细菌性阴道病与外阴阴道假丝酵母菌病患者治疗前后阴道乳杆菌功能变化

探讨细菌性阴道病(BV)与外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者阴道乳杆菌的功能状态及治疗后阴道乳杆菌的重建情况, 为BV与VVC的乳杆菌补充治疗提供依据。

选取BV与VVC患者及正常对照组女性各30例, 采用前后对照、标准对照的方法, 通过检测患者治疗前后阴道乳杆菌功能(定植密度、乳杆菌分级、产酸能力、产H₂O₂能力、体外增殖能力)研究该阴道炎症状态下阴道乳杆菌功能的变化和重建情况。

BV患者阴道乳杆菌定植密度为(5.87±1.83)个/HP, 阴道乳杆菌分级正常比例仅为6.67%, H₂O₂阳性率53.33%, 24 h pH值为5.45, 24 h菌液浊度为23.7 MCF。BV患者治愈后阴道乳杆菌定植密度为(45.28±15.05)个/HP, 乳杆菌分级正常比例为54.55%, H₂O₂阳性率81.82%, 24 h pH值为4.49, 24 h菌液浊度为46.6 MCF。VVC患者阴道乳杆菌定植密度为(48.53±10.59)个/HP, 乳杆菌分级正常比例为73.33%, H₂O₂阳性率为80.00%, 24 h pH值为4.41, 24 h菌液浊度为52.2 MCF。VVC患者治愈后阴道乳杆菌定植密度为(47.95±10.28)个/HP, 乳杆菌分级正常比例为90.48%, H₂O₂阳性率85.71%, 24 h pH值为4.33, 24 h菌液浊度为51.3 MCF。

BV患者阴道乳杆菌功能减退, 治愈后未能完全重建, 需帮助恢复阴道乳杆菌功能状态。VVC患者阴道乳杆菌功能基本正常。

     

腹腔镜联合GnRH-a治疗后Ⅲ-Ⅳ期子宫内膜异位症患者妊娠情况与阴道微生态的相关性

探讨腹腔镜联合GnRH-a治疗后Ⅲ-Ⅳ期子宫内膜异位症（EMS）患者妊娠情况与阴道微生态的相关性。

经腹腔镜联合GnRH-a治疗后的196例EMS患者根据妊娠情况分为妊娠组（n = 98）和未妊娠组（n = 98）,比较两组阴道微生态差异。将已成功妊娠的患者按照阴道微生态情况分组探讨阴道微生态对妊娠结局的影响和相关性。

治疗前未妊娠组与妊娠组的pH值、H₂O₂值、菌群密集度、菌群多样性、Nugent评分、AV评分差异无统计学意义（P＞0.05）,但治疗后未妊娠组上述指标异常的病例比例显著高于妊娠组（P＜0.05）。在已成功妊娠的EMS患者中,阴道微生态异常的患者发生不良妊娠结局的比例显著高于阴道微生态正常的患者（P＜0.05）。pH值、H₂O₂值、菌群密集度和多样性、Nugent评分和AV评分的异常可导致不良妊娠结局。

阴道微生态失衡是经腹腔镜和GnRH-a联合治疗后的Ⅲ-Ⅳ期EMS患者不能成功妊娠或妊娠后发生不良妊娠结局的重要原因。

     

不同级别宫颈鳞状上皮内病变患者宫颈分泌物各指标检测情况及其临床意义

探讨不同级别宫颈鳞状上皮内病变（SIL）患者宫颈分泌物各指标检测情况及其临床意义,为该类患者的治疗提供参考。

选取北京市和平里医院妇科2022年3月至2023年5月164例SIL患者为研究对象,根据病理检查结果将患者分为宫颈低度鳞状上皮内病变（LSIL）组（n=72）和宫颈高度鳞状上皮内病变（HSIL）组（n=92）,另纳入宫颈癌患者21例为宫颈癌组、健康女性60例为健康组。统计4组受试者阴道白细胞酯酶（LE）、N-乙酰基氨基半乳糖苷酶（NAG）、唾液酸苷酶（SNA）、过氧化氢（H₂O₂）阳性率及pH值;观察4组受试者阴道滴虫感染情况及需氧菌性阴道炎（AV）、细菌性阴道病（BV）阳性率;评估4组受试者阴道清洁度;观察4组受试者HPV感染情况并通过Spearman分析评估宫颈病变程度与阴道微环境、HPV感染的相关性。

