Fas与FasL的分子生物学研究进展

Fas是细胞表面诱导凋亡的分子,是I型膜蛋白,属TNF受体家族成员。而Fas配体（FasL)是Ⅱ型膜蛋白,属TNF家族成员。Fas与FasL结合,可向细胞传递死亡信号,引发细胞凋亡。Fas在人体中表达及功能正常与否,对人体免疫调控起重要作用。     

Fas/FasL系统与类风湿关节炎发病机制的研究进展

类风湿关节炎是机体对自身滑膜发生免疫反应的疾病,其主要病理特征是滑膜增生和多种炎症细胞的浸润。滑膜增生的有关机制仍不清楚,目前认为可能是滑膜细胞和炎症浸润细胞数量增加及凋亡相对减少,即细胞凋亡程度不及增殖程度所致。Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要途径之一,通过影响滑膜细胞的Fas/FasL表达可以诱导其凋亡。本文对Fas/FasL的性质、结构、功能、Fas/FasL与RA发病机制及RA治疗的关系进行综述。     

Fas／FasL与消化道肿瘤的相关性

Fas,FasL均是细胞表面受体。正常情况下,Fas分子主要分布于人体各个组织器官及病变细胞表面,FasL广泛分布于活化的T细胞等免疫细胞表面。Fas与FasL的结合可导致表达Fas的细胞凋亡,平衡机体免疫反应。当机体发生肿瘤时,肿瘤细胞表面Fas表达下调,有时甚至出现FasL的表达,不但削弱了Fas阳性淋巴细胞的攻击能力,而且赋予了肿瘤细胞杀伤免疫细胞的能力,即肿瘤免疫逃逸的新机制—Fas反击。就这一新机制与消化道肿瘤尤其胃部肿瘤的相关性做一综述。     

姜黄素对慢性低O2高CO2作用下大鼠脑组织Fas/FasL表达的影响

目的：观察慢性低02高C02作用下大鼠脑组织Fas/FasL表达及神经细胞超微结构变化,探讨姜黄素是否能影响慢性低O2高CO2作用下Fas/FasL表达以及脑神经细胞的超微结构变化。方法：将健康sD雄性大鼠15只,随机分为常氧对照组、慢性低02高c02组、慢性低O2高CO2姜黄素组（姜黄素采用灌胃给药,150mg/（kg·d）;应用免疫组织化学法和蛋白免疫印记法对脑神经细胞凋亡分子Fas/FasL的表达进行定性、定量测定,透射电镜下观察大脑皮质神经细胞超微结构形态学改变。结果：①免疫组织化学和蛋白免疫印记法显示,慢性低O2高CO2组中脑组织Fas/FasL的表达显著高于常氧对照组和慢性低O2高CO2姜黄素组。②脑组织的透射电镜结果显示,常氧对照组神经细胞及细胞器结构形态正常;慢性低O2高CO2组可见神经细胞和细胞器肿胀,细胞核染色质边集,出现凋亡小体;慢性低O2高CO2姜黄素组神经细胞核、细胞器、血管的形态结构基本正常。结论：①慢性低O2高CO2可上调脑组织Fas/FasL的表达,并诱导脑神经细胞呈现凋亡的超微结构变化;②姜黄素可能通过抑制Fas/FasL的表达减轻慢性低O2高CO2诱导的脑神经细胞的超微结构变化。     

口腔鳞癌组织细胞凋亡相关蛋白Fas/FasL的表达研究

目的　研究调亡相关蛋白Fas、FasL在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法　应用免疫组织化学方法检测 10例正常口腔粘膜、 38例口腔鳞癌组织及肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)和 11例转移淋巴结中Fas、FasL的表达。结果　Fas在正常口腔粘膜中广泛表达 ;鳞癌组织表达明显下调 (P <0 .0 5 ) ;Fas表达与口腔鳞癌分化程度有关 ;淋巴结转移癌中Fas表达减弱。FasL在正常口腔粘膜不表达 ;鳞癌组织表达明显上调 (P <0 .0 5 ) ;FasL表达与口腔鳞癌分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ;有淋巴结转移者FasL阳性表达率高于无转移者 (P <0 .0 5 )。TIL细胞Fas、FasL阳性表达率为 81.6 %和 84 .2 % .。Fas、FasL在口腔鳞癌的表达有明显相关性 (P <0 .0 5 )。结论　Fas表达与口腔粘膜上皮细胞的自然分化成熟衰老及口腔鳞癌的形成和肿瘤的恶性度有关。FasL的表达上调可能是口腔鳞癌组织免疫反攻击的体现 ,对促进肿瘤的发生发展及转移有重要作用。     

