雌二醇对鳟免疫功能的影响

伴随着性腺的成熟,大麻哈鱼属鱼类的抗病能力降低,其中的许多种在排卵（精）后死亡。虹鳟在繁殖季节后虽然不至于死亡,但极容易受许多病原菌的感染而发生病患,我们以前的研究提示,疾病的易感性可能与性激素的水平相关,但那些研究主要集中于雄激素对虹鳟免疫功能的影响,雌二醇是重要的雌激素之一,本研究运用酶联吸附免疫法、酶联吸附斑点法以及微量活性氧测定法,主要探讨了雌二醇在体内或体外对抗体的水平、产生抗体的细胞的数目和噬细胞产生活性氧的水平的影响。实验结果表明：（1）口服雌二醇能够提高未成熟虹鳟血浆中的雌二醇水平,这种提高能显著地降低血浆中的免疫球蛋白M（IgM）的浓度;（2）在离体的条件下雌二醇也能按剂量依赖方式降低自成熟红鳟血液、头肾和脾脏的淋巴细胞中产生抗体的细胞数量以及抑制头肾的巨噬细胞产生各种活性氧。这些结果提示随着性腺成熟,免疫功能的降低可有与血液中雌二醇水平的升高有关,免疫功能的降低可能是导致生殖季节雌性虹鳟易受许多病原菌感染的原因之一。     

睾酮抑制虹鳟淋巴细胞的IgM分泌

睾酮的腹腔注射能迅速提高虹鳟血液中睾酮的水平和降低血液免疫球蛋白M（IgM）的含量；在不同浓度的睾酮存在下培养来自虹鳟血液、头肾和脾脏的淋巴细胞，发现不仅抗体产生细胞数而培养液中IgM量都随着睾酮浓度的升高而显著降低。这些结果表明睾酮能抑制虹鳟免疫活动，至少是体液免疫功能，这提示伴随着产卵季节的到来虹鳟血液中性激素水平提高，鱼体的免疫功能可能下降，这可能是虹鳟在繁殖季节易感染许多疾病和死亡的原因之一。     

性激素对肺泡巨噬细胞溶菌酶分泌的影响

目的：探讨肺泡巨噬细胞（AM）的功能及调控机制。方法：采用电泳法观察大鼠AM分泌的溶菌酶活性及雄酮、雌二醇对其分泌的影响。结果：雄酮、雌二醇对大鼠AM溶菌酶有显著促进作用（P＜0．01）,吲哚美辛能降低雄酮及雌二醇的这种作用。提示性腺功能的衰退、性激素水平的降低可能是机体免疫功能下降,易患某些感染性疾病的机理之一。结论：性激素有促进AM分泌溶菌酶的作用,其作用与前列腺素的合成有关。     

Dectin-1在curdlan诱导的慢性肉芽肿病高炎症反应中的作用机制

慢性肉芽肿病(CGD)是一种罕见的遗传免疫缺陷综合症.CGD病人最常见为NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)功能缺失造成吞噬细胞内活性氧生成障碍,不能清除外源的细菌与真菌的感染.凝胶多糖curdlan属于1,3-β-葡聚糖,是白色念珠菌细胞壁的主要成分.目前,作为吞噬细胞中主要的模式识别受体,凝集素dectin-1是否参与curdlan诱导巨噬细胞参与免疫炎症反应以及其分子机制不十分清楚.为了研究这一机制,我们采用luminol和Amplex Red法检测活性氧生成水平,ELISA检测炎症因子IL-1β水平以及免疫荧光法检测NF-κB信号通路的激活情况.结果表明,curdlan浓度依赖性上调巨噬细胞活性氧生成,NOX2缺失显著降低活性氧产生,dectin-1缺失部分降低活性氧的生成和部分阻断NF-κB信号通路的激活.NOX2 KO小鼠炎症因子IL-1β水平显著升高,Dectin-1缺失后NOX2 KO小鼠IL-1β水平降低;Dectin-1 KO小鼠的IL-1β水平与WT小鼠比无显著差异,与Dectin-1/NOX2 KO小鼠比差异显著.上述结果提示,curdlan刺激下机体通过巨噬细胞内的dectin-1受体诱导免疫应答,激活NF-KB信号通路释放炎症因子IL-1β,同时通过dectin-1受体激活NOX2释放活性氧清除病原,促进机体修复.在这一过程中dectin-1不是唯一参与的受体.     