LSIL组、HSIL组、宫颈癌组患者阴道LE、NAG、SNA、H₂O₂阳性率及pH值均显著高于健康组（均P＜0.05）,且随着宫颈病变程度的加重,阴道LE、NAG、SNA、H₂O₂阳性率及pH值均呈上升趋势（均P＜0.05）。LSIL组、HSIL组、宫颈癌组患者滴虫感染率及AV、BV阳性率均显著高于健康组（均P＜0.05）,且随着宫颈病变程度的加重,滴虫感染率及AV、BV阳性率均呈上升趋势（均P＜0.05）。LSIL组、HSIL组、宫颈癌组阴道清洁度Ⅰ～Ⅱ级患者占比低于健康组,Ⅲ～Ⅳ级患者占比高于健康组（均P＜0.05）,且随着宫颈病变程度的加重,阴道清洁度越来越差（均P＜0.05）。LSIL组、HSIL组、宫颈癌组高危型HPV感染患者占比、HPV感染总发生率均高于健康组（均P＜0.05）,随着宫颈病变程度的加重,高危型HPV感染、HPV感染总发生率均呈上升趋势（均P＜0.05）。经相关性分析,宫颈病变程度与滴虫感染、AV、BV、LE、NAG、SNA、H₂O₂、pH值、阴道清洁度、HPV感染均呈正相关（均P＜0.05）。

SIL患者宫颈微生态处于显著失衡状态,宫颈病变程度与分泌物各指标具有显著相关性。

     

不同方案阴道乳杆菌活菌胶囊结合抗菌药物治疗混合性阴道炎的临床研究

研究两种阴道乳杆菌活菌胶囊结合抗菌药物对混合性阴道炎的疗效。

选取2015年4月至2020年12月北京大学第一医院收治的混合性阴道炎患者50例。同时符合以下两项即确诊为混合性阴道炎：（1）阴道分泌物真菌检测阳性;（2）阴道分泌物革兰染色积分法评分（Nugent评分）≥7分;（3）阴道分泌物滴虫镜检阳性。入选患者根据乳杆菌胶囊使用方法分为联合组（25例）及序贯组（25例）,联合组在使用抗菌药物的同时使用阴道乳杆菌活菌胶囊,序贯组在使用抗菌药物结束后序贯使用阴道乳杆菌活菌胶囊。评估两组患者病原体转阴率、症状改善及乳杆菌恢复情况。

序贯组患者综合治愈率高于联合组（56.0% vs 28.0%,P＜0.05）。经过治疗后,联合组有12.0%的患者阴道菌群恢复为形态类似乳杆菌的革兰阳性大杆菌,序贯组有32.0%恢复为形态类似乳杆菌的革兰阳性大杆菌,两组差异无统计学意义（P＞0.05）,但序贯组在趋势上高于联合组。

对于混合性阴道炎的治疗来说,抗菌药物治疗后序贯使用阴道乳杆菌活菌胶囊优于抗菌药物治疗同时联合使用阴道乳杆菌活菌胶囊。

     

杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品对小鼠免疫功能的影响

研究杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115（Lacticaseibacillus paracasei N1115）发酵乳饮品对小鼠免疫脏器指数、免疫球蛋白、巨噬细胞、NK细胞、B淋巴细胞及T淋巴细胞的影响。

将SPF级6～8周龄雄性Balb/c小鼠随机分为对照组以及杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品低、中、高剂量组,每组15只,连续灌胃30 d,进行免疫脏器指数测定、免疫球蛋白测定、碳廓清能力测定、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、NK细胞活性测定、脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、血清溶血素测定和抗体细胞生成实验。

杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品低、中、高剂量组的小鼠碳廓清指数显著高于对照组（t = 3.926 2,P = 0.000 7;t = 6.000 1,P＜0.000 1;t = 5.314 4,P＜0.000 1）,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率显著高于对照组（t = 3.812 1,P = 0.001 5;t = 4.257 2,P = 0.000 4;t = 4.976 3,P = 0.000 5）。

杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品具有增强小鼠非特异性免疫力的功能,可为副干酪乳酪杆菌N1115的开发利用提供科学依据。

     

双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对幽门螺杆菌根治后消化道不良反应的改善作用

探讨加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对临床四联疗法根除幽门螺杆菌(H.pylori)过程中患者消化道不良反应的改善作用。

