西索米星发酵工艺的优化控制

在用橄榄星孢小单孢菌Ｍ－４１发酵生产西索米星的过程中,通过优化控制种子期菌丝的生长形态、培养基中有机氮源质量和磷酸盐含量、ｐＨ、温度、搅拌速度、通气质量等条件,可以使西索米星发酵达到适应工业化生产的水平。在此条件下,西索米星的发酵效价可达到５４５ｕ／ｍｌ左右。     

依尼奥小单孢菌抗性基因sisR的克隆研究

从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR,借助计算机设计PCR引物,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中,经PCR扩增获得DNA序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌,从中筛选到5个抗西索米星的转化子(其中一个命名为sisR)显示对西索米星的高抗性(超过1000μg/mL)。经DNA测序并通过互联网Biast比对,确认对该抗性负责的DNA片段是一个未见报道的新基因。     

橄榄星孢小单孢菌M—41孢子的耐热性和热活化效应的初步研究

温度在50℃－80℃时,于20min内,对由新鲜斜面制备的橄榄星孢小单孢菌M－41的孢子悬浮液做耐热试验,结果表明,温度低于60℃时,对该菌株的孢子生长培养无影响,如超过此温度,则存活孢子数量减少。与此同时,研究了孢子的热处理效应,发现经4℃贮存1个月后的菌株斜面的孢子,在平板培养中可形成的菌落数仅为原孢子总数的1／10,此时大部分斜面孢子处于休眠状态,但当这孢子在50℃经15min和60℃经5min加热处理后,在平板上可形成的菌落数则分别增加6倍、4倍,表明这些处于活的非可培养状态的休眠孢子,可应用热活化处理去激活孢子发芽生长。     

依尼奥小单孢菌抗性基因sisR的克隆研究

从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR ,借助计算机设计PCR引物 ,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中 ,经PCR扩增获得DNA序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌 ,从中筛选到 5个抗西索米星的转化子 (其中一个命名为sisR)显示对西索米星的高抗性 (超过 10 0 0 μg mL)。经DNA测序并通过互联网Blast比对 ,确认对该抗性负责的DNA片段是一个未见报道的新基因。     

糖单孢菌16S rDNA的PCR-RFLP分析

ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析适用于种和种间水平的多相分类研究。文章对ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法应用于糖单孢菌属分类有具体方法进行了探讨;报道了一组适于糖单孢菌属ＰＣＲ－ＰＦＬＰ分析的限制性内切酶,并用这组酶对６株糖单孢菌属分离株进行了研究,进一步探讨了实验菌株在该属的分类地位。同时指出了ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法应用中应注意的问题。     

几种具纤毛分生孢子的腔孢菌

本文报道了河北省具纤毛(setulae)分生孢子的腔孢菌(Coelomycetes)5种,它们隶属于多毛孢属(Polynema Lev.),星毛孢属(Stauronema H.Sydow,Sydow ＆Butler),刺杯毛孢属(Dinemasporium Lev.)和双毛壳孢属(Discosia Lib.)。其中多毛孢属和星毛孢属系国内新记录属。记载了一新种中国多毛孢(Polynema sinense w.-P.Wu)和一中国新记录种甘蔗星毛孢(Stauronema sacchari H.Sydow,Sydow ＆Butler)。在刺杯毛孢属和双毛壳孢属内共鉴定出3个种,它们是槭刺杯毛孢(Dinemasporium acerinum Peck),刚毛刺杯毛孢(Dinemasporium strigosum(Pets.:Ft.)Sate.)和双毛壳孢(Discosia artocreas(Tode:Fr。)Ff.)。文中对这些种进行了详细描述,新种有拉丁文描述。研究标本保藏于河北省科学院生物研究所。     