17α，20β-二羟黄体酮降低虹鳟鱼血浆免疫球蛋白M的水平(英文)

本文首次报道１７α,２０β－二羟黄体酮对虹鳟免疫功能的影响。在对生殖季节虹鳟血浆１７α,２０β－二羟黄体酮、免疫球蛋白Ｍ和总蛋白水平的调查时发现,雌雄虹鳟血浆１７α,２０β－二羟黄体酮的水平与免疫球蛋白Ｍ的水平负相关,即在雌性相关系数ｒ＞－０．７９７,Ｐ＞０．０１;而在雄性ｒ＞－０．４７７,Ｐ＞０．０５。这提示１７α,２０β－二羟黄体酮可能抑制免疫球蛋白Ｍ的合成或分泌。产卵或排精后的血浆总蛋白量低     

黄颡鱼PGRP-L基因克隆及其对爱德华氏菌的反应

为了研究肽聚糖识别蛋白家族(Peptidoglycan recognition proteins, PGRPs)在黄颡鱼(Pelteobagrusfulvidraco)先天免疫应答中发挥的作用, 根据NCBI中斑马鱼(Danio rerio) 和虹鳟(Oncorhynchus mykiss) PGRP-L的基因信息, 采用简并引物和RACE方法从黄颡鱼肝脏中克隆得到了一个长型PGRP (PfPGRP-L)基因. PfPGRP-L基因的全长cDNA序列大小为1617 bp, 其中5'和3'非翻译区的长度分别为135和72 bp, 开放阅读框为1410 bp, 编码469个氨基酸. 同源性和系统进化分析表明, 黄颡鱼PGRP-L与虹鳟的同源性为60%, 与脊椎动物的PGLYRP2 或PGRP-L聚在一起. 半定量RT-PCR分析发现PfPGRP-L基因在黄颡鱼鳃、胸腺、肝脏、脾脏、肠道、肾脏、头肾、心脏、血液和肌肉组织中均有分布, 但在肠道和脾脏中的表达量较为丰富, 而在肌肉和血液中表达则很少. 用爱德华氏菌刺激后, PfPGRP-L在肝脏、脾脏、肠道及头肾中的表达明显上调. 结果表明, PfPGRP-L在黄颡鱼抵抗病原菌中具有重要作用.     

虹鳟LECT2的酵母表达、纯化及生物活性分析

白细胞衍生趋化因子2 (leukocyte cell-derived chemotaxin 2,LECT2)是一个参与多种生理和病理过程的分泌型细胞因子.该文采用毕赤酵母表达体系分泌表达虹鳟LECT2,用阳离子交换柱结合分子筛层析方法分离纯化目的蛋白,并获得纯度为96％,得率为120 mg/L的重组虹鳟(Oncorhynchus mykiss)LECT2酵母培养物.生物学活性验证表明该重组蛋白能趋化虹鳟头肾来源的巨噬细胞,增强其呼吸爆发和杀菌能力,并改变其细胞因子等基因的表达.综上,该实验建立了一种快速有效的虹鳟LECT2活性重组蛋白的制备方法,为后续相关蛋白的功能研究奠定了基础.     

