中国蝮蛇头骨形态比较及分类学讨论（蛇亚目：蝮亚科）

目前,我国蝮蛇某些种类的分类仍存在不同见解,对蝮蛇类群的分类主要集中在外部形态的比较,而较少涉及内部结构的研究。因此,本文的我国１３个地区的８种（亚种）共２６号蝮蛇的头骨进行了比较解剖,以头骨特征为依据,对岩栖蝮Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｓａｘａｔｉｌｉｓ,乌苏里蝮Ａ．ｕｓｓｕｒｅｎｓｉｓ,蛇岛蝮Ａ．ｓｈｅｄａｏｅｎｓｉｓ,短尾蝮Ａ．ｂｒｅｖｉｃａｕｄｕｓ,秦岭蝮Ａ．ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ等的有效性     

中国蝮属蛇类的RAPD分析

用ＲＡＰＤ技术研究了我国５种蝮属蛇类（中介蝮，蛇岛蝮，短尾蝮，高原蝮，乌苏里蝮）的系统发生关系，研究中使用了３３个蝮蛇标本和２个草原蝰标本，用１１个引物对样品分别作ＲＡＰＤ扩增，获得７２个扩增片段。     

江浙蝮蛇血清中天然神经妥毒因子的分离纯化及性质鉴定

江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)是属于蝮科蝮属的有毒蛇。蝮蛇毒成份比较复杂，但其中所含的蝮蛇神经毒素(agkistrodotoxin,ATX)，是主要的神经毒性成分，它具有磷脂酶[2](PLA[2])活性，是一种阻碍神经肌肉接头传递的突触前神经毒素，可导致递质释放机制失活，从而引起动物中毒。本室发现江浙产蝮蛇的血清能中和自身蛇毒的神经毒性，说明蝮蛇血清中有神经解毒因子存在。本室曾从华南眼镜蛇(Naja naja atra)血清中分离 得到解毒因子CSAP(cobra serum antitoxic protein)，但江浙产蝮蛇血清解毒因子的研究见报道，本文建立了该因子的分离纯化方法，并对一些性质及解毒机制进行了初步探讨。     

尖吻蝮蛇毒磷脂酶A2基因的克隆与序列分析

从尖吻蝮蛇毒腺中抽提总ＲＮＡ,经ＲＴＰＣＲ扩增磷脂酶Ａ２的基因,以江浙蝮蛇的酸性磷脂酶Ａ２基因为探针杂交筛选克隆,分离得到４种磷脂酶Ａ２基因。经双向测序测定了这些磷脂酶Ａ２同功酶基因的全序列,并由此推导出编码的氨基酸序列。运用计算机软件推算了它们的等电点,按照等电点和结构特征将它们分别命名为尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２Ｉ（Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ）、尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２ＩＩ（Ａ．ａＡＰＬＡ２ＩＩ）、尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶Ａ２（Ａ．ａＢＰＬＡ２）和尖吻蝮蛇毒Ｌｙｓ４９磷脂酶Ａ２（Ａ．ａＬｙｓ４９ＰＬＡ２）。其中Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ的１～１０位氨基酸残基序列同以前分离得到的尖吻蝮蛇酸性磷脂酶Ａ２已测定的１～１０位氨基酸残基序列完全一致。Ａ．ａＬｙｓ４９ＰＬＡ２基因则由于其推导出的４９位氨基酸残基由Ｌｙｓ代替了Ａｓｐ而区别于以前克隆到的磷脂酶Ａ２基因。最后运用计算机软件比较了它们的同源性。这一组磷脂酶Ａ２基因的克隆,将为进一步研究磷脂酶Ａ２的结构与功能的关系提供更多的信息。     

亚洲蝮属两种的种下分类研究(蛇亚目:蝮亚科)

对分布在辽东半岛和山东半岛的“黑眉”蝮蛇,依据Ｍａｙｒ（１９５３）两个样本间平均数比较的亚种划分的经典方法,进行分类学研究,辽东半岛半蛇岛蝮应为：蛇岛蝮千山亚种Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｓｈｅｄａｏｅｎｓｉｓ ｑｉａｎｓｈａｎｅｎｓｉｓ ｓｓｐ;ｎｏｖ．山东半岛产岩栖蝮为：岩栖蝮长岛亚种Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｓａｘａｔｉｌｉｓ ｃｈａｎｇｄａｏｅｎｓｉｓ ｓｓｐ;ｎｏｖ．。     

