慢性复合应激对成年海马FGF-2的表达及神经发生的影响

目的通过观察慢性复合应激后大鼠海马FGF-2表达的变化,来探讨慢性复合应激对FGF-2表达的影响及其与海马神经发生的联系。方法成年雄性大鼠随机分为复合应激组和正常对照组。复合应激组动物每天交替无规律暴露于复合应激原中达6周。然后运用免疫组织化学方法、Western-blot和RT-PCR技术观察海马FGF-2表达的变化。结果慢性复合应激组动物海马FGF-2阳性细胞的表达量增多(P<0.05);海马FGF-2蛋白的表达明显增加(P<0.05);海马FGF-2 mRNA水平明显上调(P<0.05)。结论慢性复合应激可引起海马FGF-2阳性细胞表达量增加和FGF-2表达水平升高,提示应激后内源性FGF-2的表达增高可能是慢性复合应激促海马神经发生的因素之一。     

慢性复合应激对大鼠学习和记忆及海马神经元神经颗粒素表达的影响

目的探讨慢性复合应激对大鼠学习和记忆功能及海马内神经元神经颗粒素(neurogranin,Ng)表达的影响。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组和复合应激组,复合应激组动物每天无规律交替暴露于复合应激原环境中,为期6周。应激结束后,用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆成绩,同时用免疫组织化学方法观察海马各亚区Ng表达的变化,并用RT-PCR技术分析各组大鼠海马Ng mRNA水平的变化。结果Morris水迷宫测试显示,应激组动物寻找隐蔽平台潜伏期明显短于对照组(P<0.05);应激组大鼠海马DG和CA3区Ng的蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05),而两组海马CA1区的Ng的免疫反应性无明显差别;与对照组相比,应激组动物的Ng mRNA水平亦明显上调(P<0.05)。结论慢性复合性应激大鼠的学习与记忆能力增强;Ng在海马中的表达和Ng mRNA转录水平增高,提示Ng参与了该增强机制。     

蛋白激酶Cγ和蛋白磷酸酯酶Aα在慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马中表达的变化

目的 探讨蛋白激酶Cγ(PKCγ)和蛋白磷酸酯酶Aα(PP2B-Aα)在慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马中的表达及其意义。方法 将成年雄性Wistar大鼠随机分为应激组和对照组,对应激组实行慢性复合应激42d后,用Morris水迷宫,Y-迷宫对2组大鼠进行学习和记忆能力测试,然后用免疫组织化学方法,观察2组大鼠PKCγ和PP2B-Aα的表达,并用计算机图像分析系统对免疫阳性反应结果进行处理。结果 应激组比对照组学习记忆能力明显增强;在海马CA3区PKCγ的免疫反应阳性日月显增强;PP2B-Aα在海马CA1和CA3区的免疫反应阳性明显减弱。结论 海马内PKCγ和PP2B-Aα表达的变化可能参与了慢性复合应激致大鼠学习记忆增强的机制。     

慢性复合应激对大鼠大脑皮质生长休止蛋白7表达影响的研究

目的探讨慢性复合应激对大鼠大脑皮质神经元中生长休止蛋白7（Gas7）的表达变化及意义。方法36只大鼠随机分为两组：慢性复合应激组和正常对照组。复合应激组动物进行6w的垂直旋转、睡眠剥夺、捆绑（6h／d）和夜间光照等慢性复合性应激试验;实验结束后,所有动物采用免疫组织化学、Western-blot等方法检测大鼠海马Gas7蛋白表达的变化。结果与对照组相比,Gas7在大鼠大脑皮质表达明显增强（P〈0．05）。结论Gas7参与了慢性复合应激对大鼠大脑皮质神经元生长发育的影响。     

