疫苗

<正>本文描述了从液体培养基和代谢产物中分离细菌的程序,用于微生物工业,制备抗原和疫苗。细菌培养的加工程序,从发酵开始、无菌密封分离器,以及在密闭无菌系统中分离产物。此系统便利了大规模生产,产品不被微生物污染,工作人员不受细菌或致敏原的危害。120℃蒸汽消毒,细菌培养从发酵罐送出,经运送管T1而至分离器.浓     

脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的优化研究

目的探索A群、C群脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的适宜配方。方法通过筛选改良培养基(配方2)中酸水解酪蛋白替代培养基配方1中原50%盐酸酪蛋白水解液制备相应的培养基,培养A群、C群脑膜炎球菌一定时间后,以收获的细菌浓度和复合多糖量来确定培养基的配比,并比较该培养基在不同温度条件下培养细菌的结果。结果在A群、C群脑膜炎球菌多糖疫苗不同培养基的细菌培养过程中,用酸水解酪蛋白制备的改良培养基(配方2)培养的细菌浓度和多糖收获量均高于其他培养基(配方1和配方3),用酸水解酪蛋白培养基能提高脑膜炎球菌的产量。结论以酸水解酪蛋白为主要原料(配方2)的改良培养基能作为流脑A群、C群细菌的最适培养基,且细菌在(37±0.2)℃培养情况良好。     

幽门螺杆菌分离培养的研究

采用细菌培养法及快速尿素酶法分别检测了１６９例消化道疾病患者幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉ－ｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,ＨＰ）感染情况。标本经２０％葡萄糖运送培养基运送后,分别涂布于选择性培养基和本室改良的选择性培养基,３７℃微氧环境（５％Ｏ２,１０％ＣＯ２,８５％Ｎ２）培养８天。标本同时采用快速尿毒酶法进行检测。结果表明,细菌培养法与尿素酶法检测阳性率接近,分别为４６％和５５％;细菌培养第６天与第８天其阳性检出率相同;选择性培养基与本室改良选择性培养基对幽门螺杆菌的检出率差别明显,分别为３４％（１７／４９）和５１％（６１／１２０）,同时其杂菌生长率分别为５４％（２９／４９）和２５％（３０／１２０）。     

细菌培养基制作的几点改进

全日制普通高中生物选修教材实验三——学习细菌培养的基本技术,这一实验中培养基的制作部分,介绍的方法步骤．有的过于简单,有的有缺憾,致使学生操作中出现许多问题,如培养基沾附试管口、棉塞脱落、斜面有冷凝水等。本人对这些容易出问题的步骤,进行多次改进,效果较好。现将改进方法介绍如下：     

国产199培养基制备狂犬病疫苗,乙型脑炎疫苗及麻疹疫苗的质 …

用国产１９９培养基,以进口１９９培养基和自配维持液为对照,制备狂犬病疫苗、乙型肝脑炎疫苗、麻疹疫苗。从这三种疫苗的毒力、效力、稳定性三个方面,比较国产１９９培养基作为疫苗维持液能否改进疫苗质量。试验结果表明：国产１９９培养基作为疫苗维持液制备这三种疫苗的质量和进口１９９培养基制备疫苗的质量几乎无差别,但优于自配维持液制备疫苗的质量。以国产１９９培养基作为疫苗维持液能提高疫苗的质量。     

国产199培养基制备狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗及麻疹疫苗的质量研究

用国产１９９培养基,以进口１９９培养基和自配维持液为对照,制备狂犬病疫苗、乙型肝脑炎疫苗、麻疹疫苗。从这三种疫苗的毒力、效力、稳定性三个方面,比较国产１９９培养基作为疫苗维持液能否改进疫苗质量。试验结果表明：国产１９９培养基作为疫苗维持液制备这三种疫苗的质量和进口１９９培养基制备疫苗的质量几乎无差别,但优于自配维持液制备疫苗的质量。以国产１９９培养基作为疫苗维持液能提高疫苗的质量     

用减糖豆饼消化液制备单糖基础培养基的试验

1．豆饼消化液用大腸杆菌处理后糖分减少,糖氮比例降低,缓冲能力增加,可供制备单糖基础培养基之用。原料成本此蛋白腺水单糖基础培养基的成本约低一半。 2．加少量蛋白胨于未经大腸杆菌处理的豆饼消化渡中,降低其糖氮此例;同时将培养基的pH提高为7．8时,亦可用以制备单糖培养基。 3．未经大腸杆菌处理的豆饼消化液糖氮此例高,不适于制备单糖培养基。本实验由技术员楊燕玲同志协助进行,特此致谢。     

