由蛋白质介导的双歧杆菌对体外培养肠上皮细胞的粘附

本文对双歧杆菌和体外肠上皮细胞系Ｌｏｖｏ细胞间的粘附进行了研究。结果表明,双歧杆菌能特异性地粘附于肠上皮细胞周围,并且具有浓度和时间效应;各株双歧杆菌的粘附力存在着差异,新分离株高于标准株,胰蛋白酶处理耗尽培养液上清可完全抑制其粘附;高温也能降低粘附力;而白蛋白对粘附无影响。提示,双歧杆菌粘附素可能是一种不耐热的蛋白质,主要存在于耗尽培养液上清中     

灭活的双歧杆菌对肠上皮细胞粘附及其影响因素的研究

目的 观察灭活的青春双歧杆菌对人大肠癌细胞系ＣＣＬ－２２９的粘附以及影响粘附的因素。方法 通过与双歧杆菌活菌比较,灭活的双歧杆菌同样能粘附于肠上皮细胞,并且耗尽培养上清有利于双歧杆菌粘附。结果 粘附具有显著的浓度效应;粘附效果与孵育环境的ｐＨ值有关;高温处理耗尽培养上清对粘附无明显影响。结论 灭活的双歧杆菌可能具有与活菌相同的生态效应。     

双歧杆菌粘附对肠上皮癌细胞酶的影响

目的 研究双歧杆菌粘附对肠道细胞生理功能和能理代谢的影响。方法 以婴儿型双直菌ＤＮＭ９２２７菌株粘附大肠癌ＣＣＬ－１８７细胞为实验模型。结果 婴儿以歧杆菌ＤＭ９２２７菌株在适宜的条件下与培养的大肠癌ＣＣＬ－１８７细胞共同培养１ｈ后,ＣＣＬ０１８６细胞的碱性磷酸酶以及琥珀脱氢酶的以反应均有所增强。结论 双歧杆菌对被粘附的大肠癌细胞的生理功能和能量代谢具有正向影响。     

双歧杆菌粘附大肠癌细胞相关因素探讨

本文以青春双歧杆菌ＤＭ９２２７粘附大肠癌细胞ｃｌ－１８７为实验模型,探讨粘附的相关因素。结果表明：粘附需要一定的菌浓度（＞１０６ＣＦＵ／ｍｌ）,一定的温度（３７℃）及一定的时间（＞１０ｈ）,且偏酸更有利于粘附。破坏菌体表面的糖结构使粘附上升,而破坏蛋白结构则使粘附下降。     

双歧杆菌粘附机制研究的现状

近年来，人们对病原菌的粘附机制进行了深入研究，但对正常菌，特别是双歧杆菌粘附的研究处于初步阶段。已证实双歧杆菌对肠上皮细胞的粘附是牧民的和可逆的，具有种属特异性，但还不定期其粘附素及其受体的成分及结构，对其粘附的分子机制和由地引致的一系列生物学效应也不完全清楚。由于粘附是双歧杆发挥生理作用的前提，也是评定益生菌制剂效果的主要指标之一，对其粘附机制的研究具有重要的理论及实际意义。     

双歧杆菌粘附机制研究的进展

双歧杆菌是人体肠道最重要的生理性细菌 ,对宿主发挥生物屏障、营养、免疫、控制内毒素血症、抗肿瘤、抗衰老等生理作用。由于双歧杆菌粘附及定植于肠粘膜上皮细胞是其发挥作用的首要条件 ,而且生理性细菌的粘附可能参与了正常菌群生物屏障形成机制。因此有关双歧杆菌粘附的研究日益受到人们的重视。本文就这一方面的现状综述如下。1　一般特征1985羊 ,Cam p等用　 1 4 C- 油酸标记一株分叉双歧杆菌的脂磷壁酸 (L TA) ,然后用酚提取 L TA ,研究 L TA与人肠上皮细胞的粘附 ,他们发现双歧杆菌的 L TA与肠上皮细胞的粘附是特异的和可逆的…     

