信使核糖核酸5′末端帽状结构和功能

信使核糖核酸(mRNA)5′末端帽状结构是病毒mRNA和真核细胞mRNA的重要修饰之一。1974年Reddy在研究Novikoff肝瘤细胞时首先发现细胞核的一种低分子量RNA5′末端具有封闭的帽状结构,其特点是2,2,7-三甲基鸟苷由5′-5′焦磷酸连接于2′-邻甲基腺苷。此后,陆续证实帽状结构存在于多种病毒mRNA和真核细胞mRNA中,并对其结构、功能和合成进行了大量研究。     

真核细胞信使核糖核酸的提纯

在基因表达的研究工作中,手边拥有信使核糖核酸(mRNA),从各方面来说,都是十分有利的。首先,采用DNA-RNA杂交技术,可以对特异基因进行鉴定;其次,合成与mRNA互补的DNA(cDNA),再以无性繁殖法就可以使之大量的复制;另外,把cDNA作为亲和层析的基质,还有可能把整个基因提取出来。考虑到这些方面的应用,本文以真核细胞mRNA的提纯为中心,就至今已知的各种mRNA的有关问题加以叙述。     

高等植物的发育与信使核糖核酸(mRNA)

植物的生长和发育是基因有序表达的过程。基因的表达包含两方面意义:转录出有功能的rRNA、tRNA等核酸分子和转录出mRNA,并通过它指导合成蛋白质。mRNA携带着蛋白质基因的信息,是基因表达的基本产物。它作为生命过程中很敏感的信息大分子,直接体现着遗传物质信息流的状态,因而能够反映基因表达及其调控的基本情况。     

家蚕信使核糖核酸的分离及体外活性测定

总RNA的制备主要参考Schutz等(1972)的方法,加以修改。除注明外,实验操作控制在4℃以下。以家蚕幼虫的整体 (除去消化道) 为材料,按1:8(W/V)加入pH8.3缓冲液(0.01M Tris,0.075M NaCl,0.005M EDTA,0.5％SDS),置组织捣碎机中迅速匀浆一分钟。加入4倍组织体积(W/V)90％酚液(9份体积重蒸酚溶     

人珠蛋白信使核糖核酸的制备及其体外翻译

本文以新生儿ABO血型不配溶血换得的血网织红细胞为材料,用酚-氯仿提取及Oligo(dT)纤维素亲和层析制备了人珠蛋白mRNA。并在变性条件下经琼脂糖凝胶电泳鉴定,证明它是9～10S的RNA。人珠蛋白mRNA在兔网织红细胞溶解物与麦胚体外翻译体系中的翻译活性与其浓度均有依赖关系。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳及萤光显影鉴定了无细胞体系的翻译产物为人珠蛋白;并以醋酸纤维膜电泳分析了体外合成的人珠蛋白肽链组成,结果表明新生儿血中珠蛋白mRNA合成的α、β、γ珠蛋白肽链之比为3:1:2。     

哺乳动物中Kelch超家族蛋白的结构与功能

在不同生物体,如病毒、植物、真菌和哺乳动物中,几百种含Kelch构象的蛋白质已经被鉴定出来了,但大部分此类蛋白质的功能未知.而在哺乳动物中,已经有接近41种Kelch蛋白被报道.这些蛋白质在体内参与了很多重要的生理过程.根据Kelch蛋白的域结构不同,把这些哺乳动物中的Kelch蛋白分成了三类(BTB/Kelch蛋白,只含有Kelch结构域的蛋白质,及含其他结构域的Kelch蛋白),并把其已知的功能大致划分为5类:介导蛋白质-蛋白质的相互作用、参与蛋白质降解、信号传导、胞外功能及其他等.另外还认为Keap 1的Kelch结构域其晶体结构应该是研究哺乳动物Kelch蛋白的一个很好的参考模型.     

苜蓿豆血红蛋白的信使核糖核酸(mRNA)

本文叙述了分离纯化苜蓿豆血红蛋白 mRNA 和蛋白体外翻译及其检测方法,指出苜蓿豆血红蛋白的 mRNA 约占总 RNA 的1.4%,总 poly(A)~+-mRNA 的24%左右;有6、9、26S值的不同分子量的三个群体,编码豆血红蛋白的不同组分。     

人珠蛋白信使核糖核酸的制备及其体外翻译

本文以新生儿ABO血型不配溶血换得的血网织红细胞为材料,用酚-氯仿提取及Oligo(dT)纤维素亲和层析制备了人珠蛋白mRNA。并在变性条件下经琼脂糖凝胶电泳鉴定,证明它是9～10S的RNA。人珠蛋白mRNA在兔网织红细胞溶解物与麦胚体外翻译体系中的翻译活性与其浓度均有依赖关系。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳及萤光显影鉴定了无细胞体系的翻译产物为人珠蛋白;并以醋酸纤维膜电泳分析了体外合成的人珠蛋白肽链组成,结果表明新生儿血中珠蛋白mRNA合成的α、β、γ珠蛋白肽链之比为3:1:2。     

大豆胚轴信使核糖核酸(mRNA)的分离

信使核糖核酸(以下简称mRNA)是在细胞质中指导蛋白质合成的遗传物质。已有不少动物组织mRNA分离纯化,植物材料中的mRNA报导不多。我们用Oligo(dT)—纤维素柱层析法分离、纯化了大豆(Glycine max)胚轴的mRNA。引言 mRNA是从细胞核内DNA处接受遗传信息,携至细胞质中供作蛋白质生物合成的模板。但确定它存在的历史却起源于一个假说。那是1961年Jacob及Monod根据大肠杆菌乳糖操纵子控制某些诱导酶形成过程的现象而提出的学说。这个学说很快就由Brenner、Jacob和Meselson在研究感染     

