斯氏肺吸虫成虫组织化学观察

本文对正常的斯氏肺吸虫成虫的糖原、核酸、碱性磷酸酶、蛋白质、酯酶等进行了组织化学观察,旨在为研究药物对虫体的作用提供对比性参考资料。现将结果报告如下:材料与方法从人工感染斯氏肺吸虫囊蚴三月后的家犬肺脏囊胞内取得虫体,分别固定于10%福尔马林—钙、Carnoy氏液、95%酒精及丙酮中,以石蜡包埋作6微米的连续切片。按Brachet氏甲基绿—派若宁法观察核糖核酸(RNA)及去氧核糖核酸(DNA);Best氏胭脂法及PAS法观察糖元;Gomori氏钙—钴法观察碱性磷酸酶(AKP),汞—溴酚蓝及固绿法显示蛋白质,茚三酮—Schiff氏法显示结合α—氨基蛋白…     

用改进的Blenden银染色法检查钩端螺旋体

近年来,在钩端螺旋体流行病学调查中,均采用改良镀银染色法,但此法在染色过程中须控制温度(最适为60℃),无特殊恒温设备,不易掌握。为寻求一种简便方法,我站于1982年,在钩体病监测中,按常法取鼠双肾培养后,再取鼠肾作压印片,沿用刘聿太改进的鞭毛染色法中的Blenden银染色法,检查钩端螺旋体(简称钩体),现将结果报告如下。     

选择性增菌液对单核增生性李斯特氏菌检出效果的比较

为了了解食品中单核增生李斯特氏茵(Listeria monocytogenes)的污染状况,比较不同选择性增茵方法对单核增生李斯特氏茵的检出效果,并进一步比较不同增茵方法在不同类食品中检出单核增生李斯特氏茵的差异性,进而确定特定食品最合适的增茵方法,随机采集本市生鲜肉、水产品、果蔬及冷冻食品4类135份食品.采用国标LB二次增茵法、EB法、最新改良FDA法及Fraser肉汤增菌法进行增菌,采用PALCAM选择性平板进行分离,先用行标多重PCR法进行初步验证后再进行国标生化鉴定.4种方法共检出单核增生李斯特氏茵23株,其中LB二次增菌法检出5株、Fraser肉汤增菌法检出6株、EB法检出5株、最新改良FDA法检出7株.结论是4种方法总的检出率没有较大的差异性,但对于不同类食品的检出率有所不同.     

恙虫热立克次体(宫崎地区分离株)在BSC—1细胞中的增殖

恙虫热立克次氏体的致病性有多种类型。从宫崎地区的恙虫病患者中分离出的立克次氏体对小白鼠致病性弱,小白鼠虽可感染发病,但不死亡,很难在腹腔内细胞或脾中发现立克次氏体。在一般恙虫热立克次氏体的研究中常用的鸡胚卵黄囊和细胞培养法中几乎不繁殖,这就使立克次     

泌尿生殖道淋病奈氏菌与解脲支原体感染的检测

采用涂片、培养及生化反应,对116例患者泌尿生殖道琳病奈氏菌进行检测,用培养法检测解脲支原体,结果表明,116例患者中,淋病奈氏菌感染者占67.24%,淋病奈氏菌与解脲支原体混合感染占23.08%,揭示在性传播疾病的诊治中,应注意混合感染问题.     

纯化HuIFN—α蛋白含量测定方法的研究

本文对Ｋｊｅｌｄａｔｈ氏,Ｌｏｗｒｙ氏及Ｋａｌｃｋａｒ氏三种测定纯化α型人白细胞干扰ｕＩＮＦ－α）蛋白南含量的方法进行了比较试验和研究。Ｋｊｅｌｄａｈｌ氏法测定结果准确可靠,但样品用量大,费时,Ｌｏｒｒｙ氏法与Ｋｊｅｌｄａｈｌ结果一致,榈一少,结果稳定：ａｌｃｋａｒ氏法操作简单方便,样品用量少,但误差较大作者改良了Ｋａｌｃｋａｒ氏法,测定误差大为下降。纯化ＨｕＩＮＦ－α与人血清白蛋白（ＨＳＡ）,牛     

Kato—Katz法与改良洪氏虫卵计数法检出钩虫卵效果比较

1987年于云南省巍山县安章伍村对KatoKatz法(简称卡氏法)、改良洪氏虫卵计数法(简称洪氏法)检出钩虫卵效果作了比较,现将结果报告如下。方法一、对5周岁以上居民以小酒杯饱和盐水漂浮法查出钩虫卵阳性者分别同时以洪氏法、卡氏法计数。并与玻管滤纸培养法(简称培养法)进行比较。二、以钩虫卵在50个/克粪以下粪便,经108目尼龙绢滤渣,同时作洪氏法和卡氏法,比较检出效果。三、在气温20.5～16℃、湿度55～63%条件下,同时以同一粪样制作3张玻片,以卡氏法定时观察计数钩虫卵。结果共检查229人,钩虫卵阳性者24人(10.5%)。以洪氏法计数18人,EPG算…     