尖吻蝮蛇酸性磷脂酶A2的纯化和初步晶体学

为进一步揭示影响血小板聚集活性的结构基础,纯化了江西尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒａｄｕｎ ａｃｕｔｕｓ）酸性磷脂酶Ａ２。江西省吻蝮蛇蛇毒经ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换柱层析,两步ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换柱层析以及Ｍｏｎｏ）ＧＦＰＬ离子交换柱层析,得到了ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳和等和集电泳均一的磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）,其分子量为１６．５ＫＤ,等电点为４．３,经测定,该酶具有抑制ＡＤＰ诱地     

中介蝮在黑龙江省的发现

ＡＳｔｒａｕｃｈ(1868)最初报道中介蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ(Ｓｔｒａｕｃｈ)的模式标本产地为日本北海道、黑龙江流域以及黑龙江省的兴安岭山区。现代研究普遍认为中介蝮在我国分布于西北地区,西起新疆、东至山西及内蒙古。黑龙江省的蝮蛇只有体形粗壮,具有“黑眉”的黑眉蝮Ｇｓａｘａｔｉｌｉｓ(Ｅｍｅｌｉａｎｏｖ)和体较细小、具有“白眉”的乌苏里蝮Ａｕｓｓｕｒｉｅｎｓｉｓ(Ｅｍｅｌｉａｎｏｖ)两种。1996～1998年我们在编写《黑龙江省两栖爬行动物志》和进行全国“陆生脊椎动物普查”的过程中,先后对黑龙江省大…     

蝮亚科几种毒蛇的染色体初步研究

目的　研究我国蝮亚科蝮属尖吻蝮、蝮蛇、雪山蝮３ 种蝮蛇和烙铁头属竹叶青、烙铁头的染色体。方法　给蛇体按１ｍ ｇ／ｋｇ 蝮腔注射秋水仙素,５～７ｈ 后活体取肋骨、睾丸等组织样品进行细胞染色体检测。结果　５ 种蝮蛇的染色体为２ ｎ ＝ ３６。结论　蝮亚科两个属的染色体数目是恒定的, 说明其进化上的保守性, 可能它们的祖先是单一的。     

蛇毒所致微循环障碍的处理

地球上有蛇类２７００余种，其中毒蛇５７０余种；我国有蛇类２０３种，其中毒蛇４７种，包括陆生剧毒蛇３１种和海蛇１６种。对人类危害较大的有陆生剧毒蛇９种和海蛇２种，即蝰蛇科的五步蛇（ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓＧｕｅｎｔｈｅｒ）、蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔ...     

钙调神经磷酸酶在血管紧张素Ⅱ刺激的心脏成纤维细胞增殖中的作用

本研究观察了钙调神经磷酸酶（ＣａＮ）在血管坚张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激的大鼠心脏成纤维细胞增殖中的作用。在培养的大鼠心脏成纤维细胞上,应用双波长荧光 计检测Ｆｕｒａ－２标记的细胞游离Ｃａ＾２＋浓度;应用对硝基苯磷酸（ＰＮＰＰ）作底物测定钙调神经磷酸酶（ＣａＮ）活性;根据＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法评估ＣａＮ特异性抑制剂环胞素Ａ（ＣｓＡ）对ＡｎｇⅡ刺激的心脏成纤维细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,ＡｎｇⅡ（１０     

蝮蛇蛇毒影响大鼠胫神经对辣根过氧化酶（HRP）逆行运输的初步观察

蝮蛇蛇毒［ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｍＨｏｌｙｓ（ｐａｌｌａｓ）Ｖｅｎｏｍ］（简称ＡＨＶ）影响大鼠胫神经对辣根过氧化酶（ＨＲＰ）逆行运输的实验,在不同组别的动物中所观察其结果如下：以左侧外侧腓肠和作注入点为实验例：Ａ组：ＡＨＶ和ＨＲＰ同时等量注入,在脊髓Ｌ４－６灰质前角和脊神经节内未见标记细胞;Ｂ组：注入ＡＨＶ两天后,再注入等量ＨＲＰ;Ｃ组和Ｄ组：在注入ＨＲＰ的同时,在胫神经干上浸滴ＡＨＶ和低１０倍的ＡＨＶ后,三组在相应的左侧脊髓灰质前角和脊神经内均见有标记细胞。按Ａ组方法,将ＡＨＶ用量递减７５ｕｌ、５０ｕｌ、３５ｕｌ注入后,标记细胞也逐渐显示。上述结果提示：ＡＨＶ（粗毒）对肌内神经末梢有抑制ＨＲＰ向胞体的运输作用,而在神经干处作用不显,此种抑制影响可因延时和浓度逆减而逐渐消减。并结合实验结果,对其机理进行了讨论。     