慢性复合应激性增强空间学习与记忆时突触素Ⅰ在大鼠海马中的表达

目的观察突触素Ⅰ在慢性复合应激性空间学习与记忆增强大鼠海马各亚区表达的变化及其意义.方法成年雄性Wistar大鼠随机分成应激组和对照组.采用垂直旋转、剥夺睡眠、噪音刺激和夜间光照4种应激原无规律交替应激动物6周,每天6 h,制作慢性复合应激动物模型.采用Morris水迷宫和Y-迷宫测试大鼠空间学习与记忆成绩,并用免疫组织化学技术显示突触素Ⅰ在慢性复合应激性空间学习与记忆增强大鼠海马中的表达变化.结果结果显示,应激组动物慢性复合应激后在Morris水迷宫内寻找隐蔽平台所需时间(潜伏期)比对照组的明显地短(P<0.05),在Y-迷宫内寻找安全区的正确率比对照组的明显地高(P<0.05);应激组动物慢性复合应激后,其海马齿状回(dentate gyrus,DG)和CA3区突触素I的免疫反应性明显地强于对照组(P<0.05), 两组CA1区突触素I的免疫反应性无明显差别(P>0.05).结论这些结果提示,慢性复合应激可增强大鼠空间学习与记忆能力,突触素Ⅰ在大鼠海马内表达的变化可能参与了大鼠空间学习与记忆增强的机制.     

应激可以降低海马脑源性神经营养因子的表达

应激可以降低海马脑源性神经营养因子的表达过去的一些研究曾发现,长时间应激产生的激素可以引起海马神经元的树突减少,海马被认为与学习记忆有关。最近,美国学者ｓｉｎｉｔｈ等发现,应激也可以使神经营养因子的生成发生改变,他们给大鼠束缚应激,每天２ｈ,连续７天...     

慢性复合应激对大鼠胰腺HAP1表达的影响

目的探讨慢性复合应激大鼠胰腺内胰岛内分泌细胞HAP1表达的变化及其意义。方法36只大鼠随机分为两组:慢性复合应激组和正常对照组。应激组动物无规律交替暴露于垂直旋转、睡眠剥夺、捆绑(6h/d)和夜间光照等慢性复合性应激,共6周;实验结束后,采用免疫组织化学和Western-blot等方法检测两组大鼠胰腺胰岛内分泌细胞内HAP1蛋白表达的变化。结果HAP1在大鼠胰腺内选择性表达于胰岛内分泌细胞中。与对照组相比,慢性复合应激组大鼠胰腺HAP1的表达明显增强(P<0.05)。结论6周慢性复合性应激可使大鼠胰腺中胰岛内分泌细胞的HAP1表达加强,提示HAP-1在慢性复合应激促进胰腺内分泌功能中可能发挥一定作用。     

慢性复合应激对大鼠学习记忆功能及脑ERK表达活化的影响

目的：研究慢性复合应激对大鼠学习记忆的影响,以及大脑细胞外信号调节激酶（ERK）表达活化的变化,探讨慢性应激致学习记忆损害的分子机制。方法：采用低温暴露、足电击、白噪声、束缚、尾部悬吊、睡眠剥夺、水平震荡等刺激方式,建立慢性复合应激大鼠模型。Morris水迷宫实验观察应激对学习记忆的影响;放射免疫法检测血清皮质酮（CORT）含量;Western blot检测ERK的表达。结果：应激组大鼠水迷宫训练潜伏期较对照组延长,应激3周时有所恢复,但4周时大鼠的训练潜伏期再次显著延长（P〈0.05）。同时应激组大鼠血清CORT水平增高,海马、前额皮质P-ERK水平降低（P〈0.05）,两者在应激3周时均出现短时恢复,但4周时再次下调。结论：海马、前额皮质ERK蛋白磷酸化水平的改变可能参与了慢性复合应激损害学习记忆的分子机制。     

甘丙肽及其受体2在抑郁症动物模型脑内的表达研究

运用慢性非预见性应激刺激建立抑郁症动物模型,用开野实验（open—field）检测大鼠建模前后行为学变化,HPLC—EC法测定血清皮质醇变化,由此对模型进行初步评价。运用原位杂交、RT—PCR方法检测大鼠海马脑区和中缝背核甘丙肽及其受体2的表达。结果显示．慢性应激后模型组大鼠活动性明显降低,血清皮质醇含量显著升高,海马脑区和中缝背核甘丙肽及其受体2的表达显著上调。在慢性应激大鼠抑郁症模型中,甘丙肽及其受体2在部分脑区的高表达提示甘丙肽很有可能参与了应激过程中神经元功能的调节。     

