卡介苗菌基因组DNA对小鼠腹腔巨噬细胞激活效应的初步研究

为了比较研究卡介苗菌基因组DNA和卡介苗菌激活小鼠腹腔巨噬细胞的抗结核免疫应答过程及免疫作用,用卡介苗菌基因组DNA、卡介苗菌和生理盐水分别皮内注射小鼠第30、60 d后,分别采用Griess法、化学法、ELISA法检测小鼠腹腔巨噬细胞产生的NO、H2O2以及IL-12、TNF-α的表达.研究结果,卡介苗菌基因组DNA和卡介苗菌皮内接种小鼠后能显著诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌表达IL-12和TNF-α.卡介苗菌基因组DNA组和卡介苗菌组相比较,无明显差异,与生理盐水组比较,其差异均有统计学意义(P<0,05);卡介苗菌基因组DNA和卡介苗菌皮内接种小鼠后也能诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO、H2O2,卡介苗菌基因组DNA组和卡介苗菌组相比较,无明显差异,与未免疫组比较均具有统计学意义(P<0.05).研究结果表明,卡介苗菌基因组DNA皮内接种小鼠后能诱导小鼠腹腔巨噬细胞活化并产生较强的激活效应,且该效应于卡介苗菌无明显差异.     

卡介苗生产中细菌生长的变化与免疫应答的相关性

正卡介苗接种对总体生存率具有有益的非特异性作用。卡介苗接种后人体对结核菌素试验产生阳性反应并且有疤痕形成与提高生存数相关。在一项随机的现场研究中,初生低体重新生儿初生时接种卡介苗或延迟接种卡介苗。卡介苗的生产者测试了生长率相对较慢的时期制备的卡介苗。作者研究了卡介苗生产制备期间卡介苗的生长率与体内和体外诱导免疫应答之间的关联性。1 633名新生儿在初生时随机接种卡介苗,并在12个月龄时检查疤痕形成情况。在2和6月龄时     

乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗动物安全性试验研究

为评价乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗的安全性,分别给豚鼠皮下注射、小鼠皮内注射乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗或卡介苗,豚鼠每2周称体重一次,观察6周,解剖检查其病理变化;小鼠也进行病理检查。结果乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗接种组和卡介苗接种组的豚鼠体重均增加,疫苗注射局部及各脏器病理改变相似;小鼠接种局部皮肤病理改变也未见差异。结论为乙肝表面抗原(HBsAg)没有促使卡介苗毒力增强,乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗接种实验鼠是安全的。     

中国分支杆菌类免疫调节剂的评述与展望

近年来,中国分支杆菌类制剂有多种,如治疗用卡介苗,卡介苗多糖核酸（已有三个品牌：卡提素、斯奇康和卡舒宁）,冻干卡介苗细胞壁,草分支杆菌注射液（高品名：乌体林斯注射液）及母牛分枝杆菌冻干制剂（即Vaccae苗）,这些制剂均有免疫调节功能,治疗用卡介苗及卡介菌细胞壁主要用于治疗浅表性膀胱癌;卡介苗多糖核酸制剂主要用于预防和治疗慢性气管炎,感冒和哮喘;单分枝杆菌及母牛分枝杆菌制剂以及卡介苗多糖核酸液主要用作结核病的辅助治疗,临床观察,均有明显疗效。     

液质联用技术分析比较基因重组卡介苗与传统卡介苗Ag85复合体成分

目的利用液质联用技术分析比较基因重组卡介苗Aeras-422与传统卡介苗的主要分泌型抗原Ag85复合体成分。方法分别提取基因重组卡介苗Aeras-422与传统卡介苗培养上清中的分泌蛋白,采用反相高效液相色谱(Reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)进行分离,并将最终得到的目的蛋白峰采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS ReflexⅢ)进行质谱分析鉴定。结果基因重组卡介苗Aeras-422与传统卡介苗培养上清分泌蛋白Ag85复合体成分有所不同,Aeras-422表达的Ag85复合体成分包括Ag85A和Ag85B两种抗原,传统卡介苗菌株仅分泌表达Ag85A抗原。结论基因重组卡介苗Aeras-422分泌Ag85复合体的能力优于传统卡介苗。为建立新型结核病疫苗的质控方法提供了数据支持。     

结核活疫苗的研究进展

近年研究较多的结核活疫苗主要有重组卡介苗、减毒牛分枝杆菌和减毒结核分枝杆菌,另外对田鼠分枝杆菌和猿分枝杆菌也有所研究。大多数结核活疫苗在动物模型中的免疫效果低于或相当于卡介苗,只有极少数的免疫效果优于卡介苗。     

