地衣芽胞杆菌对实验性家兔阴道炎影响的研究

目的通过探讨地衣芽胞杆菌活菌制剂对实验性家兔细菌性阴道病的影响,恢复家兔阴道微生态平衡和正常菌群环境。方法（1）采用注射用氨苄西林和甲硝唑生理盐水溶液注入家兔阴道进行冲洗,建立家兔阴道脱污染动物模型。（2）取40只阴道脱污染家兔,其中20只接种大肠埃希菌,20只接种金黄色葡萄球菌,建立家兔阴道感染模型。（3）地衣芽胞杆菌对家兔阴道菌群失调的调整作用：采用不同浓度的地衣芽胞杆菌菌液（10^6CFU／ml、10^8CFU／ml、10^9CFU／ml）对感染家免阴道进行接种,分析和考察地衣芽胞杆菌对家兔阴道菌群失调的影响以及对家兔阴道黏膜的影响。结果（1）动物经过金黄色葡萄球菌感染,通过地衣芽胞杆菌治疗后,动物阴道内芽胞杆菌、肠杆菌、乳杆菌数量明显上升,葡萄球菌数量明显下降,自细胞数量减少,黏膜红肿减轻、分泌物减少,治疗作用明显。（2）大肠埃希菌感染动物经地衣芽胞杆菌治疗后,动物阴道内芽胞杆菌、乳杆菌数量明显上升,肠杆菌数量明显降低,白细胞数量减少,黏膜红肿消失、分泌物减少。结论地衣芽胞杆菌对实验性家兔金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌阴道炎的治疗有效。地衣芽胞杆菌与乳杆菌的作用相似,具有维持阴道菌群平衡的作用。     

乳杆菌生态制剂对家兔阴道上皮的刺激性实验

乳杆菌生态制剂对家兔阴道上皮的刺激性实验大连医科大学微生态学研究所大连１１６０２７文姝袁杰利孙永海李兵唐立蒋寒青乳杆菌生态制剂是我所研制的用于治疗细菌性阴道炎的阴道制剂。本文对乳杆菌生态制剂进行了阴道刺激性试验观察,现将试验结果报告如下：１材料与方法...     

对阴道炎主要致病菌有抑菌活性乳杆菌的筛选及特性

目的 从实验室保藏的乳杆菌中筛选出对阴道炎主要致病菌有抑菌活性的乳杆菌,研究其生物学特性从而作为防治阴道炎的潜在益生菌株。 方法 采用琼脂扩散法检测乳杆菌对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和阴道加德纳菌的抑菌效果。采用共培养法探究乳杆菌在不同时间对白假丝酵母生长的抑制效果。检测乳杆菌产过氧化氢和产酸能力、对低pH环境的耐受性以及对家兔阴道黏膜的刺激性。 结果 植物乳杆菌LP45和鼠李糖乳杆菌LR519对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和阴道加德纳菌的抑菌效果最佳。经24 h共培养后,LP45和LR519对白假丝酵母的抑制率分别为95.27%和98.85%。LP45和LR519产过氧化氢量分别为11.28 μg/mL和15.15 μg/mL,能耐受pH 4.5酸环境。LP45和LR519复合菌在37 ℃培养48 h可持续产乳酸,且对家兔阴道黏膜无刺激性。 结论 植物乳杆菌LP45和鼠李糖乳杆菌LR519具有优良的生物学特性,可作为阴道微生态制剂的候选菌株来预防和缓解由菌群紊乱而引起的阴道炎症。     

地衣芽孢杆菌对实验性家兔阴道炎金葡菌的消除作用

本文以地衣芽孢杆菌菌液对实验性家兔金葡萄感染阴道炎进行治疗,观察把衣芽孢杆菌对阴道内葡菌的消除作用。结果表明,地衣芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌有明确的消除作用,可逆转由金葡菌引起的阴道感染性炎症。     

