中国人红细胞醋酶D同工酶表型及其基因频率研究1)

六十年代,Tashian等人^[6]相继发现人红细 胞中至少含有弓种以上不同类型的、能够水解 梭酸醋键的酶,如胆碱醋酶,碳酸f酶及另外3 种兰卜特异性的狡酸酝酶A,B,C, 1973年Hopkinson^[8]等人利用淀粉凝胶电泳法以4一甲基伞 形酮醋酸盐或丁酸盐为底物,发现了1种新型 酷酶D(EsD）的存在。EsD在电泳性质、底物特 异性、酶活力及抑制作用等方面均不同于上述 几种脂酶OEsD分子量为60,000,最适pH值为 5.0-5.礼他们证明,人红细胞中有3种EsD 的大理、即EsDI,EsD2-1,EsD2。以后又发现 稀有型EsD 3-1.Coaters^[5]等人研究表明,常染 色才：上至少存在3个等位基因EsD¹,EsD².sD³, 其后Beger³,又发现另一新的等位基因EsD⁴。近 年还有人相继报导了EsD⁵, EsD⁶, EsD'⁰的存 在¹⁰     

云南省元江县白族人红细胞E$D和PGM，分型的调查

柔用淀粉／琼脂糖混合凝胶同步电泳法,对云南省元江县126例白族人红细胞EsD和PGM,作了 分型调查,计算出这两种红细胞同乙酶的基因频率及识别能力,结果表明云南省元江县白族与上述两地 居民（汉族）的红细胞EsD和PGM：表型分布无显著性差异。     

中国人红细胞磷酸葡萄糖变位酶的电泳分型及其频率研究

磷酸葡萄糖变位酶(Phosphoglucomutase) 是人体组织中广泛存在的一组重要的酶类。它 可以催化葡萄糖一1一磷酸盐和葡萄糖-6-磷酸盐 相互转化,在糖代谢中起着重要的作用11,810 电泳分型表明这种酶存在着多种形式,决 定他们结构的基因座位至少有3个,即PGM PGM PGM,。它们彼此并不连锁,分别定位在 1,4. ,6号染色体上。每一座位分别决定一组特 异的葡萄糖磷酸变位酶的同工酶。酶的总活力 有80-95务是来自PGM,,而其余的主要由 PG喊提供。但在红细胞中PGM;和PGM,大 约各占50外。在所有的组织中PGM,的总活 力比例很少,在红细胞中则检不出来［u.}0 1964年Spencer等人继Hopkinson及Harris 之后证明了红细胞PGM,多态性的存在。他们 利用淀粉凝胶电泳法将其分成3个普通型 PGM, 1-1, PGM, 2-2, PGM, 2-1。这种多态 性是由两种普通的常染色体等位基因（PGM}, PG川）决定的。当PGM;或PG域与不同的 基因座位的一系列罕见等位基因中的某一个等 位基因杂合时,又形成若千稀有型11,5,8]。近年 来,Bark和K{ihnl等人分别采用等电聚焦电 泳技术将PGM,又分成10种遗传表型,并发现 了稀有型及PGM,01710 PGM,的基因频率在不同的群体中各不相 同。应用淀粉凝胶电泳法在英国人群体中检出 58%的PGM, 1一1、36%的PGM,2-1和6 0%o的 PGM, 2-211'。本文报道用醋酸纤维素膜电泳的 方法对中国人群体中红细胞中的PGM：检测结 果,并对血痕进行了分型。PGM,酶型是继 EAP（红细胞酸性磷酸酶）、EsD（醋酶D）之 后用此法检验的第3个酶型。在人类群体遗传 学、法医学的个体识别以及临床医学的基因标 志的研究中有着和上面两种酶同样重要的意 义。     

人胃液乳酸脱氢酶同工酶定量电泳测定方法

本文介绍一个琼脂糖凝胶电泳定量测定胃液乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的简易方法。包括一个灵敏的染色程序和光密度扫描,或洗脱比色。并完全适用于血清和组织抽提液中LDH同工酶分析。血清和组织提取液LDH同工酶的分离检测,最初用淀粉凝胶和琼脂凝胶电泳,四氮唑蓝(NBT)染色,以后用醋酸纤维薄膜电泳1961年提出的琼脂糖凝胶电泳,优于纸电泳和琼脂电泳的是:(1)无吸附作用,(2)含荷电基团少,电     

云南省元江县白族人红细胞EsD和PGM_1分型的调查

采用淀粉/琼脂糖混合凝胶同步电泳法,对云南省元江县126例白族人红细胞EsD和PGM_1作了分型调查,计算出这两种红细胞同乙酶的基因频率及识别能力,结果表明云南省元江县白族与上述两地居民(汉族)的红细胞EsD和PGM_1表型分布无显著性差异。     