选择2019年1月至2020年1月在昆明医科大学第二附属医院门诊就诊的100例H.pylori感染患者, 分为益生菌组和正常组, 各50例。全部患者通过四联疗法根除H.pylori后, 益生菌组患者继续加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗, 对结果进行分析。

2组患者使用含有铋剂的四联疗法根除H.pylori后效果满意。益生菌组患者不良反应发生率低于正常组(25.5% vs 47.5%;χ²=11.023, P=0.001)。

益生菌可减轻四联疗法根除H.pylori后消化道不良反应, 根除H.pylori过程中加用益生菌的时机尚待进一步探讨。

     

双歧杆菌制剂对肿瘤化疗患者肠道菌群影响的Meta分析

探讨双歧杆菌制剂对肿瘤化疗患者肠道菌群的影响。

通过检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、Web of Science以及CBM、CNKI、WanFang Data和VIP数据库,收集各数据库从建库至2022年7月发表的所有关于肿瘤化疗患者应用双歧杆菌制剂的随机对照试验,由2名研究者独立筛选文献,按照系统评价的要求对文献质量进行评估,使用Revman 5.4和Stata 17.0统计学软件进行Meta分析。

共纳入25篇文献（2 152例患者）,Meta分析结果显示,双歧杆菌制剂组患者肠道中双歧杆菌和乳杆菌的数量高于对照组[SMD = 2.89,95% CI（2.28,3.49）,P＜0.001;SMD = 2.20,95% CI（1.57,2.84）,P＜0.001],双歧杆菌制剂组患者肠道中大肠埃希菌、肠杆菌和肠球菌的数量低于对照组[SMD = −1.08,95% CI（−1.64,−0.52）,P＜0.001;SMD = −0.88,95% CI（−1.58,−0.17）,P = 0.010;SMD = −0.98,95% CI（−1.68,−0.28）,P = 0.006]。

在化疗的基础上添加双歧杆菌制剂对肠道主要菌群水平能起到显著的改善作用,降低不良反应发生率,值得在临床上推广及应用。

     

高级别上皮内瘤变和不同型别人乳头瘤病毒感染患者阴道微生态特征分析

探讨高级别上皮内瘤变（high level squamous intraepithelial lesion,HSIL）患者阴道微生态的特征及不同型别人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染对阴道微生态的影响。

收集我院健康女性（对照组,n=54）和HSIL患者（HSIL组,n=54）的阴道分泌物样本,提取其DNA,通过HPV试剂盒检测HPV型别,并使用16S rRNA基因高通量测序分析阴道菌群的组成结构及特征。

HSIL组女性HPV阳性率为88.9%,对照组女性HPV阳性率仅有11.1 %。与对照组相比,HSIL组女性阴道乳杆菌属相对丰度降低,加德纳菌属、普雷沃菌属、双歧杆菌属相对丰度增多,但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与HPV Others组相比,HPV CR组女性阴道阿托波菌属相对丰度显著降低（t=2.067,P=0.043）;加德纳菌属、链球菌属、肠球菌属相对丰度降低,双歧杆菌属相对丰度升高,但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

HSIL患者HPV感染率升高,不同型别HPV感染会对阴道微生态产生影响,提示对阴道微生态进行干预可能对宫颈病变产生调节作用。

     

子宫微生物研究及其对IVF-ET助孕患者妊娠结局的影响

分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者的子宫微生物对妊娠结局的影响, 并探讨影响子宫微生物群分布的因素。

选取2019年10月-12月在北部战区总医院生殖医学中心行IVF-ET治疗的139例患者为研究对象。入组患者均于移植手术前做阴道微生态检查。术后从移植导管尖端及外鞘配对获取患者的子宫内膜液和宫颈粘液进行微生物培养, 采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定宫腔和宫颈微生物。根据质谱法微生物鉴定结果并按优势菌是否为乳杆菌属菌群进行分组, 即乳杆菌属主导组, 非乳杆菌属主导组和鉴定阴性组。