抗体应答期间大鼠脑和胸腺中儿茶酚胺含量的变化

目的：探讨在抗体应答期间,脑和淋巴器官中儿茶酚胺（ＣＡｓ）含量的动态变化,籍以了解免疫状态对中枢和外周ＣＡｓ神经活动的影响。方法：用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）免疫大鼠,在免疫后第２￣７ｄ应用高效液相色谱－电化学检测法（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）测定大鼠下丘脑、海马、脑干和胸腺中云甲肾上腺素（ＮＡ）、肾上腺素（Ａ）、多巴胺（ＤＡ）和高香草酸（ＨＶＡ）的含量。结果：①下且脑和海马内ＮＡ在抗体应答期间升高,而胸腺中     

肾神经传入纤维在DOCA—salt大鼠高血压形成中的作用

于大鼠皮下埋入含醋酸去氧皮质酮（ＤＯＣＡ）的交管以形成ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ高血压,其中一组动物在埋管前切除（Ｔ９－Ｌ２）脊髓右侧背根神经,每周以尾套法测定大鼠收缩压,埋管后６周测定大鼠脑和血浆中儿茶酚胺（ＣＡ）和血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度,用电脑血管显微图像分析系统测量血管的结构变化。与对照鼠相比,ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ高血压大鼠下丘脑和延脑 肾上腺素含量和ＡｎｇⅡ放免活性及血浆去甲肾上腺素（ＮＥ）     

蝮蛇

蝮蛇属蝰科蝮亚科蝮属蝮蛇种,下分短尾亚种、中介亚种、乌苏里亚种及黑眉亚种蝮蛇在我国分布较广,东北白眉蝮蛇主要含血液毒,神经毒极微。蛇岛黑眉蝮蛇含血液毒外还含少量神经毒。主要分布在长江以南的短尾蝮蛇(亦称江浙蝮蛇)含血液毒及神经毒等混合毒。头部三角形,上颌长有较长的管状毒牙,生活在平原或丘陵地区,以昆虫、蛙、蜥蜴、鸟、鼠等为食。卵胎生、     

蝰科(Viperidae)蝮亚科(Crotalinae)线粒体12S rRBA基因序列分析及其系统发育

对蝮亚科（蛇岛蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｓｈｅｄａｏｅｎｓｉｓ Ｚｈａｏ、黑眉蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｓａｘａｔｉｌｉｓ Ｅｍｅｌｉａｎｏｖ、乌苏 里蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｕｓｓｕｒｒｉｅｎｓｉｓ　 Ｅｍｅｌｉａｎｏｖ、　竹叶青Ｔｒｉｍｅｒｅｓｕｒｕｓ 　ｓｔｅｊｎｅｇｅｒｉ 　Ｓｃｈｍｉｄｔ和分别来自不 同地区的尖吻蝮Ｄｅｉｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎ　ａｃｕｔｕｓ　Ｇｕｅｎｔｈｅｒ、短尾蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ　ｂｒｅｖｉｃａｕｄｕｓ　Ｓｔｅｊｎｅｇｅｒ各 两条）６种蛇共８个个体测定、分析了约３７０ｂｐ线粒体１２Ｓ ｒＲＮＡ基因序列;以游蛇科链蛇属半 棱鳞链蛇Ｄｉｎｏｄｏｎ ｓｅｍｉｃａｒｉｎａｔｕｓ　序列为外群构建分子系统树。分子数据结果支持尖吻蝮形态 学的属级分类地位;提示蛇岛蝮位于黑眉蝮的蛇岛亚种分类地位,同时探讨了蛇岛蝮的起源 问题;并提示短尾蝮和乌苏里蝮同位于种级分类地位。     

