组织培养和HPLC法研究红豆杉生物合成紫杉醇的组织化学定位

为了探索用组织培养法和高效液相色谱(HPLC)法研究红豆杉植物生物合成紫杉醇的组织化学定位,对南方红豆杉[Taxuschinensis(Pilger)Rehd.var.mairei(LemeeetL啨vl.)ChengetL.K.Fu]和曼地亚红豆杉(Taxusmediacv.Hicksii)各种组织进行了愈伤组织诱导培养,用HPLC法(检测条件:色谱柱为DiamonsilTMC18,5μm,4.60×250mm柱,检测波长为227nm,流动相为甲醇∶水∶乙腈=1∶2∶2,流速为1.2mlmin,柱温为35℃,灵敏度为0.16AuFs,进样量10μL)对组织培养物中紫杉醇含量进行检测,结果显示:红豆杉幼茎、幼茎皮、茎形成层、幼叶和顶端分生组织的组织培养物中紫杉醇含多以由分生组织细胞诱导培养所形成的愈伤组织为高。南方红豆杉以幼茎皮和茎形成层愈伤组织培养物中为高,分别为0.0409%(干重)和0.0407%(干重),曼地亚红豆杉则以茎形成层和顶端分生组织的愈伤组织培养物中为高,分别为0.025%(干重)和0.016%(干重),均是它们天然材料中含量的2.3～8倍。     

植物遗传工程 四、细胞融合与遗传转化方法

在这一讲里，首先讨论组织培养过程中的自发突 变。已经知道，细胞在离体培养时会产生突变，因此，很 多再生植株在遗传上与其来源的植株是不同的。突变 的频率与培养物的状态有关，如果以非分化伏态，例如 愈伤组织或悬浮培养物的状态培养，突变频率将相当 高，但如果不以非分化状态培养，而以顶端分生组织状 态培养，突变频率就会低得多。突变频率还与培养时间 的长短及培养基成份有关。产生的变异包括个别染色 体或整个染色体组的数量变化，缺失、重复、倒位及易 位等发生于染色体内及染色体间的变化，以及单个基 因的突变。而由于顶端分生组织的稳定性，这些变异在 植株上一般是不会发生的。除了遗传变异之外，培养 细胞还有发育上及生理上的变化。     

通过胚电泳转移基因

美国农业部花卉与苗圃作物实验室的 R.J.Griesbach 开发了一种直接把基因转移给植物的新方法。此方法是将植物胚顶端的分生组织暴露在有电场的外源 DNA 里,把含有0.3%琼脂糖的吸管和含有 DNA的乙酸缓冲液置于带顶端分生组织的胚一端,而另一端与仅含缓冲液和琼脂糖的吸管连接,通过电流而产生 DNA 摄取。Griesbach 利用这种胚电泳系统把含有 GUS 标记基因的质粒转移到了虾脊兰胚的顶端分生组织里,     

梨实生树童区和成年区顶端分生组织的细胞学研究（简报）

梨实生树童区技梢顶端分生组织中中央区、周缘区和肋状分生组织的细胞核中DNA含量分别低于、无差异于和高于成年区枝梢顶端分生组织中各相应区域,童区顶端分生组织中这三个区域的细胞中RNA含量都比成年区低。童区与成年区顶端分生组织的细胞核面积无差异,细胞面积的差异只出现在中央区。     

体外培养和遗传育种

卯1337生物技术在亚麻育种中的最新进展及其展望咦」/Nicbterlcin,K.…11 FatSci.TeChnol一1989,91(7)一272一275阵自DBA,1 989,8(19),89一1 1402] ,讨论了在亚麻(L~。itat加如。)育种中采用生物技术的进展.研究的方法有:用于植物快速繁殖和体外选择的体细胞分生组织培养和愈伤组织培养;进行单倍体植株再生的花药培养或小泡子培养;载培品种与其野生种之间的种间杂交,如采用胚胎营救法;杂种原生质体(无性杂种)的培养及其再生;通过原生质体融合(采用PEG或电融合)的遗传工程;借助于特异性根癌土壤杆菌(Agrobacteri,lu二efac衍。)载体系统…     

根端原分生组织和静止中心

根端原分生组织人们对于植物根端原分生组织的认识是有一个过程的。在1950年前,许多植物解剖学家就对根端进行过较为深入地研究。根据这些研究,人们了解到大多数植物根端是由两个通常不同的区域所组成:顶端根冠和亚顶端根端分生组织。分生组织区通常被认为是由许多细胞肋所组成,这些细胞肋似乎起源于分生组织顶端的中央区域,即所谓的中柱极。所以曾提出位于这些细胞肋焦点处的一群细胞产生根的所有组织的看法。因此,研究者早先认为这一     