宫腔和宫颈菌属分布一致性尚可(Kappa=0.494)。人绒毛膜促性腺激素(HCG)阳性率在宫腔和宫颈均表现为非乳杆菌属主导组显著低于乳杆菌属主导组(60.0%vs87.2%, P < 0.017;65.7%vs 97.9%, P < 0.017)。着床率及临床妊娠率均在宫腔表现为非乳杆菌属主导组显著低于乳杆菌属主导组(44.7%vs 68.6%, P < 0.017;52.0%vs 83.0%, P < 0.017)。宫颈微生物描述着床率及临床妊娠率差异无统计学意义(P > 0.017)。宫腔中检出乳杆菌属的患者其临床妊娠率显著高于未检出者(83.0%vs 65.2%, P < 0.017)。移植日阴道微生态状况与E2水平是子宫微生物群分布差异的影响因素。

当宫腔微生物以非乳杆菌属为主导时, IVF-ET助孕患者的HCG阳性率、着床率和临床妊娠率显著降低。移植日阴道微生态失调或E2过高可能增加子宫非乳杆菌属检出的风险。

     

细菌性阴道炎合并HPV16感染患者阴道菌群分布与局部免疫的关系

探究细菌性阴道炎（BV）合并人乳头瘤病毒16（HPV16）感染患者阴道菌群分布与局部免疫的关系。

选取2019年1月到2023年1月我院收治的83例BV合并HPV16感染患者和81例单纯BV患者,分别作为研究组和对照组,检测两组患者阴道菌群分布和宫颈阴道分泌物中T淋巴细胞亚群（CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）和炎症因子（IL-1β、IFN-γ、IL-2）水平。

研究组乳酸杆菌数量低于对照组,加德纳菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌数量高于对照组（P＜0.05）;研究组阴道菌群密集度Ⅲ+Ⅳ级、多样性Ⅱ+Ⅲ级、微生态失调比例均高于对照组（P＜0.05）;研究组宫颈CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺比值低于对照组（P＜0.05）;研究组宫颈IL-1β、IFN-γ、IL-2水平低于对照组（P＜0.05）。

合并HPV16感染可使BV患者阴道乳酸杆菌数量减少,阴道微生态失衡,局部免疫功能下降,应尽早检测此类患者阴道菌群和宫颈阴道局部免疫情况,进行针对性干预。

     

Selection and identification of anaerobic lactobacilli producing inhibitory compounds against vaginal pathogens

Two strains of Lactobacillus crispatus (15L08 and 21L07) and one strain of Lactobacillus jensenii (5L08) were selected from amongst 100 isolates from the vaginas of healthy premenopausal women for properties relevant to mucosal colonization and the production of H2O2 and/or bacteriocin-like compound. All three strains self-aggregated and adhered to vaginal epithelial cells, displacing well-known vaginal pathogens, such as Gardnerella vaginalis and Candida albicans. Lactobacillus crispatus 15L08 was characterized as a potential H2O2 producer. A high level of bacteriocin-like compound was synthesized by L. jensenii 5L08, with a bactericidal mode of action for G. vaginalis, C. albicans and Escherichia coli. However, H2O2-dependent activity alone was not sufficient to inhibit the growth of C. albicans. Simultaneous actions of H2O2 and bacteriocin-like compound produced by lactobacilli may be important for antagonizing pathogenic bacteria. These strains of lactobacilli may be excellent candidates for eventual use as probiotics to restore the normal microbial communities in the vaginal ecosystem.     

Characterization and selection of vaginal Lactobacillus strains for the preparation of vaginal tablets

AIMS: To characterize and select Lactobacillus strains for properties that would make them a good alternative to the use of antibiotics to treat human vaginal infections. METHODS AND RESULTS: Ten Lactobacillus strains belonging to four different Lactobacillus species were analysed for properties relating to mucosal colonization or microbial antagonism (adhesion to human epithelial cells, hydrogen peroxide production, antimicrobial activity towards Gardnerella vaginalis and Candida albicans and coaggregation with pathogens). The involvement of electrostatic interactions and the influence of bacterial metabolic state in the binding of lactobacilli to the cell surface were also studied. Adherence to epithelial cells varied greatly among the Lactobacillus species and among different strains belonging to the same Lactobacillus species. The reduction in surface negative electric charge promoted the binding of several Lactobacillus strains to the cell membrane whereas lyophilization reduced the adhesion capacity of many isolates. The antimicrobial activity of lactobacilli culture supernatant fluids was not directly related to the production of H2O2. CONCLUSIONS: Three strains (Lactobacillus brevis CD2, Lact. salivarius FV2 and Lact. gasseri MB335) showed optimal properties and were, therefore, selected for the preparation of vaginal tablets. The selected strains adhered to epithelial cells displacing vaginal pathogens; they produced high levels of H2O2, coaggregated with pathogens and inhibited the growth of G. vaginalis. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: The dosage formulation developed in this study appears to be a good candidate for the probiotic prophylaxis and treatment of human vaginal infections.     