动物室氨浓度两种检测方法的对比

目的寻找方便、快捷、准确的实验动物环境中氨浓度检测方法。方法通过对《实验动物环境及设施》（GB14925-2001）中规定的纳氏试剂比色法和近年国内引进的Ammonia meter法两种检测室内的氨气浓度的方法比较研究。结果纳氏试剂比色法和Ammonia meter法检测结果存在差异显著性。结论在现阶段Ammonia meter法代替传统的纳氏试剂比色法的条件尚不成熟。同时,对实验采用方法进行说明。建议现行标准的吸收液浓度由0.5 mol/L修改为0.05 mol/L,吸收波长由500 nm修改为420 nm。     

谷子(Setaria italica)Ch 4n×法氏狗尾草(S.faberii)杂种幼胚培养及杂种F_1的鉴定

谷子是我国北方主要作物之一,耐干旱和瘠薄,在西北和华北干旱地区广为栽培,但产量较低。我们在谷子三系选育研究中,利用远缘杂交,以狗尾草属的5个野生种(包括法氏狗尾草在内)为母本与谷子杂交,分别选育不育系,1989年安排其反交组合 Ch 4n×法氏狗尾草,其目的在于:(一)根据雄性不育基因的多样性,彼此独立性和质核对应性原理,通过正反交对比,测验此雄性不育基因有无互补关系;(二)使从法氏狗尾草中获得的恢复源具有谷子     

关于法氏囊自然退化的研究

实验结果进一步表明法氏囊的发育是受性激素控制的。法氏囊的自然退化是机体内性激素浓度达到一定的水平所致。 在法氏襄的退化过程中起关键作用的细胞成分是FAE细胞,当它们完全地受到性激素的影响时,淋巴细胞分化的微环境遭到破坏,法氏襄发生不可逆性的退化。     

显示SARS病毒包涵体的技术探讨

SARS病毒包涵体是一种非常微小的微生物 ,在一般的情况下用光学显微镜是不易被发现的 ,但当它侵及细胞并形成小体时 ,则可用光学显微镜来检测 ,但较难寻找。为了寻找较有效的病毒包涵体染色方法来显示SARS病毒包涵体 ,我们对现有的病毒染色法如Macchiavello氏法的改良法、Mann氏法、Lendram氏法进行对照应用 ,经实验认为 ,Macchiavello氏的改良法效果最好 ,该法应用省时、易操作 ,可将病毒包涵体显示为鲜红色。至今为止 ,认为引起SARS的病毒是变性的冠状病毒 ,但由于该病毒非常微小 ,必须依靠电镜才能对其进行鉴定和鉴别。由于进入细…     

皂化法分离测定三孢布拉氏霉菌体中辅酶Q10的研究

目的:为研究醇碱皂化法分离三孢布拉氏霉菌体中辅酶Q10的最佳工艺。方法:采用正交实验,对醇碱皂化法分离测定三孢布拉氏霉菌体中辅酶Q10的各工艺条件进行了研究。结果:皂化时间、醇碱浓度及焦性没食子酸添加量对皂化效果影响显著,而温度(50~90℃)对其影响较小。醇碱皂化法提取三孢布拉氏霉中辅酶Q10的最佳工艺条件为:KOH加入量为湿菌体的1/2(w/w),醇碱浓度为10%,焦性没食子酸量添加量为湿菌体的10%(w/w),在70℃下皂化60min。此提取工艺平均回收率达81.8%,RSD为2.6%。     

新的血液染色剂与方法

目前常用的血液染色法,如姬姆萨氏(Giemsa’s)法和赖特氏(Wrigh’s)法染色,在配制和染色过程中,都要使用缓冲液,使用很不方便, 最近在探讨次甲基紫Methylene Violet(Bernthsen)的化学性质时发现与其他染料配合使用,对血液涂片的染色效果较好,不亚于赖特氏     

利用16SrDNA建立种特异性PCR快速检测鸭疫里默氏菌

鸭疫里默氏菌感染是危害养鸭业的主要疾病,用表型指标鉴定鸭疫里默氏菌存在不足,因此有必要建立检测该菌的种特异性PCR法。利用已登录的鸭疫里默氏菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌的16S rDNA基因序列,设计了一对鸭疫里默氏菌16S rDNA基因的特异性引物190f和843r,分别以基因组DNA和菌落提取液为模板,从1-19型鸭疫里默氏菌参考菌株和代表亚型、变异株和可能新型的国内分离株共26株细菌中均扩增出大小为654bp的特异性片段,而扩增鸭大肠杆菌、鸭沙门氏菌和禽多杀性巴氏杆菌等感染鸭的常见细菌的结果均呈阴性。分别将鸭疫里默氏菌基因组DNA和菌落提取液进行10倍梯度稀释,基因组DNA的最小检出量为50pg,菌落最小检出量为15CFU／mL。结果说明,该PCR法具有较好的特异性和敏感性,可用于快速鉴定鸭疫里默氏菌。     