云南苗族人红细胞EsD、PGM1和GLOI分布的调查

采用EsD-PGM1-GLOI同步电泳分型法,对云南省屏边苗族自治县138例苗族人红细胞EsD、PGM1和GLOI作了分型调查,计算出这3种红细胞同功酶的基因频率是:EsD1 0.6014、PGM11 0.6304(PGM61 0.0109),GLO1 0.1123;根据这3种同功酶的表型频率计算出DP值分别为EsD 0.6206 ,PGM1 0.6315,GLOI 0.3377,累积DP值0.9074。     

中国汉族人群红细胞ADA 6-PGD同工酶多态性的研究

腺昔脱氨酶(Adenosine deaminase，以下简 称ADA）和6一磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6一phosphogluconate dehydrogenase，以下简称6-PGD) 是两类有重要生物学意义的同工酶。在法医学， 群体遗传学和在为骨髓移植植活提供证据等应 用方面，同红细胞酸性磷酸酶(EAP),醋酶 D(EsD)、葡萄糖磷酸变位酶(PGM)、乙二醛 酶(GLO）等同工酶一样，是重要而有用的遗传标记［(11。现将我们完成的中国汉族人群（北 京）ADA, 6-PGD 的基因频率结果简报如下。     

电泳现状——关于高分辨电泳(HRE)及其临床意义

<正> 电泳的发展实质是支持介质不断改善的历史。1937年,Tiselius首先提出以液体为介质的移动界面电泳。直到Konig推荐以滤纸为介质之前,它并不是临床上有用的技术。自淀粉凝胶电泳问世后,已成为广泛应用的研究工具。Kohn介绍以醋酸纤维素膜为介质,其后取代滤纸并广泛应用。然而,近年来琼脂糖凝胶已作更有希望的介质出     

八倍体小黑麦的醋酶同工酶

在小黑麦的醋酶同工酶研究中,一些报道 指出,六倍体小黑麦的胚乳产生5条快速移动 带,带1, 2和3来自小麦,带5来自黑麦,带4 是杂种带;小麦和黑麦胚乳样品机械混合物的 酶谱中,只有1.2、3和带5^[367]。在比较六倍 体小黑麦（AABBRR）和某些八倍体小黑麦 (AABBDDRR）时,我们看到在两者的醋酶同工 酶酶谱中都有上述E,区5条标志带^[3]。同时, 我们也发现,有一些八倍体小黑麦表现出另外 一种类型的酶谱,对这种酶谱还未见报道。对 于八倍体小黑麦的遗传育种,鲍文奎等曾进行 过许多研究^[12]。为了研究八倍体小黑麦醋酶同 工酶的特点,我们对中国农业科学院作物研究 所提供的14个八倍体小黑麦进行了醋酶同工 酶的电泳分析,     

玉米过氧化物酶同工酶Px、位点和醋酶同工酶Est3位点的遗传基础研究

同工酶是基因表达后的产物,是分子水平 上的表型〔幻。和个体水平上的表型一样,通过 同工酶在世代间的表现,就可以分析其遗传基 础。对同工酶的遗传基础的深人分析,有助于 了解基因与酶之间的关系及酶与个体水平上表 型的关系。这些关系的阐明,是当代分子生物 学的重要课题,并且对同工酶在实践中的应用 也具有重要的意义。国外对植物同工酶生化遗 传学研究的报道很多〔‘一,。,,国内黄炳权等〔31对水 稻醋酶同工酶的遗传基础进行了研究,程家胜 等〔叼对苹果过氧化物酶同工酶也作过遗传分 析。但是,不同的植物,不同的酶系统,甚至同一 种酶的不同同工酶带的遗传基础是不同的。本 文试图用经典遗传学与分子生物学手段相结合 的方法,对玉米幼苗的过氧化物酶同工酶和醋 酶同工酶进行遗传分析,以期探明这些同工酶 带的遗传基础。     

一种具有抑制糜蛋白酶活性的血清DNA结合蛋白质的纯化和理化特性

 本文采用离子交换层析,DNA亲和层析和硫酸铵盐析三步从人血清中分离纯化了一种肿瘤相关DNA结合蛋白质(64DP)。本方法较简便,产率提高。经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫电泳鉴定纯度符合要求。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量为64,000。等电聚焦电泳测得等电点在4.2左右。醋酸纤维膜电泳和转移电泳表明其为一种α_1球蛋白。过碘酸西夫氏糖蛋白染色呈阳性反应。氨基酸分析和酶抑制试验证实64DP与α_1抗縻蛋白酶很相似。     

内蒙古鄂伦春、鄂温克、达斡尔族人三种酶型遗传多态性分析

用同步电泳分型的方法,对中国内蒙古鄂伦春族、鄂温克族、达斡尔族人506份血痕红细胞酶EAP、ADA、AK1遗传多态性进行了研究,被调查群体中均未检出上述三种酶型的变异型。被调查群体三种酶型基因频率范围分别为EAPA 0.2139～0.2280;ADA10.9500～0.9596;AK1 1.0～0.9963。 Abstract:In the paper the phenotype freguencies of the EAP,ADA and AK1 have been investigated by the emthod of typing of EAP-ADA-AK on the samemixed starch／agarose gel electrophresis among 3 nationalities in Inner Mongolia.(Oroqen,Ewenki and Dawuor.) The distribution of their typy frequencies varied with races. The gene freqrencies DP and CDP were also calculated.     

