捕食性蝽类唾液腺解剖方法—以叉角厉蝽为例

唾液腺的解剖是研究捕食性蝽类唾液成分及功能的关键。以叉角厉蝽Eocanthecona furcellata为例,报道了解剖获得其完整唾液腺的方法。该方法与其他解剖方法相比明显不同之处在于使用镊子固定虫体,更有利于唾液腺的解剖与收集。通过拍照观察,叉角厉蝽的唾液腺由主腺、副腺、肺门和导管组成。主腺可分为主腺前叶和主腺后叶,它们之间通过肺门相连。主腺肺门处着生有两根导管,其中一根导管与口器相连,而另一根导管与副腺连接。本文描述的解剖方法以及叉角厉蝽唾液腺形态结构可用于指导解剖获得其它捕食性蝽类的唾液腺,进而提取唾液开展成分鉴定和功能研究。     

巨细胞病毒的生物学的特性

巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)属疱疹病毒科,分布十分广泛,各种动物均有种特异的CMV。早在发现此病毒之前,已有人在肾病理组织切片中发现巨细胞,这种巨细胞核大,周围有亮区,胞核及浆内均可见包涵体。这类病变细胞常与婴儿肝、脾肿大、肺炎等有关。直到1949年Enders建立细胞培养技术后,CMV才培养成功。1954年Smith和weller分别从死亡婴儿的唾液腺及巨细胞包涵体病婴儿尿中分离到了CMV。现公认AD169为CMV的代表株。     

日本医蛭进食前后唾液腺的形态学变化

为研究日本医蛭(Hirudo nipponica)进食前后唾液腺的形态和超微结构特征,该文通过光学显微镜和电子显微镜对日本医蛭唾液腺进行观察。基于光学显微镜成像,观察到日本医蛭咽部具有三角形肌肉颚,唾液腺呈葡萄状依附在颚上,腺体呈乳白色且对称分布在颚周围。HE染色结果表明,唾液腺细胞是由卵球形的体细胞和细长的导管组成的,且细胞核位于细胞底部或边缘。未进食的日本医蛭唾液腺细胞染色浅,细胞质饱满;进食后的日本医蛭唾液腺细胞染色深,细胞质结构疏松。基于透射电子显微镜成像,观察到唾液腺细胞中存在球形分泌颗粒,且分泌颗粒内部存在高电子密度的致密成分。未进食的日本医蛭唾液腺细胞结构紧致,分泌颗粒相互挤压,且大量分泌颗粒内含有致密成分;进食后的日本医蛭唾液腺细胞结构疏松,分泌颗粒之间存在空隙,且分泌颗粒内致密成分消失。基于扫描电子显微镜成像,观察到唾液腺细胞呈葡萄状排列。未进食的日本医蛭唾液腺细胞表面光滑,细胞圆润;进食后的日本医蛭唾液腺细胞表面存在大量颗粒物质,细胞凹陷。以上结果表明,日本医蛭进食后,唾液腺细胞分泌出的多种分泌蛋白是分泌颗粒中的致密成分,而大部分分泌颗粒还存在于唾液腺细胞内。     

MCMV不同途径感染免疫缺损性小鼠体内效应的研究

通过血管注射、腹下注射、唾液腺注射等3种不同途径将野生型小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染免疫缺损型小鼠CM17 SCID(sevele combined immunodeficiency,严重免疫缺损综合症),在感染后不同的时间内分别取唾液腺、脾、肝、肺和肾脏测定其病毒滴度,以及测定感染后SCID小鼠的死亡率．同时通过唾液腺注射RvM43突变株,测定病毒在唾液腺中的滴度．结果显示：经尾部血管途径注射的体内唾液腺、肺、脾、肝和肾脏的病毒滴度高峰期和SCID小鼠死亡时间均显著性早于经腹下注射、唾液腺注射途径、除唾液腺器官外,经唾液腺注射途径肺、脾、肝和肾脏的病毒的出现时间晚于经尾部血管和腹下注射途径．经唾液腺注射后,唾液腺中突变型RvM43在各时间点的病毒滴度及高峰出现时间与野生型相同．由此可知,从唾液腺感染小鼠后：MCMV病毒在唾液腺中的生长不受M43基因突变的影响,小鼠巨细胞病毒不同途径感染免疫缺损型小鼠CMl7 SCID的体内生物学效应有差异．因此有必要通过不同途径感染宿主来研究MCMV基因的体内功能．     

