杯山药零余子愈伤组织诱导及植株再生的研究

对怀山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｏｐｐｏｓｉｔａ）零余子愈伤组织的诱导、分化、再生苗的生根和移栽进行了研究。结果表明：⑴在不同激素组合的培养基上怀山药零余子均能产生愈作组织,而且具有一次成苗的能力。ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ的培养基对诱导愈伤组织最有利,其出愈率达１００％;⑵在愈伤组织的分化中,ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ的激素组合是最佳的,其分化率为６３．６％,且多形成丛生芽;⑶再生植株     

红叶石楠离体植株再生频率的影响因素研究

以红叶石楠带芽茎段及叶片为外植体,分析激素和培养条件等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,MS+0.10mg/L 2,4-D+0.50mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA+0.50mg/L KT为最佳愈伤组织诱导培养基,暗培养的愈伤组织诱导率高于光培养,其愈伤组织诱导率可达100%(带芽茎段)和98%(叶片)。MS+0.50mg/L IBA+2.00mg/L 6-BA+2.00mg/L KT为最佳分化增殖培养基,分化率91%以上,增殖倍数6.8以上,均达到最高。1/2MS+0.50mg/L IBA+0.01mg/L NAA为最佳生根培养基,生根率92%,生根量4.4根/株,均达到最高。     

三叶半夏叶片一步成苗离体培养技术

以药用植物三叶半夏叶片为材料,通过比较直接和间接器官发生两种途径,建立了半夏一步成苗的快速繁殖技术体系。结果表明,经过愈伤组织阶段的一步成苗培养基为MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,90d左右方可得到再生植株,植株分化率为74%,每个外植体上分化的块茎数为5.61±1.04。附加NAA与BA两种激素对一步成苗培养基进行优化,筛选出一步成苗最佳培养基MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/LBA,60d后就可直接发育成完整植株,植株分化率为76%,每个外植体上分化的块茎数高达9.97±0·81,对这种培养基上的再生小植株进行移栽,1个月后,移栽成活率达100%。     

Callus Induction and Organ Differentiation in the Tissue Culture of Begonia fimbristipula Hance

This paper reports the organ differentiation in the tissue culture of Begonia fimbristipula Hance. Three types of regenerated plantlets were obtained: (1) callus differentiation, (2) growth center induced from the aseptic seedling leaf and (3) shoots were differentiated from roots developed from the callus. Callus could be obtained on SH medium as well as on MS basic medium supplemented with 2,4-D (0.1 ppm) +NAA (2.5 ppm) +KT (0.25 ppm). Experiments were carried out to compare the effects of different concentrations of sucrose on callus induction. It was found that the differentiation rate of callus was higher on MS medium than on SH medium. Comparative experiments were also carried out to find out the efficiency of callus differentiation by BA and 2ip at various concentrations. The better differentiation of callus was obtained at the range 0.25—2 ppm of BA, The cytological investigations showed that individual plantlet grown on the leaf was originated from the epidermal cells. According to our study, numerous plantlets can be obtained from a single leaf of aseptic seedlings. It is possible that this technique provides a way of rapid donal propogation of Begonia fimbristipula Hance.     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT2.0 mg/L+ IAA0.5mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化.结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4％.分化后得到的不定芽在含NAA0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基上生根率达90％,移栽存活率为95％.     

香果树茎段和叶片的组织培养

以香果树（Emmenopterys henryi Oliv．）实生苗带芽茎段和叶片为外植体进行组织培养。结果表明,香果树带芽茎段愈伤组织的最适诱导培养基为含有1．0mg·L^-1～6-BA和0．01mg·L^-1 NAA的MS培养基,愈伤组织诱导率达100％;愈伤组织分化的最适培养基为添加2．0mg·L^-1KT和0．01mg·L^-1 NAA的MS培养基;在含有1．0mg．L^-1～6-BA和0．1mg·L^-1 NAA的MS培养基上,叶片诱导不定芽的效果较好,诱导率可达80％;在含有2．0mg．L^-1 KT和0．1mg·L^-1 NAA的MS培养基上,不定芽的增殖系数可达3—4;以含有1．5mg·L^-1 IBA的1／2MS培养基为生根培养基,香果树试管苗生根率达72．73％。移栽至大田后,香果树试管苗的成活率达到30％。     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件。以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的激素组合对不定芽分化最有利。在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化。结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15 d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4%。分化后得到的不定芽在含NAA 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的 1/2MS培养基上生根率达90%,移栽存活率为95%。     