妊娠中晚期阴道微生态失调及乳酸菌胶囊干预对不良妊娠结局的作用

目的 观察妊娠中晚期妇女阴道微生态状况,探讨应用乳杆菌活菌胶囊纠正阴道微生态失调对不良妊娠结局的预防价值。方法 选择孕13~36周单胎妊娠期妇女560例,取其阴道分泌物,经革兰染色后油镜下观察,进行阴道微生态（阴道菌群的密集度、多样性、优势菌、炎症反应等）状况评价,检测阴道分泌物成分、阴道病原菌类型。对阴道微生态失调孕妇,根据是否接受乳杆菌活菌胶囊治疗分为治疗组和对照组,治疗组给予乳杆菌活菌胶囊,对照组不采用药物干预。追踪随访所有孕妇的妊娠情况,比较阴道微生态正常组、微生态失调治疗组及微生态失调对照组的不良妊娠结局。结果 560例研究对象中,阴道微生态正常 335 例（59.82%）,微生态失调225例（40.18%）。225例微生态失调孕妇中,细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）32例（14.22%）,阴道假丝酵母菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）56例（24.89%）,滴虫性阴道炎（triehomonal vaginitis,TV）11例（4.89%）,BV和VVC混合感染4例（1.78%）,BV和TV混合感染3例（1.33%）,菌群增殖过度75例（33.33%）,菌群抑制44例（19.56%）。微生态失调组pH值>4.5、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性比例均明显高于微生态正常组（χ2=55.59~340.06,Ps0.05）。结论 妊娠中晚期容易导致阴道微生态失调,造成不良妊娠结局,乳杆菌活菌胶囊纠正阴道微生态失调对于改善不良妊娠结局有较好的预防作用。     

Inhibitory activity of vaginal Lactobacillus bacteria on yeasts causing vulvovaginal candidiasis

Growing frequency of therapeutical failures of vulvovaginal candidiasis, resulting from resistance of certain species of Candida to imidazole agents, raises interest in the use of probiotics from Lactobacillus genera as prophylaxis. Unfortunately, little is known about inhibitory mechanisms of Lactobacillus on Candida. The aim of this study was to compare the activity of selected Lactobacillus species, representing the physiological vaginal flora, against Candida as well as investigation whether their inhibitory activity against Candida is related strictly to hydrogen peroxide and lactic acid production. 125 strains from vaginal smears of healthy women were classified by making use of phenotypic and genotypic methods. The majority of strains belonged to L. acidophilus: L. acidophilus sensu stricto, L. crispatus, L. gasseri and L. johnsonii as well as L. fermentum and L. plantarum species. Culture supernatants of selected 25 strains representing the isolated species were examined for their inhibitory activity against the growth of Candida albicans and C. glabrata. The results showed that the strongest and the fastest activity against C. albicans was demonstrated by L. delbrueckii strains, producing the largest quantities of hydrogen peroxide. On the other hand, extended activity, demonstrable after 24 hours, was shown by non-H2O2 producing L. plantarum supernatants. Growth of C. glabrata was not inhibited by any of the examined strains of Lactobacillus. Comparison of activity of live active cultures of Lactobacillus strains and their mixtures with this of pure H2O2 and lactic acid has shown that pure chemical compounds were less active than the cultures. This suggests that mixtures of Lactobacillus strains are in cooperation with each other using many different metabolites.     

