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《生物技术通报》1992,(11)
924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(… 相似文献
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《生物技术通报》1989,(3)
890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924350由可变基因文库产生抗体的细胞筛选法:存储库的收集[英〕/Hawkins,R.E.…/Eur.J.Im-munol一1992,22(3)一567~570〔译自DBA,1992,11(11),92一06028」 用(4一羚基一3一硝基苯酚)乙酸(NP)一家禽势球蛋白免疫小鼠,初次免疫后7天收集脾细胞。由用抗原包被磁性珠粒筛选的细胞DNA制备重链可变(VH)基因文库,再由未筛选细胞的DNA或mRNA制备基因文库。VH基因文库与V一入一1基因结合,该基因以Fv片段形式在大肠杆菌中表达,并通过结合(4一经基一3一碘一5一硝基苯酚)乙酸一家畜血清清蛋白而进行筛选。抗原结合克隆的频率,筛选细胞DNA或… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
923283贯组人降钙素在大肠杆菌中的高浓度合成:融合蛋白的胶原酶裂解和肚基甘氨酸的a一酸胺化〔英〕/Tajima,M.…了J.Ferment.Bioeng一1991,72(5)一562~367〔译自DBA,1992,11 (5),92一02581〕 将编码甘氨酸伸长的人降钙素(h CT一G行)的合成基因插入tac启动子与lacZ墓因之间。把具有胶原酶识别位点的合成DNA置于hCT一Gly基因下游。培养物在181培养基(1%葡萄糖、1%酵母膏、i%Baeto PePtone、0.2%硫酸钱、0。2%磷酸二氢钾、1,8%磷酸二钠和。。01%硫酸镁,pH7.0)、32℃下通过IPTG诱导培养5小时,使携带质粒pZT2232(含hCT基因和lacZ序… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920836用盆组聚合酶链反应构建小砚全长血型.蛋白签因〔英〕/Gu,H.一厂B ioehe皿.Biophys.Res.Commun一1991,177(i)一202~208〔译自})BA,1991,10(15),91一08450〕 分别从贫血小鼠脾基因库(质粒pBR322)和小鼠基因库(质粒pUC18)中分出小鼠血型搪蛋自一A基因不完全cDNA克隆(质粒pGP315)和基因组克隆(质粒pGX7,含第一个外显子和转录起始位点附近的序列),并定序。由于缺乏构建小鼠全长血型糖蛋白一A基因的限制位点,用聚合酶链反应拼接这两部分序列克隆擂人的成分,获得全长的重组DNA片段(IO53bp,含小鼠血型糖蛋白A eDNA)。用5种DNA… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923695分离自苏云金芽抱杆菌肯尼亚亚种的晶体蛋白甚因产物的杀虫特性〔英〕/Masson,L.…了Appl.Environ,Mierobiol一1992,58(2)一642~646〔译自DBA,1992,11(7),。2一03850〕 从苏云金芽抱杆菌肯尼亚亚种(Bac订如8‘h-。,￡。夕￡。。s‘,subsp.无e叮ae)一个大质粒分离到的前毒素基因被克隆到大肠杆菌JM83(质粒pKEN4)的BamHI DNA片段中。该基因(编码Cr刃E毒素)是作为4.skb片段克隆于质粒pMP-CV,在大肠杆菌HB101中作为相发光包涵体表达134kDa蛋白。用胰酶或家蚕胃计消化已溶解的包涵体,得到抗蛋白水解酶的65kDa蛋白。在强迫进食… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923619乙型肝炎表面抗原在乳酸克会维醉母中的克隆和表达〔英〕/Martinez,E.…2 Bioteehnol.Lett一1092,14(2)。一53~56〔译自DBA,1992,11 (7),92一03754〕 为了用乳酸克鲁维酵母生产乙肝病毒表面抗原,构建了含lac4基因启动子(来自质粒BSLAC4)、表面抗原基因(来自质粒pHBI)、LAC4终止区及其后的URA3基因(来自酿酒酵母)和LAC4基因的3‘非编码区(来自质粒pJAAS12)的质粒pDLHZ。用含表达盒区的pDLHZ转化乳酸克鲁维酵母VDI,转化子于1%酵母粉、2%蛋白膝和2%葡萄糖的培界基中进行摇瓶培养(21摇瓶装40001培养基,于50℃、25orPm培养… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924297降解2,4一二氯苯氧乙酸(2,4一O)的质粒pJP4的PCR和基因探针检测〔英〕/Neilson,J.W.