'早红'草莓高效遗传转化受体系统的建立

本文以草莓主栽品种'早红'组培苗离体叶片和叶柄为外植体,进行叶龄、暗培养、植物生长调节剂配比及抗生素敏感性研究,建立草莓高效遗传转化的受体系统.在含3.0 mg/L 6-BA与0.1 mg/L 2,4-D的MS培养基上,30 d叶龄的叶片再生频率高达98.31%,平均每叶片再生芽数5.09个,叶柄切段的再生频率为89.25%,平均每叶柄切段再生芽数4.92个,叶片的再生频率略高于叶柄;不定芽在含0.2 mg/L 6-BA与0.2 mg/L GA_3的MS继代培养基上培养成苗.将生长状态良好的不定芽转至含0.2 mg/L IBA的1/2 MS培养基上生根,生根率达100%,平均生根数量16.27条,平均根长1.85 cm.抗生素敏感性试验表明,草莓外植体适宜的卡那霉素选择压力为25 mg/L,头孢霉素的筛选浓度为300mg/L.本研究建立的再生体系可作为草莓遗传转化的受体系统.     

绞股蓝悬浮细胞的原生质体再生植株

绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum (Thumb)Mak．)是葫芦科多年生草本药用植物,现已得到广泛的开发利用,本文首次报道了绞股蓝悬浮细胞的原生质体再生植株。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化研究

以2个小麦品种成熟胚为外植体进行离体培养,研究了不同预处理、不同2,4-D浓度及与KT组合、不同蔗糖浓度等因素对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:4℃低温预处理可提高愈伤组织的出愈率及再生苗率,2个材料的出愈率及再生苗率均达到90%和30%以上;在不同预处理条件下,2,4-D浓度对出愈率及再生苗率的影响与基因型有关,2,4-D浓度为1~2 mg/L更有利于愈伤组织诱导及分化;附加KT能缓解高浓度2,4-D对再生苗率的抑制作用,而对于在1、2 mg/L 2,4-D的培养基中附加KT则不表现这种作用;蔗糖浓度则在30 g/L条件下更有利于愈伤组织诱导。因此通过4℃低温预处理,在MS基本培养基中附加1~2mg/L 2,4-D及30 g/L蔗糖亦可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化。     

草木樨状黄芪高频离体再生体系的建立

以草木樨状黄芪无菌苗茎切段为材料,在含１－２mg/L2,4-D和０－０．５mg/L６ＢＡ的MS培养基上培养获得大量愈伤组织,愈伤组织诱导率在９５％以上,愈伤组织在附加０．２mg/LＫＴ,１mg/L６ＢＡ,０或０．５mg/LＮＡＡ,５００mg/LＣＨ 和２００mg/L ＹＥ的ＭＳ培养基上诱导丛生芽,并进而发育成苗。苗的分化频率为１００％。分化苗或其茎的切段在不国源植物激素的１／２ＭＳ培养基上可出现根的分化,分化频率达９０％以上,再生植株经炼苗后移栽成活率达８０％以上。     

活血丹组织培养与快速繁殖技术研究

以活血丹为材料,应用组织培养和快速繁殖技术,对适于活血丹增殖分化的培养基、培养方式进行了系统的研究。用活血丹叶片作为外植体,在MS添加生长素2,4-D和细胞分裂素BA的培养基上成功诱导出愈伤组织,并对其继代培养条件进行研究,分析了继代培养中褐化的原因。在MS添加NAA和BA的培养基中,活血丹的茎尖和带腋芽茎段能直接诱导出大量丛生芽,随后将不定芽转入MS添加IBA和KT的培养基中,可生成不定根,完成快速繁殖技术体系。结果表明:活血丹愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D(1.5mg/L)+BA(1.0mg/L),诱导率高达91.38%。丛生芽诱导的适宜培养基为MS+NAA(0.1mg/L)+BA(1·0mg/L),在此培养基上,出芽率达100%,芽增殖系数接近于10,有利于生物量的积累。而根的诱导则在MS+IBA(1.0mg/L)+KT(1.0mg/L)培养基上进行最好,此基础上能诱导出健康、粗壮的根。试管苗炼苗后移栽,成活率达100%。     

小麦×天兰冰草杂种体细胞愈伤组织诱导及无性系建立

从普通小麦×天兰冰草杂种F_1的叶、茎、节、幼穗诱导出愈伤组织,建立了体细胞无性系,获得了大量试管苗并移栽成活。 愈伤组织诱导率及分化率以幼穗最高,茎、节、叶较低。完全展开的叶片不能形成愈伤组织,未伸展的幼叶能诱导出愈伤组织,分化程度越低的幼叶部位越容易脱分化。幼叶基部切段的愈伤组织诱导率可达90％以上。改良MS附加4mg/l 2,4-D、0.1mg/l KT、0.5mg/l NAA为最佳愈伤组织诱导培养基。最适宜的分化培养基为改良MS附加0.25mg/l KT、0.5 mg/l NAA、150 mg/l腺嘌呤核苷。杂种的愈伤组织诱导率及分化率高于两个亲本。杂种的愈伤组织长势旺盛,适应性强等都表现了小冰麦杂种在组织培养中的杂种优势,而且这种再生能力杂种优势可以通过无性系得到保持。     