HAP-1在慢性复合应激大鼠肾上腺的表达

目的探讨慢性复合应激大鼠肾上腺髓质细胞亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,HAP-1)表达的变化及其意义。方法36只大鼠随机分为两组:慢性复合应激组和对照组。应激组动物进行6周的垂直旋转、睡眠剥夺、捆绑(6h/d)和夜间光照等慢性复合性应激试验;实验结束后,所有动物采用免疫组织化学、Western-blot以及RT-PCR等方法检测肾上腺髓质细胞内HAP-1蛋白和mRNA水平的变化。结果与对照组相比,慢性复合应激组的大鼠肾上腺髓质中HAP-1的表达明显增强(P<0.05),HAP-1 mRNA水平明显升高(P<0.05)。结论6周慢性复合性应激大鼠HAP-1在肾上腺髓质区的表达加强,mRNA水平提高。提示HAP-1在慢性复合应激促进肾上腺功能中可能发挥一定作用。     

产前束缚应激子代大鼠海马神经颗粒素表达降低

神经颗粒素（neurogranin,NG）是脑特异性突触后蛋白,参与在学习记忆功能中起核心作用的信号转导通路及突触可塑性。本研究旨在探讨产前束缚应激对子代大鼠海马NG表达的影响。连续7d对孕晚期大鼠进行束缚应激,建立产前束缚应激模型,分为对照雌、雄组,应激雌、雄组。采用免疫组化方法观察NG在产前束缚应激子代大鼠海马不同亚区的分布特点;采用蛋白免疫印迹方法检测产前束缚应激子代大鼠海马NG蛋白的表达。结果显示：各组子代大鼠海马各区均有NG蛋白表达,CA1和CA3区表达高于齿状回（dentate gyrus,DG）;应激组雌、雄子代大鼠海马NG的表达明显低于对照组（P〈0．01）,应激组雌性子代比雄性子代减少更显著,对照组雌、雄子代之间无差异。免疫组化与蛋白免疫印迹方法所得结果一致。上述结果表明,NG在产前束缚应激子代大鼠海马表达降低,并且雌性比雄性降低明显,NG对产前束缚应激子代大鼠有差异性调制,NG表达减少可能与产前束缚应激子代大鼠学习记忆能力下降有关。     

海马NMDA受体和NOS在慢性应激性抑郁发生中的作用及其相互关系

运用慢性不可预见性温和应激（chronic unpredicted mild stress, CUMS）建立抑郁动物模型,通过海马内微量注射、动物行为学观察及免疫组织化学方法检测海马内一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）表达的变化,探讨CUMS诱发抑郁与海马谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）受体、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS)的关系。结果发现：CUMS组大鼠表现出抑郁样行为变化,海马NOS表达显著升高;海马微量注射NMDA受体激动剂,动物行为学表现与CUMS组相同,NOS表达升高;海马微量注射非竞争性NMDA受体拮抗剂MK-801能明显改善应激引起的抑郁样行为表现,并降低海马NOS表达。这些结果表明慢性不可预见性应激可能使谷氨酸（glutamic acid,Glu）过量释放,NMDA受体过度激活,NOS高表达,NO过量产生,损伤海马神经元,导致抑郁发生。     

海马微量注射神经肽Y通过抑制一氧化氮合酶改善大鼠抑郁样行为

本文旨在探讨在慢性应激性抑郁发生过程中海马神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的关系。建立慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,大鼠海马定位并分别微量注射NPY、NPY-Y1受体阻断剂GR231118和NOS抑制剂L-NAME,测量、计算动物体重变化并通过糖水偏爱测试、旷场和强迫游泳实验等方法检测大鼠行为,免疫组织化学方法检测海马内NPY、神经元型NOS(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)和诱导型NOS(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达。结果显示,与对照组相比,CUMS组大鼠表现出明显的抑郁样行为变化,且海马NPY表达下降、NOS表达显著升高;海马微量注射NPY明显改善应激引起的抑郁样行为表现,并降低海马NOS表达;用GR231118选择性阻断NPY-Y1受体后,大鼠的行为学表现能力下降,海马NOS表达升高;而CUMS以及GR231118所导致的行为学表现能力下降的现象均可被海马微量注射L-NAME所反转。以上结果表明,CUMS引起海马NPY表达下降,NOS表达升高,NO过量产生,导致抑郁发生;而NPY通过NPY-Y1受体抑制NOS的过量表达是NPY抗抑郁的一个重要途径。     