检测巨细胞病毒(CMV)DNA及其即刻早期抗原、pp65和pp67在肾移植受者术后巨细胞病毒感染早期诊断中的价值

目的探讨检测巨细胞病毒(CMV)DNA及其即刻早期抗原(IE)、巨细胞病毒pp65和pp67抗体对肾移植受者术后巨细胞病毒感染早期诊断的临床应用价值。方法按肾移植术受者术后3个月外周血是否出现CMV抗原,将71例患者分为CMV感染组(56例)和CMV未感染组(15例),肾移植术受者手术前和术后第1个月每周检查1次,第2、3个月每2周检查1次外周血巨细胞病毒pp65和巨细胞病毒pp67、即刻早期抗原(immediate early antigen,IE),巨细胞病毒DNA和IgM、IgG,共8次;以监测与分析评价肾移植术受者手术前后各项指标变化。结果肾移植术前71例肾移植受者PP65、PP67、IE、CMV DNA均为阴性;肾移植术后CMV感染组的pp65、pp67、IE、CMV DNA阳性率分别为67.8%(38/56)、66.1%(37/56)、64.2%(36/56)和48.2%(27/56),CMV未感染组4项指标值分别为0%、0%、13.3%(2/15)、和0%,两组差异均有统计学意义(P均0.01)。肾移植术后CMV感染组(56例)和CMV未感染组(15例)CMV IgG均为阳性,而IgM阳性率在CMV感染组仅为3.5%(2/56),在CMV未感染组为0%,IgM表达率在CMV感染组和未感染组无统计学差异(P0.05)。观察期内感染组与未感染组相比,术后CMV pp65,pp67,CMV DNA和IE指标出现阳性的例数及阳性出现的具体时间均有显著性差别(P均0.01),而IgM和IgG则均无显著性差别(P均0.05)。结论肾移植术后患者外周血CMV DNA,IE,pp65和pp67抗原检测阳性与其术后巨细胞病毒感染相关。检测CMV DNA、IE、pp65和pp67抗原可能更早更准确反映器官移植术后CMV活动性感染。而CMV IgG和IgM不能作为肾移植后患者CMV感染的诊断指标。     

腺体是如何形成的?

答:凡具有分泌机能的上皮组织称腺上皮,腺上皮的细胞称腺细胞。以腺上皮为主要成分构成的器官称为腺体。腺体是由上皮深陷或外突发育分化而形成的。在胚胎时期,由原始的上皮组织形成上皮细胞索,向深层结缔组织生长分化而形成的。根据腺体有无导管和分泌物运输的途径,腺体分为两大类:外分泌腺和内分泌腺。如果腺体有导管,腺体的分泌物可经导管排到身体表面或器官内腔,这种腺体称为外分泌腺,也称有管腺,如唾液腺、汗腺、皮脂腺、胰腺     

先天性巨细胞病毒感染的研究进展

巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)在世界范围内均有较高的感染率,是最常见的先天性感染。先天性CMV感染可继发于母体原发性感染或非原发性感染。高达40%～50%的感染新生儿是在妊娠早期原发感染, 之后出现长期后遗症,主要包括先天性CMV感染相关听力损伤和神经后遗症。血清学检查对于确定原发性CMV感染至关重要。产前超声检查发现胎儿异常要警惕先天性CMV感染的可能性,磁共振成像有助于发现CMV相关脑异常。羊膜穿刺术是诊断胎儿CMV感染的金标准。加强育龄妇女及孕妇的卫生健康知识教育、减少CMV感染及抗病毒治疗是目前预防先天性CMV感染的主要措施。更昔洛韦及缬更昔洛韦是目前治疗CMV感染最有效的药物。高免疫球蛋白及CMV疫苗预防先天性 CMV 感染的作用尚无明确结论。     

