动物转基因研究中的技术方法

转基因动物研究的深入为生物学的发展起到了巨大的推动作用。转基因新技术的不断出现,推动了转基因动物的发展。介绍了几种哺乳动物转基因研究中常见的方法,包括原核显微注射法、逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法、生殖细胞介导法、基因打靶以及新的比较有应用前景的方法,如PiggyBac、iPS,锌指核酸酶法,并且分别对每种方法的优缺点进行了总结归纳。     

转基因动物在生物制药工业中的应用

简要论述了转基因动物的概念、制作方法及应用领域,回顾了转基因动物技术的发展及现状,分析了转基因动物与克隆动物的区别.就转基因动物在制药工业和生物医药领域中的国内外研究与开发应用情况进行了阐述,同时展望了转基因动物制药的发展前景及对社会的影响.     

Transgenic Animals in Agriculture

Transgenic Research -     

转基因动物在microRNA研究中的应用

MicroRNA是一类在转录后水平上调节基因表达的非编码小分子RNA,在生物体生理、病理等过程中发挥重要作用．MicroRNA功能的研究将是未来人们关注的焦点．通过转基因技术建立的多种动物模型在整体水平揭示了基因的功能．近年,以microRNA为研究对象的转基因动物模型数量不断增加,构建策略不断丰富．通过miRNA过表达、敲除及敲减等手段已揭示了miRNA在肿瘤、心血管系统疾病等多方面的作用．转基因动物正成为microRNA研究中不可或缺的工具．     

转基因克隆动物研究

克隆动物是目前生物技术领域研究的热点之一,其科学意义和应用价值重大根据现有理论和技术发展趋势,本文提出了转基因克隆动物的概念,即将克隆动物与转基因克隆动物技术有机地结合起来,认为转基因克隆动物制作技术将有望成为下一世纪创建遗传工程动物的主层性技术。     

转基因克隆动物技术及其应用

克隆动物是目前生物技术领域研究的热点之一,其科学意义和应用价值重大。根据现有理论和技术发展趋势,本文提出了转基因克隆动物的概念,即将转基因动物技术与克隆动物技术有机地结合,认为转基因克隆动物制作技术有望成为21世纪创建遗传工程动物的主导性技术 。     

转基因动物技术的研究进展及应用

文章综述了转基因动物的制作的主要方法及其优缺点,包括显微原核注射法、逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法、体细胞核移植技术、精子载体法、胞浆内单精子注射法以及卵母细胞载体法等。阐述了转基因动物技术在人类疾病模型、生产人体器官、动物反应器和改良动物品种及其生产性能等方面的应用,并提出转基因动物技术存在的一些技术难题和安全性问题。     

HPV转基因动物研究进展

人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)可以引起人宫颈癌、肛门生殖器癌、尖锐湿疣等多种良、恶性肿瘤,严重威胁人类健康。然而,由于HPV严格的嗜人类上皮组织的特性,自然状态下不感染任何实验动物,给研究HPV的感染过程、致病机理,以及开发治疗HPV感染的药物等带来了困难,因此,研究HPV的动物模型显得尤为重要。     

fat-1转基因动物研究进展

转染秀丽隐杆线虫fat-1基因后的哺乳动物具备了将n-6多不饱和脂肪酸(PUFAs)转化为n-3 PUFAs的能力,可降低动物机体的n-6/n-3 PUFAs比例.n-3 PUFAs有益于人类健康,可减少多种相关疾病发生的风险,但人体内不能合成n-3 PUFAs,其必须依赖于富含n-3 PUFAs的食品,fat-1转基因动物将成为人类必需的n-3 PUFAs的重要来源.对fat-1及其转基因动物的研究现状进行综述.     

转基因动物应用的研究现状与发展前景

转基因动物的迅速发展使医药、农业、环保、生物材料等领域发生了巨大变革。综述了国际和国内转基因动物在这些领域中的研究历史、现状和产业化进展,同时也预测了转基因动物应用的发展前景以及给社会带来的深远影响。     

转基因动物整合位点的研究进展

转基因动物整合位点克隆及相关序列特征研究是探索外源基因整合机制和整合稳定性的重要手段。转基因整合位点序列的克隆方法主要有：个体基因组文库筛选法、反向PCR法、热不对称交互式PCR法和质粒回收法。4种方法各有优缺点,可根据不同条件选用。克隆到的整合位点序列表明,整合位点可能存在一定的共同特征。 Integration Sites of Transgenes in Transgenic Animals WU Bo,ZHU Zuo-Yan State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology,Institute of Hydrobiology, Chinese Academy of Science,Wuhan 430072,China Abstract:To study the mechanism of transgene ' s integration in the host genome,first step is to clone the integration-site sequence.The method employed for this purpose includes selection from genomic pool,IPCR,TAIL-PCR and plasmid rescued.Different method fits different cases depending on how the transgenics have been produced.The data of integration-site sequences showed some similar features existed. Key words：transgene; integration site; clone method     

Polysialic Acids: Potential Role in Therapeutic Constructs

Abstract

Prokaryotic microorganisms are widespread in all environments on Earth, establishing diverse interactions with many eukaryotic taxa, including insects. These associations may be symbiotic, pathogenic and vectoring. Independently of the type of interaction, each association starts with the adhesion of the microorganism to the host, entry and “invasion” of the host, then progresses to establishment and dissemination within the host, by avoiding host immune responses, and concludes with transmission back to the environment or to a new host. Advances in genomics and genetics have allowed the dissection of these processes and provided important information on the elements driving the shaping of the members of each association. Furthermore, many mechanisms involved in the establishment of the associations have been scrutinised, along with the development of new methods for the management of insect populations.     

