共查询到20条相似文献,搜索用时 6 毫秒
1.
2.
发光酶基因lux AB标记硅酸盐细菌NBT菌株的研究 总被引:2,自引:1,他引:2
外源基因标记技术为研究土壤引入细菌的生态行为提供了有效的检测手段,通过选择不同的碳源和降低碳氮比筛选获得0.25%麦芽糖作为碳源的菌体制备培养基,对硅酸盐细菌BT菌株进行紫外诱变和抗生素抗性驯化获得—株抗利福平200μg·ml^-1的NBT-R200菌株,含发光酶基因luxAB的质粒pTR102::luxAB在辅助质粒pRK2013的帮助下转入该菌株中,从而赋予NBT菌株以发光活性和利福平、卡那霉素、四环素三种抗生素抗性.以对数生长期的菌体制备受体细胞,发现对数生长前期的细胞转移频率最高,可达6.70×10^-5,杂交比例以1:1:1适宜.标记菌株RL85的释钾能力没有丧失且有提高,发光特性稳定,连续转接20次后仍具有发光活性和3种抗生素抗性,适用于根际微生态学研究。 相似文献
3.
用发光酶基因(luxAB)标记法研究慢生花生根瘤菌的竞争结瘤能力 总被引:6,自引:1,他引:6
luxAB基因标记是一种新型基因标记技术,在很多研究领域都有着良好的应用前景。研究通过三亲本杂交将luxAB基因成功地向慢生型花生根瘤菌进行了转移,并获得了一株带LuxAB基因标记的菌株Cspr7-1。对Cspr7-1进行性状、标记基因的遗传稳定性检测,结果表明,LuxAB基因不仅能有效表达,而且性状稳定。在无氮水培条件下进行标记菌株与土著根瘤菌的竞争结瘤试验。结果证实,Cspr7-1在植物根系上的占瘤率平均达到61.3%,比土著根瘤菌的竞争结瘤能力强,而且Cspr7-1在主根上的侵染能力远较侧根上的强,平均高出22.3%-39.6%。 相似文献
4.
5.
6.
7.
发光酶基因标记的荧光假单胞菌Xl6L2在小麦根圈的定殖动态 总被引:1,自引:0,他引:1
在土壤微宇宙系统内及田间土壤中,采用发光酶基因标记检测技术研究了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens,简称Pf)Xl6L2在小麦根圈的定殖动态。研究结果表明:在不灭菌灰潮土微宇宙中,Pf·Xl6L2在小麦播种后36d定殖密度可达最高水平(32×104cfu.g-1根),然后开始下降,最后保持在一个相对稳定的较低水平(约32×102cfu.g-1根))。在田间条件下,Pf·Xl6L2通过种子表面接种在小麦根圈的定殖动态与微宇宙中的相似,可散布至种子下方10cm以内,水平移动距离在植物播种后125d不超过40cm。 相似文献
8.
电化学发光基因检测是把电化学发光的高灵敏性和传统分子生物学方法的稳定性结合于一体的一种新型的基因检测技术。与传统的基因检测方法相比,它具有无放射性危害、高灵敏度、操作简便等优点。近年被广泛地应用于核酸序列分析,基因突变分析,遗传病、转基因物种、病毒、微生物等的检测。本文概述了电化学发光的基本原理以及传统的基因检测技术,详细地介绍了电化学发光在当前基因检测中的应用现状,并对其前景作了展望。 相似文献
9.
利用发光酶基因标记技术跟踪棉花根圈中的绿针假单胞菌PL9L 总被引:9,自引:0,他引:9
采用细菌转化和杂交的方法,成功地将全套发光酶基因标记系统Tn7luxCDABE引入绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)PL9,得到稳定的发光标记菌PL9L。采用发光菌落平板计数法和X射线胶片自显影法,通过盆栽试验和盒裁试验,研究了发光标记菌PL9L在棉花根圈的定殖动态和分布规律。盆栽试验结果表明,在灭菌土盆栽中,播种后6d左右PL9L在棉花根圈的定殖水平达最高(31×109cfu/g根土),播种后56d左右趋向稳定,PL9L数量为17×102cfu/g根土;未灭菌土盆载中,播种后8d左右PL9L的定殖水平达最高(11×109cfu/g根土),46d左右趋向稳定,菌数为14×102cfu/g根土。盒栽试验结果表明,PL9L可从种子向根尖方向扩散,但并不与根的伸长生长同步,播种后36d,灭菌土盒栽中PL9L可扩散至种子下方120cm以内,而未灭菌土盒栽中PL9L扩散至110cm以内。在棉花根尖区域均未检测到PL9L。 相似文献
10.