乳酸杆菌细胞裂解物对家兔实验性阴道炎的治疗作用

目的观察乳杆菌DM8909裂解物及发酵物在体内对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果,探索一种替代活菌制剂的生态制剂。方法用阿莫西林和甲硝唑接种家兔建立脱污染模型,再用大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的混合液接种,建立实验性感染模型后,随机分为5组,分别用乳杆菌裂解物原液、裂解物稀释液、发酵上清液、乳杆菌活菌制剂及生理盐水(对照组)进行治疗,分析和考察阴道菌群变化。结果德氏乳酸杆菌裂解物具有治疗实验性家兔细菌性阴道炎的效果,其疗效与活菌制剂相近。结论德氏乳酸杆菌裂解物可作为乳酸杆菌活菌制剂的替代物。     

不同人群阴道乳杆菌分离比较的研究

目的比较细菌性阴道病患者、抗生素治疗后BV患者和健康妇女阴道内乳杆菌的分布差异。方法对124例(包括40例细菌性阴道病患者和23例抗生素治疗后细菌性阴道病患者)年龄为19~65岁的妇女阴道分泌物进行乳杆菌及产H2O2乳杆菌的分离和半定量计数。结果健康妇女阴道内乳杆菌检出率和活菌数量明显高于细菌性阴道病患者和抗生素治疗后细菌性阴道病患者(P<0.01);产H2O2乳杆菌是健康妇女阴道内优势菌,其检出率明显高于细菌性阴道病患者。结论阴道内乳杆菌特别是产H2O2乳杆菌是健康妇女阴道乳杆菌的重要成员,在防治细菌性阴道病发生中起重要作用,且对多种抗生素敏感。     

惰性乳杆菌对女性生殖道健康影响的研究进展

乳杆菌是维持女性阴道环境的重要菌群。惰性乳杆菌是发现最晚、基因组最小的一种乳杆菌,也是健康女性阴道内众多乳杆菌中的一种。惰性乳杆菌表现出的特性与以往认识的乳杆菌不同,其存在往往与阴道微生态紊乱有关。由于常能在细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）或BV中间型患者阴道中检测到该菌,因此有研究认为惰性乳杆菌通过某种机制促进阴道内致病菌的定植和侵袭,从而间接参与BV的发病。以惰性乳杆菌为优势菌的阴道环境明显比以卷曲乳杆菌为优势菌的阴道环境更容易定植假丝酵母。复发性外阴阴道假丝酵母菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）患者阴道菌群丰富度明显降低,并以惰性乳杆菌为优势菌,而卷曲乳杆菌含量明显减少。惰性乳杆菌在HIV感染、HPV感染及沙眼衣原体感染女性的阴道中具有较高的定植率,有研究表明其存在率也与宫颈上皮内瘤变有关。     

应用qPCR方法快速定量检测阴道分泌物中乳杆菌的研究

目的建立快速、定量检测女性阴道分泌物中乳杆菌的方法。方法合成针对乳杆菌的特异性引物,建立乳杆菌qPCR标准曲线后,进一步对收集得到的健康女性及细菌性阴道病女性阴道分泌物样品中乳杆菌进行定量检测。结果引物仅扩增出乳杆菌特异性DNA条带,qPCR能够检测到各分泌物样本中乳杆菌的数量。结论建立了一种快速、定量女性阴道分泌物中乳杆菌检测方法。     

地衣芽孢杆菌对家兔体液免疫功能的影响研究

本研究采用地衣芽孢杆菌制成微生态制剂,饲喂断奶后的家兔４０天,再用兔病毒性出血病（ＲＨＤ）组织灭活疫苗免疫,检测家兔产生的血清抗体对ＲＨＤ病毒的特异性血凝抑制价和血清免疫球蛋白的含量。结果,试验组家兔的血清抗体对ＲＨＤ病毒的特异性血凝抗体和血清免疫球蛋白含量均明显高于对照组。表明,地衣芽孢杆菌对家兔的体液免疫功能有促进作用,ＲＨＤ组织灭活疫苗与地衣芽孢杆菌制剂相结合较单独使用疫苗的效果更佳     