鱼类乳酸脱氢酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

本文对用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分离鱼类乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶的技术进行了研究。结果表明：该方法优于淀粉凝胶电泳及琼脂糖凝胶电泳分析鱼类ＬＤＨ同工酶,具有较高的分辩率。     

黑木耳菌株酯酶同工酶酶谱多样性研究

目的：为了探索黑木耳菌株之间的遗传距离,构建出供试菌株酯酶同工酶鉴别图。方法：采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对21个黑木耳菌株酯酶同工酶的酶谱多样性进行了研究。结果：酯酶同工酶电泳各个菌株分别具有2~7条酶带,其中在Rf值为0.344处,21个菌株都有谱带出现。21个菌株之间的遗传相似系数在0.167-1.000之间,应用NTSYS软件进行聚类分析,当相似水平为0.73时,可将供试的21个黑木耳菌株分为6个不同的类群。结论：酯酶同工酶可以有效快捷的对黑木耳菌株进行菌种鉴定,是黑木耳菌株遗传多样性研究的理想手段。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳配合荧光增白剂显色检测木霉几丁质酶同工酶谱

为提高木霉几丁质酶检测方法的准确性和灵敏度,建立一种快速检测几丁质酶同工酶的方法。采用活性凝胶电泳、变性凝胶电泳、原位显色凝胶电泳结合荧光增白剂（Calcofluor white M2R）显色从绿色木霉LTR-2发酵产物中检测几丁质酶同工酶。活性凝胶电泳在粗酶液浓缩5倍时显示两条活性谱带,变性凝胶电泳在浓缩10倍时显示一条活性谱带,原位显色凝胶电泳在浓缩20倍时显示两条不清晰的活性谱带,SDS-PAGE显示这两条活性谱带的分子量分别为65kDa和42kDa。结果表明活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Calcofluor white M2R显色相结合的方法在几丁质酶上样量为0.47U时具有较好的分辨能力,是检测木霉几丁质酶同工酶的有效的方法。     

LDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析植物过氧化物酶同工酶

以高粱和甘蓝型油菜叶片为材料,用十二烷基磺酸锂不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（LDS-PAGE）检测过氧化物酶同工酶的结果表明,LDS-PAGE的酶带条数比非变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（native PAGE）明显增加,分辨率大大提高,上样量少,胶片易保存;比复性电泳（G-PAGE）的步骤简单,电泳后无需除去LDS即可直接按常规活性染色方法染色。     

水稻醋酶同工酶Est3基因的表达

同工酶作为生化标记正广泛应用于研究发 育过程的基因调控。研究报道较多的是玉米的 过氧化氢酶基因Cat,, Cat,和Cat3,以及乙醇脱 氢酶基因Adh：和Adh：的遗传调控和表达[7-910 水稻各种同工酶基因的表达的报道尚少,Ento 研究了水稻酸性磷酸酶Acp、位点控制的酸性 磷酸酶在纯合体和杂合体发育中的变化151,其 它酶系统的基因表达未见详细的报道。我们在 研究水稻醋酶Est3位点遗传[41的同时,对其所 控制的酶带在整个水稻生育期的表现和变化进 行了研究,以进一步了解其基因的调控机理,为 Est,基因作为水稻的标记基因在遗传育种中之 应用提供理论依据。     

黄兔尾鼠和草原兔尾鼠两种醋酶同工酶的比较分析

利用聚丙烯酞胺盘状电泳分析了新疆北部两种害鼠— 黄兔尾鼠和草原兔尾鼠的二一醋酶和Is-醋 酶同工酶。共检查了肝脏、心脏、肌肉、肾脏、胃、肺、脑和横隔8种组织。结果表明,在同种动物中,两种 醋酶同工酶具明显的组织特异性,并且部分酶带有重叠现象;在不同动物中,两种醋酶同工酶具种间特 异性。不同动物中醋酶同工酶的特异性可能与其生活的特殊生态环境相适应。     

醋酸纤维素膜上的蛋白质等电聚焦电泳

等电聚焦电泳一般以聚丙烯酰胺作为支撑物。但凝胶配制麻烦,两性载体用量多,价格昂贵。利用醋酸纤维素膜进行等电聚焦电泳,则可能克服上述缺点。但是醋酸纤维素膜的强电渗作用,影响了等电聚焦。过去解决这一问题的方法,条件复杂,要求高,有些试剂国内无法得到。我们试用了甲基化方法来封闭醋酸纤维素膜上的解离基团,有效地消除了电渗作用,不需转移而直接进行了大鼠血浆凝血酶原的酶联免疫染色。     

同工酶技术及其优化

同工酶电泳法是一种常用的遗传多样性分析方法,具有成本低、耗时少和操作简单等优点。主要介绍了同工酶电泳法,过氧化物酶、酯酶和超氧化物歧化酶的染色技术,以及同工酶电泳的优化方法,以促进同工酶电泳分析技术在生物学、食品和制药等各领域的应用。