对"学习细菌培养的基本技术"实验的改进

高中选修《生物》教材(全一册)中的实验三“学习细菌培养的基本技术”是一个技能性实验．实验要求学生理解配制培养基的一般步骤和方法．初步学会细菌培养的基本技术。本实验对材料的选择、用量以及实验过程有较严格的要求,特别是实验材料特殊,即芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌,芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌均为条件致病菌．学生在实验中稍有不慎,或机体抵抗力下降,均易引起感染或致病。     

MEM培养基对带状疱疹减毒活疫苗卡那霉素残留量的影响

目的:分析比较MEM培养基对带状疱疹减毒活疫苗卡那霉素残留量的影响。方法:分别使用海克隆、日水2种MEM培养基培养2BS细胞,经传代、感染、洗涤、收获、合并、冻干等工序制备带状疱疹减毒活疫苗,分析比较MEM培养基对带状疱疹减毒疫苗卡那霉素残留量的影响。结果:日水MEM培养基制备的带状疱疹减毒活疫苗卡那霉素残留量一般是海克隆MEM培养基制备疫苗的5-10倍。结论:美国海克隆实验公司的MEM培养基卡那霉素残留量明显小于日水MEM培养基。     

1 330例粪便标本培养的细菌分布及药敏结果

粪便标本的细菌培养检查是诊断肠道细菌感染性疾病的重要方法。依据药物敏感性试验结果 ,可以正确指导临床合理用药 ,预防滥用抗生素 ,减少耐药菌株的产生。我们对我院近 3年的粪便标本细菌培养和药敏结果作了回顾性统计分析 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　 1330例粪便标本均取 1999年 1月至 2 0 0 1年 12月我院住院及门诊病人。1 2　试剂和材料　ＳＳ琼脂、碱性胆盐琼脂 ,由杭州天和微生物试剂有限公司生产。ＷＣＧ无血培养基 ,中国药品生物制品所生产。以上培养基均按说明书配制使用。细菌鉴定和药敏试验用试剂、纸片等购于杭…     

b型流感嗜血杆菌培养及细菌溶解产物制备工艺研究

目的研究b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza type b,Hib)培养条件及细菌溶解产物制备工艺。方法比较Hib在传统培养基和改良培养基的生长情况,优化改良培养基在生物反应器中对Hib培养条件(p H值、温度、溶解氧等),研究最佳菌体细胞破碎方法及细菌溶解产物纯化制备工艺。结果改良培养基可代替传统培养基用于Hib的生产培养,且Hib在p H7.4、温度为36℃、溶解氧为25%的改良培养基中,生长迅速,菌体产量最高。高压匀浆破碎法的破碎效果明显优于超声波破碎法,破碎效果达到98%以上,纯化后的细菌溶解产物的多糖含量、总氮含量、蛋白质含量、核酸含量及细菌内毒素含量均符合《中华人民共和国药典》(三部)2010版中b型流感嗜血杆菌结合疫苗的质量标准。结论初步建立了b型流感嗜血杆菌培养及细菌溶解产物制备工艺。     

屎肠球菌产生有机酸降低琼脂胶凝作用

目的探讨细菌破坏琼脂凝胶形成的原因和机制。方法利用细菌培养技术培养细菌;高压灭菌再融化琼脂-酵母培养基,室温下观察其是否凝固;利用硬度测量仪测量培养基硬度;pH测量仪测量pH值。结果首先,固体琼脂培养基在培养屎肠球菌之后再融化出现室温条件下不凝固现象;其次,pH是一个影响琼脂凝固性的主要因素;最后,屎肠球菌通过发酵产酸而降低pH,当pH值小于4时就破坏了琼脂的凝固性。结论细菌发酵产生酸性物质,降低了培养基pH,引起琼脂凝固点降低。     

无血清培养基培养人全血制备染色体研究

无血清培养基培养人全血制备染色体研究谭湘陵,刘梅江苏省南通医学院生物学教研室,２２６００１通过人外周血的培养制备染色体是最常用的方法。常规培养基中含一定量的血清,血清的使用被认为必不可少,但也存在一定的弊端［１］。国外对于细胞无血清培养技术进行了广泛...     