弯孢节丛孢和厚皮单顶孢菌株的RAPD分析

对来自不同地方的７个弯孢节丛孢（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ ｍｕｓｉｆｏｒｍｉｓ Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒ）的９个厚皮单顶孢（Ｍｏｎａｃｒｏｓｐｏｒｉｕｍ ｅｕｄｅｒｍａｔｕｍ（Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒ）Ｓｕｂｒａｍ）标准菌株用４个随机引物（ＯＶＷ－１８,ＯＰＷ－１６,ＯＰＭ－１,ＯＰＫ－１９）进行了随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析。扩增谱带聚类分析结果不能将弯孢节丛孢和厚皮单顶孢的菌株分开,具有附属丝的菌     

胶孢镰刀菌产生串珠镰刀菌素的不稳定性

从陕北克山病病区分离到的两株串珠镰刀菌素产生菌株－胶孢镰刀菌陕－６号和２－１７号进行单孢分离,分别得到２３和１９个单孢分离株。这些单孢菌株可为两种培养型：一种形态上与原始菌株相似,产生串珠镰刀菌素,产色素,具有大、小分生孢子,转管八次产毒量有下降,另一种则不产串珠镰刀菌素和孢子,无色素,后者在二株菌的单孢分离菌中所占比例分别为６０．９％和１５．８％。由此可见,胶孢镰刀菌产毒稳定性受异核体和该菌单     

采用EF-1α序列及气生菌丝上的孢子形态特征对九州镰孢菌、拟枝孢镰孢菌和厚垣镰孢菌的鉴定

对九州镰孢菌Fusarium kyushuense、厚垣镰孢菌F. chlamydosporum 和拟枝孢镰孢菌F. sporotrichioides在气生菌丝上产生的孢子进行了比较。九州镰孢菌在气生菌丝上产生多隔孢子（即中型分生孢子）;厚垣镰孢菌在气生菌丝上产生的主要是0隔针叶状分生孢子;拟枝孢镰孢菌在气生菌丝上产生两种类型的分生孢子：芜菁形、单胞分生孢子以及椭圆形、0－1隔的分生孢子。多隔的气生孢子（中型分生孢子）在厚垣镰孢菌和拟枝孢镰孢菌这两个种中偶尔可以观察到,但是不应作为对这两个种进行鉴定的主要     

中国尾孢菌属及其近似属的研究Ⅱ.

５种尾孢菌和２种假尾孢菌,其中有３个新种：杜若尾孢Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｐｏｌｌｉａｅ－ｊａｐｏｎｉｃａｅＹ．Ｌ．Ｇｕｏ＆Ｙ．Ｊｉａｎｇ,ｓｐ．ｎｏｖ．,日本锦带花尾孢Ｃ．ｗｅｉｇｅｌａｅ－ｊａｐｏｎｉｃａｅＹ．Ｌ．Ｇｕｏ＆Ｙ．Ｊｉａｎｇ,ｓｐ．ｎｏｖ．和旋覆花假尾孢Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｉｎｕｌａｅＹ．Ｌ．Ｇｕｏ＆Ｙ．Ｊｉａｎｇ,ｓｐ．ｎｏｖ．,１个新组合：紫菀假尾孢Ｐｓｅｕｄｏｃｅ     

河北省马铃薯早疫病菌群体遗传结构的研究

通过对2009－2010年河北省145株及外省30株马铃薯早疫病菌对代森锰锌的敏感性、产孢量两个表型性状和AFLP基因型的测定,揭示了河北省早疫病菌群体的遗传结构。毒力测定表明所有供试菌株对代森锰锌均表现敏感,其EC50范围介于1.04－4.86μg/mL之间,平均为2.93μg/mL。被测河北省47株早疫病菌产孢量平均为85个孢子/mm2,大大高于30个对照菌株的产孢量,对照菌株的平均产孢量为50个孢子/mm2,菌株间产孢量存在明显差异。AFLP聚类分析揭示出了马铃薯早疫病菌丰富的遗传多样性,每个菌株都具有独特的AFLP基因型。早疫病菌AFLP基因型与地理来源存在着密切的相关性,与菌株产孢量有一定的相关性,但与代森锰锌敏感性无相关性。     