表达黄瓜花叶病毒外壳蛋白的转基因番茄抗黄瓜花叶病毒侵染

通过土壤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导将黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV CP)的cDNA成功地引入番茄(Lycopersicon esculentum)植株中,并得到转基因植株。用强致病力CMV株系接种后,表达CMV外壳蛋白的转基因植株表现出对CMV侵染的抗性。转基因植株RI代的抗性基因以接近3:1比例分离。对R_1代接种CMV后,表达CMV CP的植株病症减轻,发病率、病情指数及病毒积累量明显低于对照。病症出现推迟1个多月。     

黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒在双抗转基因线辣椒内的增殖

本试验以转化CMV CP和TMV CP基因的转基因线辣椒纯合系植株作为研究试材 ,比较了单独或混合接种CMV和TMV后 ,转化线辣椒的抗病性表达特点 ,并测定了两种病毒在植株体内的病毒含量。结果表明 :转化线辣椒不仅能抵抗CMV和TMV的单独侵染 ,而且还能抵抗CMV和TMV的复合侵染。转化线辣椒表现为系统症状延迟出现 7 15d ,显症株率和病害严重度级别大幅度降低 ,CMV和TMV在接种叶、新生叶中的病毒含量明显减低。转基因线辣椒原生质体作为研究试材接种CMV ,测定病毒含量结果表明 :CMV病毒的增殖在转基因线辣椒原生质体内受到明显抑制。在CMV接种浓度为 4 0 μg/mL ,感染原生质体 4 8h后 ,CP(- )植株原生质体内CMV是CP( )的 4 .2倍。这一结果揭示了转基因线辣椒具有抑制病毒增殖的抗病性。     

小鼠巨细胞病毒实验性持续感染模型的建立

应用小鼠巨细胞病毒(MCMV)Smith株,经腹腔感染我国繁殖的C57BL/6近交系小鼠,在高剂量感染组(10~(5.33)TCID_(50))、中剂量感染组(2×10~(4.33)TCID_(50))、低剂量感染组(2×10~(3.33)TCID_(50))均可引起感染。自感染后第5—14天,所有感染组鼠脾脏均可100％分离到病毒。自第14天开始,高、中剂量感染组唾液腺中已可100％分离到病毒;低剂量感染组唾液腺中到21天亦可全部分离到病毒;中剂量感染组小鼠追踪至第102天,唾液腺中仍100％可分离到病毒。MCMV感染后第21天的小鼠唾液腺切片中,还可见到腺体细胞核增大,核质疏松,有些细胞可见核内包涵体。本研究中全部对照小鼠均未分离到MCMV,说明本研究所用的C57BL/6小鼠可进行实验MCMV感染的研究。     

黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒在双抗转基因线辣椒内的增殖

本试验以转化CMV-CP和TMV-CP基因的转基因线辣椒纯合系植株作为研究试材,比较了单独 或混合接种CMV和TMV后,转化线辣椒的抗病性表达特点,并测定了两种病毒在植株体内的病 毒含量.结果表明转化线辣椒不仅能抵抗CMV和TMV的单独侵染,而且还能抵抗CMV和TMV的 复合侵染.转化线辣椒表现为系统症状延迟出现7-15d,显症株率和病害严重度级别大幅度降低, CMV和TMV在接种叶、新生叶中的病毒含量明显减低.转基因线辣椒原生质体作为研究试材接 种CMV,测定病毒含量结果表明CMV病毒的增殖在转基因线辣椒原生质体内受到明显抑制. 在CMV接种浓度为40μg/mL,感染原生质体48h后,CP(-)植株原生质体内CMV是CP(+)的4.2倍 .这一结果揭示了转基因线辣椒具有抑制病毒增殖的抗病性.     

