人参细胞生物合成熊果苷转化体系的建立

以人参(Panax ginseng C. A. Mey.)培养细胞为生物反应体系,利用外源氢醌为底物,对熊果苷的生物合成进行了研究.TLC鉴别表明,人参细胞可以将外源的氢醌转化为熊果苷;以熊果苷含量和氢醌的转化率为指标,对人参细胞生物合成熊果苷的基本条件(氢醌浓度、转化持续时间、细胞培养阶段)进行了探讨, 结果表明,MS固体培养基上培养32 d的人参细胞,在含有2 mmol·L-1氢醌的生物合成培养基中转化24 h后,合成的熊果苷含量占细胞干重的7.176%,氢醌转化率也达到79.15%.     

人参毛状根生物合成天麻素转化体系的建立

以对羟基苯甲醇转化率和天麻素含量为指标,探索适宜于人参毛状根生物合成天麻素的培养条件如底物浓度、转化持续时间和培养阶段.结果表明,B5液体培养基培养22d的人参毛状根,在含有1.000mmol·L-1对羟基苯甲醇的生物合成培养基中转化24h,合成的天麻素含量占干重的6.65%,对羟基苯甲醇转化率达到84.8%,说明以人参毛状根为反应器可以合成人参所不具有的天麻素.     

植物激素对人参毛状根生长和皂甙含量的影响

就植物激素IAA、IBA、NAA、2,4-D对人参（Panax ginseng C.A.Meyer）毛状根生长及皂甙含量的影响进行了研究。结果表明,4种生长素在适宜的浓度下均可不同程度地促进人参毛状根的生长以及皂甙的积累,同时能影响单体皂甙的分布。NAA和IBA能显著促进毛状根的生长,其中0.500mg/L IBA能显著促进毛状根生长和总皂甙的积累。细胞分裂素6-BA在较低浓度时虽然对生长无明显的促进作用,但对皂甙积累有利,同时显著促进单体皂甙Rb1的积累,增大Rb1在总甙中所占的比例。     

人参毛状根培养过程中对活性氧清除能力的动态变化

采用化学发光法 ,考察了人参 (PanaxginsengC .A .Mey)毛状根培养过程中对 3种重要活性氧ROS(O2÷、OH·、H2 O2 )清除能力的动态变化 ,发现在毛状根生长对数期时对 3种ROS都有很强的清除能力 ,而在生长停滞期较低 ,符合人参毛状根生长的S型曲线 ,印证了人参毛状根的生长和衰老过程。     

植物毛状根的培养及其化学进展：2.植物毛状根的次生代谢

本文介绍了毛状根的次生代谢调控、次生代谢物质的生产、生物转化、生物合成以及工业化应用。     

青蒿素在露水草毛状根中的生物转化

露水草毛状根培养系中加入青蒿素培养８ｄ后,青蒿素转化去氧青蒿素。根据光谱数据,对去氧青蒿素的结构进行了鉴定。结果表明,通过水草毛状根能将青蒿素进行选择性还原为去氧青蒿素。     

人参毛状根及愈伤组织中ATP动态变化的生物发光法测定

人参 (ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ .Ａ .Ｍｅｙ)系五加科 (Ａｒａｌｉａｃｅａｅ)人参属 (ＰａｎａｘＬ .)植物 ,是一种贵重药材。随着植物生物技术的发展 ,Ｒｉ质粒介导产生的植物毛状根培养是植物基因工程和细胞工程相结合的一项新技术[1 ,2 ] 。人参毛状根系统的建立是对人参资源开发和利用的新形式。ＡＴＰ是生物体的能量“通货”及重要的代谢调节物质 ,对生命活动至关重要。随着生物有机体的生长发育 ,ＡＴＰ含量也呈一定的变化趋势 ,并反映出生物体的生长代谢情况。由于ＡＴＰ测定操作复杂 ,仪器试剂昂贵[3 ] ,不便于进行动态监测。…     

温度对青蒿毛状根生长和青蒿素生物合成的影响

本实验研究了不同温度(15℃～35℃)对青蒿毛状根生长和青蒿素生物合成的影响,发现25℃有利于毛状根生长,30℃促进了青蒿素生物合成。通过温度改变的二步培养技术(培养前20d温度控制在25℃,后10d温度提高到30℃),青蒿素的产量得到明显提高,高于在恒温培养时(25℃或30℃)的结果。     