在应激低反应期新生大鼠的海马和视交叉上核核受体-MR、GR表达的变化

目的搞清新生大鼠HPA轴改变在应激低反应时期（stress hyporesponsive period、SHRP））的核受体-MR（盐皮质激素受体）和GR（糖皮质激素受体）在海马和视交叉上核（SCN）的表达变化。从而进一步了解新生大鼠发育时间对MR和GR的影响。方法本研究应用免疫荧光技术研究了生后4d（PD4）和生后12d（PD12）的新生大鼠海马和SCN的MR、GR的表达。同时采用RIA方法测定了血清中皮质类固醇的浓度水平。结果RIA结果显示在应激低反应期给予刺激,血清皮质类固醇水平没有明显改变。在海马,PD12较PD4,MR-和GR-i mmunoreactivity在CA1区表达增强;在齿状回没有明显变化;在海马门（hilus）减弱。而在海马的CA3区和SCN中,PD4 GR-ir强烈表达,在PD12却下降。同时也发现在hilus细胞出现GR和nestin（巢蛋白）阳性表达的共存,但是却没有发现MR和nestin的共存。结论新生大鼠阶段,发育时间对MR和GR的影响因区域不同影响不同。GR和nestin（巢蛋白）的共存为探讨在新生大鼠阶段GR对神经干细胞的分化有否影响提供了实验资料。本研究也为进一步研究新生大鼠应激低反应状态下海马及SCN与低活性的HPA轴的关系提供了形态学依据。     

海马Glu与抑郁症的关系及其对胃运动的影响

目的：探讨抑郁症的发生与海马谷氨酸（Glu）的关系及其对胃运动的影响。方法：运用慢性不可预见性温和应激（GUMS）建立抑郁动物模型,采用海马定位微量注射,通过体重变化率、糖水偏爱、敞箱、强迫游泳实验观察大鼠行为表现,用PowerLab／8sp生理信号采集分析系统记录胃内压,观察胃运动的变化。结果：慢性不可预见性温和应激21d,可显著降低大鼠的体重增长率,糖水偏爱率和敞箱实验的水平运动和垂直运动得分,增加了大鼠的游泳不动时间,与正常对照组相比,差异显著。同时大鼠平均胃内压和胃的收缩幅值也显著降低。海马微量注射Glu与慢性不可预见性温和应激引起的动物行为表现一致,而胃运动减弱的程度小于应激组,但与正常时照组比较,差异明显。海马微量注射NMDA受体阻断剂MK-801,可消除应激所引起的抑郁样行为,减弱应激对胃内压的抑制作用,并明显增大胃的收缩幅值。结论：海马Glu和NMDA受体与应激性抑郁发生密切相关,既参与了应激引起的行为变化。又参与了应激引起的胃活动变化,只是对行为影响和胃活动影响有所不同。     

慢性应激大鼠海马的比较蛋白质组学研究

慢性应激可造成海马神经细胞丢失、树突萎缩等损伤,但有关其损伤机制仍有很多问题不甚明了.为了寻找应激致海马损伤相关的重要蛋白质、从蛋白质水平揭示应激致海马损伤的分子机制,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离对照组和束缚应激组大鼠海马组织总蛋白质,图像分析检测差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MSS)和数据库检索对差异表达的蛋白质点进行鉴定,并采用半定量的RT-PCR在mRNA水平验证2-DE结果.得到了分辨率较高、重复性较好的对照和束缚应激大鼠海马2-DE图谱,质谱分析和数据库检索鉴定了14个差异表达蛋白质点中的11个蛋白质,大多数差异蛋白的功能涉及能量代谢、信号传递等过程.研究结果为揭示应激致海马损伤的机制、提高机体的应激适应能力提供了理论依据.     