长柄双花木愈伤组织诱导及植株再生

以长柄双花木当年生嫩梢上的叶柄、嫩茎、嫩叶为外植体,对影响长柄双花木愈伤组织诱导和继代、分化主要因素进行研究。结果表明:在培养基MS+NAA0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L上,三种外植体均可诱导出愈伤组织,其中叶片愈伤组织诱导率最高。该培养基还可作为愈伤组织继代培养基,但继代培养周期不超过2周。愈伤组织接种在MS+BA2mg/L上分化不定芽,根的诱导在1/2MS+IBA0.5mg/L培养基上进行。     

珍稀濒危植物蒙古扁桃的组织培养及植株再生

对珍稀濒危植物蒙古扁桃进行组织培养获得再生植株。实验结果表明,在MS培养基上蒙古扁桃幼苗茎尖,茎切段和叶片等外植体均可以脱分化形成愈伤组织,并进一步分化形成再生植株。器官的脱分化与再分化决定于培养基中的激素种类及其浓度。诱导愈伤组织形成的最适培养基为MS＋6－BA0.8mg/L NAA0.1mg/L,芽分化诱导最适培养基为MS＋6－BA0.8mg/L,诱导生根的最适培养基是MS＋IBA0.5mg/L。     

冬凌草离体培养体系的建立及主要次生代谢产物的测定

以冬凌草叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对冬凌草愈伤组织诱导及植株再生的影响,并对不同外植体(茎、叶)诱导愈伤、芽的分化能力及再生植株内主要次生代谢产物的含量进行了比较研究。结果表明:在MS 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L NAA培养基上诱导愈伤组织效果较好;在MS 2.0 mg/L 6-BA的培养基上诱导芽的效果较好;叶片和茎段在愈伤诱导培养基上均能产生大量的愈伤组织,但其再分化能力以茎段最好;再生苗生根培养基以0.3 mg/L IBA最好;以叶为外植体诱导的再生植株中冬凌草甲素、迷迭香酸的含量均高于以茎为外植体诱导的再生植株。     

牛蒡组织培养和高频植株再生的研究

通过对牛蒡(A rctium lapp a L.)不同外植体、不同激素配比的比较研究,建立了牛蒡离体培养高效植株再生体系.牛蒡子叶与下胚轴切段在含2.0 m g/L 2,4-D和0.5~2.0 m g/L BA的M S培养基中愈伤组织诱导率可以达到87%~100%;在1.0~3.0 m g/L NAA和0.5~2.0 m g/L BA的M S培养基上通过愈伤组织间接分化或外植体直接分化形成不定芽,其中愈伤组织分化率可达100%;下胚轴的分化率明显高于子叶,在1.0 m g/L NAA和1.0 m g/L BA的M S培养基上下胚轴直接分化率达77.3%.组织学观察发现牛蒡再生有器官发生和体细胞胚发生两种途径.将生长状态良好的不定芽转至含1.0 m g/L IBA和1.0 m g/L NAA的1/2 M S培养基上生根,移栽,成活率达到93.3%.从诱导愈伤组织到组培苗在珍珠岩中过渡成活,大约需要13周.组培苗次年开花并结实,生长形态特征正常.     

盾叶薯蓣组织培养技术的优化

以盾叶薯蓣的根状茎、茎段、叶柄、幼叶为材料,进行愈伤组织诱导、分化及再生植株形成的研究。结果表明：盾叶薯蓣不同外植体均能诱导出愈伤组织,其中茎段愈伤组织的诱导率最高;不同激素配比的培养基对愈伤组织的形成有很大的影响：以LS为基本培养基,2,4-D浓度为4．0mg／L、6-BA浓度为1．0mg／L的激素配比诱导率最高,达62．5％;以改良MS为基本培养基,2,4-D浓度为2．0mg／L、6-BA浓度为0．5mg／L的激素配比诱导率最高,达71．4％。筛选到优化的分化培养基为改良MS附加2．0mg／L的6-BA和0．5mg／L的Vc,且能直接诱导出根,并形成完整植株。     

鹤望兰组织培养与工厂化快繁程序的研究

将材料接种于诱导愈伤组织手芽的培养基上,培养２个月后,胚芽外植体下出现白色颗粒状的愈伤组织,４个月后愈伤组织上出现小芽丛。将小芽丛转入不加植物激素的ＭＳ培养基上,芽的生长加快,２个月左右可长成３－６ｃｍ高的丛小植株。将小植株切下,插入根培养基中,一般３５ｄ左右基部突出很小的白色根尖。