甘肃大葱贮藏期镰孢菌腐烂病病原鉴定

【目的】大葱在贮藏期频繁发生镰孢菌腐烂病,损失严重。明确该病害病原种类对病害防治具有重要意义。【方法】利用组织分离法对采集自甘肃省兰州市(区)蔬菜市场的16份大葱贮藏期镰孢菌腐烂病病样进行病原物的分离、纯化培养,经单孢分离后根据形态学特征,再结合r DNA-ITS、EF-1a(tef)基因序列分析的方法进行鉴定。【结果】共分离得到80株镰孢菌,经鉴定分属3个种,即层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)、尖孢镰孢菌(F.oxysporum)和燕麦镰孢菌(F.avenaceum),其中层出镰孢菌为大葱镰孢菌腐烂病的优势致病菌,分离频率为52.50%。对兰州白葱不同部位进行致病性测定,结果表明层出镰孢菌对大葱鳞茎的致病力最强,而燕麦镰孢菌对大葱鳞茎的致病力最弱。【结论】3种镰孢菌作为该病害的病原,属国内首次报道。     

链霉菌质粒pSET152电转化稀有放线菌小单孢菌的研究

利用链霉菌(Streptomyces)噬菌体ΦC31所构建的整合型载体pSET152作为供体质粒,分别以小单孢菌(Micromonospora)40027菌株的萌发孢子和新鲜菌丝体作为受体菌,在不同的电场强度下进行电转化实验,结果表明:以小单孢菌40027菌株萌发孢子为受体菌,未获得电转化子;以小单孢菌40027菌株新鲜菌丝体为受体菌,获得了电转化子。电场强度为13kV/cm时可获得最高转化效率。Southern杂交结果表明:质粒pSET152可通过菌丝体电转化法导入小单孢菌40027菌株,并整合到小单孢菌40027菌株的染色体上,暗示链霉菌噬菌体ΦC31的整合酶基因和整合位点在异源宿主小单孢菌40027菌株中仍具有相同的功能。质粒稳定性检测实验表明:质粒pSET152可稳定地存在于小单孢菌40027菌株中。     

淡紫紫孢菌PLF-1对感染尖刀镰孢菌百合种球的促生作用及其相关防御酶活性变化

为了探究淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)PLF-1对百合种球的促生作用及对百合尖刀镰孢菌的防治效果,采用平板对峙法评估淡紫紫孢菌对尖孢镰刀菌的拮抗效果,以及淡紫紫孢菌对百合抗尖孢镰刀菌的抗性作用。同时监测百合种球中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性变化情况。研究结果表明：浓度为4.34×10⁴ CFU/mL和4.34×10⁵ CFU/mL的淡紫紫孢菌孢子悬浮液对百合种球表现为促进作用,浓度为4.34×10⁴ CFU/mL时最高茎长达11 cm。平板拮抗实验中该淡紫紫孢菌菌株能有效抑制尖孢镰刀菌生长,抑制率高达72%。接种淡紫紫孢菌和病原菌的百合种球茎长会增长37.6%,根长会增长33%。该菌株能提高感染尖刀镰孢菌百合种球中的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性,有效抑制尖刀镰孢菌的毒害作用,促进植株健康生长。     

凤梨科植物上的两个真菌新种

报道凤梨科植物真菌病害2个新种：水塔花星裂盘菌Phacidium billbergiae,凤梨顶多毛孢Bartalinia ananatis。模式标本保存于华南农业大学植物病理标本室。     