对德氏乳杆菌DM8909菌株的微生物学研究

通过对阴道正常菌群定性、定量研究表明 ,乳杆菌在阴道正常菌群中的检出率和数量都占有绝对优势 ,并对致病菌有拮抗作用。乳杆菌对维持阴道微环境 ,保持其健康状态具有重要意义 ,乳杆菌作为阴道病防治的微生态调节剂应用具有广泛的应用前景。本文就阴道乳杆菌的分离、生化反应特征、代谢产物分析及菌种鉴定等微生物学研究工作报道如下。1　材料与方法1 .1　菌种的分离方法　根据文献及本课题的阴道菌群与微生态疗法的研究结果 [1] ,确定乳杆菌为选种对象。用阴道拭子取阴道分泌物 ,接种于 Lbs培养基上 ,37℃培养 72 h。根据乳杆菌的特征筛…     

中药91－4对抗生素相关性腹泻小鼠肠道膜菌群及腔菌群的影响

本实验以肠道菌群检测与电镜观察法,初步研究了中药９１－４对抗生素相关性腹泻（ＡＡＤ）小鼠肠道菌群的影响。结果表明,盐酸林可霉素对小鼠肠道膜菌群、腔菌群干扰显著,乳酸杆菌、双歧杆菌及肠杆菌等比正常对照组明显减少,致小鼠腹泻或肠炎;中药９１－４能够促进肠道乳酸杆菌、双歧杆菌等生长繁殖,对肠道膜菌群、腔菌群均具有调整作用,加速肠粘膜病变的愈合及修复,可有效地控制ＡＡＤ模型小鼠的腹泻症状。     

乳杆菌泡腾片治疗细菌性阴道病

目的观察10例BV患者采用了信谊制药总厂生产的阴道嗜酸乳杆菌泡腾片1个疗程(7 d)后阴道菌群的变化。方法采用7种选择或非选择培养基对阴道分泌物的细菌总数、乳杆菌等7个指标进行检测。结果治疗后阴道中乳杆菌显著增多,厌氧革兰阴性杆菌显著减少(两者P<0.001)。细菌总数、肠杆菌、酵母菌和阴道加德纳菌均减少(P<0.01)。结论信谊阴道嗜酸乳杆菌泡腾片具有较好的调整阴道微生态平衡的作用。     

中药91—4对抗生素相关性腹泻小鼠肠道膜菌群影响的电镜研究

实验用菌群检查和光、电镜相结合的方法,观察了中药９１—４对抗生素相关性腹泻（ＡＡＤ）小鼠肠道膜菌为及其病理学变化的影响。由林可霉素灌胃致小鼠腹泻模型并证实菌群紊乱后,给各治疗组分别灌喂中药,并设自然恢复组,一个疗程后,时各组小鼠进行肠道膜菌群检测分析,同时取回盲部组织标本,分别用光镜及电镜观察肠粘膜结构。结果表明,ＡＡＤ模型组大多数小鼠肠粘膜出现不同程度的损害,治疗一个疗程后,病理组织学及超微结构改变基本恢复正常。９１－４不仅对肠道膜菌群有调整作用,对肠粘膜也有一定的修复作用。     

Qualitative and quantitative differences in normal vaginal flora of conventionally reared mice, rats, hamsters, rabbits, and dogs

We examined quantitatively the vaginal flora of conventionally reared mice, rats, hamsters, rabbits and dogs, species that are widely used as laboratory animals. Vaginal specimens were examined according to the method of analyzing intestinal flora (Mitsuoka's procedure). The total number of bacteria (aerobes and anaerobes) and the prevalence of specific bacteria were determined. The total number of bacteria was highest during estrus and lowest during diestrus or anestrus in mice, rats, hamsters, and dogs. The most predominant bacteria during estrus were streptococci in mice; gram-negative rods (GNR), streptococci, and members of the family Bacteroidaceae in rats; GNR, Bacteroidaceae and gram-positive anaerobic cocci in hamsters, and Bacteroidaceae in dogs. The increase in the total number of bacteria during estrus was caused by an increase of predominant bacteria in the vagina. Aerobes were more predominant than anaerobes in mice, and number of aerobes was comparable to that of anaerobes in rats and dogs. On the other hand, in hamsters, anaerobes were more predominant than aerobes and the total number of bacteria was highest among the laboratory animals (mice, rats, hamsters, rabbits, and dogs). However, in rabbits, bacteria were not isolated from about 90% of the vaginal specimens. Rabbits do not have cyclic reproductive stages and are usually in precoital status in the laboratory. In precoital rabbits, vaginal epithelium manifests few signs of secretion. Therefore, we suspect that the vaginal environment in precoital rabbits is comparable to that during diestrus or anestrus in mice, rats, hamsters, and dogs. These results suggest that the vaginal flora of laboratory animals is influenced by the estrous cycle, and probably by mucous secretion. Our data imply that vaginal flora differ among laboratory animals species, and researchers need to take into consideration the estrous cycle of laboratory animals when studying their vaginal flora.     

