小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无     

小鼠骨髓细胞染色体标本制备中的失误与对策

动物骨髓细胞具有数量多且分裂旺盛的特点 ,可以直接利用其进行染色体标本的制备 ,这种方法具有方便快捷、不需体外培养和无菌操作 ,并且可以真实地反映完整机体所受环境影响的优点 ,常用于环境中致畸、致突变因素的检测和小型动物染色体的研究 ,在临床上也常用于白血病、多发性骨髓瘤等恶性血液病的研究。小鼠骨髓细胞染色体制备实验也是遗传学及细胞生物学的重点实验之一。1　问题的提出一个优良的动物骨髓细胞染色体制片应该是 :全部染色体较集中 ,其中各染色体分散均匀且互不重叠 ,染色体长度适中 ,能清晰地显示出着丝点位置 ,染色体呈…     

染色体畸变分析在慢性辐射损伤诊断中的应用

随着原子能工业的蓬勃发展和原子能和平利用的日益广泛,在医疗、地质、放射性矿山、工厂、仪表工业、科学研究机构,核动力装置等部门中接触辐射或从事放射性同位素工作的人员日渐增多。在资本主义国家,由于不重视工人     

小鼠染色体畸变类型研究

世界卫生组织对人体细胞染色体分析方法作了详细的规定,使各实验室的结果便于比较。小鼠是遗传学研究的常用动物,但迄今关于小鼠体细胞、生殖细胞染色体畸变分析方法尚无统一规定。小鼠的染色体属端着丝粒染色体,其结构畸变与人类的染色体结构畸变类型     

微核与染色体畸变的相关性

由于染色体畸变的分析可以准确地反映外界因素对生物体的作用。因此,这种技术被广泛地用于遗传毒理学的研究以及诱变剂的筛选等工作。但在检测方面,中期细胞染色体分析存在着人所共知的缺点,例如实验周期长而程序繁。另外,畸变反应过于敏感也给工作带来某些局限性,如,药剂和实验条件造成染色体粘     

微核与染色体畸变的相关性

由于染色体畸变的分析可以准确地反映外 界因素对生物体的作用。因此,这种技术被广 泛地用于遗传毒理学的研究以及诱变剂的筛选 等工作。但在检测方面,中期细胞染色体分析 存在着人所共知的缺点,例如实验周期长而程 序繁。另外,畸变反应过于敏感也给工作带来 某些局限性,如,药剂和实验条件造成染色体粘 连而分散不佳,或中期细胞太少,降低了分析的 可靠性。而利用微核技术来检测对生物的损伤 却简便、迅速,恰恰弥补了畸变分析的弱点。所 以自Matter 等介绍了微核率作为染色体损伤 检测的经典方法以来,目前这种技术在人和动 物染色体损伤分析中已得到广泛应用,而且植 物小抱子母细胞的微核也用于环境检测。     

云锡矿粉诱发大鼠骨髓细胞染色体畸变的研究

云南锡业公司矿工的肺癌发病率高,矿尘中的砷,铁,铅等金属的潜在致癌性已引起了重视(张辅铭等,1985;云南锡业公司劳动防护研究所,华北辐射防护研究所,1982;云锡劳研所流行病室,1982;孙来华等,1986)。鉴于物质的致癌性与致突变性之间有一定的相关性,我们选用5种云锡矿粉,4种金属化合物,研究它们对大鼠骨髓细胞的遗     

病毒感染和染色体畸变

病毒广泛分布于人类环境之中,人类病毒性疾病种类繁多,流行又广。自Hampar等(1961)在单纯疱疹病毒感染的中国地鼠细胞中,首次发现染色体畸变以来,大量的工作相继证明,在许多病毒性疾病患者以及离体培养的人类细胞中,病毒感染有着强烈的细胞遗传学效应即诱发人类染色体畸变。在某种意义上,我们可以把病毒称为拟辐射因子,而且可能是人类环境中最普遍的一种     

蚕豆染色体Giemsa带型及其在鉴别染色体畸变中的应用

本文用BSG染色体C带显示法,研究了两个蚕豆(Vicia faba)品种嘉定白和平鲁的染色体带型。 平鲁的染色体带型:(1)70％M染色体显示出三条带,一条付缢痕带,二条着丝点带(C臂、O臂各一条);30％M染色体却显现出四条带,除付缢痕带以外,有三条着丝点带(C臂两条,O臂一条)。(2)第二对染色体均有三条带,着丝点两侧有两条着色较浅的带,长臂中央有一条中间带。(3)第三对染色体只有两条带,均位于长臂,一条着丝点带,另一条中间带。(4)第四对染色体与第三对有相似的两条带,但是中间带特别阔,着色最深。(5)第五对染色体虽然也是在长臂上显示两条带,但中间带的位置稍偏着丝点方向。(6)     

蚕豆染色体Giemsa带型及其在鉴别染色体畸变中的应用

Giemsa分带是七十年代出现的细胞学新技 术。它用某些特殊方法,使染色体上显示出特 定带纹。用它作标记,有助于深人认识每条染 色体的特点及其结构。目前国际上已广泛地用 它进行核型分析,研究亲缘关系^[3,4,9],进行远缘 杂种细胞学鉴定^[10,12],人类群体研究^[5]。它对细 胞遗传学的发展在理论上和实际应用上均有重 大意义。     