芸薹属植物发育过程中顶端结构的解剖学研究

本文采用解剖学方法研究花椰菜、青花菜、结球甘蓝和大白菜在生长发育过程中顶端分生组织结构的变化及之间存在的差异。结果显示它们的顶端分生组织结构都是由最初幼苗的原套-原体结构逐渐发育到过渡型分区结构、典型化五个分区结构,至开始进入生殖生长时期的四个分区结构(形成层状细胞区消失)。四种植物在进入生殖生长后,顶端分生组织细胞行为不同:大白菜和甘蓝顶端亚外套两侧细胞分裂分化形成顶生叶原基,在顶生叶原基内侧的细胞将进行分裂产生花序侧枝原基。花椰菜和青花菜顶端亚外套两侧细胞分裂形成花序分生组织,花序分生组织增生即为花球体;内部解剖结构表现为分生组织不断分裂增多的过程。这些结果为研究花序表型发生的解剖学本质及分子生物学研究分生组织发育方向奠定了基础。     

水稻细穗形态发生与顶端分生组织的研究

应用“铸模”扫描电镜法和组织切片技术对水稻幼穗的形态发生过程和顶端分生组织进行了系统而细致的研究。研究表明：从营养生长放到生殖生长早期,水稻生长锥发生了显著的变化。根据苗端分生组织中原基分化的民生将水稻幼穗早期起源和发育过程分为共顶端分生组织期,小穗顶端分生组织期、花顶 端分生组织期,在这３个大的发育时期又根据每一发育时期中的原基分生组织生长发育的程度及先后顺序分别又可分为：花序０期、花序Ⅰ期、花     

绿豆未成熟子叶及其原生质体的培养(简报)

豆科植物的未成熟子叶由分生细胞或尚未成熟的细胞构成,在组织培养中较易诱导细胞分裂和器官分化,近来常被用作分离原生质体的材料。绿豆(Phaseolus aureus)是一种重要的杂粮作物,其组织培养中植株再生十分困难,由原生质体培养再生植株至今尚未见有报     

树木病害的防治

活跃的分生组织常常是无病原物的。通过从染病的植株解剖出分生组织并加以培养,并从这些培养物中再生出新植物,常可获得无病原物的植物(已有另文介绍)。     

科技消息

繁殖苹果树的新方法利用组织培养法把苗尖(即顶端的分生组织)从成年树或幼苗的茎上进行无菌分离。把分离出来的苗尖放在含有矿物盐、蔗糖、维生素和生长素的琼脂培养基的灭菌试管内。新苗大约在四周内生长10倍。然后把每个新苗再移种在新的试管培养基上,它又以同样速度继续     

茎顶端分生组织在植物发育过程中的保持、转变和逆转

顶端分生组织(shoot apical meristems,SAM)为产生新的器官和组织而不断提供新的细胞,它的活性依赖于平衡分生组织细胞的增殖和器官发生之间关系的调控基因.来自不具备光合能力的顶端分生组织的细胞可形成具有光合能力的营养器官.在从营养生长到生殖发育的转变过程中,茎顶端分生组织,转变为花序分生组织,最终形成花分生组织.在进入开花决定状态以前,SAM的状态很大程度上受到环境信号和转录调控因子的影响.以模式植物拟南芥为主,对在顶端分生组织的保持和转变中复杂同时又有差异的基因调控网络进行讨论.在花和花序分生组织逆转过程中,SAM中的细胞也受到相关基因的调控,且表达方式存在明显的时空差异.因此,具有决定性的和未决定性双重特性的分生组织之间的转变和相互协调,对于器官发生和形态建成起到至关重要的作用.     

拟南芥茎顶端分生组织相关突变体的表型与结构分析

以拟南芥野生型(C24)和T-DNA插入诱发的突变体(155系)为材料,通过表型分析、组织切片、GUS基因表达的组织化学定位等研究方法对155系的形态结构和生长发育进行了较为细致的观察分析,结果发现:(1)T-DNA插入诱发的155系突变体植株矮化,叶片等器官体积减小,营养生长阶段延长,发育较C24缓慢;(2)同一时期155系的茎顶端分生组织面积较C24减小,顶端平坦,细胞层数减少,两侧叶原基基部之间的距离缩短,呈现出发育迟缓、从茎顶端分生组织向花分生组织转变延迟等特征;(3)GUS基因特异性地在155系茎顶端分生组织和维管组织中表达.结果表明,T-DNA诱捕基因可能在茎顶端分生组织中发挥作用,由于T-DNA的插入使该基因的功能受到了影响,进而影响了155系中茎顶端分生组织的发育模式,产生了155系的一系列表型改变.     