四君子汤及其纳米制剂对微生态失调小鼠的调整作用

目的研究四君子汤水提液及纳米制剂对肠道微生态失调小鼠的调整作用。方法应用林可霉素灌胃建立小鼠肠道微生态失调模型,然后应用四君子汤水提液(常态中药)及其纳米制剂进行治疗,同时设正常、阳性对照及自然恢复组,于给药6 d后处死小鼠,进行肠道菌群检测、肠组织电镜检查及肝脏细菌易位检测。结果林可霉素灌胃3 d后,小鼠肠道菌群失调,肠黏膜损伤严重,肝脏有大量细菌易位。持续6 d治疗后,肠道双歧杆菌和乳酸杆菌菌量明显上升,损伤的肠黏膜基本修复,肝脏细菌易位数量大幅度下降。各治疗组间比较纳米中药组的效果要好于常态中药和丽珠肠乐组(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论2种不同粒径的中药均能扶植肠道正常菌群生长,促进肠黏膜损伤修复,控制细菌易位。但纳米中药效果优于常态中药,且用药量小。     

八珍制剂对~(60)Co辐射小鼠微生态失调的促恢复作用

目的　观察中药八珍制剂对60 Co辐射小鼠微生态失调的调整作用。方法　60 Co辐射昆明种小鼠制成微生态失调模型 ,用中药八珍制剂对其进行调整 ,检测肠道膜菌群与腔菌群中双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌、肠球菌及肝脏细菌易位数量 ,血浆内毒素水平 ,小肠黏膜中二胺氧化酶的活性和丙二醛的含量等指标 ,观测中药对辐射性微生态失调的调整作用。结果 :中药八珍制剂具有调整小鼠肠道菌群失调 ,降低肠道菌易位和血浆内毒素水平 ,减少丙二醛含量 ,升高肠黏膜中二胺氧化酶的活性。中药治疗组各项指标与自然恢复组相比 ,差异均有显著性(P <0 .0 0 1或P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论　八珍制剂对60 Co辐射小鼠微生态失调有促恢复作用     

乳酸菌阴道胶囊联合小剂量甲硝唑对中晚期妊娠滴虫性阴道炎妇女阴道菌群的调节作用

目的 探讨乳酸菌阴道胶囊联合小剂量甲硝唑对中晚期妊娠滴虫性阴道炎妇女阴道菌群的调节作用。方法 选择中晚期妊娠滴虫性阴道炎妇女140例,随机分为观察组和对照组各70例。对照组妇女予以甲硝唑片0.2 g/次,3次/d,口服,连用1周。观察组在采用对照组治疗方法结束后再加用乳酸菌活菌胶囊0.25 g/次,1次/d,阴道放置,连用1周。治疗结束后2周复诊,比较两组妇女的临床疗效、阴道乳酸菌检出率及产H2O2阳性率。结果 观察组妇女临床总有效率明显高于对照组（χ2=4.52,P<0.05）;观察组妇女阴道乳酸菌检出菌落≥1/2面积率明显高于对照组（χ2=60.51,P<0.01）;观察组妇女产H2O2阳性率明显高于对照组（χ2=14.12,P<0.01）。结论 乳酸菌阴道胶囊联合小剂量甲硝唑治疗中晚期妊娠滴虫性阴道炎妇女的疗效确切,能明显升高阴道乳酸菌数量及活性,纠正阴道菌群紊乱。     

兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立

目的:建立小肠急性缺血再灌注损伤模型,确定合适的肠系膜上动脉阻断时间.方法:将70只新西兰兔随机按不同的肠系膜缺血时间(0、15、30、45、60min)分为A、B、C、D、E5组,每组14只,取8只用于恢复血供2h后留取各组兔下腔静脉血标本及肠组织,检测血清中MDA含量的变化,光镜下观察小肠组织形态学变化并对小肠黏膜损伤程度进行评分.另6只用于术后24h、 48h及72h生存率的观察.结果:A、B、C组的术后生存率均>83.3%.C、D、E组的MDA含量及肠黏膜损伤评分与A组比较,差异均有显著性(F=12.13～280.24,p<0.01).结论:肠系膜缺血30min,再灌注2h是建立兔小肠急性再灌注损伤的合适时间.     

小鼠阴道菌群紊乱模型的建立

目的 建立小鼠阴道菌群紊乱模型,为调整阴道菌群紊乱的药物研发提供模型参考。 方法 采用雌激素化的C57BL/6小鼠经阴道以不同处理方式(链霉素50 μg/只,加德纳菌50 μL/只,链霉素50 μg/只+抗链霉素加德纳菌50 μL/只,每种处理方式各70只/组)诱导小鼠阴道菌群紊乱模型,采用细菌16S rDNA高通量测序考察造模后第1、第2、第3、第5、第7、第9、第11天内加德纳菌在阴道内的定植情况,以及阴道细菌结构和细菌生物多样性,并通过显微镜观察阴道组织的病理改变,比较3种造模方法的差异。另采用阳性药物(定君生,成分为德氏乳杆菌)对模型进行验证。 结果 采用链霉素联合抗链霉素加德纳菌能诱导形成典型的阴道菌群紊乱模型,造模后可见加德纳菌在阴道内的定植增多,优势菌以铜绿假单胞菌为主,且阴道细菌生物多样性增加,阴道组织可见明显的炎症浸润和上皮细胞坏死等病理改变。定君生能显著减少加德纳菌在阴道内的定植,减少阴道内的细菌生物多样性,并能显著改善阴道组织病理变化。 结论 采用链霉素联合抗链霉素加德纳菌诱导的小鼠阴道菌群紊乱模型方法更佳,模型的细菌学和组织病理学改变,以及对药物的反应性与临床有一定相似,具有临床应用价值。     

妊娠期阴道菌群多样性的动态变化及对早产的预测价值

目的 探究妊娠期阴道菌群多样性的动态变化及对早产的预测价值。方法 选取2018年1月至2019年1月拟在我院生产的具有早产危险因素的孕妇71例,根据是否发生早产分为早产组与对照组,比较两组一般资料,测定及对比其不同孕期阴道菌群多样性指标,包括：丰富度、Shannon-Wiener指数及均匀度,应用Logistic回归分析早产发生的独立危险因素;应用ROC曲线评估不同多样性指标对早产的预测效能。结果 本研究共发生18例（25.35%）早产,早产组在合并妊娠期内感染及妊娠期糖尿病的人数显著高于对照组（χ2=13.169,5.565;均P<0.05）,两组阴道菌群丰富度及Shannon-Wiener指数均在不同孕期差异具有显著性,且随孕期增加而增加（P＜0.05）。早产组孕晚期丰富度显著高于对照组（t=5.681,P<0.01）,孕中期、孕晚期Shannon-Wiener指数显著高于对照组（t=2.683,7.367;均P＜0.05）。不同孕期两组阴道菌群在多个微生物层次的表达具有一定差异。多因素Logistic回归分析显示,高水平孕晚期丰富度、孕晚期和孕中期Shannon-Wiener指数是早产发生的独立危险因素（P=0.037,0.006,0.018）,孕晚期丰富度、Shannon-Wiener指数、孕中期Shannon-Wiener指数预测早产发生的最佳截点分别为11.28、2.54、2.94,其AUC分别为0.792、0.948、0.645,孕晚期Shannon-Wiener指数显著优于其他两指标（均P＜0.05）。孕晚期丰富度、Shannon-Wiener指数具有较好的灵敏度,孕中期Shannon-Wiener指数具有较好的特异度（均P＜0.05）。结论 妊娠期阴道菌群多样性对早产的发生具有一定预测效能。