双歧杆菌对人大肠癌细胞粘附作用的初步探讨

双歧杆菌是人肠道的正常菌群之一。为探讨双歧杆菌对肠道粘膜上皮细胞的粘附机制,本文观察了双岐杆菌ＤＭ９２２７对培养的大肠癌细胞系ＣＣＬ－１８７细胞的粘附作用以及影响粘附的因素,初步建立了体外双歧杆的的粘附模型。结果还发现：在粘附近程中,孵育培养基的环境ｐＨ值在６．０－７．０左右时,钙离子浓度在２．０ｍｍｏｌ／Ｌ时,双歧杆菌ＤＭ９２２７对大肠癌ＣＣＬ一１８７细胞的粘附效果达到最佳。     

双歧杆菌粘附素受体的初步观察

本文研究了Ｌｏｖｏ细胞上双歧杆菌粘附素的受体。结果表明,过碘酸钠成或蛋白酶处理Ｌｏｖｏ细胞后,双歧杆菌对Ｌｏｖｏ细胞的粘附力明显降低,呈剂量效应。Ｄ一甘露糖能抑制两者的粘附;葡萄糖,乳糖,山梨糖,蔗糖及Ｄ一果糖不能抑制粘附。提示双歧杆菌粘附素受体是一种糖蛋白,可能与甘露糖有关。     

双歧杆菌对大肠癌细胞ccL187cAMP,cGMP影响的实验研究

双歧杆菌对维持机体正常微生态平衡具有重要作用。本文研究了长双歧杆菌对大肠癌细胞ｃｃＬ１８７内第二信使ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ浓度的影响,对长双歧杆菌的对数期培养物分别进行下列处理：活菌、死菌、代谢产物作用ｃｃＬ１８７细胞２小时后分别收集ｃｃＬ１８７细胞内的ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ浓度。实验表明长双歧杆菌的不同状态及代谢产物对ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ产生显著影响,且存在时间依赖关系,三种处理作用ｃｃＬ１８７细胞内的ｃ     

双歧杆菌抗肿瘤信号机制的研究

双歧杆菌是人类和某些哺乳动物肠道中最重要的生理菌,也是构成肠道黏膜菌群的主要成分。它是一类革兰阳性、无运动性、无芽胞的专性厌氧的杆菌。无毒无害,可与宿主和谐相处。双歧杆菌在机体内发挥着生物屏障、防辐射、抗感染、缓解便秘、控制内毒索血症、降低高胆固醇血症、抗衰老、改善乳糖消化不良和营养免疫等多种作用．同时它还具有抗肿瘤的作用,对维持人体的健康具有重要的作用。其中双歧杆菌抗肿瘤的研究是近年来肠道微生态学的研究热点。已知双歧杆菌不仅能拮抗多种肿瘤的生长,还能预防多种肿瘤的发生和发展。目前研究发现双歧杆菌的抗肿瘤机制主要有：（1）影响肠道菌群的生化代谢,减少致癌物的产生;（2）调整和激活机体的免疫系统;（3）诱导一氧化氮的产生;（4）抗诱变;（5）诱导细胞凋亡。本文主要就双歧杆菌抗肿瘤的信号机制的研究作一综述。     

双歧杆菌及肠致病性大肠杆菌粘附的细胞膜通透性研究

采用乳酸脱氢酶释放法比较研究双歧杆菌１０２７株及肠致生大肠杆菌（ＥＰＥＣ）对体外肠上皮细胞Ｌｏｖｏ细胞株粘附的细胞膜通透性,探讨它们对肠上皮细胞的不同生物学交谈２。结果表明,双歧杆菌粘附Ｌｏｖｏ细胞后,宿主细胞释放ＬＤＨ远较ＥＰＥＣ粘附的效果低,提示双歧杆菌粘附对主细胞膜通生影响不大,而ＥＥＣ则可损伤宿主细胞膜而增加其通性。因此,双歧杆菌作为生理性细菌可与肠上皮细胞和谐共生,这与ＥＰＥＣ的粘附损伤     

双歧杆菌对人类大肠癌CCL187细胞DAG的调控

目的 探讨双歧杆菌对人类大肠癌细胞第二信使ＤＡＧ的调控作用,解释菌群影响机体的分子生物学机制。方法 采用＾３Ｈ标记肌醇掺入法及ＨＴＬＣ法。结果 双歧杆菌对人类大肠癌细胞中第二信使ＤＡＧ具有调控作用。     