EB、巨细胞病毒

<正>现在一般用测定血清抗体价的方法诊断EB病毒和巨细胞病毒(CMV)感染症,在诊断CMV时同时由尿分离病毒(接种于人胎肺细胞,由细胞病变判断)。在感染初期,IgM抗体的出现具有特异诊断价值,但在初期感染之后便100%的呈现潜伏状。由于免疫抑制等宿主方面的原因常见病毒的再活动化。90%以上的日本人感染该二病毒,由健康人的唾液分离出EBV、尿液分离出CMV也不罕见。在AIDS(艾兹病)、器官移植等高度免疫抑制时,常常出现伴随EBV、CMV活动化的重笃感染。DNA诊断的优点是迅速和判断客观,最近建立了多聚酶链反应法(PCR),使大幅增加检测敏感度成为可能。但是对于EBV、CMV这样的在健康人就存在的病原体,既使检测敏感度增加到能检出微量病毒DNA的程度,也很难判定是否果真是病原体。本文介绍DNA诊断的现状及未来。各种检测方法的实例描述于CMV项。     

安徽烟草病毒类型及优势种初步研究

1978年,烟草病毒病在安徽烟区流行,导致凤阳县烟叶总产损失92.3％,引起了普遍震惊。1981—1984年作者对来自16个县、市552个病毒材料,经生物测定、血清反应、电镜观察,初步分离出CMV、TMV、PVY和PVX四种病毒。它们分别约占检测总数的82.79％、4.53％、2.54％和0.36％,其中CMV与长期视为优势种的TMV比值为18.3,除此,尚有约占检测总数9.8％的CMV和TMV、CMV和PVY复合侵染,以及不明类型的毒株。通过对田间烟草以及其他植物花叶病株的实际检测,进一步表明:CMV在烟区分布范围极广、出现频次最多,已形成了复杂的循环侵染系统,成为近期内烟草病毒病持续流行危害的首要毒原。     

用Epstein-Barr病毒转化法获得分泌肾综合征出血热病毒抗体的B淋巴细胞系

人B淋巴细胞膜上带有Epstein-Barr(EB)病毒受体,用EB病毒转化人B淋巴细胞是获得人源性单克隆抗体的重要方法之一。最近David等报道,先用EB病毒转化感染巨细胞病毒(CMV)患者的脾脏B淋巴细胞,再将转化了的B淋巴细胞和人骨髓瘤细胞WL-L_2-727融合,获得迄今为止分泌抗体滴度最高的人—人杂交瘤312A和914,能稳定分泌抗体达12     

用PCR法检测献血员单个核细胞中的CMV—DNA

107份自愿献血新鲜血标本和22份库存血标本分别用PCR检测单个核细胞中巨细胞病毒DNA（CMV－DNA）和用ELISA检测其血浆中CMV－IgG。结果CMV－DNA阳性率达80．4％和77．3％,CMV－IgC阳性纺为65．9％。其中CMV－IgG阳性者,基本上都携带CMV－DNA;CMV－IgG阴性者,亦有部分携带CMV－DNA。因此认为献血员血液中CMV高带毒率应引起临床有关部门的高度重视;PCR是筛选无传播CMV危险性血液制品的最可靠方法。     

小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法研究

目的:建立小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法。方法:从7~8周龄的C57BL/6J小鼠唾液腺分离唾液腺干细胞,采用悬浮唾液球法培养唾液腺干细胞,应用倒置显微镜动态观察细胞形态;细胞计数观察细胞生长状况;免疫荧光检测LN(层连蛋白)的表达。结果:倒置显微镜下,接种2 d后细胞(salispheres)小聚集体明显增加;接种4 d后唾液腺球直径逐渐增大,形成直径约100μm的神经球,球周围无明显刺突,存在明显细胞聚集。接种7 d后唾液腺球周围存在较多微刺,10 d后球继续增长,形状明显不同于4 d,表明处于活跃的增殖状态,唾液腺干细胞已经开始分化。生长曲线结果显示随着培养天数的增加,唾液腺球的数目呈明显递增趋势,同时,唾液腺球的直径也明显增大。免疫荧光结果显示,培养2 d后,唾液干细胞球开始表达LN,培养第4 d后,随着唾液干细胞球的增加,层连蛋白表达更明显。结论:应用该方法获得了唾液腺干细胞,具有成体干细胞的特征,具有自我更新和多向分化的潜能。     

