丁型肝炎病毒基因组和抗原研究进展

丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）属于缺陷性ＲＮＡ病毒。ＨＤＶ ＲＮＡ是由单链基因组ＲＮＡ和互补的反基因组ＲＮＡ组成的闭合环状分子,具有酶活性,能自身催化断裂,进行滚环式复制。反基因组上的可读框编码大小两种抗原。ＨＤＶ的装配需要乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的帮助,其包膜是ＨＢＶ表面抗原。ＨＤＶ感染者可同时有ＨＢＶ感染,这种双重感染可加重肝脏损害和病情。     

大肠杆菌表达的乙型肝炎病毒核心抗原的某些理化特性

1979年Pasek等用大肠杆菌表达乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)成功以来,国内外也有类似的报道,但对其理化特性的报道不多。为了更有效地保存和应用此抗原,本文研究了从表达HBcAg的大肠杆菌菌液中纯化抗原的方法,以及抗原的某些特性。 HBcAg是由pHBV-1的C基因与pTL载体重组后在大肠杆菌BMH71-18内表达的,     

乙型肝炎病毒前S2抗原决定簇与乙型肝炎病毒核心抗原的基因融合与表达

乙肝前Ｓ２（ＨＢＶ ＰｒｅＳ２）肽段由５５个氨基酸组成,其Ｎ端肽段含Ｔｈ和Ｂ细胞抗原决定簇。我们将化学合成的ＰｒｅＳ２ ｅｐｉｔｏｐｅ（１２０－１４５）基因不同位点进行融合,融合基因在大肠杆菌中获得表达,并对融合蛋白进行了纯化。经ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ实验表明,融合蛋白具有ＰｒｅＳ２和ＨＢｃＡｇ两者的抗原性。此外,研究还表明,强启动子能使表达水平有一定的提高。     

微小RNA-1调解乙型肝炎病毒复制和肝细胞分化

微小RNA(MicroRNA,miRNA)是一种高度保守的非编码小RNA,参与调节各种细胞过程。病毒可以利用细胞中的miRNA增加其在宿主细胞中的复制。迄今为止,miRNA在乙型肝炎病毒(HBV)复制过程中的作用还知之甚少。该研究中,大量miRNA拟态随着HBV复制被转染入肝癌细胞系。该研究注意到MicroRNA-1(miR-1)转染后导致HBV复制明显增加,并伴随HBV转录上调、抗原表达及子代分泌。然而,生物信息学和荧光素酶报告分析显示,miR-1可能不是直接以HBV基因组为靶点,而是通过调控宿     

乙型肝炎病毒体外感染和复制的细胞模型

慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染是严重威胁人类生命健康的世界性公共卫生问题。基于现有抗HBV药物的治疗策略,仅能在极少部分患者中实现慢性乙肝的功能性治愈。发展更为有效的抗HBV药物,需要更加透彻全面地认识各个病毒组分和关键宿主因子在HBV感染和复制生命周期中发挥的功能和机制,并在此基础上发现鉴定新的治疗靶点。支持HBV体外感染和复制的细胞模型,是研究HBV生活史的重要工具,并在治疗新靶点的发现和候选药物功效评估等研究工作中发挥关键作用。本文对支持HBV感染和复制细胞模型的新近研究进展进行梳理分析,并对这些模型的应用特点和局限性、新近研究进展和未来发展方向进行系统阐述和讨论。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其临床意义

目的:探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与血清标志物之间的关系,了解其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附实验检测乙型肝炎病毒血清标志物及前S1抗原,并采用速率法检测血清丙氨酸氨基转移酶。结果:乙肝表面抗原阳性率为9．2%,乙肝表面抗原阳性人群中前S1抗原阳性率为28．6%;乙肝e抗原阳性及阴性人群中前S1抗原阳性率分别为81．1%、13．9%(p＜0．01);前S1抗原阳性人群ALT(49．5U/L)高于前S1抗原阴性人群(43．2U/L,p＜0．01)。结论:前S1抗原与血清标志物e抗原有较高的一致性,是反映病毒复制的良好指标,能较早发现肝损伤。     