毛地黄皂苷诱导的水稻悬浮细胞防卫基因表达的信号传导

用带水稻苯丙氨酸解氨酶PAL 2启动子和GUS读码框嵌合基因的水稻悬浮细胞证明毛地黄皂苷能诱导水稻PAL 2的转录。NAD-PH、NADH、过氧化氢、超氧歧化酶、过氧化氢酶、甘露醇、1,2-羟基苯-3,5-二磺酸(Tiron)、paraquat、精氨酸、还原型和氧化型的谷胱甘肽、N-乙酰-L-半胱氨酸、二硫苏糖醇等都不影响毛地黄皂苷诱导的PAL2转导。只有在超氧歧化酶和过氧化氢酶或超氧歧化酶和Tiron一起时才微弱地抑制这种诱导。毛地黄皂苷能在缺钙培养基中诱导胞外介质碱性化,但它只在含钙离子的条件下才诱导PAL 2转录。钙离子载体A 23187及Stauros-poline不诱导PAL 2基因转录和胞外介质碱性化。钙调素的拮抗剂N-(6-Aminohexy1)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide(W7)和trifluoperazine(TFP)能抑制毛地黄皂苷诱导的PAL 2转录,但一些蛋白激酶的激活剂和抑制剂包括phorbol-12-myristate(TPA)、1-(5-Isoquinoline sulfony1)-2-methylpiperaz-ine(H7)、staurosporine及genestein不干扰它对PAL 2转录的诱导,G蛋白激活剂GTP-γS和抑制剂百日咳毒素也不影响这种诱导。毛地黄皂苷不诱导几丁酶转录。二硫苏糖醇能抑制几丁酶转录。伴刀豆球蛋白及麦胚凝集素能微弱地促进几丁酶基因转录,但对PAL 2表达没有影响。看来毛地黄皂苷诱导的水稻悬浮细胞PAL 2转录与活性氧激活没有简单和直接的关系。但它依赖于胞外介质碱性化和钙-钙调素,它的信号传导途径与诱导几丁酶转录的信号传导途径是不同的。     

SH－SY5Y细胞胞内钙库特性研究

运用单细胞显微荧光测量技术测量了单个ＳＨ—ＳＹ５Ｙ细胞内游离钙离子浓度的变化。首次报道了ＳＨ—ＳＹ５Ｙ细胞内存在毒蕈碱敏感而非咖啡因敏感的钙库,并研究了它的动力学特征。Ｎ￣￣Ｃ￣ｈｅｔｗＭａｄＵｇｈ＊ＴＯｗｈｏｍＣｂ￣ｐｏｎｄｅｎｅｅｓｈｏｕｌｄｂｅ￣．     

SH－SY5Y细胞胞内钙库特性研究

运用单细胞显微荧光测量技术测量了单个ＳＹ－ＳＹ５Ｙ细胞内游离钙离子浓度的变化。首次报道了ＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞内存在毒蕈碱敏感而非咖啡因敏感的钙库,并研究了它的动力学特征。     

胰岛素和IGF-I对离体犊牛小肠上皮细胞增殖和吸收功能的影响

本试验选择离体犊牛小肠上皮细胞,以细胞增殖率和葡萄糖吸收率作为细胞生长发育与功能成熟的指标,研究了胰岛素与胰岛素样生长因子-I(IGF-)对细胞生长发育的影响。结果表明,胰岛素浓度为10μg/ml时,明显促进小肠上皮细胞的增殖和对葡萄糖的吸收,浓度达到50μg/ml时则抑制细胞的增殖和吸收(P<0.01)。IGF-I浓度为100ng/ml时,对促进小肠上皮细胞增殖和吸收葡萄糖的作用最强(P<0.01),但100ng/ml、500ng/ml和1000ng/ml三种不同浓度的IGF-I对刺激细胞增殖和提高吸收功能无显著差异(P>0.05)。     

三七总皂甙诱导MSCs分化为神经元样细胞时胞内钙离子浓度变化的研究

目的探讨三七总皂甙(tPNS)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞过程中细胞内钙离子浓度[Ca2 ]i的变化.方法 L-DMEM冲洗SD大鼠股骨骨髓腔,培养大鼠MSCs.选用第5代MSCs进行诱导分化,用含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的L-DMEM培养液预诱导24h,加入含10μmol/L Fluo-3/AM的L-DMEM培养液负载30min,最后更换成含三七总皂甙0.25g/L的无血清培养液,同时在波长为488nm激光下扫描观测细胞形态和荧光强度的变化.结果更换三七总皂甙诱导液后,细胞内荧光强度逐渐增加,到100s达高峰值,其后逐渐减弱,但20min时细胞荧光强度仍高于诱导前,此时可见MSCs开始向神经元样细胞分化.结论三七总皂甙在体外诱导MSCs分化为神经元样细胞过程中胞内游离钙离子[Ca2 ]i浓度升高.     