接骨木的茎尖培养和快速繁殖

<正> 前言 接骨木属忍冬科接骨木属植物,枝、叶入药,主治骨折、跌打损伤,风湿性关节炎等,嫩叶可食,种子可榨油,供肥皂及工业用,髓部甚大可做生物学手切片的支持物,又是庭园观赏树种。 现在生产上用种子繁殖,繁殖系数低,品种混杂,病害严重。为了加快繁殖,采用组织培养的方法,进行无性繁殖,是去病害,提高纯度的有效途径。植物的茎尖,有非常活跃的顶端分生组织,易于发挥细胞的全能性而诱导再生植株。同时茎尖很少病毒感染,可以从茎尖     

棉花组织培养名录

棉花(Gossypium)组织培养工作起步较晚。1971年Beasley首次从陆地棉(Gossypium hirsutum)胚珠的珠孔端诱导出愈伤组织,1983年Davidonis获得第一株体细胞再生植株。近年来,棉花组织培养发展迅速,现已基本建立和完善了棉花组织、单细胞和原生质体三个培养系统;幼胚培养种间杂种以及遗传转化培养系统;幼胚     

水稻幼穗形态发生与顶端分生组织的研究

应用“铸模”扫描电镜法和组织切片技术对水稻幼穗的形态发生过程和顶端分生组织（ Ａｐｉｃａｌｍ ｅｒｉｓｔｅｍ ）进行了系统而细致的研究。研究表明：从营养生长转入到生殖生长早期,水稻生长锥发生了显著的变化,根据苗端分生组织（ Ｓｈｏｏｔ ａｐｉｃａｌｍ ｅｒｉｓｔｅｍ , Ｓ Ａ Ｍ ）中原基分化的属性,将水稻幼穗早期起源和发育过程分为花序顶端分生组织期（ Ｉｎｆｌｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｐｉｃａｌ ｍ ｅｒｉｓｔｅｍ ｐｈａｓｅ, Ｉ Ａ Ｍ Ｐ）、小穗顶端分生组织期（ Ｓｐｉｋｅｌｅｔ ａｐｉｃａｌ ｍ ｅｒｉｓｔｅｍ ｐｈａｓｅ, Ｓ Ｐ Ａ Ｍ Ｐ）、花顶端分生组织期（ Ｆｌｏｒａｌ ｍ ｅｒｉｓｔｅｍ ｐｈａｓｅ, Ｆ Ｍ Ｐ）。在这 ３ 个大的发育时期,又根据每一发育时期中的原基分生组织生长发育的程度及先后顺序分别又可分为：花序 ０ 期、花序Ⅰ期、花序Ⅱ期;小穗期Ⅰ期、小穗Ⅱ期、小穗Ⅲ期;内稃原基分化期、浆片原基分化期、雄蕊原基分化期、心皮原基分化期。同时,在研究过程中还发现了一些与前人所不同的形态发生特征,并初步探讨了水稻幼穗早期的起源及分化发育的机理。     

香蕉通过胚状体途径的快速繁殖研究

采用吸芽顶端分生组织培养的方法快速繁殖香蕉已广泛应用于生产。近年来,我们通过胚状体途径的快速繁殖已取得成功。取香蕉花序顶端3—5厘米,分别将雄花、花苞片和花序轴剪碎作外植体。基本培养基为MS。诱导胚状体培养基为 MS 2,4-D2mg/L(单位以下同) BA0.5 NAA0.5,胚状体发育和分化培养基为 MS BA3.0 NAA0.2;加速再生植株生长培养基为 MS KT0.2 NAA0.     

香果树组织培养过程中遗传变异的RAPD分析

用RAPD分子标记方法,从DNA水平上分析野生型香果树以及通过器官发生途径和体细胞胚胎发生途径得到的香果树再生植株以及体细胞胚胎发生过程中不同继代次数的培养物之间的遗传变异。筛选了100个随机引物,其中有75条随机引物能够扩增出条带,从中选取11个引物进行PCR扩增的结果显示：香果树体细胞胚胎无性系中有RAPD多态性位点,在胚性愈伤组织中也检测到少数RAPD变异位点。表明RAPD分子标记方法可以鉴定香果树组织培养过程中的遗传变异。     

果树的组织培养

近年来,果树组织培养的研究工作取得了很大进展,几乎涉及所有重要的果树(表1)。在柑桔、草莓等果树中进展尤为迅速。虽然还没有关于果树组织培养的专门评述,但已有一些关于木本植物和园艺植物组织培养的评述文献涉及到果树组织培养。果树是经济价值较高的作物,生产上和     

多肽-受体激酶信号维持顶端分生组织稳态的分子机制

植物在一生的发育过程中不断进行着新器官的产生和既有器官的伸长,例如,叶、侧枝、花等器官的产生和根、茎的伸长,这一切都取决于其分生组织中干细胞的活动及由此产生的细胞命运决定.植物顶端分生组织的维持有着精细的调控网络,复杂的胞间信号转导保证了细胞分裂与分化之间的平衡.过去二十多年的研究表明,多肽和受体激酶在维持植物顶端分生组织的过程中起着至关重要的调控作用.本文整理了有关多肽和受体激酶维持顶端分生组织稳态的最新研究进展,梳理了这些已知调控元件之间的关系,并提出了可能存在的工作模式以及未来完善这些信号网络的研究方向.