信使核糖核酸3′端多聚腺苷酸链的作用

原核生物如细菌,其原始RNA转录物就是信使核糖核酸(mRNA),新RNA分子一生成就与核糖体结合,并开始合成蛋白质。真核生物的细胞,原始转录物并不被直接用作mRNA,而是mRNA的前身——核不均核糖核酸(hnRNA),它要经过一系列的转录后加工,其中包括5‘端的“戴帽”——增加一甲基化的低聚核苷酸结构,以及3’端的多腺苷酰化作用——接上一条长长的多聚腺苷酸尾链(以下简称多聚(A))才具有mRNA作用。近年还有证据表明,比mRNA大的原始转录物要经核酸内切酶裂解后,其某些片段再连接在一起才成为有功能的mRNA。本文重点讨论mRNA     

哺乳动物DMRTs的结构、功能及其与肿瘤的关系

DMRT基因家族是一个与性别决定有关的基因家族,其编码的转录因子DMRTs蛋白(除DMRT8外)均具有一个DM(double-sex and mab-3)结构域,并通过该结构域与DNA结合而发挥调控作用。目前研究表明,DMRT基因家族在性器官发育(如性别分化、性腺发育、生殖细胞发育等)与性外器官发育(如肌肉软骨发育、神经系统发育等)中均具有重要作用;同时也有学者提出DMRTs可能参与肿瘤(如前列腺癌、乳腺癌、肺癌等)的发生和发展。本文综述了以人与小鼠为主的哺乳动物DMRTs/Dmrts的结构、在性器官发育与性外器官发育中的重要功能及其与肿瘤的关系的研究进展,提示DMRT基因家族在多器官发育及多种肿瘤发生和发展及治疗等过程中可能发挥作用,能够作为深入研究肿瘤发病机制与治疗策略的候选基因。     

核糖核酸结构的研究 Ⅱ.絲腺与酵母核糖核酸的结构比较

目前认为蛋白貭生物合成的密碼主要决定于核酸的一級結构(即其核苷酸的排列順序),DNA~(**)的一級結构决定RNA的一級結构,后者再决定蛋白貭的一級結构,因此核酸結构的研究(以下均指一級結构),就成为一个很重要的課題。关于RNA結构的研究,继Markham和Smith及Volkin和Cohn之后,目前已有不少报告,如在Rushizky     

人核糖核酸酶A家族生物学功能的结构基础

人核糖核酸酶A(ribonuclease A, RNaseA)家族成员有13个,分别为RNase1-RNase13,它们具有很高的序列相似性,大多含有6～8个半胱氨酸并形成分子内二硫键,以维持特有的空间结构。其中,RNase1-RNase8具有多种生物活性,可概括为3类：涉及核糖核酸转录后的剪切、修饰和降解;具有抗细菌、抗真菌和抗病毒活性;以及机体免疫调节作用。而RNase9-RNase13不具有核糖核酸酶活性。因此,本文将重点对RNaseA家族成员RNase1-RNase8的结构与功能研究进行综述,重点概述决定RNaseA生物学功能的结构特征,以期指导以RNaseA为基础的抗微生物药物开发及RNaseA在机体免疫中的功能研究。     

大鼠肝癌(BERH-2)细胞甲胎蛋白信使核糖核酸的分离与提纯

采用双抗体免疫沉淀合成AFP的聚核糖体并合Poly(U)-Sepharose亲和层析的方法分离和提纯了大鼠肝癌BERH-2细胞的AFPmRNA。这种纯的AFPmRNA在2％聚丙烯酰胺—0.5％琼脂糖凝胶中以单一的22S带移动。用双抗体免疫沉淀的方法,鉴定麦胚抽提液中由AFPmRNA直接合成的蛋白。在纯甲胎抗体所沉淀的多肽中,有95％的放射性在凝胶电泳中与载体AFP一起移动。在最佳条件下,AFPmRNA在麦胚系统中翻译产物比AFPpRNA高54倍。用AMV反转录酶合成互补于AFP-mRNA的DNA(AFP~3H-cDNA),用分析AFP-mRNA.AFP~3H-cDNA杂化物的热变性来测定AFPcDNA的真实性。高达89℃的Tm值,表明所反转录的cDNA是AFP-mRNA真实的拷贝。     

哺乳动物胰岛素样生长因子酸不稳定亚基的结构与功能

胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors, IGFs)信号系统是动物体内一条重要的信号通路,广泛作用于机体的生长、发育以及疾病的发生和发展等各种生命活动过程。尽管IGFs系统的各种配体、受体和结合蛋白分子的基因结构、功能及作用机制已被深入地研究,但是有关胰岛素样生长因子酸不稳定亚基(Insulin-like growth factor acid-labile subunit, IGFALS)的功能研究却一直局限于其延长IGFs半衰期方面。近年来,越来越多的研究表明IGFALS基因的突变和蛋白表达量的偏低均可能导致动物体生长发育的延迟甚至缺陷。本文综述了IGFALS基因序列特征、IGFALS蛋白的结构特点及其生物学功能以及表达调控的研究进展,旨在为IGFALS的功能及其作用机制的深入研究提供参考。     

转移核糖核酸的三维结构

核酸类物质的晶体结构的研究,迄今只有酵母苯丙氨酸转移核糖核酸(tRNA~(Phe))获得了原子水平的结果。这是利用X射线衍射晶体结构分析技术完成的。1968年,5—6个实验室宣称拿到了可供X射线衍射用的单晶。实际上,那种晶体有序程度很差,衍射分辨率很低,