土壤因子对发光酶基因标记的荧光假单胞菌X16L2在小麦根圈定殖的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
采用发光酶基因(luxAB)标记检测技术研究了根
盒土壤微宇宙(microcosm)中土壤灭菌、土壤含水量和土壤类型对荧光假单胞菌(Pseudonmonas fluorescens,简称Pf)Xl6L2在小麦根圈定殖的影响。研究结果表明,灭菌土壤中Pf·Xl6L2在小麦根圈的定殖水平较不灭菌土壤中的高。土壤类型对Pf·Xl6L2的定殖水平有较大影响,在黄棕壤中的定殖水平显著高于灰潮土中的。土壤含水量对定殖情况的影响与土壤类型有关
,当土壤含水量为50%田间持水量(Field contents,简称FC)时,在黄棕壤中,Pf·Xl6L2主要定殖在种子下方4cm以内的根段上,但仍可散布至8cm处,而在灰潮土中,Pf·Xl6L2只能散布至种子下方4cm以内;在黄棕壤中,土壤含水量为60%FC和75%FC时,Pf·Xl6L2的定殖水平显著高于在50%FC条件下的,不但能散布至种子下方8cm处,而且定殖水平可达3.0×10.2cfu·g-1根,在灰潮土中,不同土壤含水量之间Pf·Xl6L2的定殖水平差异不大,但Pf·Xl6L2的散布范围不一,在60%FC和75%FC条件下,Pf·Xl6L2可散布至种子下方8cm处,而在50%FC下则不能。 相似文献
11.
应用发光酶基因对快生型大豆根瘤菌HN01结瘤作用进行检测 总被引:19,自引:0,他引:19
含发光酶基因luxAB的Tn5转座子自杀质粒pHNC3,在辅助质粒pRK2013的帮助下,转入快生型大豆根瘤菌HN01中小,pHNC3经自杀重组,其Tn5-luxAB转座插入HN01基因组中,从而赋予HN01以发光活性。挑取具有发光活性的HN01杂交单菌落,进行质粒快检和以luxAB为探针的分子杂交,选取Tn5-luxAB分别插入到HN01染色体上和不同质粒上的标记菌株,进行灭菌盆栽实验,并对一株Tn5-luxAB标记于染色体上的菌株HN01LC02进行了模拟大豆栽培条件下的有菌盆栽实验,包括对发光根瘤菌占瘤率的测定和发光根瘤在根系上分布情况的测定。 相似文献
12.
13.
微生物脂酶及其在环境生物技术领域中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
脂酶是生物体内脂类物质 (三酰甘油脂 )生物转化过程中不可缺少的催化剂。除其生物学意义外 ,脂酶在食品加工、生物医学、化工及环境保护等众多领域中有着巨大的应用前景。脂酶具有在液相和非液相 (即有机相 )界面间起催化作用的独特性能 ,使其与酯酶不同。脂酶界面激活的概念源自以下事实 ,即脂酶的催化活性通常依赖于底物的聚集状态。可以认为脂酶的激活涉及到酶的活性部位的暴露和结构变化 ,这种变化需要在有水包油液滴存在下通过构象的改变来实现。脂酶的活性与反应体系的表面积有关。最近对几种脂酶结构的研究结果为深入理解其水解活性… 相似文献
14.
植物转化中的安全标记基因 总被引:8,自引:0,他引:8
赵艳 《生物化学与生物物理进展》2002,29(3):352-354
转基因植物中的除草剂或抗生素抗性标记基因的生态环境和食用安全性一直颇有争议.糖类分解代谢酶基因作为安全标记基因,近年来在植物转化中显示了巨大应用潜力.这类标记基因编码产物是筛选剂糖类的分解代谢酶,使转化细胞能利用筛选剂糖类作为主要碳源从而获得优势生长,非转化细胞则因饥饿生长被抑制但不被杀死,故称为正筛选系统(positive selection system).目前木糖异构酶基因(xylose isomerase,xylA)和磷酸甘露糖异构酶基因(phosphomannose isomerase,pmi)等安全标记基因已成功应用于植物转化. 相似文献
15.
16.
17.
本对发光细菌生物发光的分子生物学、发光基因在转染细胞中的表达、发光基因在分子生物这中的应用以及基因工程发光菌的应用进行了综述。 相似文献
18.
转基因植物中的标记基因 总被引:8,自引:0,他引:8
概述并评价了转基因植物研究中所采用的标记基因,利用它们都无法实时、无伤地筛选出转化细胞,但新近用作标记基因的绿色荧光蛋白(GFP),与流式细胞仪(FACS)联用,便弥补了上述标记基因的不足。 相似文献
19.