改变乙型肝炎病毒核心抗原基因3′端序列对其在原核细胞中表达的影响

乙型肝炎病毒(HBV)的核心抗原基因(C基因)编码185个氨基酸残基,在原核细胞或痘苗病毒系统中能表达并装配成27nm大小的核心抗原(HBcAg)多聚体颗粒。已证实HBV C基因3′端编码近40个氨基酸的碱基序列,不是表达形成HBcAg颗粒所必需的。用外源基因替换这部分序列,已表达出表面带有外源基因产物的杂合颗粒,它具有很好的免疫原性,成为新型的基因工程多决定簇颗粒载体疫苗。但我们的实验中发现,用另外的外源基因替换3′端序列能显著影响HBV C基因在大肠杆菌中的表达,不同组成的外源基因其影响程度有所不同。     

乙型肝炎病毒核心抗原基因序列的启动子活性

将核心抗原基因起始码下游的序列,构建两个ＣＡＴ报告基因表达质粒,即ｐＣＡＴＮ Ｉ和ｐＣＡＴＮⅡ,转染ＨｅｐＧ２与ＣＶ－１细胞后,均可使ＣＡＴ报告基因表达,表现出启动子活性。     

一株重组乙型肝炎病毒的全基因克隆和序列分析

通过血清学和PCR方法对广西地区乙型肝炎病毒感染者样本进行检测,发现一株乙型肝炎病毒基因序列与其余病毒差异较大,利用PCR的方法,扩增出该株病毒的全长cDNA序列,并将其克隆到T载体,进行序列测定,结果显示基因全长为3 215bp,血清型为adr.将测定序列与网上公布的标准基因序列进行比对分析,发现该株病毒全基因组序列进化分析结果与C型基因比较接近,而对其全基因组进行分析时发现1 630bp～2 880bp间基因起源与和C型基因最为接近,而其余基因序列则与A型基因更接近,提示这是一株C型和A型重组的乙型肝炎病毒,首次在国内发现这种类型的基因重组病毒,丰富了我国乙型肝炎病毒研究内容,并对基因型别研究和病毒进化研究提供了参考.     

乙型肝炎病毒变异与肝细胞癌发生关系

乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）基因组复制时,以病毒前基因组RNA作为模板合成子代病毒DNA,催化该过程的逆转录酶缺乏校对功能,所以HBV易出现变异。近年来,各国学者通过比较肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者和非HCC患者的HBV基因序列,发现HBV基本核心启动子区的A1762T／G1764A变异或T1753V变异、增强子Ⅰ区的G1053A或G1229A变异、前S蛋白的F141L变异、前s2区基因缺失变异和x基因的截短变异,分别是HCC的易患因素,而前c区常见的G1896A变异,与HCC的发生无关。增强子Ⅱ区的C1653T变异在c基因HBV感染中可能与发生HCC有关,而在A基因型可能无关。     

pSUPER介导的RNAi抗乙肝病毒S基因的研究

目的 研究RNAi抗乙肝病毒的作用.方法 设计并合成一段针对HBV S基因的干扰序列及一段无关的序列,克隆进pSUPER载体中,分别构建pSUPEK-HBS、pSUPEK-nonsense载体,然后将pSUPER、pSUPEK-HBS、pSUPER-nonsense转染进HepG2.2.15细胞中,用ELISA方法对细胞上清中HBsAg、HBeAg进行检测.尾静脉注射HBV转基因小鼠,取血清检测.结果 pSUPER-HBS所表达的siRNA成功的抑制了HepG 2.2.15上清及HBV转基因鼠血清中的HBsAg、HBeAg,抑制率分别达到70%、51%以及60%、42%.结论 针对HBV S区的siRNA能明显抑制HBV的复制.     