内耳免疫反应诱导Fas和FasL表达与凋亡的关系

目的研究内耳免疫反应过程中是否存在细胞凋亡,以及细胞凋亡是否与Fas和FasL信号转导有关.方法选用雌性白色豚鼠16只,随机分为实验组和对照组各8只,以钥孔虫戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)全身免疫后,实验组以相同抗原进行内耳免疫,对照组内耳注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate buffered saline,PBS),在内耳免疫5d后处死动物,取内耳免疫侧耳蜗做石蜡切片.通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测内耳凋亡细胞,免疫组化检测内耳Fas和FasL的表达.结果实验组豚鼠内耳Corti器毛细胞,血管纹的缘细胞和螺旋神经节细胞存在TUNEL染色阳性细胞,而对照组动物切片仅在支持细胞、血管纹和螺旋神经节细胞中发现极少数TUNEL染色阳性细胞.免疫组化染色实验组Corti器、螺旋神经节细胞、血管纹和螺旋韧带Fas和FasL蛋白表达阳性,而对照组只有螺旋神经节细胞和血管纹有较弱的Fas蛋白表达,FasL蛋白表达阴性.结论内耳免疫反应可诱导细胞凋亡的发生,Fas-FasL途径是参与此过程重要的信号转导途径之一.     

汉滩病毒诱导小鼠骨髓瘤SP2／0细胞凋亡的初步研究

为研究汉滩病毒对肿瘤细胞的诱导凋亡作用,以一定量病毒悬液感染体外培养的SP2／0细胞,接种后一定时间将细胞消化甩片行Gimsa染色观察凋亡细胞核的变化,制细胞悬液以流式细胞仪测细胞周期,并用免疫组化的方法检测凋亡分子Fas和FasL的表达。结果示经病毒诱导后细胞出现生长特性及形态学变化,Giemsa染色观察到典型凋亡细胞：流式细胞仪显示有凋亡峰出现;免疫组化检测出感染后SP2／0细胞中Fas和FasL表达明显升高。该结果表明汉滩病毒可诱导体外培养SP2／0细胞凋亡,其发生可能与凋亡分子Fas和FasL有关。     

汉滩病毒诱导小鼠骨髓瘤SP2/0细胞凋亡的初步研究

为研究汉滩病毒对肿瘤细胞的诱导凋亡作用,以一定量病毒悬液感染体外培养的SP2/0细胞,接种后定时间将细胞消化甩片行Gimsa染色观察凋亡细胞核的变化,制细胞悬液以流式细胞仪测细胞周期,并用免疫组化的方法检测凋亡分子Fas和FasL的表达.结果示经病毒诱导后细胞出现生长特性及形态学变化,Giemsa染色观察到典型凋亡细胞;流式细胞仪显示有凋亡峰出现;免疫组化检测出感染后SP2/0细胞中Fas和FasL表达明显升高.该结果表明汉滩病毒可诱导体外培养SP2/0细胞凋亡,其发生可能与凋亡分子Fas和FasL有关.     

FasL在睾丸细胞的定位

FasL/Fas系统介导的胞外信号凋亡途径是哺乳动物睾丸生殖细胞凋亡的一条主要途径,然而,关于FasL在睾丸细胞中的定位却存在争议。本文对近年来国内外关于FasL在睾丸中的细胞定位研究进行了综述,为阐明FasL/Fas系统介导生殖细胞凋亡的机制提供资料,对深入理解睾丸中Sertoli细胞和生殖细胞间的调控关系及临床实践具有一定的指导作用。     

在HBV感染的肝癌组织中Fas/FasL表达的作用

目的探讨Fas／FasL（Fas配体）在原发性肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其与乙肝病毒（HBV）感染的关系。方法用免疫组化S-P法检测21例肝癌组织及其10例癌旁组织Fas／FasL的表达。结果在肝癌和癌旁组织中Fas表达的阳性率分别为52．38％和80．00％（P〈0．05）,FasL分别为66．67％和40．00％（P〈0．05）。在HBsAg阳性和阴性组Fas表达的阳性率分别为50．00％和66．67％（P〉0．05）;FasL分别为61．11％和100％（P〈0．05）。肝癌组织中Fas、FasL表达与性别、年龄、肿瘤大小无关,与癌栓转移呈负相关,FasL与分化程度有关。结论肝癌细胞能下调Fas及上调FasL的表达而使凋亡受阻,HBV感染能抑制肝癌组织FasL的表达,可能是HBV在HCC的发牛及发展讨稃中的致痛机制。     