结核分枝杆菌对巨噬细胞抗原呈递功能的抑制作用

本文旨在通过观察结核分枝杆菌刺激后巨噬细胞抗原呈递功能的变化, 探讨结核分枝杆菌的免疫逃逸机制。在体外, 结核分枝杆菌刺激巨噬细胞24 h 后, 用流式细胞仪检测γ干扰素( IFN-γ) 诱导的主要组织相容性复合物( MHC) Ⅱ类分子、CD86 和CD80 的表达变化; 酶联免疫吸附试验( ELISA) 检测巨噬细胞的抗原呈递功能; 反转录-聚合酶链反应检测巨噬细胞CⅡTA 及其启动子PⅠ、PⅢ和PⅣ的mRNA 水平。结果发现, 结核分枝杆菌抑制IFN-γ诱导的巨噬细胞表面MHCⅡ 类分子和CD86 的表达, 且呈剂量依赖性, 但CD80的表达变化不明显; 抗原呈递功能明显降低; 结核分枝杆菌刺激后巨细胞CⅡTA 及其启动子PⅠ、PⅢ和PⅣ的mRNA 水平显著降低。提示结核分枝杆菌可能通过降低CⅡTA 及其启动子PⅠ、PⅢ和PⅣ 的mRNA 水平, 抑制IFN-γ诱导的巨噬细胞MHCⅡ类分子的表达; 结核分枝杆菌可降低巨噬细胞CD86 的表达, 抑制IFN-γ诱导的巨噬细胞抗原呈递功能。     

维生素D3对黄颡鱼头肾极化分型的巨噬细胞影响

研究以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)头肾巨噬细胞为研究对象,通过细菌脂多糖(LPS)和环磷酸腺苷(cAMP)分别诱导M1型和M2型极化,200 pmol/L维生素D₃孵育后对其形态学特征、生物学功能及极化相关基因的表达进行分析鉴定来确定维生素D₃在巨噬细胞极化中的调节作用。结果表明,维生素D₃能降低诱导后M1型和M2型巨噬细胞的死亡率,并增强巨噬细胞的吞噬活性。在M1型巨噬细胞中维生素D₃能够抑制活性氧(ROS)和炎症介质一氧化氮(NO)的产生,降低超氧阴离子自由基的活力,白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平显著降低(P<0.05);在M2型细胞中能够增加精氨酸酶的活性,显著增加白介素10(IL-10)和转化生长因子(TGF-β)的表达水平(P<0.05),最终抑制巨噬细胞向M1表型极化,促进巨噬细胞向M2表型极化,发挥抗炎作用;黄颡鱼头肾巨噬细胞中Nos-2和Arg-2分别是M1和M2巨噬细胞的生物标记基因。研究结果为进一步研究鱼...     

小麦肽对受环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫调节及抗氧化功能

本研究旨在分析小麦蛋白活性肽对免疫抑制小鼠免疫功能和抗氧化功能的调节作用。小鼠灌胃小麦肽10d,第8天用环磷酰胺诱导免疫抑制,测定血清溶血素、抗体生成细胞含量、脾细胞增殖、体外腹腔巨噬细胞吞噬能力、肝脏抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量以及血清清除DPPH和·OH的能力。实验结果表明,环磷酰胺处理显著的降低了小鼠血清中抗SRBC抗体(溶血素HC50)水平和腹腔巨噬细胞的吞噬能力;同时伴随着肝脏超氧化物歧化酶活性(SOD)、过氧化氢酶活力(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)的降低和MDA含量的提高。给小鼠灌胃小麦肽可以恢复HC50和脾细胞增殖,显著提高抗体生成细胞含量和腹腔巨噬细胞吞噬能力;此外,小麦肽增强了小鼠血清清除DPPH和清除·OH的能力。以上结果表明,小麦肽可以调节应激状态引起的机体抗氧化体系紊乱及免疫功能的降低。这可能与小麦肽缓冲自由基生成、激活腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞活性有关。     