利用16S rDNA建立种特异性PCR快速检测鸭疫里默氏菌

鸭疫里默氏菌感染是危害养鸭业的主要疾病,用表型指标鉴定鸭疫里默氏菌存在不足,因此有必要建立检测该菌的种特异性PCR法。利用已登录的鸭疫里默氏菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌的16S rDNA基因序列,设计了一对鸭疫里默氏菌16S rDNA基因的特异性引物190f和843r,分别以基因组DNA和菌落提取液为模板,从1~19型鸭疫里默氏菌参考菌株和代表亚型、变异株和可能新型的国内分离株共26株细菌中均扩增出大小为654bp的特异性片段,而扩增鸭大肠杆菌、鸭沙门氏菌和禽多杀性巴氏杆菌等感染鸭的常见细菌的结果均呈阴性。分别将鸭疫里默氏菌基因组DNA和菌落提取液进行10倍梯度稀释,基因组DNA的最小检出量为50pg,菌落最小检出量为15CFU/mL。结果说明,该PCR法具有较好的特异性和敏感性,可用于快速鉴定鸭疫里默氏菌。     

微孔板杂交法测定郴毒假单胞酵米面亚种的ＤＮＡ—ＤＮＡ同源性

采用一种新的ＤＮＡ－ＤＮＡ发校方法－微孔板法对郴毒假单胞菌酵米面亚种及伯克霍尔德氏菌属中１１个的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性进行测定。结果发现郴毒假单胞菌酵米面亚种与唐菖蒲伯克霍尔德氏菌及椰毒伯克霍尔德氏菌的ＤＮＡ－ＤＮＡ同源性均大于７５％,建议这３个种应合并为同一个种,命名为唐菖蒲的伯克霍尔德氏菌（Brukholderia gladioli)。     

肥达氏反应教学实验新方法

采用20孔U型孔血凝反应板微量法代替传统的肥达氏反应实验方法,结果可见凝集现象清晰,易于判断,解决了试管法易摇动而影响结果观察、需大量试剂和试管等不足。20孔血凝板微量反应法可作为肥达氏反应教学实验的一种新方法。     

一种改良的可直接用于PCR扩增的土壤DNA提取方法

本研究对Zhou氏土壤DNA抽提方法进行了改良,减少了土壤用量、孵育和裂解时间,增加了土壤淋洗和硫酸铝处理步骤。接着比较了改良法和Zhou氏法抽提四种类型土壤DNA的效果。结果表明,将土壤用量减少至0.4 g、孵育和裂解时间分别降至20 min和30 min,极大地简易了操作过程,大幅节省了实验所需时间(约为Zhou氏法所需时间的一半)。裂解前增加淋洗步骤和裂解过程中加入硫酸铝都提高了DNA的纯度。前者同时提高了DNA得率,但后者稍微降低了DNA得率。与Zhou氏法相比较,改良法提取4种类型土壤(黑土,黄土,潮土,红土)的DNA在得率和纯度方面均得到提高,并且可以直接用于16S rRNA基因的PCR扩增等分子操作。总之,本改良法简便了DNA提取过程、大大节省了实验时间,可用于从不同类型土壤中抽提适合于PCR扩增等分子操作的DNA。     

沃尔巴克氏体在中国三种稻飞虱中的感染

用PCR方法检测了采集于不同地域稻田的3种稻飞虱共生菌沃尔巴克氏体(Wolbachia)的感染,发现灰飞虱Laodelphax striatellus、褐飞虱Nilaparvata lugens、白背飞虱Sogatella furcifera为沃尔巴克氏体所感染。克隆了编码沃尔巴克氏体外膜蛋白质的wsp基因并进行了序列测定。对wsp的RFLP分析证实了这些飞虱为单一沃尔巴克氏体感染。研究了灰飞虱中沃尔巴克氏体所诱导的胞质不相容性及其在不同地域灰飞虱中的分布。还发现能寄生于上述3种飞虱的稻虱红螯蜂也受同种沃尔巴克氏体感染。沃尔巴克氏体可能通过这种寄生蜂在不同昆虫间横向传播。     

通过葡萄糖醛酸酶-半乳糖苷酶-色氨酸酶(GGT)试验快速检定大肠杆菌的

本文报告用纸片法检查376株细菌产生葡萄糖醛酸酶、半乳糖苷酶和色氨酸酶的能力(GTT试验),97%的大肠杆菌,47.4%的志贺氏菌,41.1%的沙门氏菌能产生葡萄糖醛酸酶。肠杆菌科的其它细菌,包括枸橼酸杆菌,产气肠杆菌,阴沟肠杆菌,蜂窝哈夫尼亚菌,肺炎克雷伯氏菌,爱德华氏菌,沙雷氏菌属,变形杆菌,摩根氏菌属,司徒氏普鲁菲登斯菌(一株例外),雷极氏普鲁菲登斯菌和小肠结肠炎耶氏菌均不产生葡萄糖醛酸酶,假单胞菌属中的绿脓杆菌、粪产碱杆菌以及弧菌科的类志贺邻单胞菌也为阴性。132株大肠杆菌中,90.9%的菌株,其