产前束缚应激对子代大鼠海马神经干细胞增殖及巢蛋白表达的影响

为了观察产前束缚应激对子代大鼠空间学习记忆能力、海马神经干细胞增殖及巢蛋白表达的影响,将体重240~260 g的Sprague-Dawley雌性母鼠12只随机分成2组,对照组于孕期不做任何处理,束缚应激组于孕14~20 d时给予束缚应激,3次/天,45 min/次。取1月龄子代大鼠进行实验研究。Morris水迷宫定位航行实验结果显示,应激组子代与对照组相比,到达平台的潜伏期延长(P0.05),而在空间探索实验中,应激组子代在原平台象限停留时间与对照组相比无显著差异。免疫组织化学结果显示,应激组雌性子代海马巢蛋白(nestin)和BrdU阳性细胞表达均较对照组显著增加(P0.05),而雄性子代海马nestin和BrdU阳性细胞表达与对照组相比无显著性差异(P0.05)。以上结果提示,产前束缚应激可引起雌性子代大鼠海马神经干细胞数量增加以及增殖能力增强,可能与机体对产前应激所致脑损伤的代偿性反应相关。     

慢性应激对大鼠学习记忆能力和海马LTP的影响

目的和方法：本研究采用一种多因素的２１ｄ慢性应激动物模型,以Ｙ迷宫和ＬＴＰ为指标,探讨慢性应激对运动学习记忆能力和海马神经突触可塑性的影响。结果：长期慢性应激使大鼠空间学习记忆能力下降,而且,使中枢海马齿状回ＬＴＰ的诱生受到抑制。结论：慢性应激可能使大鼠海马齿状回神经突触可塑性降低,并进一步影响到学习记忆的功能。     

阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液的抗抑郁样效果

阿魏酸(ferulic acid,FA)是一种广泛存在的低毒酚酸,阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)则是其钠盐。先前的研究已经证实,阿魏酸钠具有显著的神经保护和神经发生增强作用及抗抑郁效果。该研究的目的在于探讨阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液可能的抗抑郁效果。PC12细胞在含80μmol/L阿魏酸钠的DMEM培养基中孵育6d,无菌条件下制备阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞液的无细胞滤液,测定PC12细胞裂解液无细胞滤液中残留的阿魏酸钠量。以慢性不可预期的多种刺激制造大鼠抑郁模型,用行为学、形态学、免疫组织化学和BrdU掺入等方法观察并检测阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液对慢性应激大鼠抑郁模型行为学、海马的组织病理学、海马和大脑皮质的神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达及神经发生的影响。实验证实,阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液能改善抑郁症样模型大鼠的行为学障碍,上调其海马和大脑皮质NGF和BNDF的表达,增加海马神经干细...     

慢性应激抑郁大鼠学习记忆及海马非对称性超微结构的改变

目的：探讨慢性不可预见性应激抑郁模型大鼠大脑海马非对称性超微结构与学习记忆能力的改变。方法：SD雄性大鼠20只,随机分为正常对照组与抑郁模型组,每组10只。采用慢性轻度不可预见性应激21d及单笼饲养方法建立抑郁模型,应激前以及应激21d末对两组大鼠进行旷场实验、液体消耗实验及体重测量,对大鼠进行避暗穿梭实验,测试其学习记忆能力,之后活杀动物,取出大鼠左右海马,制作常规电镜标本,观察海马超微结构的改变。结果：在穿梭变实验中抑郁大鼠学习记忆潜伏期减少,进入暗箱错误积分增多。抑郁大鼠左右侧海马超微结构中左侧海马较正常对照组神经细胞及胶质细胞变化明显,表现为内质网扩张,溶酶体增多。而右侧海马远不及左侧损伤严重。结论：慢性不可预见性应激抑郁大鼠学习记忆能力显著下降,其可能与海马组织在应激过程受到的累积损伤有关,且抑郁大鼠海马损伤呈非对称表现。