应用rep-PCR分型技术筛选潜在治疗性乳杆菌

分离鉴定阴道弯曲乳酸杆菌并对其进行基因分型分析和产H2O2能力测定,初步筛选具有潜在防治女性生殖道感染的弯曲乳酸杆菌菌株。将健康妇女阴道分泌物接种到de Man,Rogosa and Sharpe (MRS) 培养基,分离培养乳酸杆菌。通过16S rRNA序列进行乳酸杆菌分类鉴定,重复序列片段PCR扩增方法进行弯曲乳酸杆菌的基因分型,并进一步采用pH直接测酸法和辣根过氧化物酶催化四甲基联苯胺与过氧化氢反应显色法检测了10株弯曲乳酸杆菌产酸和产H2O2能力。经过序列比对鉴定,共得到65株乳酸杆菌。其中,弯曲乳杆菌Lactobacillus crispatus 19株,詹氏乳杆菌Lactobacillus jensenii 17株,发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum 12株;rep-PCR分型发现不同种类的乳酸杆菌和同一种弯曲乳酸杆菌均表现为不同的带型指纹图;10株弯曲乳酸杆菌均产酸,其中T22-3和T29-5两株弯曲乳酸杆菌产H2O2量最高。结果表明个体阴道内乳酸杆菌分布具有差异,弯曲乳酸杆菌具有种内多样性,产H2O2丰富的T22-3和T29-5两株弯曲乳酸杆菌有可能作为防治女性生殖道感染的有益菌株。     

阴道中益生特性乳杆菌的分离与功能评价

目的 分离健康女性阴道中的乳杆菌并鉴定其益生特性,为开发治疗妇科疾病的复方益生菌制剂提供新型菌株。方法 采集健康女性阴道分泌物并分离筛选乳杆菌,通过16S rDNA序列分析鉴定乳杆菌分离株,并对其产酸性能、产H2O2能力、抑菌能力、产生物膜能力进行检测。结果 从50名健康女性阴道内共分离出179株乳杆菌,其中卷曲乳杆菌101株、詹氏乳杆菌42株、格氏乳杆菌26株、植物乳杆菌5株、唾液乳杆菌3株以及干酪乳杆菌2株。179株乳杆菌中有146株具有产酸能力,发酵液pH值的最低的5株菌分别为卷曲乳杆菌J3、卷曲乳杆菌J8、詹氏乳杆菌J87,植物乳杆菌J75以及格氏乳杆菌J35,其pH分别为4.20、4.23、4.24、4.26及4.36;产H2O2弱阳性菌株有87株、阳性有37株、强阳性有9株,这9株菌分别为卷曲乳杆菌J3、卷曲乳杆菌J8、卷曲乳杆菌J20、詹氏乳杆菌J87,詹氏乳杆菌J90、詹氏乳杆菌J15、格氏乳杆菌J11、植物乳杆菌J75、植物乳杆菌J69以及植物乳杆菌J40;能拮抗大肠埃希菌的菌株有115株、拮抗金黄色葡萄球菌的有84株、拮抗白假丝酵母的有52株;经统计,对三者同时有拮抗作用且作用最强的只有6株,分别为卷曲乳杆菌J3、卷曲乳杆菌J50、卷曲乳杆菌J62、詹氏乳杆菌J87、詹氏乳杆菌J16和格氏乳杆菌J66;不同乳杆菌产生物膜能力数值范围在1.0~5.4,卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌、干酪乳杆菌的生物被膜形成能力显著高于其他三种菌（P<0.05）。在全部179株菌中,卷曲乳杆菌J3和詹氏乳杆菌J87既具有强的产酸能力和产过氧化氢能力,又有较强抑菌活性,同时产生物膜能力也最强。结论 卷曲乳杆菌J3和詹氏乳杆菌J87具有优良的生物学特性,有望成为用于治疗妇科疾病微生态制剂的备选菌株。     

乳杆菌对全子宫切除术后阴道微生态的影响

目的 分析甲硝唑阴道准备联合全子宫切除术对患者阴道微生态的影响及乳杆菌的应用价值。 方法 采用前瞻性分析,收集2015年1月至2018年5月我院符合本研究相关标准并行腹腔镜全子宫切除的患者100例为研究对象,患者术前均用甲硝唑进行阴道准备。采用随机数字表将入选患者分为2组,每组50例。观察组患者在术后2个月时采用乳杆菌活菌胶囊阴道给药,1次/d,2粒/次,10 d/疗程,共3个疗程;对照组不处理。观察2组患者术前、术后2个月、术后3个月时阴道乳杆菌数量、pH值、菌群多样性、菌群密集度分级差异,同时对比观察组与对照组患者治疗前后阴道乳杆菌检出率、阴道菌群失衡率、pH值、FSFI分值。 结果 (1)100例患者术后2个月时阴道乳杆菌数量、pH值、菌群多样性、菌群密度分级均显著减少,以Ⅰ级为主;术后3个月时以Ⅳ级为主。(2)与治疗前相比,两组患者阴道乳杆菌检出率均升高,阴道菌群失衡率均降低,pH值均降低,FSFI分值均升高(均P0.05);治疗后观察组患者阴道乳杆菌检出率高于对照组,阴道菌群失衡率、pH值低于对照组,FSFI分值高于对照组(均P2=3.78,P=0.022)。 结论 甲硝唑阴道准备联合腹腔镜全子宫切除术患者术后阴道微生态环境被破坏,尤其以术后2个月最为明显,给予乳杆菌干预能促使被破坏的阴道微生态环境恢复正常,减少术后细菌性阴道病的发生,值得应用和推广。     