丫啶橙荧光染色法在微核试验中的应用

染色体或染色单体断裂后所遗留下来的断 片可通过细胞分裂在一定时期内保留于子细胞 中;纺锤体细胞器功能失调也可形成断片;这些 断片称为微核。小鼠体内的微核试验就是利用 微核来观察染色体畸变的另一种表现形式。由 于Giemsa染色法简单,快速、经济、因而被广 泛采用。但Giemsa染色法特异性较差,非特 异着色颗粒有时很难与微核相区别,影响结果 的判断,为此有必要建立一种更加特异的观察 方法。近年来荧光显微技术在细胞学、免疫学、 微生物学等多个领域中得到广泛应用,我们参 照有关文献〔1-4,将py咤橙(Acridine Orange)荧 光染色法应用于微核试验,并获满意的结果。     

男性不育与染色体畸变

男性不育症愈来愈引起社会和医学生物界的关注。据统计,因各种各样原因引起男性不育的患者约占育龄夫妇的5—8％,也就是说,全国每年如有100万对育龄夫妇的话,就有5至8万对夫妇因男性不育而陷入痛苦与焦虑之中。男性不育的病因很多,本文重点谈谈男性不育的细胞遗传学有关问题,即男性不育与染色体畸变的关系。 (一)男性不育的细胞遗传学基础男性的精子都是单倍性。由于男性的性染色体是XY,故有X精子和Y精子两种,它们与卵子结合的机会都是随机的。精子的发生是由一个精原细胞经过减数分裂后形成四个精子,它的发生是每时每刻在进行     

蚕豆微核试验及其在重金属遗传毒害中的应用

随着工业的发展,工业“三废”的排放日益增加,致使大量的重金属进入空气、水和土壤,从而污染了环境,破坏了生态平衡。不仅如此,这些重金属还可通过不同方式,不同途径进入植物体内,破坏它们的细胞结构,干扰它们的代谢过程,导致种子萌发率降低、根的生长减缓、植株发育受阻、农作物产量和品质下降。不仅如此,而且这些重金属还能通过食物链进入人体,对其健康产生严重危害,如身体消瘦,关节肿胀,血红素合成受阻,出现忧郁腩疾病和忧郁麻痹及幼儿智力下降等,严重者甚至能诱发绑咆癌变,引起癌症,因此防止重金属对环境的污染已成为世界各国政府和学者高度关注的问题之一。     

苯和环磷酰胺诱发小鼠肝、骨髓和精原细胞染色体畸变的比较分析

在同一个体小鼠上比较分析苯和环磷酰胺诱发的肝、骨髓和精原细胞的染色体畸变率。结果表明,这三种靶细胞的遗传毒理学敏感性是不同的。按每只0.01毫升的剂量皮下注射两次苯于部分肝切除的小鼠,按其诱发的染色体畸变率,敏感性的次序是肝>骨髓>精原细胞。而以环磷酰胺处理的小鼠(15微克/每克体重,腹腔注射),诱发的染色体畸变是骨髓>肝>精原细胞。苯和环磷酰胺诱发的染色体畸变类型无明显差别,主要都是染色单体型的畸变。这种在同一个体小鼠上比较分析三种靶细胞染色体畸变的方法,对于需要肝代谢活化的前致癌剂/前诱变剂活性的测定以及体内比较三种靶细胞的遗传毒性敏感性提供了新的检测途径。 不同组织、器官对化学诱变剂敏感性的差异及其机制的研究,在遗传毒理学中是一项重要的研究课题。 本文试图以苯和环磷酰胺作为检测剂,以同一个体上的肝、骨髓、精原细胞为靶细胞,比较分析诱发的染色体畸变率差异以期对遗传毒理学敏感性有较好的了解。     

微核试验在中国的应用、发展与展望

微核试验是反映染色体损伤的重要试验方法,已广泛应用于遗传、食品、药物、环境等多领域的遗传毒性评估,以及作为有害职业和生活环境暴露人群遗传损害的生物标志物。我国开展微核试验已有二十余年的历史,本文通过检索《中国生物医学文献数据库》(1980~2000),共检索到有关微核的专题研究文献共1316篇,研究内容涉及微核的文献共2083篇。本文对微核的相关信息进行了分析,并结合作者自己的研究工作,回顾了微核试验在中国的应用和发展,总结了我国学者开展该项工作的优势与不足,对微核试验在我国的进一步发展进行了展望。     

原位杂交技术在检测染色体畸变中的研究

实验运用原位杂交技术检测肿瘤组织的染色体畸变。用3、7、8、9、12号染色体着丝粒特异性DNA探针,分别对外周静脉血的淋巴细胞、新鲜实体瘤组织、瘤组织石蜡切片进行染色体检测。二个染色体杂交点代表一对正常的染色体、三个染色体杂交点显示该细胞有染色体三体。整个实验过程简单、快速、准确、易重复。此方法和传统的细胞遗传学方法相结合,对探讨肿瘤的发生、发展有很大的意义。