有的一种小型鲤科鱼类,属于亚科、鮈鲫属,俗称金白娘、墨线鱼,主要分布于四川省汉源县大渡河支流的流沙河及成都附近的一些小河流中,被中国野生动物红皮书列为濒危鱼类。       

稀有鮈鲫脑垂体组织学观察

稀有鮈鲫Gobiocypris rarus是中国特有的小型淡水鱼类,已成为重要的实验研究用动物.运用AF、Mallory's三色法染色,HE对照,观察了稀有鮈鲫脑垂体的组织学结构.稀有鮈鲫的脑垂体呈肾形,由神经垂体和腺垂体组成,整个垂体通过垂体柄与下丘脑相连.腺垂体分为垂体前外侧部(RPD)、垂体中外侧部(PPD)和垂体中间部(PI)3部分.神经垂体及其分支深入腺垂体的各部分,在PI中分布尤为丰富.脑垂体中血管丰富.     

稀有(鱼句)鲫的脂肪酸组成

稀有(鱼句)鲫汉源种群和彭州种群全鱼中共检测到3种饱和脂肪酸(SFA),它们是C14∶0、C16∶0、C18∶0.4种单不饱和脂肪酸(MUFA),它们是C14∶1、C16∶1、C18∶1、C20∶1.4种多不饱和脂肪酸(PUFA),它们是C18∶2、C20∶4、C20∶5(EPA)、C22∶6(DHA).SFA 占总脂肪酸的23.63-28.97%,MUFA 占40.73-54.32%,PUFA 占9.96-23.17%,EPA占0.41-1.74%,DHA占0.11-5.37%.EPA 含量一般低于 DHA.UFA(MUFA+PUFA)%＞SFA%,且 MUFA%＞PUFA%,n-3FA/n-6FA为0.33-0.99.此外还测定了鱼肌、内脏脂肪、肝脏、性腺等的脂肪酸组成和含量.     

倪氏复口吸虫在稀有鮈鲫体内的移行及对其耳石微结构的影响

倪氏复口吸虫是我国淡水鱼类的一种常见的危害严重的寄生虫。利用稀有鮈鲫作为寄主,研究了倪氏复口吸虫在其体内的移行途径,并观察了复口吸虫的感染是否在寄主耳石上留下标记轮。倪氏复口吸虫尾蚴从稀有鮈鲫体表的各个部位侵入,但主要集中在头部,侵入体内的尾蚴通过肌肉和结缔组织直接进入眼球。感染倪氏复口吸虫的稀有鮈鲫耳石表面微结构发生变化,部分鱼耳石上出现明显的标记轮。     

稀有鮈鲫脑芳香化酶cDNA片段的克隆与表达分析

芳香化酶（P450arom）是雌激素合成过程中的关键酶,在性别分化中起重要作用。鱼类存在卵巢性和脑型两种芳香化酶,分别由Cyp19a和Cyp19b编码。稀有鮈鲫作为我国特有的实验动物,尚无其芳香化酶的有关资料,其性别分化机制亦不清楚。本研究采用RT-PCR的方法以简并引物扩增了稀有鮈鲫脑型芳香化酶基因Cyp19b的部分序列,其长度为1070 bp, 编码357个氨基酸残基,具有典型的芳香化酶结构域。RT-PCR分析发现该基因主要在稀有鮈鲫的脑中表达,在性腺、肠、肾中也有表达;其在雌、雄脑中的表达差异不显著。在胚胎发育阶段,Cyp19b的表达从囊胚期开始,至神经胚期达到较高水平,随后下降,孵化期又有所增强,孵化10天后维持在高水平。这些结果说明Cyp19b以脑中表达为主,可能在稀有鮈鲫神经系统发育和脑的性别分化中有重要作用。     

五种鲤科鱼类的RAPD分析兼论稀有鮈鲫的系统位置

本文作者采用20个随机引物,对五种鲤科鱼类,即稀有鲫、中华细鲫、麦穗鱼、唐鱼和草鱼的基因组进行了DNA随机扩增分析（RandomAmplifiedPolymorphicDNA,即RAPD）。其目的是为了探讨稀有鲫的系统分类位置。研究结果表明在所研究的物种中,稀有鲫与中华细鲫和唐鱼有更近的亲缘关系。     

不同饵料对稀有鳇鲫仔稚鱼生长、消化道及消化酶的影响

为了筛选稀有逗鲫(Gobiocypris rarus)仔稚鱼期合适的饵料, 将初孵仔鱼随机分为3个组: 活饵组、饲料组、转食组, 每组3个平行, 均从3 dah(day after hatching)开始投喂相应饵料, 在10、15、20、25、30、35 dah时统计生长指标和存活率, 并进行35 dah仔稚鱼消化道组织学及消化酶活性研究。结果显示: (1)35 dah时, 活饵组存活率最高; (2)从15 dah开始, 活饵组表现出最好的生长性能, 并维持这种趋势; (3)活饵组的消化道各部肌层厚度、黏液细胞数目均最高, 提示该组仔稚鱼消化道发育状态较好, 并具有较优的消化吸收能力; (4)转食组胰蛋白酶活性显著高于活饵组和饲料组。研究结果提示: 相对于饲料和转食, 一直投喂活饵更有利于稀有逗鲫仔稚鱼的生长和发育。建议在标准化养殖过程中, 对仔稚鱼期的稀有逗鲫采取活饵投喂的方式。     