香鱼精氨酸酶Ⅱ基因的cDNA克隆及其表达与鳗弧菌感染的相关性

精氨酸酶II(arginase II,Arg-II)是精氨酸酶的一种,不仅可以参与机体尿素循环,还与机体病理过程密切相关。通过香鱼(Plecoglossus altivelis)单核/巨噬细胞转录组测序获得香鱼Arg-II基因全长c DNA序列,结果表明,Arg-II基因由4 707个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,编码348个氨基酸,预测分子量为38.09 k D,等电点为6.15。氨基酸序列多重比对结果显示,香鱼Arg-Ⅱ具有典型的Arg-Ⅱ结构特征,与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)Arg-Ⅱ同源性最高,为85.3%;系统进化树分析表明,鱼类Arg-Ⅱ形成一个大簇,香鱼Arg-Ⅱ与虹鳟Arg-Ⅱ进行相关性最高。实时荧光定量PCR(quantitive real-time PCR,q RTPCR)结果显示,香鱼Arg-Ⅱ基因m RNA主要在健康香鱼肝、脑、头肾和单核/巨噬细胞中表达;鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后,香鱼肝、脑、头肾和单核/巨噬细胞Arg-Ⅱ基因m RNA的表达量显著上调。综上,香鱼Arg-Ⅱ基因的表达与鳗弧菌感染紧密相关,揭示其可能在鱼类抗感染免疫应答中发挥重要作用。     

胸腺对雌性大鼠肝脏抗氧化功能的影响及其与细胞免疫、性激素水平的关系

雌性成年大鼠切除胸腺后,其肝脏脂质过氧化产物丙二醛增多,还原型谷胱甘肽(GSH)含量减少,微粒体和线粒体膜流动性降低。隔日1次皮下注射自猪胸腺提取的胸腺因子D(TFD)2mg/kg共3月,可逆转去胸腺大鼠上述指标的变化。为了探讨胸腺影响肝脏抗氧化功能的中间途径,还测定了脾T淋巴细胞增殖反应及血浆性激素水平。结果表明,去胸腺大鼠脾脏T淋巴细胞增殖反应减弱、血浆雌二醇/睾酮比值下降;给予TFD可逆转其变化。实验结果提示,胸腺对大鼠肝脏抗氧化功能的影响可能与胸腺-内分泌-免疫网络有关。     

皮质醇的周年变化与雌性虹鳟性腺成熟的关系

利用放射免疫分析法对饲养于恒定水温和自然光照下的雌性虹鳟血浆中皮质醇和性激素含量的周年变化进行了测定．结果表明：１）根据性腺结构指数和性激素分泌量判断,三龄时,雌性虹鳟达到性成熟;２）在血浆中不仅性激素而且皮质醇的变化水平与性腺结构指数的变化高度相关．排卵前性激素的水平都较高,伴随着排卵的进行性激素水平下降．而且在产卵季节虹鳟血浆中皮质醇水平也较高,三龄时皮质醇水平与性腺结构指数的相关系数为０．８６．这些结果提示,皮质醇在虹鳟的繁殖过程中可能发挥某种作用．     

甲状腺激素对小鼠免疫功能的调节作用

正常昆明种成年小鼠每天给予一定量的甲状腺激素可使其抗体生成能力、淋巴细胞转化能力、迟发型超敏反应和巨噬细胞的吞噬功能明显增强,外周血成熟 T 细胞数量亦明显增加。而每天给予抗甲状腺药物则使其抗体生成能力、淋巴细胞转化能力和迟发型超敏反应明显降低。切除甲状腺亦使抗体生成能力下降。这些结果提示甲状腺激素参与免疫功能的生理性调节。     

强啡肽A对烫伤大鼠免疫功能的影响

大鼠烫伤后24h血浆强啡肽A(Dyn A)的含量开始降低,120h仍未恢复到对照水平。烫伤后免疫功能也有明显的变化,表现为淋巴细胞转化功能降低,白细胞介素1,2(IL-1,IL-2)生成量减少。其变化过程与血浆Dyn A的变化基本一致。离体条件下,Dyn A与烫伤大鼠的脾淋巴细胞共同培养,可增强淋巴细胞转化及IL-2的生成。静脉注射Dyn A后,烫伤大鼠的淋巴细胞转化功能、IL-1和IL-2的生成都有不同程度的增加。本实验提示,血浆Dyn A水平的降低可能是烫伤大鼠免疫功能低下的原因之一。     