无牛血清IgG细胞培养基（—GFCS培养基）的制备及其在杂交瘤细胞体外培养中的应用

为了制备不含牛血清IgG的细胞培养基（－GFCS培养基）,并研究其在杂交瘤细胞体外培养中的应用,采用蛋白G亲和层析的方法,将含有血清的细胞培养基中的牛血清IgG去除,以制备无IgG的培养基。使用该培养基体外培养杂交瘤细胞后,监测细胞生长和上清抗体浓度。对培养上清中的IgG类单克隆抗体可以采用蛋白G亲和层析进行纯化。与示去除牛血清IgG的培养基相比,－GFCS培养基培养的杂交瘤细胞的生长状况及上清抗体浓度均无明显变化;从－GFCS培养上清中成功纯化出不被血清IgG污染的IgG类单克隆抗体,本文结果表明,采用－GFCS培养基体外培养分泌IgG类单抗的杂交瘤细胞,可以简化上清抗体的纯化工艺。     

平菇汤培养基的研究及应用

研究以平菇汤为基础成分,代替动物组织提取物,制备平菇液体培养基,平菇血琼脂培养基。平菇血琼脂培养基对１４０份痰及中段尿标本阳性菌的检出率为３４．３％,传统血琼脂培养基对阳性菌的检出率为３２．１％。平菇液体培养基和普通营养肉汤培养基同时对８０份分泌物标本培养,其检出率分别为３８．８％和３６．３％（ｐ＞０．０５）。平菇汤培养基制备简便,成本低廉,有较好的实用价值。     

一种简易的小牛血清制备方法

小牛血清是细胞组织培养中常用的培养基成份。介绍一种简易、快捷的小牛血清制备方法,经该方法制备的血清质量稳定,其在实际应用中效果良好。     

脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的标准化研究

目的用干粉原料完全替代以消化液为主要原料的培养基配方,实现脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的标准化生产。方法用筛选改良的酪蛋白酸水解物干粉替代50%盐酸酪蛋白水解液,以改良酵母浸出粉替代酵母透析液和酵母浸出粉,适当调整培养基配方,改进并稳定培养基制备工艺,确定适宜质量指标,并对各项质量指标数据进行分析。结果改进后的脑膜炎球菌多糖疫苗干粉培养基有效地降低了批间差异,各项质量指标均符合脑膜炎球菌培养要求,培养基的各项质量指标更加稳定可控,在生产中得到了良好、稳定的生长结果。结论用干粉原料完全替代脑膜炎球菌多糖疫苗培养基中的消化液和酵母透析液是成功的,同时改良的干粉培养基进一步明确了配方标准,使原料准备、制备工艺、质量指标控制更加标准化,有效提高了培养基质量,有利于规模化生产,促进了脑膜炎球菌多糖疫苗生产用培养基的标准化工作。     

酸解羽毛粉代替蛋白胨研制新型细菌培养基

【目的】从工厂下脚料——酸解羽毛粉氨基酸含量高且种类丰富出发,开发出低成本新型细菌培养基,以期资源化该类废弃物。【方法】将酸解羽毛粉代替常用细菌培养基(LB培养基)中的蛋白胨,进行细菌液体发酵试验,比浊法在波长600 nm处比色测定菌液的吸光值,可培养计数法监测细菌数量。【结果】以LB培养基为对照,酸解羽毛粉完全代替蛋白胨液体发酵供试菌株时,菌株的生物量与对照无显著性差异或显著高于对照。培养模式菌株大肠杆菌和枯草芽孢杆菌24 h后,与对照相比,生物量分别增加了21.59%和27.83%。菌株生长曲线表明,生长初期,菌株在新型培养基中生长稍延迟,但含酸解羽毛粉培养基能延长枯草芽孢杆菌的对数生长期,并且两菌株到达稳定期时的生物量均高于对照。可培养计数法结果同样表明,含酸解羽毛粉培养基所培养活菌数量与对照(LB培养基)相比,差异不显著。【结论】用酸解羽毛粉代替LB培养基中蛋白胨进行细菌培养是可行的,可以大大降低生产成本。     

支原体培养基的改良及其效果评价

为了改良支原体培养基配方,评价其效果。按《中华人民共和国药典》(以下简称药典)中规定的灵敏度比较方法,将实验室制备的新型支原体改良培养基与《药典》中支原体检查法推荐的处方培养基和商品化支原体培养基进行灵敏度效果比较试验。结果表明,改良后的支原体肉汤和半流体培养基,与接种口腔支原体和肺炎支原体及其它支原体的精氨酸培养基、支原体肉汤培养基无显著差异;与接种肺炎支原体的支原体半流体培养基无显著差异;与接种口腔支原体的支原体半流体培养基差异显著。因此经改良后的支原体培养基灵敏度能够满足药典规定的要求,但其操作简便,且成本低于现有的支原体培养基。     

2型肺炎球菌无动物源性培养基制备精糖检测及比较

用无动物源性成分培养基对2型肺炎球菌进行三批次培养,得到粗制多糖后与原培养基制备的粗制多糖都按照现行工艺进行纯化得到精制多糖,根据欧洲药典标准对其进行检测,对比精糖各项指标及收率。结果发现,采用无动物源性培养基制备的精糖各项检测结果都复核《欧洲药典》7.0标准要求,鉴别试验表明制备的多糖具有特异性抗原性,并且多糖收率有一定提高。