异种移植中转基因动物技术应用的现状

超急性排斥反应一直是异种移植中的主要障碍,转基因技术为跨越这一障碍发挥了重要作用,转基因技术克服超急性排斥反应的主要技术策略有：利用抗补体基因插入技术创建转基因猪,供体抗原遗传修饰和受体基因治疗。     

转基因动物的乳腺表达

转基因动物乳腺组织特异性表达异源基因是近年来基因工程中引人注目的途径.文章介绍了这一途径有关的乳汁蛋白基因、乳汁蛋白基因与异源基因的融合方式、重组基因的必要构成以及可能影响高效表达的因素.     

转基因动物的遗传修饰与应用(下)

CTheGeneticModificationandApplicationofTransgenicAnimals(Ⅱ)ChengWeizhongLiuYingboYuQixing(DepartmentofGenetics,SchoolofLifeSciences,WuhanUniversity,Wuhan430072)3．转基因动物的遗传表现及变异机理目前,大多数外源基因在导人受体动物细胞后都能比较‘真实”地进行表达共产生特定的表型特征,甚至具有十分明显的遗传效应,如生长激素基因转移所获得的超级小鼠和鱼,许多人体蛋白基因转入山羊、小鼠和奶牛细胞获得泌乳性药物以及人类遗传病和致毒致癌动物模型的应用等,其中有些转基因动物亦可将其所携带的外源基因通…     

精子介导转基因动物的制备

采用直接注射的方法,将脂质体包裹的含人乳铁蛋白基因的重组质粒pLNCXHLF注入兔睾丸组织和羊输精管中,一个月后分别与正常雌兔及正常的母羊交配。所产仔兔均为活体,经PCR和Southern检测,转基因仔兔阳性率平均为35%(11/31);羔羊经引物F1/R1系统PCR检测阳性率为33.3％（4/12）,F2/R2系统PCR检测阳性率为25%（3/12）。将流产羔羊组织解剖后提取舌、肺、肝脏、肌肉、皮肤、脑、生殖腺、脾脏、小肠、心脏、肾脏共11种组织的总DNA进行PCR检测,发现：F1/R1和F2/R2系统PCR检测出阳性信号存在于不同组织;F2/R2 PCR系统检测阳性信号较F1/R1 PCR系统少;而且各种组织的外源DNA存在的拷贝数不等,造成阳性信号的强弱程度不同。结果表明：1）脂质体包裹外源基因转染精子的方法,可将外源基因导入受精卵,并得到了较高的转基因阳性率;2）精子携带外源DNA的整合过程是随机的,在受精过程和胚胎早期分化过程中可能发生了片段丢失、不完全整合或游离于基因组存在而产生嵌合体。本文的研究结果证明了该方法是一种简捷有效的新途径,为进一步深入探讨精子介导转基因动物制备可行性奠定了基础,给精子载体法制备转基因哺乳动物研究提供了有价值的参考。 Abstract:The recombinant plasmids pLNCXHLF fused with human lactoferritin gene were directly injected into male rabbit's testis and male goat's spermaductus.The transfected males were fertilized with females one month later.Using F1/R1 PCR system and southern blotting,the transgenic positive rate of rabbit offsprings genomic DNA was 35%(11/31).From the PCR results of F1/R1 and F2/R2 system,the transgenic positive rate of genomic DNA of goat offsprings were 33.3% (4/12)and 25%(3/12) respectively.We prepared genomic DNA from 11 kinds of tissues of goat offsprings,which were tongue,lung,liver,muscle,skin,brain,gonad,spleen,intestines,heart,and kidney.The result of F1/R1 PCR system indicated that the abilities to uptake exogenous DNA were various in different tissues;the positive signals of F2/R2 PCR system were feebler than the ones of F1/R1 PCR system,and the density of positive signals attributed to the amount of copies of exogenous DNA in the tissues.In this experiment,spermatozoa-mediated gene transfer can produce the transgenic animals after exogenous DNA being entrapped by liposome.But during the course of fertilization and the early process of embryo proliferation,the exogenous DNA had lost segments,partly integrated,or existed outside of genomic DNA.So the rate of chimera was relatively high.According to this result,this method is not only a simple and effective way to produce transgenic animals but also make references to other researchers to prepare transgenic mammals by this means.     

抗菌肽在转基因动植物中的研究进展

抗菌肽是一类广泛存在于生物界的小分子短肽,具有广谱的抗菌、抗病毒、抗寄生虫及抗癌等生物活性.将抗菌肽基因转入动、植物体内,不仅可以提高动、植物的抗病能力,而且有望通过转基因动、植物来大量生产抗菌肽,具有重要的研究价值和广阔的应用前景.就抗菌肤的特性、抗菌机理及其在转基因动、植物中的研究做一简要的综述.     

动物转基因高效表达策略研究进展

外源基因在动物体内、细胞内表达时,常由于各种原因导致基因沉默。目前,主要有两种策略用于打破该瓶颈:一是利用友好位点;二是优化外源基因顺式作用元件。利用友好位点就是通过定点整合技术将外源基因插入至活性转录区域;优化外源基因顺式作用元件即采用合适的启动子、增强子、内含子、染色质开放元件、核基质附着区等元件,构建出高效表达载体。对相关策略进行概述,为动物基因工程育种提供参考。