The complete mitochondrial genome of Chinese rare minnow, Gobiocypris rarus (Teleostei: Cypriniformes)

The Chinese rare minnow, Gobiocypris rarus, which is endemic to China, is an attractive aquatic laboratory animal in China. In the present study, the complete mitogenome sequence of G. rarus has been determined using long polymerase chain reaction (PCR) method. It was 16,601 bp in length and contained 13 protein-coding genes, 2 rRNA genes, 22 tRNA genes, and a control region, the gene composition and order of which are similar to most other vertebrates. Except for eight tRNA and ND6 genes, all other mitochondrial genes are encoded on the heavy strand. The overall base composition of the heavy strand is 29.5% A, 27.6% T, 25.7% C, and 17.2% G, with a slight AT bias of 57.1%. There are 10 regions of gene overlap totaling 27 bp and 13 intergenic spacer regions totaling 63 bp. The mitogenome sequence of G. rarus could contribute to a better solution of its phylogenetic position within cyprinid fishes based on the whole mitogenomic data.     

数种鱼类肌肉中氨基酸成分及含量的比较研究

综述了１２科２９种鱼类肌肉氨基酸成分及含量。结果表明,鱼类肌肉氨基酸种类齐全,约１７－２０种;总氨基酸含量较高,占９．６２－９３．６０％,其中必需氨基酸储量丰富,占总氨基酸含量的３７．７５－５８．４４％。通过比较发现乌鳢、团头鲂、矛尾复虾虎鱼、鳙、鲤和虹鳟等６种鱼类肌肉氨基酸总量高于其他２３种鱼类,确为鱼中佳品。     

稀有鮈鲫对重铬酸钾和3,4-二氯苯胺急性毒性研究

目的和方法稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)作为一种本土特有的小型鱼类,是我国正在标准化的化学品毒性测试生物之一。为评价稀有鮈鲫鱼类急性毒性实验中效应的稳定性和可重复性,研究优化筛选了重铬酸钾和3,4-二氯苯胺两种化学品,分别在单一实验室内及不同实验室间进行急性毒性验证实验。结果对于来源相同、体长固定的稀有鮈鲫,无论在实验室内还是实验室间,两组化学品的96 h LC50值均在x珋±2s的质量控制范围之内,所有结果体现了很好的稳定性和可重复性。结论根据研究获得的数据可建立一个有效的稳定性和可重复性衡量数据库,用来评估之后其他单个实验的可靠性;稀有鮈鲫作为一种具有潜力的生态毒性测试的生物种类,具有成为标准实验动物的潜能。     

Sexually dimorphic and ontogenetic expression of dmrt1, cyp19a1a and cyp19a1b in Gobiocypris rarus

Fish have diverse sex determination and differentiation. DMRT1 and aromatase are conserved in the phyla and play pivotal roles in sex development. Gobiocypris rarus is a small fish used as a model in aquatic toxicology in China and has been used to study the effects of environmental endocrine disruptors on gene expression, but its sexual development remains elusive. Here, we report the full-length cDNA of G. rarus dmrt1 and its expression along with the expression of cyp19a1a and cyp19a1b, two genes encoding gonad and brain type aromatases, in adults and during ontogenesis. Both cyp19a1a and dmrt1 are expressed in the ovary and testis but show sexual dimorphism. Expression of cyp19a1a in the ovary is higher than in testes and dmrt1 follows the opposite pattern. Juvenile gonad histology changes at 15 days after hatching. The dimorphic expression of dmrt1 and cyp19a1a appears from 5 days after hatching, which is earlier than histological change. cyp19a1b is expressed coordinately with cyp19a1a until 15 days after hatching. These results show that dmrt1 and cyp19a1a play important roles in sex determination and sex differentiation in G. rarus.     

稀有鮈鲫产卵频次和卵子发育的研究

对室养条件下20尾雌性稀有鮈鲫的产卵频次、成熟卵巢卵径分布及卵子补充过程进行了研究。产卵间隔中卵径分布呈现不同的峰值,卵母细胞成熟是分批的,Ⅴ期卵巢中MA、RE卵母细胞的数量代表了即将进行的一次产卵的产卵量;卵子补充速度快,成熟卵巢每隔数天可发育成熟一批卵,一级贮备库在12─33d即更新一次,不同发育时期卵母细胞的补充是连续的。对273批鮈产卵进行了统计,每尾雌鱼平均4.5d产卵一次,平均批产卵量265.6粒。稀有鮈鲫的产卵类型为连续产卵类型。