一/Appl .Environ.Mierobiol一1992,55(4)一1271~1275[译自DBA,1992,11(11),92-06019〕 用PCR和DNA探针灵敏性检测2,4一D降解菌真养产碱菌(Azca不‘夕e,ese:t,o,hos)JMPi34(含质粒pJP4)。甩2个20一聚寡核普酸DNA引物扩增pJP 4 tfdB基因的Zosbp区,并优化扩增条件 (94℃变性1分30秒、72℃退火并延伸1分钟、72℃最后延伸7分钟,共进行25轮)。PCR和5产端标记DNA探针的杂交都是对含pJP4或其衍生质粒pRO103菌株专性的。检测灵敏性为30oocfu… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922884直接偏选含YAC克隆的cosmid文库〔英〕/Bax“-ndale,5.…/Nueleio Aeids Res一i。。1,1。 (25)一6651〔译自DBA,1992,11(4),92-01865〕 介绍了直接筛选含人类人造染色体(HAC)的cosmid基因文库的方法。从48XXXX人类细胞系的酵母人造染色体(YAC)基因文库中分离出重叠YAC克隆〔YGAS(41okb)和YGAio(4‘okb)〕,置于亨廷顿舞蹈病基因4 p16。3候选区内在紫外光下(36Onm)从凝胶上的酵母染色体带中切下HAC带。用(a一‘ZP)一dGTP和一dATP对D NA进行随机引物标记。通过与人切变胎盘DNA预杂交,从探针和经流式分拣的人第4染色… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(1)
940312稳定转化的植物细胞中骨架连接区增强报道基因表达〔英〕/Allen,G.C.…/Plant Cell一1993,5(6)一603~613〔译自DBA,1993,12(17),93一09903〕 酿酒酵母自主复制片段ARS一1含有一个能离体与植物核骨架结合的骨架连接区(S AR)。为了试验对基因表达的效应,将一个位于该片段侧翼的、在CaMV 355启动子调控下的,GUS基因的构建物通过微轰击转送到烟草NT一1悬浮细胞中。在稳定转化的细胞系中,含两个侧翼SAR构建物的GUS活性比缺少SAR的对照平均高12倍。表达水平不与基因拷贝数成比例。而在某些含多基因拷贝的转化体中,该片段似乎是… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922901在杂种病毒辐粒表面表达口蹄痊病毒外宪蛋白抗原决定签单体或二聚体的修饰的活的感染性牛.炎病拜度苗〔英〕/K it,5.…f Areh.virol一i。。1,120(i~2)。一i~17〔译自DBA,1992,11(s), 92一01373〕 将化学合成的编码牛生长激素信号肤序列和口蹄疫病毒(FMDV)VPI抗原决定基序列单体或二聚体擂入到感染性牛鼻炎(IRV)主要糖蛋白g皿基因中,构建了修饰的减活的牛感染性鼻炎杂种病毒疫苗。外源DNA序列擂入到IRVg皿编码序列的N一末端上,并受IRV 9111启动子控制。由含单体和二聚体FMDV抗原决定基序列插入的杂种病毒分别选择编码IRVg… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(6)
再于72℃下放置2.5分钟;用2种BLB引物对共扩增时,94℃1分钟(第一次循环3.5粉爹钟),在65922074利用pCR检测牛淋巴瘤中的牛白血病病那〔英〕/Rasmussen,H.B.…了Bioteeh。ForumEur一2991,s(9)一527~519〔译自DBA,1901,10(23),91一13308〕 利用聚合酶链反应(PCR)从含30只雌牛淋巴瘤样品的材料中将由牛白血病病毒(BLV)引起的肿瘤与其它病因的肿瘤区分开。设计了两种扩增DNA BLV一专性片段的引物对,还设计了第三种识别牛K一酪蛋白基因启动子区的引物对,以控制模板的质量。利用Taq DNA一聚合酶扩增DNA(0 .25件g),条件如下:用1种BLV… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923808抗冻蛋白mRNA在转基因寄主中的不同转译能力〔英〕/Raneourt,D.E.…了Bioehim.Bio-phys.AetaN一1902,1129(2)一158~194〔译自DBA,1992,11(7),92一03916〕 含D,050尹h名la oela:o夕aster卵黄多肤1墓因增强子、启动子和cap位点,擂人冬季比目鱼工型抗冻基因结构部分5/一非转译区的融合基因在成熟雌性D.仍elaoogaste,转化体中转录,以得到预ml1大小的mRNA,但通过Western印迹未检测到抗冻蛋白。当同样的抗冻蛋白与D,o8。尹瓜la热激蛋白70基因调节区融合并置于卵黄多肤基因增强子下游时,由两个基因调节片段调控mRNA的适宜表达。只… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(3)
