人类7号染色体专特性探针池的构建及应用

本文明显微切割、ＰＣＲ技术和染色体绘画技术,构建了人类第七号染色体特异性探针池,并完成了一个７号染色体结构异常患者的家系分析。     

14个染色体区特异性探针池的构建

本文运用人类染色体显微切割和ＰＣＲ技术,成功地构建了１４个染色体区带专特性探针池,并通过染色体原位杂交证明它们均分别来源于相应的被切割的染色体区带。     

14个染色体区带特异性探针池的构建

本文运用人类染色体显微切割和ＰＣＲ技术,成功地构建了１４个染色体区带特异性探针池,并通过染色体原位杂交证明它们均分别来源于相应的被切割的染色体区带。     

人类高分辨染色体显微切割、PCR、微克隆、探针池技术及其应用

人类高分辨染色体显微切割、ＰＣＲ、微克隆、探针池技术及其应用徐磊,夏家辉（湖南医科大学医学遗传国家重点实验室,长沙４１００７８）医学本身的发展,使临床病种的构成发生了质的改变,随着传染病的控制,遗传病以及遗传与环境共同作用所致的恶性肿瘤已成为临床常见而多发的病种。遗传学基础理论和技术的发展及其向医学领域的渗透．已为人群中某些遗传病（染色体病和单基因病）找到了诊断和预防的途径。     

用人染色体14q24.3区带探针池直接分离表达顺序

本文报道了从显微切割的人染色体区带直接分离区带专一性表达序列的方法和结果。以区带探针池为基础构建了单拷贝DNA分子库,并以该库和人骨髓细胞cDNA分子库为主要研究材料,从5×10~5个DNA克隆中筛选到68个初级阳性克隆,复筛得到了32个次级阳性克隆,分别命名为cFD14-1～32。再经14q24.3 DNA、17q11-12 DNA和人基因组总DNA作dot blot DNA杂交验证,最终得到24个14q24.3区带专一性表达顺序。测定了其中13个片段的部分序列,在NCBI数据库查新,均为新的cDNA片段,并与某些已知基因有一定的同源性。其中cFD14-1的初步表达谱分析提示了本实验所得cDNA片段均有可能用来进一步筛选位于14q24.3区带内的尚未克隆的基因。     

一例罕见的复杂易位携带者的染色体绘画研究

本文报道了一例罕见的复杂易位男性携带者,结婚８年,其妻连续７次流产、死胎和出生早夭的畸型儿。用染色体显微切割、ＰＣＲ技术构建的人类７号和８号染色体特异性探针地对其进行了染色体绘画研究,分析确定其核型为：４６,ＸＹ,－７,－８,－９,＋ｄｅｒ（７）、ｔ（７;９）（ｑ２２００;ｐ２４）,＋ｄｅｒ（８）ｉｎｖｉｎｓ（８;７）（ｑ２１００;ｑ３１．２ｑ２２００）,＋ｄｅｒ（９）ｔ（９;７）（ｐ２４;ｑ３１．２）．ｉｓｈｄｅｒ（７）ｔ（７;９）（ｗｃｐ７＋）,ｄｅｒ（８）ｉｎｖｉｎｓ（８;７）（ｗｃｐ７＋,ｗｃｐ８＋）,ｄｅｒ（９）ｔ（９;７）（ｗｃｐ７＋）。染色体绘画技术为研究染色体异常提供了一种有效的分子细胞遗传学技术,本文并对携带者复杂易位的发生机理进行了讨论。     

一例智力低下患者7q~ 标记染色体的来源鉴定

以人类染色体显微切割、PCR技术构建的现有人类染色体特异性和染色体区带特异性探针池作为绘画探针,采用正向染色体绘画技术,结合染色体筛查方法,查明了一例7q~ 标记染色体患者的染色体附加片段来源于3q26→3qter。确定该患者的核型为46,XX,-7, der(7)t(7;3)(7pter→7q32::3q26→3qter)。应用这个策略,能够快速有效地鉴定标记染色体的来源。     

普通小麦-中间偃麦草TAI-27中附加染色体的显微切割及特异性探针的筛选

试验以长穗偃麦草基因组DNA为探针 ,与普通小麦 中间偃麦草TAI 2 7进行染色体原位杂交 ,表明有 4条与长穗偃麦草同源的染色体 ;以P .stipifolia (St)基因组DNA为探针 ,有 4条与St同源的染色体 .这说明TAI 2 7中有 4条St染色体 .TAI 2 7是异代换 附加系 .对TAI 2 7中附加的中间偃麦草染色体进行显微切割 ,并建立其微克隆库 ,从中筛选获得了中间偃麦草的特异性探针 ,同源性分析表明该序列为一新序列 .这为进一步筛选抗病、抗逆和优质基因打下基础 .     

植物染色体显微切割技术及其应用(综述)

本文综述植物染色体微切割、微克隆技术的原理和方法,以及该技术在植物学研究上的应用。     

斯卑尔脱小麦1B染色体的显微分离及其DNA的PCR扩增

以斯卑尔脱小麦的一个变种及其近等基因系为材料,玻璃针法进行显微操作在减数分裂中期I分裂相中获得G型细胞质雄性不育的育性恢复基因Rf₃所在的1B染色体DNA。LA-PCR方法扩增DNA,斑点杂交的方法检测证明扩增产物来源于斯卑尔脱小麦基因组的1B染色体DNA。     

小鼠生精细胞染色质与染色体构筑的扫描电镜研究(简报)

正常情况下,染色质和染色体在细胞内呈高度致密状态,在光镜和透射电镜下常呈浓染的斑块状。由于方法学上的困难,至今对染色质乃至染色体的微细结构,仍缺乏清楚的了解。特别是关于染色质如何凝缩形成染色体方面,现仍存在有争论。扫描电镜的冷冻割断技术,曾被用于对游离细胞间期核染色质的观察,并取得了较好的     