转基因何首乌毛状根对8种活性成分的生物转化研究

目的：利用转基因何首乌毛状根悬浮培养体系对青蒿素等8种活性化合物进行生物转化研究。方法：分别向预培养9 d的何首乌毛状根培养体系中加入底物,共培养7 d后终止转化,通过TLC和/或HPLC检测转化产物,使用柱色谱法分离纯化产物。结果：化合物呋喃橐吾酮（6）发生了生物转化,并分离得到两个转化产物;对苯二酚（7）被转化,分离并鉴定出1个转化产物;青蒿素（8）发生了转化,分离得到两个转化产物。结论：转基因何首乌毛状根悬浮体系中存在多种生物酶系统,可对外源底物进行糖基化、氧化、还原和羟基化修饰。     

西洋参根中人参黄酮苷的分离鉴定

利用大孔吸附树脂柱及葡聚糖凝胶C 2 5柱层析 ,首次从西洋参根中分离并鉴定出黄酮类成分———人参黄酮苷 ,并对其进行了结构鉴定。为人参与西洋参的鉴别提供了又一成分区别点     

野生人参种子的超低温保存

人参（ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ．Ａ．Ｍｅｙ．）是珍贵的药用植物，由于长期过度采挖，资源枯竭，现存于我国东北地区的野生人参已处于濒临绝灭的边缘，被列为国家一级重点保护植物［１，２］。所以在加强其就地保护的同时，人参种质资源的迁地保存也是非常必要的。按...     

中国人参花化学成分研究

目的:对人参(Panax ginseng C.A.Mey.)花蕾的化学成分进行研究。方法:采用多种柱色谱技术进行分离纯化,并通过波谱分析方法鉴定化合物的结构。结果:分离鉴定了9个化合物,分别鉴定为咖啡碱(1)、胡萝卜苷(2)、豆甾醇3-O-葡萄糖苷(3)、α-菠甾醇(4)、7-豆甾烯-3β-醇(5)、人参皂苷Rk3(6)、人参皂苷Re(7)、人参皂苷Rg2(8)、谷甾醇(9)结论:其中化合物1为五加科植物中首次分离得到,化合物3、4、5为人参花中首次分离得到。     

人参悬浮细胞系的建立及其生长特性的研究

从人参幼叶的培养中,筛选出了质地松疏、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系。将这种愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡培养．建立起分散程度好的人参悬浮细胞系。在此基础上,测定了人参细胞悬浮培养物的生长曲线。实验表明,水解酪蛋白（ＬＨ）对人参悬浮细胞的生长有利。滋养培养可以使人参悬浮细胞的愈伤组织形成率提高,并在低密度下达到较高的植板率。这为有效地筛选出适合于工业化生产的高产人参细胞株提供了方便。     

红果人参叶中cDNA文库的构建

以四年生红果人参叶片为材料,提取叶中总RNA合成cDNA,连接到质粒载体pDNR-LIB上。采用电穿孔法将重组质粒转化到DH5α中。经文库质量鉴定表明:原始文库滴度为1.008×106pfu·mL-1,扩增后的文库滴度为2.968×109pfu·mL-1,重组率接近100%,插入片段大小在0.5~2kb之间,平均为0.85kb,表明已成功构建了红果人参叶中cDNA文库。     

Traits of Panax ginseng hairy roots after cold storage and cryopreservation

Summary Panax ginseng hairy root cultures were established by infecting petiole segments with Agrobacterium rhizogenes strain 15834. Hairy root segments including root tips placed onto phytohormone-free 1/2 Murashige and Skoog solid medium and stored at 4 °C in the dark for 4 months, resumed elongation when the temperature was raised to 25 °C in the dark. For cryopreservation, a vitrification method was applied. Root tips precultured with 0.1 mg/l 2,4-D for 3 days and dehydrated with PVS2 solution for 8 minutes prior to immersion into liquid nitrogen had a survival rate of 60 % and could regenerate. The hairy roots regenerated from cryopreserved root tips grew well and showed the same ginsenoside productivity and patterns as those of the control hairy roots cultured continuously at 25 °C. The conservation of T-DNAs in the regenerated hairy roots was proved by PCR analysis.Abbreviations 1/2 MS a half strength Murashige and Skoog (1962) - B5 Gamborg B5 (Gamborg et al. 1968) - WP woody plant (Lloyd and McCown 1980) - RC root culture (Thomas and Davey 1982) - RCI root culture medium containing 100 mg/l myoinositol - HF phytohormone-free - IAA indole-3-acetic acid - IBA indole-3-butyric acid - 2,4-D 2,4-dichlorophenoxyacetic acid - TIBA 2,3,5-triiodobenzoic acid - PCR polymerase chain reaction - PVS2 plant vitrification solution 2 (Sakai et al., 1990) - FDA fluorecein diacetate