卡介苗阿拉伯糖苷转移酶embC基因敲除株的构建和初步鉴定

目的采用基因敲除技术构建了卡介苗embC基因缺失株。方法从卡介苗基因组中扩增出embC基因,定向插入自杀质粒p2NIL中,切除embC基因中约1000bp片段使其失活,再定向插入标记片段,筛选鉴定阳性克隆,电穿孔转入卡介苗,筛选重组菌株。结果PCR和酶切鉴定证明构建成功用于基因打靶的置换型自杀质粒,并筛选成功获得重组卡介苗。结论获得了卡介苗embC基因敲除株,为进一步研究对卡介苗免疫活性的影响奠定了基础。     

19月龄儿童再次接种卡介苗的免疫学效果

<正>背景:卡介苗诱导重要的非特异性免疫效应,在几内亚比索进行了随机临床试验,卡介苗再次接种是与入学前接种百白破联合疫苗的幼儿和没有补充微量营养素(MN)的幼儿显著增加的存活率相关。在该项试验中,卡介苗再接种与那些未接受营养补充的儿童的明显地提高了活存率相关联。在这项试验中,作者对卡介苗再接种的效果作了评估。方法:儿童被随机分成接种卡介苗组和不接种卡介苗组。随机分组后6~11周采血者为早期样本组、5~9个月采血者为晚期样本组。检测用脂多糖(LPS)、纯化的蛋白衍生物或者植物血凝素刺激的     

小鼠巨噬细胞系体外感染卡介苗的应答

【目的】探讨小鼠巨噬细胞系RAW264.7体外感染卡介苗的应答。【方法】体外感染RAW264.7细胞23h后,分析细胞形态和细胞表面共刺激分子的表达。然后去除培养上清中的卡介苗,继续培养不同时间,通过CFSE、annexin V/PI和Rh123标记,分析宿主细胞的应答。【结果】卡介苗感染23h后,细胞生长状态良好,细胞内能明显观察到吞噬泡中的BCG。细胞表面共刺激分子CD40、CD54、CD80、CD86、CD11b的表达明显升高,CD11c、I-Ad以及H-2Kd的表达变化不明显。CFSE标记卡介苗后,随着培养时间的延长,荧光强度逐渐减弱,但是4天后仍然明显地高于对照组。除去培养上清中的卡介苗后继续培养,含有卡介苗的细胞逐渐减少,继续培养60h后基本检测不到。另外,卡介苗感染不能诱导细胞凋亡,线粒体膜电位先升高后降低,5d后,基本上与对照组一致。【结论】通过以上分析,为卡介苗免疫机理的研究提供了重要数据。     

卡介苗复种后局部早发反应和结素反应增强现象的观察

卡介苗复种后局部早发反应和结素反应增强现象的观察张建陶，朱艳琴我国规定新生儿初种卡介苗后，在小学一年级和初中一年级进行复种，复种对象为结核菌素试验阴性者。常州市自１９８５年起新生儿卡介苗接种率和卡介苗复种率均在９５％以上。为了解复种后的反应情况，我们...     

卡介苗对结核的预防接种—纪念结核菌发现100周年综述

<正>关于介卡苗 有关卡介苗菌本身的研究,最卓越的成就乃是冻干卡介苗的制造工艺学。尤其是日本的冻干菌苗制造技术战后有了显著的进步,结果是日本不仅向世界各国输出冻干卡介苗,而且日本的制造工艺也正在发展中国家的主要卡介苗制造室中普及,使之能产出质量不逊于日本的制品。     

卡介苗预防结核病的临床疗效观察

目的:探讨卡介苗接种与结核病之间的相关性,评价卡介菌预防结核病的效果。方法:选取我所2009年4月~2012年9月确诊并收治的300例结核病患者,分析所有结核病患者中,严重类型结核病、一般类型结核病生率。结果:接种卡介苗的患者与未接种卡介苗的患者严重类型结核发生率相比较存在显著差异(P0.05),两组各病症发生情况之间也存在显著差异(P0.05)。结论:卡介苗在预防结核病发生具有实际意义,值得临床推广与使用。     