白背飞虱若虫和雄雌成虫唾液腺蛋白鉴定

【目的】对白背飞虱Sogatella furcifera唾液腺蛋白进行鉴定及功能注释分类,探究不同发育阶段和不同性别的白背飞虱唾液腺蛋白之间的区别与联系。【方法】麻醉白背飞虱若虫、雄成虫和雌成虫,解剖收集唾液腺组织,提取蛋白,还原烷基化和酶解,利用液相色谱串联质谱技术鉴定蛋白。与Unigene蛋白数据库进行比对,并通过KOG分析,对唾液腺蛋白进行功能注释分类。【结果】白背飞虱若虫、雄成虫和雌成虫特有的唾液腺蛋白分别为385, 168和82个,若虫与雄成虫、若虫与雌成虫及雄成虫与雌成虫共有的唾液腺蛋白分别为319, 60和60个。KOG功能注释显示与细胞过程和信号传导相关的蛋白数量最多,若虫、雄成虫和雌成虫特有以及若虫与雄成虫、若虫与雌成虫及雄成虫与雌成虫共有的这类蛋白数量分别为81, 22, 70, 19, 21和12个,这些蛋白主要发挥着翻译后修饰、蛋白质更新、伴侣蛋白,细胞内运输、分泌和囊泡运输及信号转导作用。【结论】白背飞虱唾液腺蛋白在参与信号转导机制方面表现较为活跃,这可能与其刺吸危害有一定的关系。     

动物唾液腺的机能结构

凡腺体排空于消化管前的即为唾液腺。按此定义,无脊椎动物与脊椎动物中都有着结构和功能各异的唾液腺。 (一)无脊椎动物的唾液腺在环节动物、软体动物(除双壳纲)、节肢动物等都有唾液腺。如蚯蚓咽部背、腹侧有软的、白的小叶片,乃由很多嗜铬细胞构成,细胞间有小沟(管)。其分泌液为粘液性,也含有纤维消化酶。节肢动物生活方式多种多样,而蜚蠊、蟑螂唾液中含淀粉酶,PH为6.9。松藻虫在每侧有一主腺和一副腺(图1和图2,)。主腺小的为     

骨髓来源细胞治疗放射性唾液腺损伤的研究进展

罹患头颈部肿瘤的患者在接受放射治疗时往往会发生放射性唾液腺损伤。射线的照射使患者唾液腺结构破坏、功能减退,患者的生活质量严重下降。对于放射性唾液腺损伤,临床上尚无有效的治疗方式。骨髓来源细胞(bone marrow-derived cells,BMDCs)最早用于治疗血液系统疾病。随着对BMDCs认识的逐渐深入,BMDCs的应用领域日益广泛。近些年来,一些动物实验的研究结果表明,利用BMDCs治疗放射性唾液腺损伤能够有效地保护腺体内各种实质细胞,促进腺组织再生,恢复唾液腺功能。本文主要对利用BMDCs治疗放射性唾液腺损伤的治疗方式、治疗效果及其主要的治疗机制进行综述,并对该领域今后的研究方向进行了展望。     

巨细胞病毒中性红斑定量试验与高滴度病毒的制备

在巨细胞病毒(CMV)的研究中常需对病毒定量。CMV需低滴度传代,否则会产生没有感染性的缺损病毒颗粒;CMV的抗原性受其感染量的影响;检测CMV中和抗体或纯化病毒都需具备病毒空斑定量基础。另外,制备高感染滴度的无细胞病毒(游离病毒)是对CMV进行分子生物学研究的前提。本文建立了CMV微量板法中性红斑定量技术并比较了几种制备无细胞CMV的方法。