甲硝唑与乳杆菌活菌制剂对细菌性阴道病患者阴道微生物群影响的对比性研究

目的对300例细菌性阴道病（Bacterial Vaginosis,BV）患者随机使用甲硝唑（100例）、乳杆菌活菌制剂定君生（100例）及甲硝唑联合定君生（100例）,观察乳杆菌在阴道内定植情况及用药前后阴道内微生物多样性的变化,为临床治疗细菌性阴道病提供实验依据。方法分别提取300例BV患者用药前和用药后的阴道微生物总基因组DNA,以德氏乳杆菌16SrDNA特异性引物进行PCR,检测患者用药后德氏乳杆菌在阴道内的定植情况。以细菌16SrRNAV3区通用引物进行PCR,扩增产物进行变性梯度凝胶电泳（DGGE）,对所得指纹图谱进行分析,研究用药对微生态变化的影响状况。结果甲硝唑治疗组用药前后均没有德氏乳杆菌检出;定君生治疗组用药后德氏乳杆菌检出率为54％;甲硝唑联合定君生治疗组用药后德氏乳杆菌检出率为76％。甲硝唑治疗组用药后微生物多样性显著降低,微生物群结构失衡;定君生治疗组用药后微生物多样性有所降低,微生物群结构无显著差异;甲硝唑联合定君生治疗组用药后微生物多样性降低,但较前两组有所增加,微生物群结构差异无统计学意义。结论甲硝唑显著降低BV患者阴道微生物多样性,引起微生态失衡;定君生对BV患者阴道微生态的影响明显小于甲硝唑;定君生的使用有利于甲硝唑f预后阴道微生物多样性的恢复和微生态平衡的重建。     

Inhibition of Staphylococcus aureus by H2O2-producing Lactobacillus gasseri isolated from the vaginal tract of cattle

Infectious diseases are the major reproductive complication during postpartum. The bacteria that colonize the postpartum uterus of cattle are specific as well as opportunistic pathogens that include Staphylococcus aureus. The antibiotics and antiseptic agents used in the treatment of postpartum acute infections induce residues in foods, spread of bacterial resistance, increase in financial costs and failures in defense mechanisms of the host. Preventive treatment with probiotic products could decrease the use of antibiotics in dairy farming systems. Lactobacilli are present in the vaginal microflora of healthy cows. They can prevent pathogen colonization by mechanisms such as the production of antagonistic substances as lactic acid, H2O2, or bacteriocins. The aim of the present study was the selection of H2O2 generating lactobacilli from a group of 72 strains isolated from the vagina of cattle. Both Lactobacillus gasseri CRL1421 and Lactobacillus gasseri CRL1412, which share some probiotic properties, produce H2O2, detected by the plate colorimetric method. They were chosen to study the kinetics of H2O2 production under different culture conditions. Both microorganisms produced greater amounts of H2O2 in aerated than in static cultures. As L. gasseri CRL1421 had a greater capacity to generate H2O2, associative cultures with this strain and S. aureus were conducted. A significant decrease in the growth of the pathogen was detected after culture for 6h, this effect being greater under aerated conditions. The addition of catalase to mixed cultures partially abolished the inhibition, an effect that could be attributed to the combined action of H2O2 and other antagonistic metabolites. The simultaneous addition of catalase and NaOH to these cultures restored S. aureus growth. This observation suggests that the inhibition was produced by the combination of H2O2 and lactic acid, both released by the lactobacilli. Electron microphotographs showed the damage caused by the lactobacilli supernatant on the pathogenic cells. The treatment of S. aureus with lactic acid and hydrogen peroxide evidenced that each metabolite produced a different type of morphological damage. The number of viable cells obtained agrees with the electron microscopy observations. The results support the idea that L. gasseri CRL1421 could be successfully included in a probiotic product to prevent S. aureus infection in cows.