Fas受体与FasL在胃癌细胞株的表达及意义

观察Fas受体与FasL在胃癌细胞株的表达,以及Fas和FasL的功能提供形态学依据。采用敏感的免疫组织化学SABC法,结果提示所有胃癌细胞均呈Fas受体免疫反应阳性,阳性物质定位于胸质,胞核为阴性反应;同样所有胃癌细胞亦呈FasL免疫反应性,阳性信号位于胞质,胞核未见阳性信号。这提示Fas可能参与了胃癌细胞生长的调节,胃癌细胞的凋亡在自我调控机制。     

细胞膜分子在表达Fas配体的小鼠胸腺树突状细胞诱导凋亡中的作用

通过TUNEL方法证明在小鼠胸腺组织中 ,有凋亡的胸腺细胞存在 ,但胸腺微环境对胸腺细胞的凋亡的调控机理一直不明 .研究发现Fas配体 (FasL)阳性细胞主要分布在胸腺的髓质区 .小鼠胸腺树突状细胞系 (MTSC4)表达FasL ,在体外介导34 %的单阳性细胞的消除 ,其中使Fas阳性的胸腺细胞的比率减少 6 0 % .MTSC4促细胞凋亡的作用 ,可被单糖GalNAc完全阻断 ,被抗胸腺基质细胞TSC表面分子的单抗PF1 8- 3和 (D + )半乳糖部分阻断 .这说明胸腺树突状细胞直接参与对胸腺细胞凋亡的调节 ,其作用机理中包括多种膜分子的相互作用     

Bcl-2、Fas和FasL在BPH组织中的表达及其意义

目的:研究凋亡相关基因Bcl-2、Fas和FasL在前列腺增生组织中表达,并探讨其与前列腺增生症的关系.方法:收集哈尔滨医科大学附属第二医院2004年5月--2005年8月前列腺增生症(BPH)组织标本36例,前列腺癌(PCa)组织标本12例和正常前列腺(NP)组织标本7例.应用免疫组织化学SABC方法,检测BPH、PCa和NP组织标本中凋亡相关基因Bcl-2、Fas和FasL的表达,并探讨Bcl-2、Fas和FasL的表达与前列腺增生症的关系.结果:①BPH与PCa组Bcl-2蛋白阳性表达明显高于NP组(P<0.05),而BPH组与PCa组阳性表达无显著差异;PCa组Fas表达显著低于BPH和NP(P<0.05、0.01),而BPH和NP组之间差异也有显著性(P<0.05);FasL在三组之间表达差异均无显著性(P>0.05).②在BPH组织中Bcl-2的表达与Fas表达呈负相关(P(0.05),与FasL表达呈正相关(P<0.05),余均未见相关性.结论:Bcl-2、Fas、FasL均参与了BPH的发生发展过程,Bcl-2、Fas、FasL表达的综合结果可能是引起BPH的原因之一.     

Fas ligand在宫颈癌形成中的作用及机制研究进展

FasL(Fas ligand)是一种II型膜蛋白,属于肿瘤坏死因子家族,在体内参与诱导细胞凋亡,发挥一定生理作用。同时, FasL在许多肿瘤组织中高表达,在宫颈癌的发生发展、转移及侵袭中发挥重要作用,其具体作用机制涉及多条信号通路,包括参与肿瘤细胞的被动逃逸与主动攻击、维持机体炎症状态以及发出非凋亡信号促进肿瘤发生等。FasL高表达会导致不良的肿瘤预后,降低患者生存率。由于FasL可参与肿瘤细胞免疫逃逸,因此,针对FasL的靶向治疗可能为肿瘤基因治疗或免疫治疗提供一个新的方向。该文对FasL在宫颈癌发生发展中的作用机制及其在治疗方面的应用加以综述,从而为探索新的宫颈癌治疗靶点提供科学依据。     

Fas／Fas L调亡作用机制

Fas(又称APO-1,CD95)及其配体Fas L,诱导编程性死亡的细胞表面分子,参与机体免疫调节。本文主要讨论了Fas/Fas L 相互作用诱导细胞凋亡的可能机制,包括表达调控,特异结合蛋白,蛋白水解链等。     