甲胎蛋白在体外对人肝癌细胞生长的影响

本文用MTT比色法观察了甲胎蛋白(AFP)在体外对人肝癌细胞生长的影响。结果表明,AFP能促进SMMC-7721人肝癌细胞的生长。当AFP与AFP抗体合用时,AFP抗体能减弱AFP对SMMC-7721细胞生长的促进作用;AFP抗体单用对此种细胞的生长亦有抑制作用。另一方面,在相同的实验条件下,AFP和AFP抗体对HL-60人白血病细胞的生长无明显影响;提示AFP的促生长作用具有一定的肿瘤细胞特异性,并非一种蛋白质对培养细胞的非特异性营养作用。此外,AFP亦能促进MCF-7人乳腺癌细胞的生长,AFP抗体对此种细胞的生长有抑制作用。由于MCF-7细胞存在功能性AFP受体,也能合成和分泌AFP。这就提示,人肝癌细胞中的AFP很可能与其受体特异性结合,产生促生长效应。确切机制尚待进一步阐明。     

低钙对鲫鱼视网膜中视杆,视锥信号向水平细胞传递的不同作用

本工作应用细胞内记录技术,在灌流的鲫鱼离体视网膜的标本上,研究了低钙对外网状层中视锥、视杆信号向水平细胞传递的不同影响。当降低灌流溶液中Ｃａ（２＋）浓度至０．１ｍｍｏｌ／Ｌ时使视锥－和视杆－水平细胞（Ｃｏｎｅ－ＨＣ和Ｒｏｄ－ＨＣ）均去极化,但对两者的光反应性有不同的影响：使Ｌ型Ｃｏｎｅ－ＨＣ对６８０ｕｍ和５００ｕｍ闪光反应的幅度有不同程度的减小,但使Ｒｏｄ－ＨＣ对光反应的幅度显著增大。在０．１ｍｍｏｌ／ＬＣａ（２＋）Ｒｉｎｇｅｒ液灌流时,无论是明视ＰⅢ（反映机锥活动）或暗视ＰⅢ（反映视杆活动）,其反应的幅度均增大,提示发生在低钙时Ｃｏｎｅ－ＨＣ和Ｒｏｄ－ＨＣ光反应性的不同变化产生于突触传递的过程中。进而,磷酸二酯酶抑制剂ＩＢＭＸ对ＰⅢ的影响与０．１ｍｍｏｌ／ＬＣａ（２＋）Ｒｉｎｇｅｒ液的作用相似,而对Ｌ型Ｃｏｎｅ－ＨＣ和Ｒｏｄ－ＨＣ的作用均是使光反应性增大。这提示,在０．１ｍｍｏｌ／ＬＣａ（２＋）的Ｒｉｎｇｅｒ液中,Ｃｏｎｅ－ＨＣ和Ｒｏｄ－ＨＣ光反应性的变化差异可能是由于低钙对视锥和视杆终末Ｃａ２＋内流的不同影响而产生。     

维生素E对家蝇寿命及肠上皮细胞内脂褐素堆积的影响

正常家蝇,对照组喂常规饲料,实验组在饲料中补充维生素E(V. E.)。计算各组平均寿命,并按期取近肠,超薄切片,电镜观察。结果证明,补充V. E.组在5批实验中平均寿命分别比同批对照延长13.7％,6.4％,6.3％,21.6％,51.4％(p<0.05至<0.001)。透射电镜下发现,实验组近肠上皮细胞内脂褐素虽亦随日龄增加,但总少于同龄对照,分布较散,电子密度也较低,颗粒内质网似比对照发达。以上表明V. E.可能抑制了脂褐素堆积,并有促进合成,延长平均寿命的功效。