口服短小双歧杆菌活菌制剂对机体免疫功能的增强效应

探讨短小双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）对正常机体免疫功能的影响及对免疫低功机体的免疫功能调整作用。以环磷酰胺制备免疫低功模型,检测活菌制剂应用后,小鼠巨噬细胞吞噬功能,自然杀伤（NK）细胞杀伤活性,特异性抗体产生能力及IL—2诱生活性等指标的变化。结果表明短小双歧杆菌活菌制剂口服后可显著提高小鼠巨噬细胞吞噬功能,NK细胞杀伤活性,特异性抗体产生能力3项指标,IL—2诱生活性与对照组相比有一定提高,但差异无显著性。结果提示短小双歧杆菌对提高正常机体的免疫功能,对免疫低功机体有明显的调整作用。     

光周期影响雌性虹鳟鱼的免疫活动

运用放射免疫测定法,酶联免疫吸附法及酶联免疫斑点法调查了性未成熟雌性虹鳟鱼在生殖季节血浆中的皮质醇,雌二醇,睾丸酮,免疫球蛋白Ｍ（ＩｇＭ）,抗体产生细胞等水平的变化,同时也测定了不同光周期条件下ＩｇＭ水平的变化。实验结果表明,伴随生殖季节,血浆中甾醇类激素,ＩｇＭ量和抗体科生细胞数有季节性的变化;另外,生活在不同光周期条件下的虹鳟鱼,血浆中ＩｇＭ的量明显地不同,由于实验是在常温条件下进行的,而且即     

病原中的活性氧释放研究进展

活性氧的释放在动植物-病原菌互作过程中有着非常重要的作用.一般认为互作中的活性氧来源于动植物细胞生物膜中的氧化还原体系.但近年来随着互作研究的深入,发现动植物病原菌自身也有活性氧的释放以及复杂的调控系统,它们的活性氧释放能力很有可能与其致病性有一定的联系,并可能参与了互作,这些发现对深入了解动植物-病原菌的互作机制具有重要意义.概述了在细菌、真菌等多种动物病原菌中存在的活性氧释放现象,这些微生物活性氧产生的位点、相关功能分子以及调控机制,介绍了目前研究仍然较少但其潜在意义重大的植物病原菌中的活性氧释放现象、可能的调节机制和病理学意义.     

HIV抗体抑制病毒感染的免疫效应和机制

在非人灵长类动物和人源化小鼠模型的实验研究中已经证明,人类免疫缺陷病毒(HIV)的广谱中和抗体(bNAbs)具有保护作用。近期bNAbs 3BNC117和VRC01的临床Ⅰ期试验证实,两种中和抗体均可降低未接受抗病毒治疗的HIV感染者的病毒载量。然而,bNAbs目前尚难以通过疫苗诱导产生。在泰国RV144疫苗试验中,疫苗对受试人群的总体保护率为31%,血液样本中未检出bNAbs,表明抗体的其他免疫效应功能在抑制病毒感染和复制的过程中发挥了重要作用。越来越多的研究表明,通过抗体Fcγ受体(FcγR)介导的非中和抑制作用在保护黏膜组织免受HIV感染的过程中可能发挥重要作用。在HIV通过黏膜组织传播的早期,树突状细胞和巨噬细胞表面表达的Fc受体可能起着决定性的作用,已有研究证实它们是HIV通过黏膜组织最初感染的靶细胞。因此,在新的疫苗设计策略中,除了诱导bNAbs产生,具有其他免疫效应功能的非中和抑制性抗体也应纳入疫苗接种评价体系中。     

成年去胸腺大鼠和老年大鼠肝微粒体混合功能氧化酶及血浆性激素水平的变化

成年去胸腺(ATx)大鼠和老年大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO,包括细胞色素P450、氨基比林-N-脱甲基酶)的活力比成年对照大鼠的低,且降低幅度雄性明显大于雌性。雄性ATx大鼠和老年大鼠血浆睾酮(T)水平降低,雌二醇(E_2)水平增高,E_2/T比值明显增高;雌性ATx大鼠和老年大鼠血浆E_2和T水平均降低,E_2/T比值无明显变化。给雄性ATx大鼠皮下注射丙酸睾丸素可使其肝微粒体MFO活力恢复。提示胸腺对肝脏MFO的影响可能是通过性激素介导的。