卡介苗接种后并发迟发性淋巴腺炎一例

<正>在北美由于感染结核病的危险性很低,接种卡介苗是很少的,接种者仅是有指徵的个别人,其死亡率约占接种者的1/2500万,卡介苗提供了安全的免疫预防,即使局部淋巴腺炎这个极普通的并发症,也仅占新生儿接种的2％。如果没有获得卡介苗接种的历史或卡介苗接种是采用多刺法或划痕法     

湖南省9所医院早产儿卡介苗及乙肝疫苗接种情况及未接种原因分析

目的:了解湖南省9所医院早产儿卡介苗及乙肝疫苗接种现状,并分析未接种的原因。方法:收集2014年11月至2015年10月期间参与研究的湖南省9所医院产科分娩的早产儿相关临床资料及卡介苗和第一剂乙肝疫苗的接种资料,分析各医院的接种原则以及未接种的原因。结果:各医院间早产儿的出生体重及出生胎龄比较差异均有统计学意义(P0.05);9所医院遵循的卡介苗和第一次乙肝疫苗接种原则不尽相同;出院时卡介苗未接种率为45.0%,明显高于第一剂乙肝疫苗未接种率的16.7%(P0.05);卡介苗因低体重、疾病、IVIG、家长拒绝而未接种的比例分别为82.5%、12.9%、4.3%、0.3%,第一剂乙肝疫苗因疾病、低体重、IVIG、家长拒绝而未接种的比例分别为53.1%、41.6%、4.0%、1.3%。结论:湖南省9所医院早产儿卡介苗及乙肝疫苗接种率较低,疾病和低体重位居出院时未接种原因的前两位,应规范早产儿疫苗接种,避免遗漏或不恰当推迟疫苗接种。     

mpt64-卡介苗重组疫苗的构建、免疫原性及抗结核作用

通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原MPT64的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,采用电穿孔技术将重组质粒导入到卡介苗中,应用聚合酶链反应(PCR)扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对mpt64-卡介苗重组疫苗鉴定:成功地构建了MPT64基因pYUB295重组质粒,MPT64蛋白在卡介苗中能分泌表达....     

卡介苗载体及其在疫苗研究中的应用

卡介苗是发展多价疫苗最好的载体之一.把外源基因导入卡介苗有3种途径:一是分枝杆菌噬菌体衍生的基因转移系统;二是分枝杆菌质粒衍生的基因转移系统;三是同源重组基因转移系统.重组卡介苗多价疫苗的研制为各种疾病的预防开辟了广阔的前景.     

介绍一种用卡介苗进行改良抗酸染色的实验教学方法

利用卡介苗取代结核分枝杆菌阳性痰液作为实验标本,使用改良后的抗酸染液进行抗酸染色实验教学。卡介苗水溶液为标本,石炭酸复红染色液中加入5%的Tween-80进行抗酸染色。染色后,卡介苗标本片与结核菌阳性痰液标本比较,菌体形态与染色均无明显差异。此法具有染色效果好、标本来源方便、安全无污染等优点,满足抗酸染色实验教学需要。     

卡介苗ERP基因缺失突变株在小鼠体内毒力的研究

为初步研究卡介苗ERP基因缺失突变株对小鼠的毒性作用,将卡介苗ERP基因缺失突变株和BCG分别皮下接种BALB/c小鼠后,取小鼠脾脏和肺脏匀浆,将匀浆液稀释后接种于罗氏培养基,培养3周后计菌落数(CFU);同时观察肺部病理改变,并比较和分析免疫16周时各组小鼠肺、肝、脾的脏器系数.结果表明,卡介苗ERP基因缺失突变株较BCG对BALB/c小鼠毒性低.     

乙型肝炎-卡介苗联合疫苗的研究进展

乙型肝炎疫苗和卡介苗均是我国常年生产和使用的生物制品,其安全性、有效性早已被证实。根据我国计划免疫规定,乙肝疫苗和卡介苗必须在新生儿出生后24h内接种。因诸多原因,不能简单地将现行2种疫苗混合使用,而须分2针接种。制备乙型肝炎-卡介苗联合疫苗,可以减少针次,降低副作用。动物试验显示,联合疫苗的免疫效果不低于2种单价疫苗。     

治疗用卡介苗的研制

高浓度卡介苗临床用于膀胱癌术后化疗已有数十年。经临床使用其抑制浅表型膀胱癌术后复发效果显著。为满足临床患者的使用,需研制一种适合的治疗用卡介苗制剂。本文报道了三批治疗用卡介苗的研制过程及本所质管处,中检所的检定结果。样品现已通过检定,正申请试生产文号