人淋巴细胞的体外抗体诱发及其在杂交瘤中的应用

本文应用手术切除的人扁桃体或外伤脾为材料,在体外诱发了针对不同类型抗原的抗体应答,其中包括羊红细胞、卵白蛋白、破伤风类毒素和乙肝病毒表面抗原的抗体应答,并应用破伤风类毒素体外激活的人B淋巴细胞制作杂交瘤。根据多次融合的结果表明其融合率平均为52.1%,抗体阳性率为15.6%,分泌IgM和IgG抗体的阳性集落孔的比例接近1∶1。我们还研究了体外诱发人淋巴细胞产生抗体的条件,发现细胞类群(在本研究中是采用不同的细胞分离方法)是主要的影响因素,值得进一步研究。目前所建立的体外免疫实验系统,主要是应用尼龙毛柱法富集B细胞,在96孔培养板上加上一定剂量范围的抗原刺激。为了协助淋巴细胞反应,可再加10%的T细胞条件培液或少量丝裂原混合物(LPS0.1μg/ml+PWM1μg/ml)。     

菽麻种子多糖的分离及应用

从菽麻种子里分离出一种半乳甘露多糖,mp.285℃,[a]_D~(25)+43.5,半乳糖和甘露糖的克分子比为1:2.3。该多糖和它的羧甲基衍生物与 Na_2B_4O_7KAl(SO_4)_2交联成冻胶,用作石油工业水基冻胶压裂液的原料。     

强壮水螅的特征及其与寡水螅的种间差别问题

一种广泛分布于黑龙江省的大型具柄水螅被暂定为强壮水螅Hydra robusta(IT(?) 1947)。这一中国品系与IT(?)(1947)在日本报告的新种主要特征相同,包括具有精巢乳头。只是精巢乳头不稳定。在实验室条件下第一次有性生殖时每个雄体都发生精巢乳头,但第二次有性生殖时,同一群的后代可全部失去精巢乳头。这是介于强壮水螅与寡水螅Hydra oligactis Pallas(1766)之间的中间性状。从而导致作者做出结论,认为过去其他学者所主张的,以精巢乳头的有无做为鉴别特征来区分强壮水螅和寡水螅是不可靠的。因此,本文又检验了此种水螅的体细胞染色体,证明2n=30,其中第二对染色体上有明显近中位置的次缢痕,最小染色体的长度为最大染色体长度的二分之一以上。这些可做为此种水蝗的鉴别特征。对Niiyama(1944)和Datta(1970)在寡水螅上所做的染色体研究也做了比较及讨论。     

人造血干/祖细胞多态性的研究:Ⅷ.人正常骨髓 CD34~ 造血细胞体视学的特征

人CD34~ 造血细胞是具有高度自我更新、多向分化及重建长期造血与免疫学功能的独特体细胞。为系统探索CD34~ 造血细胞的形态、细胞化学及超微结构特征,新近我们设计组合并建立了CIMS-100-FACS 440无菌二次分选术,可使所获CD34~ 造血细胞的纯度达100%。在此基础上,本研究采用Cambri-dge Quantimet 970全自动图像分析仪对光学显微镜、扫描电镜及透射电镜下的CD34~ 造血细胞进行了体视学方面的某些探讨,进一步从三维结构信息中深刻揭示CD34~ 造血细胞的形态计量学特征。经扫描→模数转换←阴影校正→图像暂存←统计分析等检测,结果表明:CD34~ 造血细胞的直径3.490—6.741μm,周长11.776—26.240μm,面积9.565—35.686μm~2,形状因子1.048—1.840,核浆比0.58—0.72,平均光密度0.17675—0.65100,积分光密度2717.217—9870.643。由此可见CD34~ 造血细胞的确为非均一细胞群,这可能与CD34~ 造血细胞的功能亚群与分化阶段密切相关。据我们所知,这是国际上首次有关人CD34~ 造血细胞体视学特征的报道。     

普通小麦与祖山羊草杂种后代的细胞遗传学初步研究

粗山羊草(Aegilops tauschii(Coss.)Schmal.,DD,2n=14)是普通小麦(Triticumaestivum L.,AABBDD,2n=42)D染色体组的供体。粗山羊草中含有丰富的抗病,抗虫,抗逆,优质等优异基因,因此粗山羊草是改良普通小麦的宝贵遗传资源。但有关普通小麦与粗山羊草杂交的研究报道较少。本文试图通过对普通小麦与粗山羊草杂种后代的细胞遗传学和染色体分离规律的研究,探讨转移粗山羊草优异基因的方法和途径。     

云南山茶花茎尖培养中多芽体的形成和生根的研究

本文报道云南山茶花(Camellia reticulataL.)的茎尖培养诱导形成多芽体和生根的条件及影响因素。MS培养基中含有较高浓度(3—5 mgL~(-1))BA和适量(1—1.5 mgL~(-1))IAA或NAA诱导形成多芽体。外植体的母株年龄明显影响多芽体的形成,幼龄种苗外植体的多芽诱导率高于成年树。添加CM(椰乳)、ZT、尿囊素对成年芽条返幼态有明显的促进作用。采用“浸没-纸桥生根法”诱根,以高浓度生长调节剂(0.5gL~(-1)IBA或ABT生根粉)溶液浸芽条基部短时间(20—30 min),生根效果最佳。母树的年龄对芽条的生根也有显著影响,种苗来源的芽条的生根率和根的数目都比来源于成年树的高。生根培养基中蔗糖浓度为15—20 gL~(-1),生根率高。MW和1/2 ER培养基比MS培养基的生根效果好。试管植物移栽入土后生长正常并已开花。