肝癌细胞Fas-FasL途径反击免疫细胞

为了探讨肝癌细胞反击肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的机制,在体外进行肝癌细胞和TIL混合培养后,检测两种细胞FasL、Fas、caspase-8基因的表达情况,以及肿瘤细胞反击时TIL凋亡比例的变化.将肝癌细胞与TIL按照不同的比例共培养后,流式细胞术检测TIL凋亡率;实时荧光定量PCR检测肝癌细胞与TIL FasL、Fas和caspase-8基因的表达情况;以及Western印迹检测FasL、caspase-8的表达情况.不同浓度的肝癌细胞与TIL共同培养48 h后,随着肝癌细胞接种浓度的增加,TIL凋亡率明显增加(P＜0.01).与正常人肝细胞相比,人肝癌细胞FasL mRNA表达含量明显增高(P＜0.01).与人肝癌细胞共同培养24 h后,TIL Fas、caspase-8基因mRNA的表达也明显升高;TIL caspase-8的表达也明显升高.结果表明,肝癌细胞可以通过Fas系统诱导TIL发生凋亡,这为肝癌的免疫逃逸和肿瘤反击机制提供了依据.     

抑制移植免疫排斥反应的研究进展

移植免疫排斥反应是制约器官移植成功率的重要原因之一,多年来人们研究采用多种方法来克服这种排斥反应。从直接降低MHCⅠ类分子表达的方法、Fas和Fas配体系统、微囊技术、移植物中导入各种细胞因子基因以及共刺激因子阻断剂等方面对近年来抑制移植免疫排斥反应的研究进展进行了综述 。     

假孕大鼠黄体萎缩过程中凋亡相关基因Fas/FasL, Bax/Bcl-2和Caspase-3的表达

以促性腺激素诱导的假孕大鼠为模型, 用免疫组织化学、原位杂交、蛋白质印迹(Western blotting)和原位末端标记(TUNEL)方法研究了细胞凋亡相关分子Fas/FasL, Bax/Bcl-2 和Caspase-3在不同时期黄体中的表达. 结果显示: 排卵后第8天前黄体内没有凋亡信号, 第14天开始出现凋亡信号, 持续到第21天; Fas 在黄体中的各个时期都有表达, 随黄体发育其表达水平增加. FasL 在黄体各个时期都有表达, 第14天明显上升, 到第21天达到高峰; Bcl-2 随黄体的形成、维持和萎缩过程其表达由强到弱, 到第21天基本不表达; 而Bax 的表达正相反, 排卵后第2天几乎不表达, 第8天表达明显增加, 到第21天表达最高; Caspase-3持续表达于各期黄体中, 并随黄体的发育其表达由弱到强, 第2天表达最低, 到第21天表达最高. 结果提示, 大鼠黄体萎缩后期发生细胞凋亡.     

人脑星形细胞瘤中p53，Fas／FasL的表达及其与凋亡关系的研究

目的：探讨细胞凋亡在星形细胞瘤中的作用及其与p53、Fas和Fas配体（Fas ligand,FasL）的关系。方法：对43例星形细胞瘤的标本分别进行HE染色,TUNEL及免疫组化分别标记p53,Fas和FasL。结果：高级别肿瘤和低级别肿瘤间的凋亡无显著差异（P〉0．05）。高级别星形细胞瘤的p53,Fas和FasL的表达均显著高于低级别肿瘤（P均〈0．05）。结论：突变型p53可作为评价星形细胞瘤生物学行为的参考指标。与低级别星形细胞瘤相比,高级别肿瘤中的细胞凋亡受到了抑制,且Fas与FasL的过表达对细胞凋亡可产生明显影响。     

几种免疫分子对Fas介导细胞凋亡的调节

Fas/APO-1介导的细胞凋亡在免疫自稳,免疫调控,免疫逃逸,免疫赦免等各个免疫生理,病理过程中均发挥着至关重要的作用。它可使免疫细胞的活化增殖和机体的免疫应答维持在一定的限度,从而避免发生过度免疫反应损伤机体。使机体的免疫系统处于一平衡状态。免疫分子。凋亡基因及抗凋亡基因表达的蛋白,以及多种药物均可调节Fas介导的细胞凋亡。本主要对几种免疫分子对Fas介导细胞凋亡的调节机制的研究进展做一论述。