乙型肝炎病毒受体研究进展

肝细胞是乙型肝炎病毒(HBV)感染的主要靶器官,病毒黏着并进一步侵入肝细胞是感染启动的关键步骤。近几年的研究发现,肝细胞膜上的受体在病毒感染中起着至关重要的作用。我们对近年来几种可能的HBV受体的研究情况进行综述,对阐明HBV入侵肝细胞的机制具有一定的意义。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV基因分型

为了解长春市慢性乙型肝炎患者血清中的乙型肝炎病毒(HBV)基因型情况及其与临床特点的相关性,应用型特异性引物进行巢式PCR方法对长春市69例慢性乙型肝炎患者血清HBV进行基因分型检测。在69例血清标本中,B型10例(占14.5%);C型41例(占59.4%);B C混合型8例(占11.6%);未分型的患者共10例(占14.5%)。C基因型患者的HBV-DNA定量、HBeAg阳性率明显高于B基因型患者(HBV-DNA:P<0.01;HBeAg:χ2=3.98,P<0.05),C基因型患者肝功检查指标谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TB IL)均较B基因型患者高(P<0.01)。长春地区存在HBV B基因型、C基因型、B C混合基因型及未分型,C基因型为优势基因,引起的肝脏活动性炎症较B基因型明显。     

乙肝核心抗原作为免疫载体蛋白的研究进展

乙肝核心抗原由于其天然的颗粒组装能力和特异性激发针对外源表位的体液免疫和细胞免疫作用的特性,成为载体蛋白研究的热点.本简要综述乙肝核心抗原的结构特点、免疫学特性、作为免疫载体蛋白的研究进展及其应用研究.     

乙型肝炎病毒X基因及HBx蛋白的研究进展

我国是乙型肝炎高发区,乙型肝炎病毒(HBV)X基因及其编码的多功能蛋白HBx是乙型肝炎病毒基因转录所必需的作用因子,在乙肝的致病过程中起到重要作用。HBx可直接或间接改变肝脏结构细胞的结构和功能,引发肝脏细胞的凋亡;具有广泛的非特异性反式激活作用,反式激活细胞内的某些癌基因或病毒基因,与乙型肝炎和肝细胞癌的发生关系十分密切。本文从多方面综述了X基因及HBx蛋白目前的研究进展,展现了X基因功能的多样性。     

一例中国重型肝炎病人乙型肝炎病毒基因组全序列的测定

用聚合酶链反应（PCR）产物直接和克隆后序列分析，测定1例重型肝炎病人感染的HBV变异毒株全基因组序列，该毒株长3221个碱基，为adw亚型，与同一地区HfuAg阳性无症状携带者感染的adw亚型全序列比较，有35个罕见和独特的核着酸改变，导致27个氨基酸替代，其中前C和C基因变异最多，这一毒株在多种调节序列，包括启动子SPI、SP11、XP、增强子ENI和EN11，也存在变异。但并无日本毒株的X区和ENHll－CP的聚集变异。结果说明我国重肝HBV毒株有独特的变异特点。     

慢性丙型肝炎患者中丙型肝炎病毒准种变异研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）具有较高的变异性,通常以准种的形式分布在感染者的体内,病毒容易逃离机体的免疫监控,因而无法被有效地清除,导致机体很难控制其感染的发展,故易转变成慢性肝炎。HCV准种变异在宿主体内的持续存在对病毒感染的控制、抗病毒药物和疫苗的发展都是一个巨大的挑战。,我们重点阐述近年来关于HCV准种变异及其与慢性丙型肝炎患者的机体免疫、疾病进展、治疗效果之间关系的研究进展。     

一株乙肝病毒的基因组克隆及系统学分析

乙型肝炎病毒HBV的基因分型在基础研究和临床治疗中具有重要意义。PCR扩增并克隆了来自蒙古的乙肝病毒HBV199的全长基因组。分析表明HBV199基因组全长为3 145 bp,属于基因型D。HBV199与乙肝病毒基因型D代表菌株x02496的基因组序列差异为1.9%;与参比菌株AF280817和AY161157具有更高的亲缘关系,它们的基因组序列差异分别为1.1%和1.5%。不同于所有其他HBV基因组,HBV199基因组缺失了HBc-ORF处nt 2021~nt 2057之间的37个碱基。