941136全长和平截的苏云金芽抱杆菌晶体蛋白基因在杆状病毒中的表达及重组病毒的致病性〔英〕/Ri-beiro,B。M。…了J。Invertebr。Pathol。-1993,62(2)一121〔译自DBA,1993,12(22),93一12837〕 构建了分别含全长苏云金芽抱杆菌kurstakiDH一1亚种晶体蛋白cryIA(b)基因(质粒pAc-Btm)、该菌kurstaki HD一73亚种eryIA(e)基因(pAeBt73)、和eryIA(b)基因5尹平截形 (pAeBts)、3了平截形(pAeBt3)及5尹/3尹平截形(P AoBts/3)‘基因的重组转移载体。用之与重组杆状病毒AoRPS一刀一gal或野生型首蓓银纹夜蛾核多角体病毒DNA一道共转染草… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923780经微弹介导的转化获得转基因拟南芥〔英〕/Seki,M.了Appl.Mierobiol。Biotechnol一1991,36(2)。一225~230〔译自DBA,1992,11(7),92一03859〕 描述了用气动微弹枪获得拟南芥(A,。沉d。夕-。￡5 thal艺ana)基因型C24稳定转化体的方法。在金粒上包被嵌合质粒pCaMVEO(含nPt一n基因),在下述条件下用微弹轰击根切段:加速压力Zookg/em“,样品一终止器距离ioem;4产9 DNA/mg金粒(1~3声m);减压为60mm Hg。经轰击的根段在含20mg/1 Kn的培养基上培养31天后形成绿色卡那霉素(Kn)抗性愈伤。每4~7天将此愈伤转至含lomg/1 Gn(genetiein)的。… 相似文献
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FHL(four-and-a-half-LIM domain)是含4(1/2)个LIM结构域富含半胱氨酸的细胞骨架蛋白,LIM是一种在C.elegans线虫的Lin-1和Mec-3基因及大鼠Isl-1基因编码的DNA结合蛋白中分离鉴定出来的基因序列,LIM取三个基因的首字母而成。FHL家族含FHL-1-5五个成员,而FHL-1-3最早发现在心脏的发育过程中起重要作用,后面发现在肺动脉高压中有促进增殖、迁移等作用。本文就FHL家族和肺动脉高压关系作一综述,阐明FHL蛋白在PH进程中的重要作用。 相似文献
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问题1:S型细菌的D N A经过高温为什么不会失去活性?答:R型活肺炎双球菌(受体菌)在对数期后期(生长后期)约40m in内处于“感受态”,吸收外源DNA的能力比其他时期大1000倍。此时,R型活肺炎双球菌(受体菌)细胞膜表面有30～80个“感受态因子”位点。感受态因子是一种胞外蛋白,它可以催化外来DNA片段的吸收或降解细胞表面某种成分,从而使细胞表面的DNA受体显露出来(也可能是一种自溶酶,可特异性地结合双链DNA)。被加热杀死的S型肺炎双球菌(供体菌)通过自溶过程,释放出自身的DNA片段(已经失活,但双链结构尚存在,分子量小于1×107,约含15… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(1)
920323转签因猪乳腺中异谏奶蛋白的高水平合成〔英〕/Wall,R.J.…/Proe.Natl.Aead.Sei。U.S。A一1991,88(5)。一1696~1700〔译自DBA,1991,10(10),91一05746〕 为了测定来自乳清酸性蛋白(WAP)的哺乳类调节片段的功能是否跨种、和研究奶蛋白组成的质量改良,将小鼠WAP基因导入猪基因组。向卵中显微注射Zng7.2kb Eco Rl片段,其中含小鼠MAP基因全部转录区(具有其4个外显子、3个内含子和2。6kb6‘及1.6kb3尹侧翼序列。通过聚合酶链反应筛选转基因小猪尾部活组织。分析了3种转基因猪品系,检测了所有泌乳雌性猪乳汁中的小鼠WAP,其浓度为… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(3)
881180感染性重组病毒,含有所述猫白血病病毒疫苗及其生产方法〔专,英〕/Nunbe-rg,J .H.…1 European Patent Appl.EP 0216564.Pub.01 .04 .87.Appl.US.774040,filed 09.09.86〔译自CBA,1957, (6),2576〕 含有一个嵌合猫白血病病毒(FeLV)外壳基因的感染性重组病毒可用作猫白血病疫苗。用病毒DNA和一个插人性载体转染易感的哺乳动物细胞来制备病毒。该载体带有由在细胞内具活性的启动子、翻译起始密码子和为FeLV病毒外壳蛋白编码的一个DNA片段组成的嵌合基因。编码蛋白的DNA受控干启动子。用这种感染性重组病毒和一个衍生载体或… 相似文献