尖孢镰刀菌致病机理和化感作用研究进展

尖孢镰刀菌引起的枯萎病在生产中的防控相当困难。通过总结国内外相关文献,综述近年来有关尖孢镰刀菌致病机理和化感作用的研究进展。尖孢镰刀菌通过分泌毒素和细胞壁降解酶共同致病,谱系特异性区域的存在是其致病性强和宿主范围广的主要原因;在尖孢镰刀菌各专化型中已分离出大量致病相关基因;其他植物和拮抗微生物(木霉菌、丛枝菌根真菌、非致病性尖孢镰刀菌以及植物生长促生菌)可以分泌化感物质,作用于宿主植物和尖孢镰刀菌,直接抑制尖孢镰刀菌的生长或激活宿主植物的防御反应。未来有关尖孢镰刀菌致病机理研究应该在基因组测序基础上构建精细的遗传图谱;对化感作用的研究应当深入探讨分子机理,利用高通量测序等技术在转录组或蛋白组水平上明确宿主植物抗枯萎病相关基因,同时利用分子标记辅助育种来筛选新的抗枯萎病品种。     

链格孢霉醇和链格孢霉醇单甲醚产生菌株的筛选

本文对分离自小麦、马铃薯、番茄和茄子上链格孢霉属２个种的９６个菌珠,用枯草杆菌生长抑制试验筛选链格孢霉醇（ＡＯＨ）和链格孢霉醇单甲醚（ＡＭＥ）的产生菌株,有４８株产生毒性作用。１８株产强、中毒性菌用高效液相色谱分析,有１３株产ＡＯＨ和ＡＭＥ。链格孢的产毒素菌株率比茄链格孢低,但产毒素含量却是前者明显高于后者。其中产ＡＯＨ和ＡＭＥ的最高含量,链格孢菌株ＸＡ－８分别为２８０和５１４０ｍｇ／ｋｇ,而茄链     

柱孢菌细胞色素P—450nor2cDNA克隆与表达

在真菌反硝化作用中,一种独特的细胞色素Ｐ－４５０起着一氧化氮还原酶的作用。用λｇｔｌｌ构建了柱孢菌ｃＤＮＡ文库。纯化的柱孢菌Ｃ．Ｐ－４５０ｎｏｒ２免疫兔,制备抗体。并用４抗体选出阳性克隆。     

滩涂盐碱地根际镰孢菌种类、非生物胁迫抗性及致病性

镰孢菌Fusarium spp.通常引起多种作物病害,但其中某些种类可作为植物内生菌从而提高植物的生长和抗逆性。因此,研究非农田生态系统镰孢菌物种多样性和生态功能具有重要的科学意义。本研究对分离自滩涂盐碱地盐生植物根际的23株镰孢菌进行了种类鉴定、非生物胁迫抗性及毒性评价研究。结果表明：经形态学和多基因联合建树分析(ITS+rpb2+tef1-α),这些菌株属于7个系统发育种,多数菌株属于尖孢镰孢菌F.oxysporum、恶臭镰孢菌F.foetens和藤仓镰孢菌F.fujikuroi。在7种非生物胁迫条件下[H2O2、亚硫酸氢钠甲萘醌(menadionesodiumbisulfite,MSB)、KCl、山梨醇(sorbitol)、荧光增白剂(calcofluorwhite,CFW)、刚果红(congored)、NaCl]测定菌株抗性,上述3种镰孢菌与Fusariumsp.1表现出相似的抗性能力;Fusariumsp.2和Fusarium sp.3尤其在离子胁迫和渗透胁迫方面表现出较强的适应性;芳香镰孢菌F. ambrosium则对多种胁迫均比较敏感。PCR检测表明大多数菌株含有恩镰孢菌...     

几种具纤毛分生孢子的腔孢菌

本文报道了河北省具纤毛分生孢子的腔孢菌５种,它们隶属于多毛孢属,星毛孢属,刺杯毛孢属和双毛壳孢属。其中多毛孢属和星毛孢属系国内新记录属。记载了一新种中国多毛孢和一中国新记录种甘蔗星毛孢。在刺杯毛孢属和双毛壳孢属内共鉴定出３个种,它们是槭刺杯毛孢,刚毛刺杯毛孢和双毛壳孢。文中对这些种进行了详细描述,新种有拉丁文描述。研究标本保藏于河北省科学院生物研究所。