蛇毒丝氨酸蛋白酶多样性──底物专一性免疫化学及序列比较研究

本文报道烙铁头（Ｔｒｉｍｅｒｅｓｕｒｕｓｍｕｃｒｏｓｑｕａｍａｔｕｓ）蛇毒纤维蛋白原溶酶（ＴＭＶＦｇ），眼镜王蛇（Ｏｐｈｉｏｐｈａｇｕｓｈａｎｎａｈ）蛇毒纤维蛋白原溶酶（ｏｈＳ１），竹叶青（Ｔｒｉｍｅｒｅｓｕｒｕｓｓｔｅｊｎｅｇｅｒｉ）蛇毒专一纤溶酶原激活剂（ｓｖ－ｐＡ）对５种小分子多肽底物的底物专一性，及这些蛇毒丝氨酸蛋白酶对各种凝血因子（第Ｘ因子、凝血酶原、纤溶酶原、蛋白Ｃ）的作用，并和其它蛇毒丝氨酸蛋白酶如矛头蝮（Ｂｏｔｈｒｏｐｓａｔｒｏｘ）蛇毒凝血酶样酶（Ｂａｔｒｏｘｏｂｉｎ）、铜头蝮（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｃｏｎｔｏｒｔｒｉｘｃｏｎｔｏｒｔｒｉｘ）蛇毒蛋白Ｃ激活剂ＡＣＣ－Ｃ、蝰蛇（Ｖｉｐｅｒａｒｕｓｓｅｌｌｉ）毒第Ⅴ因子激活剂ＲＶＶ－Ｖ进行比较研究。通过酶标偶联免疫反应研究了抗ｓｖ－ＰＡ抗体与各种丝氨酸蛋白酶的免疫交叉反应，并对蛇毒丝氨酸蛋白酶及相应功能的哺乳动物蛋白酶进行了序列比较分析。从底物专一性多样性及已知序列结构分化上对这一类蛇毒丝氨酸蛋白酶的结构与功能进行了探讨和研究。     

蝮蛇抗栓酶临床应用近况（综述）

蝮蛇抗栓酶临床应用近况（综述）广西中西医结合医院韦东蛇蝮抗栓酶（Ｓｖａｔｅ）是从蝮蛇蛇毒中提取的一种以精氨酸脂酶为主要成分的酶制剂。它具有溶栓、抗凝、去纤、降脂、降低血液粘度、减少血中血栓素Ｂ２,增加前列腺素、扩张血管、改善微循环、降低血小板数量、粘...     

江浙蝮蛇磷脂酶A2基因的多样性研究

我们利用简并引物从江浙蝮蛇腺总ＲＮＡ经ＲＰ－ＰＣＲ扩增磷脂酶Ａ２（简称ＰＬＡ２）基因,并以碱性ＰＬＡ２（Ｂ－ＰＬＡ２）基因为探针,分离出了酸性ＰＬＡ２（Ａ－ＰＬＡ２）和两个未见报道的特征结构类同的基因,分别命名为Ａｓｎ＾４８－ＰＡＬ２和ＢＡ－ＰＡＬ２。双向测序测定了这组ＰＬＡ２同工酶（除信号肽外）基因的全序列,并由此推导编码的氨基酸序列。其中Ａ－ＰＬＡ２基因编码的氨基酸序列与较早报道的由蛇毒中分离     

长白山白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2的分离和初步表征

东北长白山白眉蝮蛇（ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｂｌｏｍｈｏｆｆｉＵｓｕｒｅｎｓｉｓ）蛇毒经ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子交换层析柱,连续３步ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５凝胶过滤柱得到了磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）的纯品。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ）以及基质辅助激光解析电离飞行时质谱（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ／ＭＳ）表征为单一蛋白,其准确分子量为（１４．００８±０．００７）ｋＤ。最适ｐＨ范围８．０～９．０,最适的反应温度为４５℃。在溶液中有多聚体的存在。     

尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A_2I的表达及其生化特征

将尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶 Ａ２ Ｉ（ Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ） 的基因克隆至表达载体ｐ Ｂ Ｌ Ｍ Ｖ Ｌ２ , 在大肠杆菌 Ｒ Ｒ１ 中成功表达。表达产物 Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ约占细菌蛋白质总量的３０ ％ , 以包含体的形式存在。纯化包含体后, 将产物变性、复性, 然后用 Ｆ Ｐ Ｌ Ｃ Ｓｕｐｅｒｏｓｅ Ｔ Ｍ１２ 纯化, 产物经过 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 检测只有单一条带。对表达的 Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ进行了酶活性、抑制血小板聚集活性和溶血活性的测定。结果显示, 表达的 Ａ．ａ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２ Ｉ的酶活性同变性后复性江浙蝮蛇酸性磷脂酶 Ａ２（ Ａ Ｐ Ｌ Ａ２） 的酶活性相近, 既具有抑制血小板聚集活性也具有溶血活性。最后对磷脂酶 Ａ２（ Ｐ Ｌ Ａ２） 的结构与这些活性的关系进行了讨论